DB43-T 959.1-2023異種移植用無指定病原體（Designated+Pathogen+Free,+DPF）醫(yī)用供體豬　第1部分：遺傳質(zhì)量控制

ICS70.080CCSB44 43湖 南 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB43/T959.1—2023代替DB43/T959.1—2014第1部分：遺傳質(zhì)量控制MedicalgradeDPFdonorpigforxenotransplantationPart1:Geneticqualitycontrol202311092024第1部分：遺傳質(zhì)量控制MedicalgradeDPFdonorpigforxenotransplantationPart1:Geneticqualitycontrol2023110920240209湖南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前言Ⅲ引言Ⅴ112規(guī)范性引用文件1314遺傳分類及命名2526（DPF）··37閉異移用DPF醫(yī)用體的傳量測4前 言GB/T1.1—20201DB43/T959（DesignatedPathogenFreeDPF）1DB43/T959——第1部分：遺傳質(zhì)量控制；——第2部分：微生物、寄生蟲學(xué)等級與監(jiān)測；——第3部分：配合飼料；——第4部分：病理學(xué)診斷規(guī)范；——第5部分：環(huán)境與設(shè)施。DB43/T959.1—2014（DesignatedPathogenFree,DPF）1DB43/T959.1—2014a）增加了“引言”一章；d）更改了“表1近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測抽樣要求”、“表4封閉群異種移植用DPF見6、.2014版的.7.e）3d）更改了“表1近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測抽樣要求”、“表4封閉群異種移植用DPF見6、.2014版的.7.e）3f）520144請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由湖南省科學(xué)技術(shù)廳提出并歸口。本文件起草單位：中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院，湖南賽諾生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：王維、胡鵬志、馬小倩、李桑、徐暢、王佳、石興勇。本文件及其所替代文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2014年首次發(fā)布為DB43/T959.1—2014；——本次為第一次修訂。引 言（DesignatedPathogenFree,DPF）DB43/T959（DesignatedPathogenFree,DPF）DB43/T959——第1部分：遺傳質(zhì)量控制。目的在于維持異種移植用無指定病原體醫(yī)用供體豬遺傳質(zhì)量穩(wěn)定性。2——第3部分：配合飼料。目的在于保障異種移植用無指定病原體醫(yī)用供體豬飼料的安全和營養(yǎng)。452014DB43/T959.1WHO2018DB43/T959.1DB43/T959.1DB43/T959.1異種移植用無指定病原體（DesignatedPathogenFree,DPF）醫(yī)用供體豬第1部分：遺傳質(zhì)量控制（DesignedPathogenFreeDPF）本文件適用于異種移植用DPF醫(yī)用供體豬的遺傳質(zhì)量控制。（GB14923實驗動物遺傳質(zhì)量控制NY/T1673畜禽微衛(wèi)星DNA遺傳多樣性檢測技術(shù)規(guī)程下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1異種移植用DPF醫(yī)用供體豬medicalgradeDPFdonorpigforxenotransplantation經(jīng)人工飼養(yǎng)與培育，遺傳背景明確或者來源清楚，12月齡體重宜不超過50kg，不攜帶世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization，WHO）3.2近交系inbredstrain一個動物群體中，任何個體基因組中98.6％以上的座位為純合的品系。注：20代的全同胞兄妹交配培育而成。品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先。經(jīng)連續(xù)20代以上親子交配與全同胞兄妹交配有等同效果。近交系的近交系數(shù)（inbreedingcoefficient）大于98.6％。3.3封閉群closedcolony不引進外部動物、在群體內(nèi)隨機選擇動物進行繁殖，以維持有限雜合度的實驗動物種群。根據(jù)遺傳特點的不同，異種移植用DPF醫(yī)用供體豬分為近交系和封閉群。命名F30F亞系、支系、重組近交系、同源突變近交系、同源導(dǎo)入近交系的定義和命名按照GB14923執(zhí)行。封閉群的命名按照GB14923執(zhí)行。5繁殖5繁殖選擇近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬繁殖方法的原則是保持近交系小型豬的等位基因純合性。DPF（。fundtionstoc（edgreexpasionstokprductnstockGB14923選擇封閉群異種移植用DPF醫(yī)用供體豬繁殖方法的原則是保持封閉群小型豬的遺傳異質(zhì)性及基因多態(tài)性，避免近交系數(shù)增速過快。DPF。1％13（25DPFGB14923（DPF）DNANY/T1673DNAPCRTm。抽樣對生產(chǎn)群，按表1要求從每個近交系中隨機抽取非同窩成年豬。表1近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測抽樣要求6.3結(jié)果判定對生產(chǎn)群，按表1要求從每個近交系中隨機抽取非同窩成年豬。表1近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測抽樣要求6.3結(jié)果判定近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測結(jié)果的判定按表2執(zhí)行。表2近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)DNADPF近交系異種移植用DPF醫(yī)用供體豬生產(chǎn)群每年至少進行一次遺傳質(zhì)量檢測。生產(chǎn)群中種母豬數(shù)量（N）抽樣數(shù)量≤100頭不少于6頭＞100頭N×6％檢測結(jié)果判定與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌完全一致未發(fā)現(xiàn)遺傳變異有一個位點的標(biāo)記基因與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致遺傳發(fā)生變異7封閉群異種移植用DPF醫(yī)用供體豬的遺傳質(zhì)量監(jiān)測DNANY/T1673DNAPCRTm7封閉群異種移植用DPF醫(yī)用供體豬的遺傳質(zhì)量監(jiān)測DNANY/T1673DNAPCRTm。抽樣按表4要求從每個封閉群中隨機抽取非同窩成年豬。表4封閉群異種移植用DPF醫(yī)用供體豬遺傳檢測抽樣要求7.3結(jié)果判定群體內(nèi)遺傳變異采用平均雜合度指標(biāo)或群體平衡狀態(tài)方法進行評價。0.5-0.7序號座位名稱染色體位置等位基因數(shù)（個）等位基因片段范圍（bp）熒光標(biāo)記引物序列5'→3'Tm（℃）Mg2+(mM)1CGA112250-320FAMF-ATAGACATTATGTAAGTTGCTGATR-GAACTTTCACATCCCTAAGGTCGT552.52SW769137106-140HEXF-GGTATGACCAAAAGTCCTGGGR-TCTGCTATGTGGGAAGAATGC553.03SW857146134-160TAMRAF-TGAGAGGTCAGTTACAGAAGACCR-GATCCTCCTCCAAATCCCAT551.54S0005510200-248FAMF-TCCTTCCCTCCTGGTAACTAR-GCACTTCCTGATTCTGGGTA553.05SW24021192-114TAMRAF-AGAAATTAGTGCCTCAAATTGGR-AAACCATTAAGTCCCTAGCAAA581.56S03551514243-277HEXF-TCTGGCTCCTACACTCCTTCTTGATGR-TTGGGTGGGTGCTGAAAAATAGGA553.07SW7238100-116TAMRAF-ATCAGAACAGTGCGCCGTR-GTTTGAAAATGGGGTGTTTCC551.58S0090124244-251TAMRAF-CCAAGACTGCCTTGTAGGTGAATAR-GCTATCAAGTATTGTACCATTAGG551.59S0218X11158-196TAMRAF-AAGATCATTTAGTCAAGGTCACAGR-TCTGATAGGGAACATAGGATAAAT541.510SW2417896-121FAMF-CTTTGGGTGGAGTGTGTGCR-ATCCAAATGCTGCAAGCG551.5群體數(shù)量抽樣數(shù)量＜100頭不少于15頭＞100頭不少于30頭封閉群異種移植用DPFDPFNY/T1673DNATm。7.4檢測頻率封閉群異種移植用DPF醫(yī)用供體豬生產(chǎn)群每年至少進行一次遺傳質(zhì)量檢測。5DNA（FR序號座位名稱染色體位置等位基因數(shù)（個）等位基因片段范圍（bp）引物序列5'→3'Tm（℃）Mg2+(mM)1SW974117129-175F-GGTGAAGTTTTTGCTTTGAACCR-GAAAGAAATCCAAATCCAAACC582.02S009121496-174F-TCTACTCCAGGAGATAAGCCAGATR-CAGTGACTCCATCACAGTTATGA551.53SW24021192-114F-AGAAATTAGTGCCTCAAATTGGR-AAACCATTAAGTCCCTAGCAAA581.54SW1066319166-214F-GCAGGATGAACCACCCTGR-CTCTTGAGGCAACCTGCTG602.05SW1089410142-190F-TTTTCCCCTTCACTCACCCR-GATCAAAGTCCCTTACTCCGG581.56S0005510200-248F-TCCTTCCCTCCTGGTAACTAR-GCACTTCCTGATTCTGGGTA553.07SW1057614142-191F-TCCCCTGTTGTACAGATTGATGR-TCCAATTCCAAGTTCCACTAGC582.08SW63279148-173F-TGGGTTGAAAGATTTCCCAAR-GGAGTCAGTACTTTGGCA542.09OPN812138-170F-CCAATCCTATTCACGAAAAAGCR-CAACCCACTTGCTCCCACC592.010SW29812133-187F-AGGGTGGCTAAAAAAGAAAAGGR-ATCAAATCCTTACCTCTGCAGC612.011SW911914151-178F-CTCAGTTCTTTGGGACTGAACCR-CATCTGTGGAAAAAAAAGCC602.012SW511912161-196AAGCAGGAATCCCTGCATCCCCAGCCACCAGTCTGAC621.513SWr1581018158-200F-TCCAATTCAACTCCTGGCTCR-GAATGTGCACATACCACATGC602.014SW9511014108-142F-TTTCACAACTCTGGCACCAGR-GATCGTGCCCAAATGGAC581.515SW271313111-144F-TTCCATGGCTTTCTTCR-CATTCATTCCCAGTGAAACTTG581.516S03861112155-178F-TCCTGGTCTTATTTTCTAR-TTTTTATCTCCAACAGTAT482.017S00681310210-256F-CCTTCAACCTTTGAGCAAGAACR-AGTGGTCTCTCTCCCTCTTGCT622.05DNA（FR（）序號座位名稱染色體位置等位基因數(shù)（個）等位基因片段范圍（bp）引物序列5'→3'Tm（℃）Mg2+(mM)18SWr1008131698-256F-ACAGCCACCAACAGTGTTTGR-GAACTTCCATATGCTGCAAGTG622.019S00071415142-192F-TTACTTCTTGGATCATGTCR-GTCCCTCCTCATAATTTCTG582.020SW857146134-160F-TGAGAGGTCAGTTACAGAAGACCR-GATCCTCCTCCAAATCCCAT551.521SWr3121511116-136F-ATCCGTGCGTTGTGCATR-CTGGTGGCTACAGTTCGAT641.522SW81168128-144F-GAT