【高效液相色譜法在藥物分析中的運(yùn)用與發(fā)展研究4500字（論文）】

高效液相色譜法在藥物分析中的運(yùn)用與發(fā)展研究TOC\o"1-3"\h\u3092引言 331841一、高效液相色譜法的原理及特點(diǎn) 314927（一）高效液相色譜法的原理 330003（二）高效液相色譜法的特點(diǎn) 317136二、高效液相色譜法的分類 42346（一）吸附色譜法 426653（二）離子交換色譜法 413966（三）親和色譜法 518639三、高效液相色譜法在藥物分析中的運(yùn)用 56910（一）在藥物含量測(cè)定中的應(yīng)用 517549（二）在藥物鑒定中的應(yīng)用 530401（三）在蒽醌類化合物分析中的應(yīng)用 526095四、高效液相色譜法在藥物分析中的發(fā)展 64022（一）超高效液相色譜技術(shù) 621086（二）聯(lián)用技術(shù) 66302（三）微柱高效液相色譜法 728842結(jié)論 710193參考文獻(xiàn) 8引言中國(guó)的經(jīng)濟(jì)科技正在快速發(fā)展，醫(yī)學(xué)也在不斷地進(jìn)步，高效液相色譜法是藥物分析的重要手段之一，采用小顆粒填充色譜柱和高壓輸運(yùn)流動(dòng)相，使柱效高于傳統(tǒng)的高效液相色譜，分辨率大大提高，高效液相色譜是經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的完美結(jié)合，是臨床藥物分析是應(yīng)用最廣泛、最快、最有效的檢測(cè)方法，具有較強(qiáng)的特異性和較高的靈敏度。它不僅可以分離藥物，還可以用于定性和定量分型，利用高效液相色譜（HPLC）對(duì)現(xiàn)代藥物進(jìn)行定向定量分析變得極為常見，因此高效液相色譜儀開始引起了人們的關(guān)注，并逐漸為人們所認(rèn)識(shí)。本文的目的是詳細(xì)論述了該技術(shù)在不同藥物分析中作用，分析其相比傳統(tǒng)方法所具有的優(yōu)點(diǎn)，以及高效液相色譜法在日后的發(fā)展，希望對(duì)提高醫(yī)學(xué)的進(jìn)步有所幫助。一、高效液相色譜法的原理及特點(diǎn)（一）高效液相色譜法的原理高效液相色譜儀不是單一的儀器，它由色譜與控制器、進(jìn)樣器、柱泵、數(shù)據(jù)處理器、檢測(cè)器和控制中心組成。各部分都有一定的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)，各個(gè)組成部分不是相互獨(dú)立的，而是相互依存的。因此，使用高效液相色譜法進(jìn)行藥物治療時(shí)，必須注意各成分的操作，確保最終結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)。高效液相色譜儀的工作原理比較復(fù)雜，主要是利用儀器來分離物質(zhì)，注意的是這種分離主要是一個(gè)物理過程，不涉及物質(zhì)性質(zhì)的變化，然后根據(jù)藥物中不同組分的性質(zhì)設(shè)置，用流動(dòng)相能將一些需要分離的物質(zhì)帶到色譜柱上，所以不同的物質(zhì)在不同的峰時(shí)間可以被分離。分離出的組分出來后，通過紫外檢測(cè)器檢測(cè)出化合物的濃度，最后對(duì)分離的物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。使用高效液相色譜儀時(shí)，應(yīng)注意液體必須經(jīng)過色譜儀的高壓，否則會(huì)影響結(jié)果。不難看出，高效液相色譜法的應(yīng)用范圍比氣相色譜法的應(yīng)用范圍要寬得多，未來的應(yīng)用前景相比傳統(tǒng)的氣相色譜法將更加廣闊。（二）高效液相色譜法的特點(diǎn)高效液相色譜相比傳統(tǒng)的氣相色譜法具有更多的特丹和優(yōu)勢(shì)，總結(jié)起來就是具有“三高一廣一快”的特點(diǎn)——1.高壓：采用高效液相色譜法時(shí)，流動(dòng)相為液體，流動(dòng)阻力大。為了保證高效液相色譜的效率，應(yīng)采用高壓加載，以保證流動(dòng)相能快速通過色譜柱。2.高效：高效意味著分離效率高。采用高效液相色譜法可獲得固定相和流動(dòng)相的最佳分離效果。3.靈敏度高：高靈敏度意味著紫外探測(cè)器的靈敏度可以達(dá)到0.01ng。4.用途廣泛：高效液相色譜法可分離分析70%以上的有機(jī)物。同時(shí)，對(duì)于一些非常特殊的物質(zhì)，如高沸點(diǎn)物質(zhì)，也能很好地分離和分析，與其他分離和分析方法相比，效果非常明顯。5.分析速度快，載液流速快：對(duì)于普通的樣品，二三十分鐘就可以完成，對(duì)于一些特殊的藥物，四五分鐘就可以完成，因此分析速度比傳統(tǒng)方法快得多。二、高效液相色譜法的分類（一）吸附色譜法吸附色譜法在高效液相色譜中是最常用的一種的檢測(cè)方法，液固色譜的固定相為固體吸附劑。吸附劑是多孔固體顆粒。吸附劑表面的原子、離子或分子的性質(zhì)不同于內(nèi)部的原子、離子或分子。液固色譜法是根據(jù)固定相上各組分的吸附能力的不同而建立的，所以又稱液固吸附色譜法。主要以吸附劑為固定相進(jìn)行檢測(cè)。硅膠是應(yīng)用最廣泛的吸附色譜固定相，而流動(dòng)相通常選用各種有機(jī)溶劑的混合溶劑。不同組分由于吸附容量的不同，用吸附色譜法分離。組分極性越大，固定相的吸附能力越強(qiáng)，留存的時(shí)間越久，流動(dòng)相極性越大，組分的洗脫能力越強(qiáng)，保留時(shí)間越短。（二）離子交換色譜法離子交換色譜是一種帶離子交換劑的固定相色譜。離子交換劑和其成分的分離基于不同的親和力。柱填料中含有極性基和離子化基，如四氯化銨離子、羧酸、磺酸，它們解離并吸引相反電荷的物質(zhì)。離子材料和柱形密封件有關(guān)系，可以分離。在樣品中，由于離子交換平衡常數(shù)的差異，每個(gè)成分是不同的離子交換色度圖的流相，通常是固定pH值的緩沖液。在一些情況下，加入少量有機(jī)溶劑（乙腈、乙醇、四羥法郎等）可以增加流動(dòng)相中成分的溶解度。流動(dòng)相pH值對(duì)離子交換器的交換容量有一定的影響。由于流相的pH值也影響弱堿性或弱酸性分離成分的離子化pH值，所以將要分離的基團(tuán)維持在游離狀態(tài)并進(jìn)行分離。在測(cè)定條件下，離子交換色譜圖上顯示游離成分。反離子對(duì)層析成像在藥物分析中的應(yīng)用。它還廣泛用于磺胺類藥物、生物堿、維生素和抗生素的分析。（三）親和色譜法親和色譜法是比較少用的一種高效液相色譜法，它可以通過固定相的組合特性進(jìn)行分離和分析。使用親和層析時(shí)，需要將凝膠過濾柱與待分離物質(zhì)連接起來。保證與待分離物質(zhì)結(jié)合良好的物質(zhì)的良好結(jié)合，使后續(xù)工作能夠順利進(jìn)行。組合模式不是不變的，而是可逆的。這樣，當(dāng)移動(dòng)相條件改變時(shí)，兩者也可以相互變換以適應(yīng)最終的變化。三、高效液相色譜法在藥物分析中的運(yùn)用（一）在藥物含量測(cè)定中的應(yīng)用采用高效液相色譜法測(cè)定藥物含量，可以保證人們用藥時(shí)更加準(zhǔn)確，有利于疾病的治療。由于天然藥物成分比較復(fù)雜，既有動(dòng)植物，又有礦物，為了更好地準(zhǔn)確測(cè)定藥物含量，應(yīng)對(duì)測(cè)定體系和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行更高層次的要求，以提高我國(guó)藥品的生產(chǎn)質(zhì)量和使用價(jià)值。采用高效液相色譜法測(cè)定天然藥物的含量，可以有效地保證藥物在我國(guó)的應(yīng)用效果，不僅有利于藥物的生產(chǎn)，而且有利于疾病的治療。（二）在藥物鑒定中的應(yīng)用藥品鑒定也是醫(yī)療行業(yè)的一項(xiàng)重要工作。如果藥品鑒定質(zhì)量得不到保證，將嚴(yán)重影響整個(gè)醫(yī)療行業(yè)。隨著市場(chǎng)利益的逐步提高，越來越多的商品有真?zhèn)沃?，藥品也是如此。因此，有關(guān)部門應(yīng)重視藥品的鑒定工作，確保藥品在生產(chǎn)、加工、銷售過程中的真實(shí)性。如果在藥品生產(chǎn)、上市時(shí)無法鑒別藥品的真?zhèn)?，不僅會(huì)影響制藥企業(yè)，還會(huì)影響人們的健康，從而導(dǎo)致我國(guó)人民整體身體素質(zhì)的下降。[]一般來說，假藥或摻假者的出現(xiàn)與真藥并無區(qū)別。普通人很難鑒別，但藥品的性能卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后。因此，必須采用最先進(jìn)的技術(shù)進(jìn)行鑒定。高效液相色譜法是一種可靠的藥物鑒別方法。（三）在蒽醌類化合物分析中的應(yīng)用蒽醌類活性成分主要存在于何首烏，其特殊成分是蒽醌和其衍生物。研究了不同產(chǎn)地的何首烏的品質(zhì)。采用高效液體層析成像法測(cè)定了何首烏中游離蒽醌類活性成分，和蒽醌類結(jié)合的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)何首烏中的甲醚和大黃素e含量均高于鹵素代的大黃素、大黃酸和大黃酚，復(fù)合型和游離型的蒽醌含量所占的百分比也會(huì)相應(yīng)地發(fā)生變化，一些研究人員“已經(jīng)掌握了非水液相色譜法反向測(cè)定活性蒽醌的方法，可以更好地提高融合技術(shù)的應(yīng)用。因此，高效液相色譜檢測(cè)器可以縮短藥物的檢測(cè)分析時(shí)間，該方法便于蒽醌的測(cè)定。四、高效液相色譜法在藥物分析中的發(fā)展（一）超高效液相色譜技術(shù)在高效液相色譜的基礎(chǔ)上，超高效液相色譜（UHPLC）采用了小顆粒填充柱的分辨，分辨率和分析時(shí)間均有不同程度的提高。超高效液相色譜法有優(yōu)點(diǎn)也有缺點(diǎn)，與高效液相色譜相比，超高效液相色譜具有分析速度快、分辨率高、靈敏度高、粒徑1.7N?m、粒徑5N?m、長(zhǎng)度增加3倍等優(yōu)點(diǎn)。超高效液相色譜通過減小填料的粒徑提高了檢測(cè)靈敏度。兩者的區(qū)別在于分辨率大大提高。同時(shí)，也存在著一些不足和不足。從性能上看，它比高效液相色譜儀更高，價(jià)格也更高。同時(shí)，對(duì)藥物分析的要求也很高。由于顆粒半徑小，為了避免誤差，對(duì)樣品的抓取也非常嚴(yán)格。中藥的化學(xué)成分比西藥復(fù)雜，采用超高效液相色譜法，可以提高分析速度和準(zhǔn)確度，同時(shí)檢測(cè)不同化學(xué)成分的存在?？梢娫摷夹g(shù)具有快速、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，在中藥和化工分析中具有良好的應(yīng)用前景。在分離度方面，超高效液相色譜法檢測(cè)淫羊藿中黃酮類化合物的效果明顯優(yōu)于高效液相色譜法。在中藥多組分的研究分析過程中，技術(shù)分析的關(guān)鍵在于不確定化合物種類繁多、含量差異大。目前，利用超高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行藥物分析，建立了較好的分析平臺(tái)，使高效液相色譜技術(shù)更充分地應(yīng)用于藥物分析和藥物質(zhì)量評(píng)價(jià)。（二）聯(lián)用技術(shù)隨著互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展，各大醫(yī)院、大學(xué)和制藥公司開發(fā)了新的軟件，制作新的檢測(cè)器，使高效液相色譜與各種檢測(cè)工具有了一定的結(jié)合，實(shí)際擴(kuò)展了高效液相色譜的應(yīng)用范圍。高效液相色譜和高效液相色譜—質(zhì)譜的結(jié)合是其中兩個(gè)的典范，是以高效液相色譜為分離手段、質(zhì)譜為鑒定手段的分離技術(shù)和分析方法。高效液相色質(zhì)譜（HPLC-MS）已成為測(cè)定低濃度藥物及其代謝產(chǎn)物的主要方法，高效液相色譜-化學(xué)發(fā)光（HPLC-CL）是另外一個(gè)聯(lián)用技術(shù)，即一種超痕量分析技術(shù)，它可以分析混合物中更加復(fù)雜的組分。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）對(duì)所有非揮發(fā)性溶質(zhì)均有檢測(cè)效果，且具有較好的性能靈敏度高，檢出限10ng，不受溫度和溶劑組成的影響，也可用于梯度洗脫。ELSD和高效液相色譜的結(jié)合是非常常見的。（三）微柱高效液相色譜法高效液相色譜法雖然有一系列優(yōu)點(diǎn)，但也有一些缺點(diǎn)，如流動(dòng)相消耗大，所用溶劑通常含有有毒物質(zhì)或價(jià)格昂貴。特別是對(duì)于那些復(fù)雜的樣品，單相分離分析不能很好地完成。微柱高效液相色譜法隨著理論層數(shù)的增加，同時(shí)也十分密集，在使用上具有相同的效果，從而提高了總的柱效。采用低內(nèi)徑柱可以控制縱向擴(kuò)散，減小峰展寬效應(yīng)，最終縮短整體分析時(shí)間，同時(shí)提高檢測(cè)靈敏度。利用微柱還可以對(duì)少量樣品進(jìn)行分析，減少流動(dòng)相的使用，有利于環(huán)境保護(hù)和溶劑節(jié)約。結(jié)論隨著現(xiàn)代技術(shù)在我國(guó)的不斷普及，越來越多的制藥中心和大型醫(yī)院，在對(duì)藥物進(jìn)行分析時(shí)選擇高效液相色譜（HPLC）進(jìn)行處理，通過高效液相色譜儀可以有效地分離藥物，分析的速度更快，準(zhǔn)確的更高，使藥物的用量或性質(zhì)達(dá)到使用規(guī)范。本文首先分析高效液相色譜法的原理及特點(diǎn)，然后逐一介紹高效液相色譜法的分類，吸附色譜法，離子交換色譜法，親和色譜法等，重點(diǎn)分析高效液相色譜法在藥物分析中的具體運(yùn)用，在有機(jī)酸分析中的應(yīng)用，在黃酮類化合物分析中的應(yīng)用等，最后分析超高效液相色譜技術(shù)，聯(lián)用技術(shù)等未來發(fā)展趨勢(shì)，對(duì)高效液相色譜法在醫(yī)學(xué)中的運(yùn)用進(jìn)行全面而完整地介紹。只有通過先進(jìn)的高效液相色譜技術(shù)，才能更好地促進(jìn)藥物分析技術(shù)的發(fā)展，從而促進(jìn)我國(guó)醫(yī)藥質(zhì)量和分析水平的提高。參考文獻(xiàn)[1]李蘭蘭.高效液相色譜儀連接不同的檢測(cè)器在藥物分析中的應(yīng)用[J].廣東化工,2019,46(16):178+183.[2]章慶.高效液相色譜儀的發(fā)展和在藥物分析中的應(yīng)用[J].生物化工,2018,4(06):126-128.[3]金景.高效液相色譜儀檢測(cè)器在藥物分析中的應(yīng)用探析[J].化工管理,2017(29):177.[4]徐臨鳳.藥物分析和藥物質(zhì)量控制中高效液相色譜儀的運(yùn)用[J].生物化工,2017,3(04):107-108.[5]姚洛芫,吳萌萌.高效液相色譜法在藥物分析領(lǐng)域中的應(yīng)用芻議[J].黑龍江科技信息,2016(11):129.[6]黃潔瓊.高效液相色譜儀與聯(lián)用技術(shù)在藥物分析及藥物質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J]