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2024屆貴州省百校大聯(lián)考高考生物押題試卷注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)、考場(chǎng)號(hào)和座位號(hào)填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑;如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動(dòng),先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.DNA聚合酶的功能有()A.使首個(gè)游離脫氧核苷酸準(zhǔn)確地與模板鏈上的堿基互補(bǔ)結(jié)合B.按3’→5’方向使互補(bǔ)結(jié)合的脫氧核苷酸連接成鏈C.使剛結(jié)合上的脫氧核苷酸的磷酸基與互補(bǔ)鏈上最后一個(gè)脫氧核糖連接成鍵D.使剛結(jié)合上的脫氧核苷酸的脫氧核糖與互補(bǔ)鏈上最后一個(gè)磷酸基連接成鍵2.下圖為人體體液物質(zhì)交換示意圖,其中丁表示某類細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液。下列敘述正確的是()A.甲的滲透壓升高則會(huì)導(dǎo)致組織水腫B.甲中可含有抗體、激素和神經(jīng)遞質(zhì)C.丁可表示淋巴細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液D.乙、丙是毛細(xì)血管壁細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境3.為研究酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)物,某研究小組設(shè)計(jì)了如下圖甲所示的裝置,并將有關(guān)檢測(cè)結(jié)果繪制成圖乙。①號(hào)、②號(hào)試管中均加入3ml蒸餾水和一定量的檢驗(yàn)試劑。據(jù)圖分析下列說法正確的是()A.發(fā)酵產(chǎn)物酒精在①號(hào)試管中B.設(shè)②號(hào)試管對(duì)照組是為了排除無關(guān)變量溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾C.圖乙曲線b表示①號(hào)試管內(nèi)玻璃管口氣泡釋放速率變化D.圖乙曲線a表示酵母菌培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量變化規(guī)律4.研究發(fā)現(xiàn),人體內(nèi)由色氨酸(分子式為C11H12N2O2)代謝生成的5-羥色胺作為一種神經(jīng)遞質(zhì)能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮度,使人產(chǎn)生困倦感。據(jù)此分析下列說法正確的是()A.色氨酸的R基是-C9H9OB.飲食中適量添加富含色氨酸的食物有利于睡眠C.人體需要的色氨酸在體內(nèi)可以由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來D.5-羥色胺在突觸前膜以主動(dòng)運(yùn)輸方式進(jìn)入突觸間隙5.下列關(guān)于氨基酸和蛋白質(zhì)的描述正確的是()A.運(yùn)輸氨基酸的載體是蛋白質(zhì)B.少數(shù)蛋白質(zhì)是由20種不同氨基酸組成C.鳥的羽毛和人的指甲存在同一種纖維蛋白D.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)改變,蛋白質(zhì)就會(huì)變性6.下列物質(zhì)中,屬于內(nèi)環(huán)境成分的是()A.肝糖元 B.血漿蛋白C.載體蛋白 D.抗原-MHC復(fù)合體7.下圖為兔的精原細(xì)胞(僅表示部分染色體),用3種不同顏色的熒光標(biāo)記圖中的3種基因,不考慮基因突變和染色體畸變,下列可能出現(xiàn)的現(xiàn)象是()A.減數(shù)分裂過程中,細(xì)胞內(nèi)的X染色體數(shù)目是0或1或2或4條B.次級(jí)精母細(xì)胞中可能有3種不同顏色的4個(gè)熒光點(diǎn)C.精細(xì)胞中有1種顏色的2個(gè)熒光點(diǎn)D.減數(shù)分裂的后期Ⅰ,移向同一極的有2種顏色的2個(gè)熒光點(diǎn)8.(10分)下列有關(guān)生物變異的敘述,錯(cuò)誤的是()A.純合子體細(xì)胞中的同源染色體上不含等位基因B.純合子雜交產(chǎn)生的后代均為純合子C.等位基因分離導(dǎo)致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離D.基因重組和染色體結(jié)構(gòu)變異均可能引起DNA堿基序列的改變二、非選擇題9.(10分)經(jīng)過多年生態(tài)修復(fù)的庫(kù)布齊沙漠,植被覆蓋度、野生動(dòng)物種類顯著增加,成為了生態(tài)庫(kù)布齊?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題:(1)從生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)分析,沙漠治理往往種植胡楊、沙柳、梭梭樹等多種生物以便形成復(fù)雜的____________進(jìn)而增強(qiáng)生態(tài)系統(tǒng)抵抗外力干擾的能力。為適應(yīng)缺水環(huán)境和最大限度地減少競(jìng)爭(zhēng),可以調(diào)整植樹造林中種群的空間配置格局為____________。庫(kù)布齊從沙漠變成沙漠濕地、草原、森林,群落的這種依次取代現(xiàn)象稱為____________。(2)庫(kù)布齊沙漠變成綠洲,不僅固定了風(fēng)沙、涵養(yǎng)了水源,而且促進(jìn)了碳循環(huán)從________到植物和動(dòng)物的路線。野生動(dòng)物種類的增加豐富了物種多樣性,同時(shí)每種野生生物作為獨(dú)一無二的基因庫(kù)也反映了_______變得更為豐富。(3)在庫(kù)布齊農(nóng)業(yè)生產(chǎn)區(qū),采用“板上發(fā)電、板下種草、板間養(yǎng)殖”的生態(tài)光伏和生態(tài)農(nóng)牧業(yè),即上層架設(shè)太陽能電板,地表種植甘草,并在其間養(yǎng)殖牛、羊、鵝等動(dòng)物。這種立體養(yǎng)殖并調(diào)整作物品種,提高了經(jīng)濟(jì)效益和_______。生態(tài)農(nóng)牧業(yè)和生態(tài)光伏體現(xiàn)了農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的種植業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化技術(shù)及_______技術(shù)。10.(14分)乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個(gè)關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)(原理如圖1),可以抑制這兩個(gè)基因的表達(dá),從而使番茄具有耐儲(chǔ)存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖。(1)圖2中的2A11為特異性啟動(dòng)子,則2A11應(yīng)在番茄的____________(器官)中表達(dá)。(2)從番茄成熟果實(shí)中提取___________為模板,利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。(3)合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn),ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn),用限制酶____________對(duì)上述兩個(gè)基因進(jìn)行酶切,再串聯(lián)成融合基因,相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進(jìn)行切割,確保融合基因能夠插入載體中。(4)為了實(shí)現(xiàn)圖1中反義基因的效果,應(yīng)將融合基因_______(正向/反向)插入在啟動(dòng)子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后,接種在含有___的培養(yǎng)基中,可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌,再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。(5)在檢測(cè)番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時(shí),____________(填“能”/“不能”)用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化(合成)酶基因片段做探針進(jìn)行檢測(cè),理由是____________。11.(14分)蜘蛛絲是自然界中機(jī)械性能最好的天然蛋白纖維,其強(qiáng)度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維,有廣泛的應(yīng)用前景,但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期,中國(guó)科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功的在家蠶絲腺細(xì)胞中大量表達(dá)蜘蛛絲蛋白。(1)在轉(zhuǎn)基因過程中,若利用圖所示質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體,需要用_____________酶來切割目的基因,該切割方法的優(yōu)點(diǎn)是_____________________________________________(答出一點(diǎn)即可)。(2)為獲取大量的蜘蛛絲基因,常采用_______________技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增蜘蛛絲基因前,需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)__________種引物。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需先加熱至90~95℃,加入引物后冷卻至55~60℃,以上調(diào)控溫度操作的目的是____________________。(3)載體中的啟動(dòng)子是____________酶的識(shí)別結(jié)合位點(diǎn),以便于驅(qū)動(dòng)遺傳信息的表達(dá)過程;而載體本身的擴(kuò)增,需借助于載體上的_________________;載體上的標(biāo)記基因的作用是_____________________________。(4)研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號(hào)位的色氨酸替換為酪氨酸,蛛絲韌性可提高50%,這項(xiàng)成果用到的生物工程技術(shù)為____________________________。12.?dāng)M柱胞藻是一種水華藍(lán)藻,其色素分布于光合片層上。擬柱胞藻優(yōu)先利用水體中的CO2,也能利用水體中的HCO3-(胞外碳酸酐酶催化HCO3-分解為CO2)。科研人員用不同濃度的CO2馴化培養(yǎng)擬柱胞藻,20天后依次獲得藻種1、2、3,測(cè)定藻種1、2、3胞外碳酸酐酶活力并探究不同濃度NaHCO3溶液對(duì)藻種1、2、3生長(zhǎng)的影響,結(jié)果如下圖。請(qǐng)回答:(1)擬柱胞藻含有的光合色素有___________,擬柱胞藻產(chǎn)生O2的場(chǎng)所在___________。(2)經(jīng)過20天的馴化培養(yǎng),藻種1、2、3中種群數(shù)量最大的是___________,原因是___________。(3)據(jù)圖1分析,在低濃度CO2水體中,擬柱胞藻能保持一定的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),這是因?yàn)開__________。(4)圖2中,B點(diǎn)凈光合速率比A點(diǎn)高的原因是______________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】

DNA聚合酶催化游離的脫氧核苷酸與DNA鏈上的脫氧核苷酸相連接,形成磷酸二酯鍵?!绢}目詳解】AB、DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從3’端延伸DNA鏈,即總是從子鏈的5’→3’方向延伸,AB錯(cuò)誤;CD、DNA聚合酶使剛結(jié)合上的脫氧核苷酸的磷酸基與互補(bǔ)鏈上最后一個(gè)脫氧核糖連接成磷酸二酯鍵,C正確,D錯(cuò)誤。故選C。2、C【解題分析】

據(jù)圖分析,丁表示細(xì)胞內(nèi)液,則甲表示血漿、乙表示組織液、丙表示淋巴。【題目詳解】A、甲是血漿,血漿的滲透壓升高在短期內(nèi)會(huì)使組織液減少,不引起組織水腫,A錯(cuò)誤;B、甲是血漿,抗體、激素都可以分布于血漿中,但神經(jīng)遞質(zhì)分布于突觸間隙中,B錯(cuò)誤;C、淋巴細(xì)胞主要分布于血漿和淋巴液中,組織液中在炎癥反應(yīng)時(shí)也有淋巴細(xì)胞,故淋巴細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境可能是血漿、組織液、淋巴,故丁可表示淋巴細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液,C正確;D、毛細(xì)血管壁細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境是組織液和血漿,即甲、乙,D錯(cuò)誤。故選C。3、C【解題分析】

1.甲裝置若有酒精生成的話,也應(yīng)該在含酵母菌的葡萄糖溶液中,不在①中。2.①、②號(hào)試管中加入的是澄清的石灰水或溴麝香草酚藍(lán)水溶液,②試管的設(shè)置是為了排除空氣中二氧化碳的干擾。3.隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和有害代謝產(chǎn)物的積累等因素,導(dǎo)致酵母菌的數(shù)量先增加后減少,①號(hào)試管內(nèi)玻璃管口的氣泡釋放速率先增加后下降?!绢}目詳解】A、根據(jù)以上分析可知,酒精不存在于①號(hào)試管中,酒精應(yīng)該在應(yīng)該在含酵母菌的葡萄糖溶液中,A錯(cuò)誤;B、①②號(hào)試管中加入的是澄清的石灰水或溴麝香草酚藍(lán)水溶液,②試管的設(shè)置是為了排除空氣中二氧化碳的干擾,B錯(cuò)誤;C、隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和有害代謝產(chǎn)物的積累等因素,導(dǎo)致酵母菌的數(shù)量先增加后減少,①號(hào)試管內(nèi)玻璃管口的氣泡釋放速率先增加后下降,曲線b符合該變化,C正確;D、隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和有害代謝產(chǎn)物的積累等因素,導(dǎo)致酵母菌的數(shù)量先增加后減少,曲線a不符合該變化,D錯(cuò)誤。故選C。4、B【解題分析】

組成蛋白質(zhì)的氨基酸的特點(diǎn)是至少含有1個(gè)氨基和1個(gè)羧基,且都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基連接在同一個(gè)碳原子上,這個(gè)碳原子還連接有1個(gè)H和1個(gè)R基,分子式為C2H4O2NR?!绢}目詳解】A、氨基酸的通式為(分子式為C2H4O2NR),色氨酸分子式為C11H12N2O2,結(jié)合二者可知其R基為-C9H8N,A錯(cuò)誤;B、根據(jù)題意,色氨酸代謝生成的5-羥色胺能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮度,使人產(chǎn)生困倦感,故飲食中適量添加富含色氨酸的食物有利于睡眠,B正確;C、色氨酸是非必需氨基酸,在體內(nèi)不能可以由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,只能從外界攝入,C錯(cuò)誤;D、5-羥色胺在突觸前膜以胞吐方式進(jìn)入突觸間隙,D錯(cuò)誤。故選B。5、C【解題分析】

蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸,組成蛋白質(zhì)的氨基酸至少含有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基,且都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基連接在同一個(gè)碳原子上;氨基酸通過脫水縮合反應(yīng)形成肽鏈,一條或幾條肽鏈盤區(qū)折疊形成具有一定的空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì);蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性與組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序及蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)有關(guān);蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性決定功能多樣性?!绢}目詳解】A、tRNA也可以運(yùn)輸氨基酸,A錯(cuò)誤;B、大多數(shù)蛋白質(zhì)是由約20種不同氨基酸組成,B錯(cuò)誤;C、鳥的羽毛和人的指甲中有一種相同蛋白質(zhì),即纖維狀的角蛋白,C正確;D、蛋白質(zhì)酶或載體蛋白在發(fā)揮作用時(shí),其空間結(jié)構(gòu)會(huì)改變,但活性上升,不屬于變性,D錯(cuò)誤。故選C。6、B【解題分析】

內(nèi)環(huán)境中可以存在的物質(zhì):小腸吸收的物質(zhì)在血漿、淋巴中運(yùn)輸:水、鹽、糖、氨基酸、維生素、血漿蛋白、甘油、脂肪酸等;細(xì)胞分泌物:抗體、淋巴因子、神經(jīng)遞質(zhì)、激素等;細(xì)胞代謝產(chǎn)物:CO2、水分、尿素等?!绢}目詳解】A、肝糖元位于肝細(xì)胞內(nèi),不屬于內(nèi)環(huán)境的成分,A錯(cuò)誤;B、血漿蛋白存在于血漿中,屬于內(nèi)環(huán)境的成分,B正確;C、載體蛋白位于細(xì)胞膜上,不屬于內(nèi)環(huán)境的成分,C錯(cuò)誤;D、多數(shù)情況下,病原體進(jìn)入內(nèi)環(huán)境后通常溶菌酶和吞噬細(xì)胞作用,使抗原分子被分解為多肽,抗原-MHC復(fù)合體與細(xì)胞表面的受體結(jié)合,啟動(dòng)免疫應(yīng)答,抗原-MHC復(fù)合體位于細(xì)胞表面,不屬于內(nèi)環(huán)境的成分,D錯(cuò)誤。故選B?!绢}目點(diǎn)撥】?jī)?nèi)環(huán)境中不存在的物質(zhì):血紅蛋白、載體蛋白、H2O2酶、細(xì)胞呼吸酶有關(guān)的酶、復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯酶等各種胞內(nèi)酶、消化酶等。7、B【解題分析】

減數(shù)分裂過程。減數(shù)第一次分裂間期:染色體復(fù)制染色體復(fù)制減數(shù)第一次分裂:前期。聯(lián)會(huì),同源染色體的非姐妹染色單體交叉互換;中期,同源染色體成對(duì)的排列在赤道板上;后期,同源染色體分離非同源染色體自由組合;末期,細(xì)胞質(zhì)分裂。核膜,核仁重建紡錘體和染色體消失。減數(shù)第二次分裂:前期,核膜,核仁消失,出現(xiàn)紡錘體和染色體;中期,染色體形態(tài)固定,數(shù)目清晰;后期,著絲點(diǎn)分裂,姐妹染色單體分開成為染色體病均勻的移向兩級(jí);末期,核膜核仁重建,紡錘體和染色體消失。【題目詳解】A、不考慮染色體畸變,減數(shù)分裂時(shí),細(xì)胞中的X染色體數(shù)目是0或1或2條,A錯(cuò)誤;B、若發(fā)生交叉互換,次級(jí)精母細(xì)胞中有可能出現(xiàn)三種不同顏色的4個(gè)熒光點(diǎn),B正確;C、精細(xì)胞中應(yīng)是2種顏色的2個(gè)熒光點(diǎn),C錯(cuò)誤;D、減數(shù)分裂后期Ⅰ,移向一極的是4個(gè)熒光點(diǎn),D錯(cuò)誤。故選B?!绢}目點(diǎn)撥】熟知減數(shù)分裂的過程是解答本題的關(guān)鍵,明確減數(shù)分裂過程中物質(zhì)的變化過程是解答本題的另一關(guān)鍵!8、B【解題分析】

純合子是指遺傳因子(基因)組成相同的個(gè)體,如AA或aa;其特點(diǎn)是純合子自交后代全為純合子,無性狀分離現(xiàn)象?!绢}目詳解】A、純合子是由基因型相同的雌雄配子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而成的個(gè)體,體細(xì)胞中的同源染色體上不含等位基因,A正確;B、純合子雜交產(chǎn)生的后代可能為雜合子,如AA×aa→Aa,B錯(cuò)誤;C、由于減數(shù)分裂形成配子時(shí)等位基因分離,導(dǎo)致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離,C正確;D、基因重組和染色體結(jié)構(gòu)變異使DNA分子中基因的排列順序發(fā)生改變,從而引起了DNA堿基序列的改變,D正確。故選B。二、非選擇題9、食物網(wǎng)均勻分布演替(群落演替)大氣圈(大氣中的CO2)遺傳多樣性生態(tài)效益(生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益)潔凈可再生的新能源開發(fā)【解題分析】

生態(tài)系統(tǒng):在一定的空間和時(shí)間內(nèi),在各種生物之間以及生物與無機(jī)環(huán)境之間,通過能量流動(dòng)與物質(zhì)循環(huán)而相互作用的一個(gè)自然系統(tǒng)?!绢}目詳解】(1)增加物種數(shù)量,以提高食物網(wǎng)復(fù)雜程度,可以增強(qiáng)生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性;分布型是種群中個(gè)體的空間配置格局,使沙漠地區(qū)植物呈均勻分布可以減少對(duì)水分的爭(zhēng)奪;群落的依次取代現(xiàn)象稱為演替。(2)碳循環(huán)的基本路線是從大氣圈到植物和動(dòng)物,再?gòu)膭?dòng)植物流向分解者,最后又回到大氣圈,植樹造林主要增強(qiáng)了C02的固定能力;每一種野生生物作為獨(dú)一無二的基因庫(kù)反映了遺傳多樣性的增加。(3)農(nóng)業(yè)生態(tài)工程種植業(yè)和畜牧業(yè)結(jié)合的優(yōu)化設(shè)計(jì)就是按照生態(tài)和經(jīng)濟(jì)規(guī)律,使系統(tǒng)從總體上獲得最佳的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益,光伏發(fā)電屬于潔凈可再生的新能源開發(fā)技術(shù)?!绢}目點(diǎn)撥】本題考查種群的特征、群落的演替、生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能及生物多樣性、農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的主要技術(shù),考查理解與表達(dá)能力、獲取與處理信息的能力、綜合運(yùn)用能力,考查生命觀念、科學(xué)思維和社會(huì)責(zé)任。10、果實(shí)RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細(xì)胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因,能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解題分析】

分析題意和題圖:番茄細(xì)胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個(gè)關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈,使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解,從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成,影響細(xì)胞中乙烯的合成,使番茄具有耐儲(chǔ)存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。圖2所示的基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因,目的基因插入點(diǎn)在啟動(dòng)子和終止子之間?!绢}目詳解】(1)乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,因此圖2中的2A11為特異性啟動(dòng)子,則2A11應(yīng)在番茄的果實(shí)中表達(dá)。(2)從番茄成熟果實(shí)中提取RNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。(3)合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn),ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn),要將兩個(gè)基因融合,需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對(duì)上述兩個(gè)基因進(jìn)行酶切,再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因,這樣融合基因上有三個(gè)限制酶切點(diǎn):BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ,其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端,因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進(jìn)行切割,確保融合基因能夠插入載體中。(4)反義融合基因是由番茄果實(shí)細(xì)胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的,因此為了實(shí)現(xiàn)圖1中反義基因的效果,應(yīng)將融合基因反向插入在啟動(dòng)子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后,接種在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中,可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌,再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。(5)在檢測(cè)番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時(shí),因?yàn)榉鸭?xì)胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因,能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交,所以不能用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化(合成)酶基因片段做探針進(jìn)行檢測(cè)?!绢}目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是:1.讀取題干信息,結(jié)合題圖1,弄清反義基因是如何形成的。2.反義mRNA和靶mRNA實(shí)質(zhì)上是分別由靶基因的兩條鏈為模板轉(zhuǎn)錄而來。3.結(jié)合題圖和題意分析融合基因?yàn)楹问欠聪虿迦朐趩?dòng)子2A11的下游。11、XbaI和SacI防止目的基因自身環(huán)化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈,然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上RNA聚合酶復(fù)制原點(diǎn)重組DNA的鑒別與選擇蛋白質(zhì)工程【解題分析】

1、基因工程的操作步驟包括:目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建:①過程:一般用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體,再用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。②目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。③基因表達(dá)載體的組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。(1)啟動(dòng)子在基因的首段,它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),能控制著轉(zhuǎn)錄的開始;(2)終止子在基因的尾端,它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束;(3)標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴(kuò)增技術(shù):PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:(1)模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。(2)模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。(3)引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈?!绢}目詳解】(1)識(shí)圖分析可知,構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),目的基因需要插入到啟動(dòng)子和終止子之間,圖中啟動(dòng)子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點(diǎn),因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因,以產(chǎn)生與質(zhì)粒相同的末端,相比用同一種酶進(jìn)行酶切,用兩種酶切割可以防止目的基因自身環(huán)化或防止目的基因反向連接。(2)為獲取大量的蜘蛛絲基因,常采用PCR擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增蜘蛛絲基因前,需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)2種引物分別與2條模板鏈結(jié)合;進(jìn)行PCR時(shí)需加熱至90~95℃然后冷卻至55~60℃,此操作的目的是使DNA解鏈,然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。(3)基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子能夠與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合,才能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程,而載體本身的擴(kuò)增,需借助于載體上的復(fù)制原點(diǎn)進(jìn)行,載體上的標(biāo)記基因的作用是鑒別與篩選含有重組DNA的受體細(xì)胞。

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