生物技術(shù)實(shí)踐（選修1）專題5 DNA和

專題5

DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)DNA的粗提取與鑒定多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段血紅蛋白的提取與分離課題1DNA的粗提取與鑒定課題目標(biāo):嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取;了解DNA的理化性質(zhì),理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理。課題重點(diǎn)DNA的粗提取和鑒定方法。本節(jié)問(wèn)題：1．DNA的粗提取和鑒定根據(jù)的原理是什么？1）DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的不同而不同。具體見(jiàn)P54圖5-1。2）利用DNA不溶于酒精但細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)溶于酒精的性質(zhì)可使DNA與蛋白質(zhì)分離得到初步純化的DNA。3）在沸水中DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。2．DNA粗提取的方法步驟怎樣？有什么主要注意問(wèn)題？注意問(wèn)題：1)材料要選用DNA含量較高的生物組織;2)整個(gè)實(shí)驗(yàn)中三次用到2mol/L的NaCl溶液;3)酒精最好用95%的冷酒精;4)二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如果從冰箱取出,用時(shí)要先搖勻;5)加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時(shí),動(dòng)作要輕緩且朝一個(gè)方向。3．解決教材其他練習(xí)題。

反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)的原因是：用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶于低鹽溶液中的物質(zhì)。練習(xí)鞏固1．向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個(gè)過(guò)程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是A．減小;減小B．增大;增大C．先減小后增大D．減小;增大2．欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出，最有效的辦法是A．加蒸餾水B．加礦泉水C．加清水D．加生理鹽水3．與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是A．操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度B．操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整C．加蒸餾水可以同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度D．當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，NaCl溶液的濃度可以認(rèn)為是0.14mol/L4．如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖，請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題：（1）正確的操作順序是_________（用字母和箭頭表示）

（2）如圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是_____________________________________________。

（3）如圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過(guò)充分預(yù)冷的才能使用，該步驟的目的是_____________________________。（4）為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加_____試劑后沸水浴，如果出現(xiàn)_____則證明該絲狀物的主要成分為DNA。解答（1）C→B→E→D→A

（2）加速