培養(yǎng)基模擬罐裝培訓(xùn)全套

培養(yǎng)基模擬罐裝培訓(xùn)全套v1.培養(yǎng)基灌裝的目的v

一、定義vMFT——MediaFillTest英文的縮寫。中文意思為：培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)vMFT——是用于證明無菌產(chǎn)品的生產(chǎn)過程在確定的環(huán)境、人員、工藝、物料、設(shè)備和監(jiān)控條件下，是否能有效地防止微生物污染，保證所提供產(chǎn)品的無菌可靠性的一種方法。vMFT是用一種模擬替代物質(zhì)來模擬整個無菌生產(chǎn)過程，在所得的模擬產(chǎn)品中加注培養(yǎng)基，再對所得的全部培養(yǎng)基樣品進(jìn)行無菌培養(yǎng)。v培養(yǎng)基模擬試驗(yàn)是無菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證手段，是任何非最終無菌藥品生產(chǎn)必須進(jìn)行的一項(xiàng)驗(yàn)證。二、目的：v評估在既定無菌生產(chǎn)環(huán)境和過程控制條件下生產(chǎn)無菌v產(chǎn)品的能力v證明指定的無菌工藝設(shè)計(jì)和變更是否可行v證明無菌工藝過程中的相關(guān)操作是否可行v評估無菌工藝人員的操作水平（資格確認(rèn)組成部分）v證明符合cCMP的要求v發(fā)現(xiàn)無菌工藝過程中潛在的微生物污染因素v2.法規(guī)要求v附錄1無菌藥品v第三條無菌藥品的生產(chǎn)須滿足其質(zhì)量和預(yù)定用途的要求，應(yīng)當(dāng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度是達(dá)到上述目標(biāo)的關(guān)鍵因素，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心設(shè)計(jì)并經(jīng)驗(yàn)證的方法及規(guī)程進(jìn)行，產(chǎn)品的無菌或其它質(zhì)量特性絕不能只依賴于任何形式的最終處理或成品檢驗(yàn)（包括無菌檢查）。v第四十六條生產(chǎn)的每個階段（包括滅菌前的各階段）應(yīng)當(dāng)采取措施降低污染。v第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。v?應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型、培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。v應(yīng)當(dāng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對無菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。v?培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的首次驗(yàn)證，每班次應(yīng)當(dāng)連續(xù)進(jìn)行3次合格試驗(yàn)?？諝鈨艋到y(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)通常應(yīng)當(dāng)按照生產(chǎn)工藝每班次半年進(jìn)行1次，每次至少一批。vv?培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：v?（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。v?（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：v?1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗(yàn)；v?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。v?（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：v?1.有1支污染，需調(diào)查；v?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。v?（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。v?第四十八條應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗(yàn)證不能對生產(chǎn)造成不良影響。v?培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：v?（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。v?（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：v?1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗(yàn)；v?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。v?（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：v?1.有1支污染，需調(diào)查；v?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。v?（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。v?第四十八條應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗(yàn)證不能對生產(chǎn)造成不良影響。v強(qiáng)制性法規(guī):v?EUGuidelinestoGoodManufacturingPractise,AnnexIv約半頁紙長的文字說明了原則要求v?FDAGuidanceforIndustry:SterileDrugroductsProducedbyAsepticProcessing(2004):v詳細(xì)的要求,7頁v?ISO13408-1Asepticprocessingofhealthcareproducts,1998(draftofrevisedversionfrom2006available)v詳細(xì)要求,5頁v?USP<1116>MicrobiologicalEvaluationofCleanRoomsandotherConrolledEnvironmentsv短的部分說明了原則要求，參照FDAAsepticGuidev(Ph.Eur.5.1.1中只有一句話)v指導(dǎo)性文件:v?PICRecommendationontheValidationofsepticProcessesv(詳細(xì)要求,7頁,對不同劑型有專門的說明，但其接受標(biāo)準(zhǔn)不再有效)v?GuidetoInspectionsofsterileDrugsubstanceManufacturer,FDA1994v最佳操作規(guī)范:v?PDATechnicalReportNo.28,ProcessimulationTestingforSterileBulkPharmaceuticalChemicals,RevisedSupplementv2006(非常詳細(xì)的建議,對于BPCs有專門的解決方案)v?PDATechnicalReportNo.221996,ProcessSimulationTestingforAsepticallyFilledProducts(非常詳細(xì),重原理不重具體要求）v3.驗(yàn)證開始前的確認(rèn)所有的驗(yàn)證均在有效期?設(shè)備確認(rèn)ü通風(fēng)系統(tǒng)（HVAC）的確認(rèn)ü設(shè)備的在線清洗和滅菌CIP,SIP?滅（除）菌工藝驗(yàn)證ü?jié)駸帷⒏蔁釡缇に嚚钩^濾ü空氣過濾器的完好性檢測ü容器/膠塞密封完好性測試?人員培訓(xùn)?潔凈室環(huán)境達(dá)到設(shè)計(jì)要求v4.培養(yǎng)基灌裝測試的頻率初始驗(yàn)證：每班次連續(xù)做3批驗(yàn)證隨后每半年針對不同班次/工藝進(jìn)行一次再驗(yàn)證所有日常操作人員每年都必須參加一次培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)偏差調(diào)查的手段v5.灌裝的批量v大多數(shù)傳統(tǒng)灌裝工藝：培養(yǎng)基灌裝：5000瓶~10000瓶可以接受（根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，95%的置信限下，批量足以至少能檢出千分之一的污染率）v正常生產(chǎn)批次量少于5000瓶：培養(yǎng)基灌裝：至少等于日常生產(chǎn)最大批量v高污染概率灌裝線（如手動灌裝）培養(yǎng)基灌裝：全批量v低污染概率灌裝線（如隔離器下）培養(yǎng)基灌裝：適當(dāng)減少無菌原料藥v常規(guī)批次量較?。号囵B(yǎng)基灌裝：模擬實(shí)施大生產(chǎn)的批次量v常規(guī)批次量較大：培養(yǎng)基灌裝：考慮大生產(chǎn)批次量的可行性，培養(yǎng)的可行性，介質(zhì)的溶解性，可適當(dāng)減?。☉?yīng)涵蓋最差條件）灌裝體積每只容器的灌裝體積不少于總?cè)莘e的1/3同樣，灌裝體積也不宜過大既要考慮到瓶倒轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)時，培養(yǎng)基能充分接觸到容器和密封件的內(nèi)表面，又要保證容器內(nèi)有足夠的氧氣支持微生物生長。v6.培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)的培養(yǎng)基和模擬替代物6.1培養(yǎng)基適宜寬菌譜范圍的微生物生長，如大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基（胰蛋白酶大豆肉湯，TSB）v培養(yǎng)基的要求無菌性試驗(yàn)合格抑菌性試驗(yàn)合格6.2模擬替代物例如：乳糖、甘露醇，聚乙二醇6000，氯化鈉抑菌性試驗(yàn)合格物理、化學(xué)性質(zhì)相似試驗(yàn)v7.最差條件確定v灌裝數(shù)量：5000～10,000瓶?備注：生產(chǎn)批量小于5000瓶，按最大批量進(jìn)行v灌裝運(yùn)行速度：最低灌裝速度或?的最低的灌裝速度v瓶子的要求：

首次驗(yàn)證：選擇最大瓶口的瓶子

確認(rèn)驗(yàn)證：可以輪換不同的瓶子v模擬日常班次輪換，暫停/休息和更衣過程：2班或3班的變化，中午/晚飯的休息時間，進(jìn)出的更衣等v模擬常規(guī)干預(yù)操作§模擬裝量的核對§模擬裝量的調(diào)節(jié)§模擬物料的添加（橡塞，粉子等）§模擬瓶子堵塞，橡塞堵塞，粉子堵塞等的操作v模擬非常規(guī)干預(yù)的操作

更換灌裝頭，更換或調(diào)節(jié)劑量盤，修理傳送帶等v人員的要求（每次要求）§參加無菌操作的人員（操作工，QC，工程部等）每年至少參加一次驗(yàn)證§驗(yàn)證時，在無菌操作的人員應(yīng)不少于日常生產(chǎn)時的操作人員v設(shè)備等儲存時間的驗(yàn)證（首次驗(yàn)證和每年一次）§灌裝的設(shè)備，儲罐，滅菌后原料，膠塞等的儲存的最長時間應(yīng)在培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證中得到驗(yàn)證v最長生產(chǎn)時間的確認(rèn)（首次驗(yàn)證和每年一次）§培養(yǎng)基的灌裝時間一般要大于等于最長的生產(chǎn)時間v設(shè)備的安裝和連接培養(yǎng)基灌裝時設(shè)備的安裝和連接應(yīng)和日常時設(shè)備的安裝連接一致v人員疲勞度的模擬對無菌人員連續(xù)工作強(qiáng)度進(jìn)行模擬v更換氣體凍干無菌粉針的模擬v執(zhí)行產(chǎn)品的凍干工藝有難度(如凍干過程可能持續(xù)幾天，溫度過低，水分的流失)v應(yīng)該首先識別有污染風(fēng)險的活動，并加以模擬(如半加塞西林瓶的轉(zhuǎn)運(yùn)，凍干機(jī)的裝載）v凍干程序的模擬，應(yīng)該采用一次或多次的部分真空和破空v小瓶必須不被冷凍（不低于3℃）v注意確保培養(yǎng)基的處于有氧狀態(tài)。無菌原料藥的模擬v最大限度排除實(shí)際生產(chǎn)工藝中存在抑制微生物生長的操作和步驟v用除菌過濾的壓縮空氣取代氮?dú)鈦泶蚱普婵誺采用其他更適合微生物生長的溫度替代實(shí)際生產(chǎn)工藝中采用的可能對微生物有抑制作用的溫度盡可能模擬生產(chǎn)時的無菌操作n總的原則n綜合考慮生產(chǎn)線可能造成污染的各種因素n盡可能模擬實(shí)際生產(chǎn)的無菌操作v8.干擾因素設(shè)計(jì)模擬灌裝必須充分涵蓋常規(guī)干擾和非常規(guī)的干擾行為，數(shù)量要有代表性。干擾的次數(shù)應(yīng)大于或等于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)干擾操作時應(yīng)是在培養(yǎng)基有灌裝時進(jìn)行所有的干擾都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定，指定人員在過程中記錄v9.監(jiān)測計(jì)劃制定環(huán)境監(jiān)測計(jì)劃，綜合形成書面方案制定培養(yǎng)基灌裝過程的微生物負(fù)荷的監(jiān)控計(jì)劃,便于偏差調(diào)查應(yīng)用風(fēng)險評估的方法確定關(guān)鍵監(jiān)控點(diǎn)，按實(shí)際需要選擇合適的監(jiān)測方法進(jìn)行總的懸浮粒子數(shù)及微生物的監(jiān)測監(jiān)測必須覆蓋所有的無菌工藝步驟，包括涉及過程及涉及人員取樣點(diǎn)，測試頻率及樣品數(shù)量應(yīng)該與常規(guī)生產(chǎn)相同或更多，以證實(shí)日常環(huán)境狀況。滅菌后的西林瓶、膠塞應(yīng)進(jìn)行無菌檢查與產(chǎn)品直接接觸的表面需進(jìn)行表面微生物檢查，生產(chǎn)后應(yīng)對粉斗，橡塞斗，所用氣體等進(jìn)行取樣設(shè)備表面、墻面、地面、手套、潔凈服等等在使用后進(jìn)行表面微生物檢查v10.灌裝過程v方法1灌裝培養(yǎng)基液體，然后壓塞，軋蓋v方法2灌裝干粉培養(yǎng)基，然后加入注射用水，壓塞，軋蓋v方法3灌裝惰性粉末，再加入液體培養(yǎng)基，壓塞，軋蓋無菌原料可根據(jù)工藝特點(diǎn)，分別以液體和固體生產(chǎn)工藝模擬例：液體工藝：制備，除菌過濾，裝箱，凍干，出箱，混粉，分裝，除菌過濾后培養(yǎng)濾芯固體工藝：出箱，粉碎，混粉，分裝，取樣，加入TSB液體搖勻后并充分接觸內(nèi)壁后培養(yǎng)培養(yǎng)基灌裝結(jié)束后的清場和清洗無菌生產(chǎn)區(qū)域管道系統(tǒng)凍干機(jī)過程中的微生物泄露培養(yǎng)基的撤出和報廢應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗(yàn)證不能對生產(chǎn)造成不良影響v11.培養(yǎng)基灌裝產(chǎn)品的培養(yǎng)和測試通常所有在工藝模擬中生產(chǎn)的產(chǎn)品必須進(jìn)行培養(yǎng)。任何灌裝的產(chǎn)品都應(yīng)該在培養(yǎng)前進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)任何不合格品（如容器密封性存在問題或完整性不好）時，都應(yīng)該被剔除并記錄。被排除在外未進(jìn)行培養(yǎng)的，必須清楚地說明排除的合理性。對于因容器破損而丟棄的產(chǎn)品，要求同日常生產(chǎn)一樣記錄并報告。完整的產(chǎn)品必須被培養(yǎng)，包括那些存在外觀缺陷的產(chǎn)品。培養(yǎng)條件：第一階段：22.5±2.5C,7天培養(yǎng)第二階段：32.5±2.5C,7天培養(yǎng)培養(yǎng)基的檢查一般在第三，七和十四天進(jìn)行檢查檢查人員的培訓(xùn)檢查人員應(yīng)進(jìn)行專門的培訓(xùn)檢查的要求燈光要求：明亮的燈光檢查要求：慢慢地旋轉(zhuǎn)逐個目檢是否有生長，記錄編號陽性瓶的檢查要求：必須主管進(jìn)行復(fù)核原料藥如培養(yǎng)容器不透明的，應(yīng)在微生物實(shí)驗(yàn)室B級背景A級層流保護(hù)下開包裝，目視觀察培養(yǎng)物所有的部分，是否有渾濁。觀察后應(yīng)進(jìn)行滯留試驗(yàn)，以確認(rèn)培養(yǎng)基在培養(yǎng)末期仍具有促生長的能力。生長試驗(yàn)測試的要求：生長試驗(yàn)必須在產(chǎn)品培養(yǎng)結(jié)束（14天）后進(jìn)行測試所用的菌常規(guī)菌（藥典要求）：枯草芽孢桿菌Bacilussubtilis白色念珠球菌Candidaalbicans非常規(guī)菌：生產(chǎn)現(xiàn)場中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)的菌對該產(chǎn)品比較敏感的標(biāo)準(zhǔn)菌接種的濃度小于100CFU/瓶v12.接受標(biāo)準(zhǔn)與試驗(yàn)結(jié)果的判斷v目標(biāo)是零污染!!!!v任何污染都是客觀事實(shí)，應(yīng)進(jìn)行調(diào)查!v警報/行動水平:v當(dāng)灌裝少于5000單位時:v不得檢出污染單位v一個污染單位(行動水平)→啟動調(diào)查，并進(jìn)行再驗(yàn)證v當(dāng)灌裝數(shù)量為5.000至10.000或更多單位時:v一個單位被污染(警報水平)→啟動調(diào)查，并考慮是否需要重復(fù)培養(yǎng)基灌裝v兩個單位被污染(行動水平)→啟動調(diào)查，并進(jìn)行再驗(yàn)證v污染單位必須與培養(yǎng)基灌裝期間采取的模擬行為和其發(fā)生時間是相關(guān)聯(lián)的!v當(dāng)培養(yǎng)基灌裝出現(xiàn)陽性結(jié)果時，不管是否符合合格標(biāo)準(zhǔn)，都必須進(jìn)行調(diào)查，科學(xué)評估工藝的可靠性以及上市產(chǎn)品可能存在的風(fēng)險。v發(fā)現(xiàn)任何陽性結(jié)果樣品均屬應(yīng)進(jìn)行調(diào)查。分離到的微生物應(yīng)鑒別到種。調(diào)查過程中應(yīng)詳細(xì)分析可能的產(chǎn)生陽性結(jié)果的原因。v對于超出標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)果，應(yīng)當(dāng)在調(diào)查清楚原因后再次進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。v必須有一個詳細(xì)的書面程序，規(guī)定出現(xiàn)培養(yǎng)基灌裝超出警報/行動水平時的處理程序。發(fā)現(xiàn)污染瓶的調(diào)查應(yīng)該從人、機(jī)、料、法、環(huán)各個方面進(jìn)行調(diào)查。（1）生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)（粒子、浮游菌、沉降碟等）（2）對人員的監(jiān)測結(jié)果（3）高效過濾器的完整性檢測數(shù)據(jù)（4）層流臺性能數(shù)據(jù)（氣流流速、壓差記錄等）（5）生產(chǎn)房間監(jiān)控數(shù)據(jù)（空氣流向、工作臺面氣流方向速度）（6）人員培訓(xùn)情況，操作資質(zhì)和能力（7）干擾模擬的執(zhí)行情況（8）無菌室生產(chǎn)用具和其他相關(guān)物品的儲