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第4講動物細(xì)胞工程一、動物細(xì)胞培養(yǎng)續(xù)表【例1】動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是(
)A.動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細(xì)胞,植物組織培養(yǎng)是培養(yǎng)組織C.動物細(xì)胞培養(yǎng)可以傳代培養(yǎng),而植物組織培養(yǎng)不能傳代培養(yǎng)D.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變,而植物組織培養(yǎng)不能A
【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)通常用液體培養(yǎng)基,成分中糖類用葡萄糖,還必須含有動物血清;植物組織培養(yǎng)通常用固體培養(yǎng)基,成分中含有蔗糖及植物激素等物質(zhì)。
【友情提醒】(1)在細(xì)胞融合時,可出現(xiàn)多種雜種細(xì)胞,如B細(xì)胞—B細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞,B細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞。(2)各項技術(shù)在使用中一般要借助于其他某種技術(shù)的協(xié)助,如動物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植、核移植等,其中動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。續(xù)表【例2】下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述,正確的是(
)A.制備過程中不需要動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點C.經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D.單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑D 【解析】單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合,經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞并經(jīng)單一抗體檢測后,培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體,雜交瘤細(xì)胞能無限繁殖但不具有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。
三、動物體細(xì)胞核移植與克隆動物1.原理
動物細(xì)胞核的全能性。動物細(xì)胞核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。2.供核細(xì)胞
一般選優(yōu)良動物的傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。
3.受體細(xì)胞
去核的MⅡ期卵母細(xì)胞。
4.過程【例3】在克隆多利羊的過程中,下列哪項技術(shù)沒有運用到(
)A.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.細(xì)胞核移植C.胚胎移植技術(shù)D.基因工程技術(shù)【解析】克隆技術(shù)需利用核移植以產(chǎn)生重組細(xì)胞,重組細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成早期胚胎后,需移植到母體子宮發(fā)育成個體。
D 動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較續(xù)表
1.(2010·四川)某實驗室做了下圖所示的實驗研究,下列相關(guān)敘述,正確的是()A.與纖維母細(xì)胞相比,過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低B.過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程C.每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體,故過程③不需要選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選D.過程④產(chǎn)生的單抗,不需細(xì)胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細(xì)胞外D【解析】本題考查細(xì)胞分化及細(xì)胞工程相關(guān)知識,考查學(xué)生的綜合應(yīng)用能力。過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞全能性高,A錯。過程②是細(xì)胞的分化過程,分化時遺傳物質(zhì)不會發(fā)生變化,B錯。過程③要用選擇培養(yǎng)基才能選出雜交瘤細(xì)胞,C錯。過程④分泌抗體蛋白,是胞吐過程,不需載體蛋白協(xié)助。
2.(2010·浙江)下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)D【解析】本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識,動物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代,因為細(xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞接觸時就會停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過程中進(jìn)行的是有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細(xì)胞基因型相同),但是細(xì)胞在培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會死亡,留下來的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,但是細(xì)胞膜表面糖蛋白減少,細(xì)胞易轉(zhuǎn)移,可以無限增殖,即可以進(jìn)行傳代培養(yǎng),這個也就是人體中癌細(xì)胞會轉(zhuǎn)移的原因。
3.(2009·江蘇)動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。(1)肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞
。(2)氣室中充入5%CO2氣體的主要作用是
。(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長,但要注意選擇抗生素的_____________,以保證抗生素對肝臟無害。(4)有機(jī)物X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對有機(jī)物X是否具有解毒作用。吸收氧氣維持培養(yǎng)種類和劑量和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物液適宜的pH
材料用具:
肝臟小塊,外周血淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液,植物凝集素(刺激淋巴細(xì)胞分裂);顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液(使染色體著色),有機(jī)物X溶液等。
實驗過程:①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞,取4等份,備用。②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置,按下表步驟操作(“√”表示已完成的步驟)。甲乙丙丁步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液√√√√步驟二:加入有機(jī)物X溶液√√步驟三:放置肝臟小塊√上表中還需進(jìn)行的操作是
。③培養(yǎng)一段時間后,取4組裝置中的等量培養(yǎng)液,分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。④一段時間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察_____________________,并對比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋巴細(xì)胞正常,則說明______________________________。向乙(或丁)組裝置中染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對有機(jī)物X具有解毒作用放置肝臟小塊【解析】本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)把肝臟切成小薄片,有利于肝臟細(xì)胞吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。(2)氣室中充入5%CO2的作用是形成碳酸來維持培養(yǎng)液適宜的pH。(3)同時也要注意選擇抗生素的種類和劑量來抑制細(xì)菌生長。(4)向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊作為對照實驗。有機(jī)物X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂,所以要觀察淋巴細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否變化。甲組添加肝臟小塊,淋巴細(xì)胞染色體正常,丙組沒有添加出現(xiàn)染色體異常,說明肝臟小塊對有機(jī)物X具有解毒作用。4.(2011·南京模擬)以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原,采用細(xì)胞工程制備單克隆抗體,下列敘述正確的是()A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個漿細(xì)胞可以獲得大量針對H1N1病毒的單克隆抗體C.將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體D【解析】單克隆抗體是相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,單個漿細(xì)胞的培養(yǎng)不能獲得單克隆抗體;用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),血清中的抗體不是單一抗體,還含有體內(nèi)已存在的其他抗原的抗體;等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,只考慮兩個細(xì)胞融合,可以形成三種雜交細(xì)胞,但只有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞。5.(2011·鄭州模擬)英國科學(xué)家威爾穆特首次用羊的體細(xì)胞、乳腺細(xì)胞成功地培育出一只小母羊,取名為“多利”,這種方法被稱之為“克隆”。以下四項中與此方法在本質(zhì)上最相近的是()A.將兔的早期胚胎分割后,分別植入兩只母兔的子宮內(nèi),并最終孕育成兩只一樣的兔B.將人的抗病毒基因嫁接到煙草的DNA分子上,培育出了具有抗病毒能力的煙草新品種C.將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D.將人的精、卵在體外受精,待受精卵發(fā)育到囊胚期時,再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒”A6.(2011·大同模擬)單克隆抗體(單抗)實質(zhì)上是單個效應(yīng)B細(xì)胞通過克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的免疫球蛋白。下列有關(guān)敘述中,錯誤的是()A.單抗作為生物導(dǎo)彈能定向到達(dá)癌細(xì)胞所在部位B.單抗制備的過程要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)C.在單抗制備的過程中必須經(jīng)過至少兩次細(xì)胞篩選D.只有用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo),才能促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞
D【解析】誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合有三種方法:滅活病毒、物理方法、化學(xué)方法。7.請據(jù)圖判斷,下列說法不正確的是()
C
A.若a,b分別對應(yīng)為骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)B細(xì)胞,則d能產(chǎn)生單克隆抗體是b的遺傳物質(zhì)選擇性表達(dá)的結(jié)果B.若d形成有
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