醫(yī)院檢驗(yàn)科培訓(xùn)課件：《微生物檢驗(yàn)相關(guān)介紹》

微生物檢驗(yàn)相關(guān)介紹

醫(yī)學(xué)微生物檢驗(yàn)存在的問(wèn)題微生物標(biāo)本的采集不夠規(guī)范微生物標(biāo)本的保存、運(yùn)送不夠規(guī)范

實(shí)驗(yàn)室與臨床溝通不夠（很重要）相關(guān)介紹微生物標(biāo)本的采集微生物標(biāo)本的運(yùn)輸微生物實(shí)驗(yàn)室特色微生物檢驗(yàn)的意義抗生素的合理使用微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目與臨床意義為進(jìn)一步加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)抗菌藥物臨床應(yīng)用管理，促進(jìn)抗菌藥物合理使用，有效控制細(xì)菌耐藥，保證醫(yī)療質(zhì)量和醫(yī)療安全，衛(wèi)生部規(guī)定接受抗菌藥物治療的住院患者微生物檢驗(yàn)樣本送檢率不低于30%（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2011）56號(hào)）。特介紹那些屬于微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目，方便統(tǒng)計(jì)。細(xì)菌檢驗(yàn)為感染性疾病診斷和治療提供依據(jù)：

目標(biāo)性治療：提高微生物的送檢率與檢出率，有利于診斷與使用抗菌藥。

經(jīng)驗(yàn)治療：根據(jù)本地區(qū)病原菌類型時(shí)間、區(qū)域、耐藥譜等使用抗菌藥。

調(diào)整治療方案針對(duì)性用藥：獲得準(zhǔn)確病原菌和細(xì)菌藥敏結(jié)果。細(xì)菌培養(yǎng)的臨床意義細(xì)菌培養(yǎng)與其它檢驗(yàn)項(xiàng)目不同，由于其樣本采集易受雜菌的干擾和培養(yǎng)條件的限制，因而造成檢測(cè)結(jié)果有時(shí)與臨床不完全一致，故在分析細(xì)菌培養(yǎng)報(bào)告時(shí)應(yīng)明白：細(xì)菌培養(yǎng)陰性不代表無(wú)細(xì)菌感染、細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性不代表該菌一定是病原菌，應(yīng)結(jié)合患者具體情況而定。1、血液和骨髓培養(yǎng)

2、腦脊液培養(yǎng)3、尿液培養(yǎng)4、痰液和咽拭子標(biāo)本的培養(yǎng)5、糞便標(biāo)本的培養(yǎng)

6、無(wú)菌體液標(biāo)本的培養(yǎng)

7、生殖道標(biāo)本的培養(yǎng)

8、厭氧菌培養(yǎng)

9、真菌培養(yǎng)

1、血液和骨髓培養(yǎng)

目前血液培養(yǎng)仍然是菌血癥和敗血癥的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的基本方法，并且廣泛地應(yīng)用于傷寒、副傷寒及其它細(xì)菌引起的敗血癥的診斷。菌血癥系病原菌一時(shí)性或間斷地由局部進(jìn)入血流，但并不在血中繁殖，無(wú)明顯血液感染臨床征象。?？砂l(fā)生在病灶感染或牙齒感染，尤以拔牙、扁桃體切除及脊髓炎手術(shù)后等多見。敗血癥是指病原菌侵入血流，并在其中大量生長(zhǎng)繁殖，造成身體的嚴(yán)重?fù)p害，引起顯著的全身癥狀（如不規(guī)則高熱與全身中毒等癥狀），它多繼發(fā)于組織器官感染，尤其是當(dāng)機(jī)體免疫功能低下、廣譜抗生素和激素的應(yīng)用及燒傷等。

單次的血培養(yǎng)結(jié)果，對(duì)臨床無(wú)鑒別指導(dǎo)意義，應(yīng)多次多部位采集血液進(jìn)行培養(yǎng)，才可判定檢出菌究竟是病原菌還是污染菌。抽血時(shí)應(yīng)特別注意皮膚消毒和培養(yǎng)瓶口的滅菌。1、血液和骨髓培養(yǎng)

Sau在BA平板上的菌落形態(tài)Sau革蘭氏染色鏡下形態(tài)2、腦脊液培養(yǎng)正常人的腦脊液是無(wú)菌的，故在腦脊液中檢出細(xì)菌（排除操作中的污染）應(yīng)視為病原菌。引起腦膜炎的細(xì)菌種類不同，化膿性腦膜炎病原菌多為腦膜炎奈瑟菌，除此之外尚有肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等。腦脊液新型隱球菌墨汁染色3、尿液培養(yǎng)

尿液細(xì)菌培養(yǎng)對(duì)于膀胱和腎臟感染的及早發(fā)現(xiàn)和病原學(xué)診斷很有價(jià)值，對(duì)于尿道、前列腺以及內(nèi)外生殖器的炎癥也有一定價(jià)值。尿液中出現(xiàn)細(xì)菌通常稱為菌尿癥，如果尿液本身澄清但培養(yǎng)出細(xì)菌，一般為標(biāo)本采集時(shí)未徹底消毒尿道口引起。如果細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性同時(shí)伴有膿尿出現(xiàn)，則提示有尿路感染的可能（需指出輕度感染時(shí)可無(wú)膿尿出現(xiàn)）。泌尿系感染常見菌為大腸埃希菌、葡萄球菌、鏈球菌、變形桿菌等，除結(jié)核分枝支桿菌外，這些細(xì)菌又是尿道口常駐菌，極易引起標(biāo)本留樣污染，應(yīng)注意鑒別。某些真菌疾病，如曲菌病在播散時(shí)也可造成腎臟感染，且尿中也能檢查到。3、尿液培養(yǎng)尿液的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)具有重要的診斷意義，但培養(yǎng)陰性并不能否定泌尿道感染，一般應(yīng)注意病程、采樣的時(shí)機(jī)、方法以及其它原因的影響。

尿道口的消毒是中段尿細(xì)菌培養(yǎng)的關(guān)鍵步驟，是引起假陽(yáng)性的最主要因素，故尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性要注意排除留樣污染，如果檢出菌的數(shù)量大于10萬(wàn)CFU/ml,則基本可認(rèn)為是病原菌。大腸埃希菌格蘭染色4、痰液和咽拭子標(biāo)本的培養(yǎng)

痰液及支氣管分泌物的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)對(duì)于呼吸道疾病的診斷、治療具有一定的意義。對(duì)無(wú)法咳痰的患者，用咳嗽后的咽拭子做培養(yǎng)檢查，仍是發(fā)現(xiàn)致病菌的主要依據(jù)。人體口腔、鼻咽部等上呼吸道內(nèi)存在有大量的正常菌群，故痰液標(biāo)本的收集易受到這些部位細(xì)菌的污染，尤以慢性呼吸道感染多見，這直接干擾細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果。另外患者接受某些藥物的治療，使病原菌生長(zhǎng)受到抑制，這樣也可影響陽(yáng)性檢出率。因此在分析結(jié)果時(shí)，應(yīng)密切結(jié)合臨床。在慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張和肺膿腫時(shí)，最好直接自支氣管抽取分泌物進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。呼吸道標(biāo)本的細(xì)菌常采取半定量計(jì)數(shù)，如果檢出菌的量大于正常菌群的量，可基本認(rèn)為系病原菌。5、糞便標(biāo)本的培養(yǎng)

腸道中細(xì)菌種類受食物的影響，除人乳喂養(yǎng)的嬰兒腸道內(nèi)以革蘭陽(yáng)性菌為主外，其余的人腸道內(nèi)均以革蘭陰性菌占優(yōu)勢(shì)，一般不致病。金黃色葡萄球菌、沙門菌、志賀菌、致病性大腸埃希菌（ETEC、EAEC、EPEC、EIEC、EHEC等）、弧菌屬（霍亂弧菌、副溶血弧菌）、氣單胞菌、鄰單胞菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、假絲酵母菌、艱難梭菌、結(jié)核分枝桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和彎曲菌等是腸道的致病菌，肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌可引起嬰幼兒腹瀉。沙門氏菌在SS平板上的菌落形態(tài)6、無(wú)菌體液標(biāo)本的培養(yǎng)

胸水

胸水最常見的污染菌有凝固酶陰性葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、草綠色鏈球菌或類白喉棒狀桿菌等。漏出性胸水一般是無(wú)菌的，但應(yīng)注意防止采樣污染。肺外傷或肺破裂引起的血胸，常常受到葡萄球菌、鏈球菌或肺炎鏈球菌和某些革蘭陰性桿菌等細(xì)菌侵襲而引起胸膜炎。原發(fā)性胸膜炎多由結(jié)核分枝桿菌引起，葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌也可引起原發(fā)性胸膜炎。繼發(fā)性胸膜炎常為肺炎、肺結(jié)核、肺膿腫或壞疽的合并癥。細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)臨床診斷頗有價(jià)值。6、無(wú)菌體液標(biāo)本的培養(yǎng)

心包液正常人的心包液量少而無(wú)菌，而滲出性心包液則系感染所致。對(duì)于急性漿液纖維素性心包炎，最常繼發(fā)于風(fēng)濕熱或繼發(fā)于猩紅熱、敗血癥、牙齦的感染病灶、肺炎、膿胸、外傷或結(jié)核性胸膜炎、縱隔淋巴結(jié)炎、隔下膿瘍向心包穿破蔓延。常見的細(xì)菌性感染有乙型溶血性鏈球菌、葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌等。慢性心包炎最常見者為結(jié)核。關(guān)節(jié)液6、無(wú)菌體液標(biāo)本的培養(yǎng)

關(guān)節(jié)囊內(nèi)發(fā)生炎性滲出現(xiàn)象可能與淋病奈瑟菌、葡萄球菌及鏈球菌等感染有關(guān)。病原學(xué)診斷可由關(guān)節(jié)囊穿刺液培養(yǎng)獲得證實(shí)。其他部分的體液有無(wú)細(xì)菌存在以及存在何種細(xì)菌，應(yīng)視其發(fā)生原因而定，并需通過(guò)細(xì)菌學(xué)檢查而確診。

流感嗜血桿菌7、生殖道標(biāo)本的培養(yǎng)

生殖道標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)性病診斷和其它細(xì)菌感染頗有價(jià)值。正常人的內(nèi)生殖器是無(wú)菌的，而外生殖器和男性尿道口、女性陰道口存在著大量細(xì)菌。尿道口常有凝固酶陰性葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、非致病性抗酸桿菌等，陰道口常見有乳酸桿菌、大腸埃希菌、白假絲酵母菌、類白喉?xiàng)U菌等。由于生殖器官正常菌群的存在常使細(xì)菌學(xué)診斷復(fù)雜化。因此對(duì)陰道、尿道、前列腺和子宮頸分泌物等標(biāo)本的采集應(yīng)特別注意生殖道外部情況，以減少雜菌的污染。

淋病是淋病奈瑟菌引起的尿道粘膜卡他性炎癥，其主要傳播途徑為性接觸直接傳染,也可被細(xì)菌污染物間接傳染。該菌主要侵犯粘膜,尤其對(duì)前尿道粘膜的單層柱狀上皮和后尿道的粘膜移行上皮有很強(qiáng)的親和力，故常見于泌尿生殖道感染。男性感染者可發(fā)展為前列腺炎、附睪炎，女性可引起前庭大腺炎、盆腔炎和陰道感染。革蘭染色涂片鏡檢可快速報(bào)告，但對(duì)于女性病例診斷不能單憑涂片檢查，而必須進(jìn)行培養(yǎng)才可確診。7、生殖道標(biāo)本的培養(yǎng)

淋病奈瑟氏菌革蘭氏染色7、生殖道標(biāo)本的培養(yǎng)

重視GBS的感染：近幾年來(lái)，有關(guān)B族鏈球菌導(dǎo)致嚴(yán)重母嬰感染的病例報(bào)道，提示B族鏈球菌導(dǎo)致的嚴(yán)重危害不容忽視國(guó)內(nèi)關(guān)于新生兒的研究則提示，B族鏈球菌是新生兒細(xì)菌感染中的重要致病菌北京協(xié)和醫(yī)院234例死亡新生兒的肺組織石蠟標(biāo)本進(jìn)行了B族鏈球菌檢測(cè)，其中檢出率為65%，結(jié)論：B族鏈球菌是新生兒肺炎死亡的主要病原菌，尤其在早發(fā)型肺炎病例中GBS感染占很大比重8、厭氧菌培養(yǎng)

（1）由厭氧菌引起的人類感染在所有感染性疾病中占有相當(dāng)大的比重，有些部位的感染如腦膿腫、牙周膿腫、盆腔膿腫等80%以上是由厭氧菌引起的，其中一部分是由厭氧菌單獨(dú)感染，大部分則與需氧菌混合感染。（2）厭氧菌大多感染密閉無(wú)氧的組織，故下列標(biāo)本無(wú)送檢價(jià)值：鼻咽拭子、齒齦拭子、痰和氣管抽取物、胃和腸道內(nèi)容物、肛門拭子、皮膚和黏膜分泌物、陰道或子宮拭子、褥瘡潰瘍分泌物等。厭氧菌感染引起的病癥9、真菌培養(yǎng)

真菌廣泛存在于自然界，如假絲酵母菌在人體的口腔、腸道、陰道及皮膚上均可分離出，住院患者的上述標(biāo)本中假絲酵母菌的分離率可達(dá)10～20%。真菌感染常發(fā)生在基礎(chǔ)代謝差的患者，如大量使用激素、免疫抑制劑、長(zhǎng)期廣譜抗生素應(yīng)用者，可引起呼吸道、泌尿道感染，甚至可致敗血癥、心內(nèi)膜炎、腦膜炎等嚴(yán)重感染。對(duì)痰液、糞便等有正常菌群生長(zhǎng)的部位檢出的假絲酵母菌，應(yīng)看數(shù)量多少?zèng)Q定治療的必要性。

甲真菌?。ㄕ婢云つw病）*顯微鏡檢查*細(xì)菌培養(yǎng)鑒定藥敏*快速檢測(cè)1.PCR法:TB-DNA 2.酶聯(lián)金標(biāo)：肺炎支原體

肺炎衣原體

結(jié)核抗體3.T-SPOT.TBr-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)；結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)4.血清標(biāo)志物:CRP、PCT5.病原體細(xì)胞成分:內(nèi)毒素、G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)細(xì)菌感染常用實(shí)驗(yàn)方法：血清標(biāo)志物:CRPC-反應(yīng)蛋白（CRP)是一種急性相蛋白，且是在歷史上首先被認(rèn)識(shí)的急性相蛋白之一。其血清或血漿濃度的增加是由炎性細(xì)胞因子如IL-6釋放所致，它幾乎恒定不變地顯示有炎癥存在。由于C-反應(yīng)蛋白通常在細(xì)菌感染后增高，而病毒感染時(shí)不增高，所以常用來(lái)作為鑒別細(xì)菌和病毒感染的一個(gè)首選指標(biāo)。臨床意義：CRP對(duì)于鑒別細(xì)菌還是病毒感染、監(jiān)測(cè)疾病的活動(dòng)情況和嚴(yán)重性、觀察治療效果有很好的指導(dǎo)作用，特別是對(duì)抗生素的合理應(yīng)用有提示性作用。降鈣素元（ProcalcitominPCT）降鈣素元是正常人血清中存在的含116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白，最初由甲狀腺C細(xì)胞產(chǎn)生，血清水平很低。在非感染或病毒性感染疾病時(shí)保持非常低的血清水平，在細(xì)菌性感染時(shí)含量升高，并與感染程度和預(yù)后呈正相關(guān)。

PCT含量的變化穩(wěn)定，并出現(xiàn)在疾病的早期（3-4h）。短半衰期(24h)國(guó)外把PCT作為最敏感的感染標(biāo)志。正常血清水平:100-150pg/ml

血管內(nèi)皮細(xì)胞在各種敗血癥相關(guān)因子的作用下應(yīng)急分泌PCT,或由PCT轉(zhuǎn)變?yōu)镃T(降鈣素)的過(guò)程中水解酶的缺少而導(dǎo)致PCT升高.早期診斷在感染發(fā)生2-3h血漿PCT濃度就會(huì)升高.病情監(jiān)測(cè)在膿毒血癥和休克時(shí)PCT含量最高,隨著感染的恢復(fù)PCT也隨著下降.預(yù)后判斷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，PCT是一個(gè)潛在的致死因子，本身不會(huì)啟動(dòng)膿毒性反應(yīng)但可放大并加重膿毒性的病理反應(yīng)，當(dāng)PCT含量升高時(shí)死亡率也升高。PCT產(chǎn)生可能機(jī)制PCT的其他臨床價(jià)值血液（靜脈血，最好床邊接種）尿液糞便其它標(biāo)本呼吸道標(biāo)本（鼻咽拭子、痰標(biāo)本、支氣管肺泡盥洗液）運(yùn)作流程——標(biāo)本采集常見標(biāo)本類型腦脊液及其他正常無(wú)菌體液（包括胸水、腹水、心包積液、滑囊液等）膿液和創(chuàng)面標(biāo)本（即創(chuàng)傷面的分泌物）生殖道標(biāo)本（分泌物拭子）組織標(biāo)本（損傷標(biāo)本拭子、骨髓組織等）常見標(biāo)本類型

——其它類型在最適宜的時(shí)間收集標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)該在感染的急性期和使用抗生素之前收集運(yùn)作流程——標(biāo)本采集基本原則：2.從實(shí)際感染的部位取臨床標(biāo)本并盡量避免污染

必須取得足夠量的標(biāo)本，以滿足培養(yǎng)的要求。（以血液標(biāo)本為例）運(yùn)作流程——標(biāo)本采集基本原則：4.標(biāo)本采集后需盡快接種、處理（<2h），腦脊液標(biāo)本必須立即送檢，否則會(huì)影響細(xì)菌的檢出率。5、必須使用適當(dāng)?shù)氖占鞑?、?biāo)本容器和培養(yǎng)基，以保證最大限度地發(fā)現(xiàn)微生物。運(yùn)作流程——標(biāo)本采集基本原則：特別聲明：所有的標(biāo)本采集應(yīng)注意無(wú)菌操作,送檢的容器無(wú)菌(嚴(yán)禁使用化學(xué)試劑)。血液標(biāo)本最佳采血時(shí)間：盡可能在抗菌藥物使用前，盡可能在寒顫和發(fā)熱初起時(shí)。培養(yǎng)瓶的消毒：棄去瓶頂塑料帽,用75%乙醇棉球消毒瓶頂橡皮塞,待干60秒。靜脈穿刺消毒：嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作（建議使用洗必泰）。直接將血液注入血培養(yǎng)瓶中、送檢（血液標(biāo)本一般不用抗凝劑，培養(yǎng)基與血液比值為10：1為佳,成人5--10ml,嬰幼兒1--2ml）注意：血液培養(yǎng)必須特別注意消毒，避免皮膚表層細(xì)菌造成污染。主要病原菌：沙門菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌。運(yùn)作流程——標(biāo)本采集尿液標(biāo)本一、女性，中段尿：1.用肥皂水完全清洗尿道區(qū)域2.用濕紗布?jí)|漂洗3.分開陰唇，開始排尿4.采集中段尿二、男性，中段尿：1.用肥皂和水完全清洗陰莖頭2.用濕紗布?jí)|漂洗3.回縮包皮，開始排尿4.采集中段。盛裝容器及最小量：無(wú)菌廣口容器≥3ml。主要病原菌：大腸埃希菌、變形桿菌、克雷伯菌、其它革蘭陰性桿菌、腸球菌、腐生葡萄球菌、純的金黃色葡萄球菌運(yùn)作流程——標(biāo)本采集說(shuō)明：女性尿液中的衣原體抗原可能難以檢出若培養(yǎng)3種以上菌群生長(zhǎng)，可疑污染糞便標(biāo)本1、排便后，挑取有膿血、粘液部分的糞便約2-3克（液狀糞便則取絮狀物），成盛于滅菌廣口瓶送檢。用棉拭挑取糞便插入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基或pH7.0的磷酸鹽甘油中送檢，可提高病原菌檢出率。2、對(duì)不易獲取糞便者或嬰幼兒，可用直腸拭子（又稱肛拭子）采集。將拭子前端用無(wú)菌甘油水濕潤(rùn)，然后插入肛門約4-5cm（幼兒約2-3cm）處，輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面粘液后退出，置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。主要病原菌：沙門菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌運(yùn)作流程——標(biāo)本采集呼吸道標(biāo)本下支氣管肺泡灌洗吸出液、支氣管沖洗液或刷子刷出物、氣管抽吸物，肺穿刺或活組織：將抽吸物或洗出物放入痰采集器內(nèi)，將刷出物放入有鹽水的無(wú)菌容器內(nèi)。盛裝容器及最小量：無(wú)菌容器>1ml

痰，咳出：在醫(yī)生或護(hù)士的直接指導(dǎo)下采集標(biāo)本，

讓患者清洗咽喉或漱口，患者深咳肺部痰，不要唾液。盛裝容器及最小量：無(wú)菌容器：細(xì)菌>1ml、真菌：3-5ml、分支桿菌：5-10ml運(yùn)作流程——標(biāo)本采集顯微鏡檢查判定痰標(biāo)本質(zhì)量實(shí)驗(yàn)室在接種前必須作痰涂片革蘭染色，當(dāng)在低倍鏡下白細(xì)胞小于10個(gè)每視野、上皮細(xì)胞大于25個(gè)每視野時(shí)應(yīng)作為不宜做培養(yǎng)的標(biāo)本；當(dāng)白細(xì)胞小于10個(gè)每視野，上皮細(xì)胞小于25個(gè)每視野時(shí)再參照油鏡觀察標(biāo)本中細(xì)菌分布作出判斷：

當(dāng)標(biāo)本中細(xì)菌種類超過(guò)3種以上，未見到纖毛柱狀上皮細(xì)胞，作為不合格標(biāo)本；如見到數(shù)量不等的白細(xì)胞或纖毛柱狀上皮細(xì)胞或兩者同在，含1-2種不同細(xì)菌，可考慮繼續(xù)培養(yǎng)，結(jié)果可根據(jù)病情再作分析；當(dāng)涂片中見到1-3種細(xì)菌，少量的扁平上皮細(xì)胞，少量或較多纖毛柱狀上皮細(xì)胞均可按合格標(biāo)本繼續(xù)培養(yǎng)。判定痰標(biāo)本質(zhì)量合格痰標(biāo)本的細(xì)菌涂片信息可預(yù)測(cè)培養(yǎng)結(jié)果合格痰標(biāo)本的培養(yǎng)陽(yáng)性率為78%不合格標(biāo)本的陽(yáng)性率僅為14.7%,兩者有顯著的差異合格痰標(biāo)本涂片結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的符合率達(dá)80.2%。說(shuō)明：若標(biāo)本中含有食物拒收。肺炎鏈球菌在2小時(shí)內(nèi)死亡。冷藏保存不會(huì)檢出肺炎鏈球菌。主要致病菌：肺炎鏈球菌、克雷伯菌屬、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌非病原菌：酵母菌、草綠色鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌鼻咽喉標(biāo)本鼻：用預(yù)先被無(wú)菌鹽水濕潤(rùn)的拭子插入鼻孔約2cm，對(duì)著鼻粘膜用力旋轉(zhuǎn)，蘸取粘膜上分泌物，緩慢抽出，將拭子直接送檢。咽喉：用壓舌板壓舌，用無(wú)菌拭子從咽后、扁桃體和發(fā)炎區(qū)域采樣，不要碰觸舌頭和面頰。主要病原菌：A群β溶血鏈球菌可選擇性報(bào)告：溶血隱秘桿菌運(yùn)作流程——標(biāo)本采集生殖道標(biāo)本1、根據(jù)不同感染種類和病變特征采集不同的標(biāo)本。采集尿道標(biāo)本時(shí)，先用生理鹽水局部清洗，以無(wú)菌棉拭子插入尿道口1-2cm停留十余秒鐘，輕輕旋轉(zhuǎn)拭子后退出。2、對(duì)外陰部糜爛、潰瘍，生理鹽水清洗后用棉拭擦取病灶邊緣的分泌物。3、陰道和宮頸口分泌物須在窺陰器下用長(zhǎng)棉拭采集。4、子宮內(nèi)分泌物需用無(wú)菌導(dǎo)管抽取。導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜，插入子宮后再刺穿該膜予負(fù)壓吸引，可減少陰道菌群污染。5、女性盆腔膿腫，應(yīng)在陰道局部消毒后，由直腸子宮陷凹處進(jìn)針抽取。6、前列腺液需進(jìn)行前列腺按摩獲取。主要病原菌：淋病奈瑟菌、滴蟲、酵母菌或女性的細(xì)菌性陰道病綜合征、孕婦攜帶的B群β溶血鏈球菌運(yùn)作流程——標(biāo)本采集膿液開放性：用無(wú)菌鹽水拭去表面滲出物，用拭子深入潰瘍基底部或邊緣部采集。封閉性：用注射器抽吸，將所有標(biāo)本轉(zhuǎn)入?yún)捬蹀D(zhuǎn)運(yùn)裝置液體（腹部的、羊膜的、腹水的、關(guān)節(jié)穿刺液、心包的、腹膜的、滑膜的、胸膜的、胸腔穿刺液）：1.用2%碘酒充分消毒皮膚2.經(jīng)皮穿刺抽吸或外科獲取標(biāo)本3.立即轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室4.盡量多呈送液體運(yùn)作流程——標(biāo)本采集主要病原菌：金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、其它β溶血鏈球菌、銅綠假單胞菌、其它革蘭陰性桿菌非病原菌：凝固酶陰性葡萄球菌、少量的棒狀革蘭陽(yáng)性桿菌

運(yùn)作流程——標(biāo)本采集運(yùn)作流程——標(biāo)本采集腦脊液（CSF）：1.用2%碘酒消毒采集部位。2.用專用的針頭插入3.進(jìn)入蛛網(wǎng)膜下腔后，采集液體，放入無(wú)菌試管中。盛裝容器及最少量：無(wú)菌試管，細(xì)菌≥1ml，真菌≥2ml，抗酸桿菌≥2ml

主要病原菌：B群β溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（2月-2歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌、新生隱球菌、結(jié)核分枝桿菌。采集后可直接注入血培養(yǎng)瓶中送檢注意事項(xiàng)血培養(yǎng)瓶——小心運(yùn)送、保證培養(yǎng)瓶的安全到達(dá)（在培養(yǎng)瓶周圍墊柔軟的物品以增大緩沖）。血平板/其他平板——接種后立即將平板放進(jìn)與之相匹配的自封袋中以防止污染。其他如拭子標(biāo)本等——將其倒置在專用的拭子管中，不可冷凍。注：所有標(biāo)本最好是室溫保存送檢，如果與其他標(biāo)本同時(shí)送檢，則需與冰袋隔開。運(yùn)作流程——標(biāo)本運(yùn)輸武漢艾迪康微生物實(shí)驗(yàn)室開展項(xiàng)目血培養(yǎng)鑒定和藥敏（KB法、MIC法）細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥敏（KB法、MIC法）一般細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定（只做鑒定，無(wú)藥敏結(jié)果）淋球菌培養(yǎng)鑒定及藥敏沙門志賀菌培養(yǎng)鑒定及藥敏GBS培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn)支原體培養(yǎng)及藥敏衣原體檢查細(xì)菌涂片檢查結(jié)核菌涂片檢查T-SPOT院感嚴(yán)格按照CLSI（美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)）文件規(guī)定進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)抗生素種類按CLSI（美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)）最新文件的規(guī)定提供，種類全面設(shè)備：法國(guó)梅里埃ATB細(xì)菌鑒定儀、美國(guó)BD全自動(dòng)血培養(yǎng)儀、迪爾微生物鑒定系統(tǒng)專業(yè)團(tuán)隊(duì)先后在武漢同濟(jì)醫(yī)院、上海、杭州進(jìn)行過(guò)系統(tǒng)學(xué)習(xí)每月全國(guó)17家分公司進(jìn)行一次電話學(xué)術(shù)交流會(huì)議每年參加衛(wèi)生部3次室間質(zhì)評(píng)、湖北省3次室間質(zhì)評(píng)，成績(jī)合格運(yùn)作流程——實(shí)驗(yàn)室特色生物安全柜微生物結(jié)果報(bào)告時(shí)間檢測(cè)項(xiàng)目報(bào)告時(shí)間血培養(yǎng)+藥敏陰性7天一般細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏陰性2-3天，陽(yáng)性最遲5-7天淋球菌培養(yǎng)3天支原體培養(yǎng)+藥敏3天衣原體檢查24小時(shí)●必須合理、科學(xué)、經(jīng)濟(jì)●原則上應(yīng)根據(jù)CLSI推薦的依感染菌的屬種來(lái)選擇抗生素的組別：A組：為首選藥物B組：為可選擇性報(bào)告的首選藥物C組：為次選報(bào)告的藥物U組：為只用于泌尿道感染分離菌株的試驗(yàn)藥物抗菌藥物的使用

1、我們想用的藥物在藥敏試驗(yàn)中沒(méi)有做？

2、是否能將所用的藥都做藥敏試驗(yàn)?

3、有的細(xì)菌報(bào)告很多種藥物，有的僅報(bào)告幾種藥物？

4、藥敏試驗(yàn)為敏感的藥物，臨床治療無(wú)效？

藥敏結(jié)果中困惑臨床問(wèn)題？抗菌藥物的使用1、我們想用的藥物在藥敏試驗(yàn)中沒(méi)有做？