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畢業(yè)論文開題報告生物技術(shù)三種貝類養(yǎng)殖中的有害性纖毛蟲研究一、選題的背景與意義1、背景:纖毛蟲(ciliate)具纖毛的單細胞生物,纖毛為用以行動和攝取食物的短小毛發(fā)狀小器官。通常指纖毛亞門(Ciliophora)的原生動物,約有8000個現(xiàn)存種,纖毛通常呈行列狀,可匯合成波動膜、小膜或棘毛。絕大多數(shù)纖毛蟲具有一層柔軟的表膜和近體表的伸縮泡。有些有絲泡、毒囊或菌囊等小器官,其功能尚不甚了解。雖然大部分纖毛蟲營自由生活和水生生活,但有些種類如致痢疾的腸袋蟲屬(Balantidium)則是寄生的。還有許多種類是在無脊椎動物的鰓或外皮上營外共棲生活。有性現(xiàn)象包括接合(個體之間核的交換)和自體受精(在一個體內(nèi)核的重建),無性生殖通常是出芽或橫向的二分裂。纖毛蟲具有大核和小核。大核一至幾十個,控制代謝和發(fā)育功能;小核一至幾百個,為接合所必需,但對於生存并不是必需的。這種遺傳物質(zhì)的分離與復(fù)雜的細胞質(zhì)分化有密切關(guān)系。纖毛亞門可能是一個高度特化的類群,僅有一綱——纖毛綱(Ciliatea),并以纖毛為依據(jù)分成四個亞綱:全毛亞綱(Holotrichia)、緣毛亞綱、吸管亞綱和旋毛亞綱。養(yǎng)殖業(yè)中的病害原生動物包括了種類繁多的幾個大類(孢子蟲類、鞭毛蟲類、纖毛蟲類以及簇蟲類等),其中許多類群均可專性或兼性寄生/棲生于海水養(yǎng)殖動物的體內(nèi)外,從而構(gòu)成對宿主的危害。迄今的記錄表明,血淋巴內(nèi)寄生的纖毛蟲已成為越冬對蝦的重要致死病原;扇貝鰓表的車輪蟲可導(dǎo)致貝類滯育直至死亡;腸膜袋蟲是多種魚類消化道疾病的病原;因盾纖類纖毛蟲寄生所引發(fā)的牙鲆、牙鲆潰瘍病可直接構(gòu)成幼魚的死因;而孢子蟲以及各類緣毛目纖毛蟲對養(yǎng)殖動物所造成的危害則早已為人們所熟知。2、意義:國內(nèi)目前圍繞該類病害,仍處于零星的病例報道和對個別種類防治措施的探尋階段,由于觀察者經(jīng)驗和資料的限制(該類工作者通常為從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究或非原生動物學(xué)領(lǐng)域的病害學(xué)研究者),許多病原報道均不同程度地存在著錯誤,混亂或不實之處。國外目前有關(guān)的研究主要限于淡水寄生原蟲。海洋種類尤其是魚類、貝類和蝦類之寄生蟲報道極少,系統(tǒng)工作基本缺失?;A(chǔ)研究的空白進而導(dǎo)致了我國該領(lǐng)域目前的狀況:參考資料嚴重缺乏,養(yǎng)殖生產(chǎn)中對這類病原生物的調(diào)查鑒定,病害預(yù)報以至防治工作實際上處于一種無據(jù)可依,無章可循的狀態(tài)。因此從病原構(gòu)成和基本資料著手全面摸清該類病害原的基本現(xiàn)狀并進而為下一步防治工作創(chuàng)造條件已成為我國目前原生動物病害學(xué)研究首當(dāng)其沖的任務(wù)。所以說對養(yǎng)殖水體中纖毛蟲的形態(tài)分類學(xué)研究是各類相關(guān)研究開展的基礎(chǔ)(如病害學(xué)、毒理學(xué)等),鑒于此,對貝類養(yǎng)殖中的若干種纖毛蟲的形態(tài)學(xué)做相關(guān)研究。二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題:基本內(nèi)容:本實驗主要對幾種纖毛蟲原生動物的形態(tài)學(xué)進行研究。定期對貝類養(yǎng)殖水體中的纖毛蟲進行采集,樣品帶回實驗室后,通過光學(xué)顯微鏡觀察目標(biāo)生物的活體形態(tài),根據(jù)不同類群選擇不同染色方法得到纖毛圖式、銀線系、核器等結(jié)構(gòu)。主要染色方法包括蛋白銀染色、氨銀法、Chatton-lwoff等方法。最后結(jié)合纖毛蟲原生動物的活體形態(tài)與染色后得到的結(jié)構(gòu)對其進行種類確定,了解其在水體中所扮演角色。擬解決的問題:通過活體形態(tài)學(xué)觀察與現(xiàn)代銀染方法,對養(yǎng)殖水體中幾種纖毛蟲原生動物的分類學(xué)做初步了解。掌握樣品的采集方法,包括纖毛蟲原生動物各種類群的采集,如浮游生類群、周叢生類群、底棲類群等;顯微鏡及影像采集系統(tǒng)的熟練運用,如相差法、微分干涉法等;初步掌握一種或兩種現(xiàn)代銀染方法,如蛋白銀染色。知道研究纖毛蟲原生動物所需要的基本步驟,最終取得鍛煉動手力能及細心、細致工作方法的培養(yǎng)。三、研究的方法與技術(shù)路線:四、研究的總體安排與進度:2010年11月—2010年12月:1.實驗前準備工作:查找資料,對實驗內(nèi)容做初步了解2.取樣工具、實驗儀器和藥品的準備3.學(xué)習(xí)銀染方法4.完成開題報告、任務(wù)書及文獻綜述的撰寫2011年1月—2011年2月:1.實驗2.翻譯英文文獻2011年2月—2011年3月:1.實驗2.數(shù)據(jù)整理3.撰寫初稿2011年4月—2011年5月:1.初稿經(jīng)指導(dǎo)老師指正后進行修改和完善2.畢業(yè)論文定稿,準備答辯五、主要參考文獻:[1]宋微波,徐奎棟.纖毛蟲原生動物形態(tài)學(xué)研究的常用方法[J].海洋科學(xué),1993,27:6-9.[2]范鑫鵬,林曉鳳,李繼秋,等.南中國海五種新紀錄纖毛蟲的形態(tài)學(xué)觀察[J].動物分類學(xué)報,2009,34(2):329-334.[3]宋微波.擬天鵝漫游蟲的形態(tài)學(xué)研究[J].動物學(xué)報,1994,40(2):131-136.[4]姜佳枚,邵晨,李俐瓊,等.青島沿海七種腹毛類纖毛蟲的形態(tài)學(xué)研究[J].動物分類學(xué)報,2008,33(1):115-119.[5]Lin,X.,Song,W.,Warren,A.TwonewmarinepleurostomatidciliatesfromChina,Amphileptusguinov.spec.andAmphileptusyuianusnov.spec.(Ciliophora,Pleurostomatida).Eur.J.Protist.2005,41,163-173.[6]Lin,X.,Song,W.,Wilbert,N.,etal.TwonewmarinepleurostomatidciliatesfromChina,LoxophyllumjinniandL.qiuianum(Ciliophora:Pleurostomatida).ActaProtozool.2005,44:147-157.[7]Lin,X.,Song,W.,Li,J.DescriptionofTwonewmarinepleurostomatidciliates,Loxophyllumchoiinov.spec.andL.shininov.spec.(Ciliophora,Pleurostomatida)fromChina.Eur.J.Protist.2007,43:131-139.[8]宋微波,馬洪鋼.我國海洋纖毛蟲原生動物的研究進展[J].生物學(xué)通報,2000,35(5):10-13.[9]宋微波,N.維樂伯特,B.希爾.南極海膽體內(nèi)的共棲纖毛蟲原生動物[J].南極研究,1994,6(3):53-61.[10]宋微波.海水養(yǎng)殖中的危害性原生動物[M].北京:科學(xué)出版社,2003.[11]宋微波,徐奎棟,施心路,等.原生動物學(xué)專論[M].青島:青島海洋大學(xué)出版社,1999.[12]徐奎棟,宋微波.海洋貝類的病害性纖毛蟲研究III.觸毛亞目盾纖類纖毛蟲[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報,2000,30(2):230-236.[13]徐奎棟,宋微波.海洋貝類的病害性纖毛蟲研究I.吻毛類纖毛蟲[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報,2000,30(2):217-223.[14]胡曉鐘,徐奎棟,宋微波.扇貝外套腔內(nèi)的共棲生纖毛蟲[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報,1996,26(2):184-188.[15]王崇明,王秀華,艾海新,等.櫛孔扇貝大規(guī)模死亡致病病原的研究[J].水產(chǎn)學(xué)報,2004,28(5):547-553.[16]周麗.人工越冬對蝦體內(nèi)寄生纖毛蟲病的研究[J].海洋湖沼通報,1995,1:61-67.[17]徐奎棟,宋微波.海產(chǎn)貝類車輪蟲病及控制途徑初探[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報,1996,26(2):172-178.[18]宋微波,魏軍.三種危害性纖毛蟲的形態(tài)學(xué)研究[J].水生生物學(xué)報,1998,22:361-366.[19]徐奎棟,宋微波.海洋貝類幾種危害性纖毛蟲的研究[J].中國水產(chǎn)科學(xué),1999,6(2):41-45.[20]陳相瑞.海洋纖毛蟲的多樣性研究[D].中國海洋大學(xué),2009.[21]宋微波,王梅.海水養(yǎng)殖水體中的病害纖毛蟲[J].海洋科學(xué),1993,4:41-47.[22]宋微波,朱明壯,陳子桂,等.海水養(yǎng)殖水體中危害性纖毛蟲原生動物研究Ⅰ.盾纖目習(xí)見類群的口器結(jié)構(gòu)及鑒別特征[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報,2000,30(2):207-216.[23]王婭寧,施
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