細(xì)胞周期同步化

細(xì)胞周期同步化將處于不同時(shí)相的細(xì)胞別離開來，從而獲得不同時(shí)期的細(xì)胞群體。精選課件細(xì)胞周期同步化自然同步化人工選擇同步化有絲分裂選擇法密度梯度離心法藥物誘導(dǎo)DNA合成阻斷法分裂中期阻斷法精選課件自然同步化自然界中已經(jīng)存在一些細(xì)胞群體處于細(xì)胞周期的同一時(shí)相如有一種黏菌的變形體plasmodia，只進(jìn)行核分裂而不進(jìn)行胞質(zhì)分裂，結(jié)果形成多核體結(jié)構(gòu)。所有細(xì)胞核在同一細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行同步分裂。某些受精卵早期卵裂精選課件人工選擇同步化有絲分裂選擇法：對(duì)數(shù)期的單層培養(yǎng)細(xì)胞——細(xì)胞分裂活潑，處于分裂期的細(xì)胞變圓，貼壁生長(zhǎng)——振蕩使細(xì)胞脫落，懸浮到培養(yǎng)液中——收集培養(yǎng)液，離心——獲得分裂期細(xì)胞，從新培養(yǎng)，獲得不同時(shí)相的細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞未經(jīng)過任何藥物處理，能真實(shí)反映細(xì)胞周期狀況，細(xì)胞同步化效率高。缺點(diǎn)是別離的細(xì)胞數(shù)量少。精選課件密度梯度離心法：根據(jù)不同時(shí)期的細(xì)胞在體積和重量上存在差異進(jìn)行別離。得到處于不同時(shí)期的細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)單省時(shí)，效率高，本錢低。缺點(diǎn)是對(duì)大多數(shù)種類的細(xì)胞并不適用。精選課件藥物誘導(dǎo)DNA合成阻斷法——G1/S-TdR雙阻斷法：1、將過量的TdR參加細(xì)胞培養(yǎng)液，所有S期的細(xì)胞立刻被抑制，其他細(xì)胞運(yùn)行到G1/S交界處被抑制。2、將TdR洗脫，解除抑制，被抑制的細(xì)胞沿細(xì)胞周期運(yùn)行。3、在解除抑制的細(xì)胞到達(dá)G1期終點(diǎn)前，第二次參加TdR并繼續(xù)培養(yǎng)，所有的細(xì)胞被抑制在G1/S交界處。4、將TdR洗脫，參加新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)一定時(shí)間，可獲得S期和G2不同時(shí)間點(diǎn)的同步化細(xì)胞。精選課件優(yōu)點(diǎn)是同步化效率高，幾乎適合所有的體外培養(yǎng)的細(xì)胞體系。缺點(diǎn)是誘導(dǎo)過程可造成細(xì)胞非均衡生長(zhǎng)。DNA抑制劑：TdR和羥基脲精選課件分裂中期阻斷法：通過抑制微管聚合來抑制細(xì)胞分裂器的形成，將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期。優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，效率高。缺點(diǎn)是這些藥物的毒性相對(duì)較大，假設(shè)處理時(shí)間過長(zhǎng)，所得到的細(xì)胞常常不能恢復(fù)正常細(xì)胞周