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菊花的組織培育指植物的離體部分〔包括任何器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體〕,在人工控制的培育基及環(huán)境條件〔溫度及光照〕下,得以生長(zhǎng)和分化成完好植株的一種無菌培育技術(shù)。又稱:植物離體培育一、植物組織培育的概念概念:細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完好個(gè)體的潛能。緣由:是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)植物組織培育原理:植物細(xì)胞的全能性什么叫分化?其本質(zhì)是什么?什么叫脫〔去〕分化、再分化?愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)?如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化?·閱讀32頁(yè)處理以下問題:二、植物組織培育的根本過程基因的選擇性表達(dá)二、植物組織培育的根本過程愈傷組織三、影響植物組織培育的要素:1、外植體的選取不同植物的組織培育難度不同同一種植物的不同組織培育難度不同2、培育基的配制(MS培育基)大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素:生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝3、不同植物激素運(yùn)用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂但不分化先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化
同時(shí)使用分化頻率提高4、不同植物激素運(yùn)用量生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促根分化,抑芽形成比值低時(shí)促芽分化,抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)思索:以下培育基出現(xiàn)的景象反響了什么問題?生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素高利于根和愈傷組織的構(gòu)成適中利于根芽的分化5、pH、溫度、光照〔菊花組培〕pH=5.8溫度控制在18—22℃每日光照12h6、消毒在培育的整個(gè)過程中,都需求是一個(gè)無菌環(huán)境制備MS固體培育基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培四、實(shí)驗(yàn)操作移栽沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培育基滅毒1、培育基的滅菌〔高壓蒸汽滅菌〕2、外植體的消毒〔酒精、氯化汞〕3、接種的無菌操作〔酒精、酒精燈——灼燒〕4、無菌箱中的培育;5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過程中,是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的?結(jié)果分析與評(píng)價(jià)〔一〕對(duì)接種操作中污染情況的分析〔二〕能否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化〔三〕能否進(jìn)展了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄〔四〕生根苗的移栽能否合格課題延伸〔略〕練習(xí)1.答:植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差,對(duì)培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適宜于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培育物一旦遭到微生物的污染,就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)展嚴(yán)厲的無菌操作。2.答:外植體的生理形狀是勝利進(jìn)展組織培育的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理情況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。菊花的組織培育再分化資料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)理物質(zhì)、環(huán)境條
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