Her2-檢測的概述課件

李麗麗病理應用顧問上海羅氏制藥有限公司HER2檢測概述設備、試劑技術支持羅氏診斷醫(yī)學部銷售部市場部病理科學術支持銷售產(chǎn)品市場推廣Roche制藥自我介紹2精選2021版課件一、HER2檢測的概述

二、HER2檢測前的最佳實驗——組織處理及固定

三、HER2檢測中的最佳實踐——方法及流程

四、HER2檢測后的最佳實踐——結果判讀

五、讀片

六、HER2檢測的質控及質保

HER2檢測系列內(nèi)容3精選2021版課件一、HER2檢測的概述

二、HER2檢測前的最佳實驗——組織處理及固定

三、HER2檢測中的最佳實踐——方法及流程

四、HER2檢測后的最佳實踐——結果判讀

五、讀片

六、HER2檢測的質控及質保HER2檢測系列內(nèi)容4精選2021版課件內(nèi)容提要什么是HER2及其作用HER2檢測的意義---乳腺癌&胃癌HER2檢測的方法相關指南及檢測現(xiàn)狀5精選2021版課件

什么是HER2？6精選2021版課件HER2基因人類表皮生長因子受體-2基因HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2(HER2)Gene定位于染色體17q21編碼跨膜受體樣蛋白（HER2蛋白）,具有酪氨酸激酶活性HER2蛋白分子量185kDa的糖蛋白:細胞外區(qū)（配體結合區(qū)）跨膜區(qū)（傳導信號）細胞內(nèi)區(qū)（激酶活性）HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜HER27精選2021版課件

HER2狀態(tài)HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2正常表達細胞(HER2–)(~2萬個受體）HER2過表達的細胞(HER2+)(100–200萬個受體）8精選2021版課件HER2陽性的定義蛋白水平(過表達):細胞表面HER2蛋白受體表達大量增加基因水平(擴增):

HER2編碼基因于細胞核內(nèi)拷貝增加IHCFISH9精選2021版課件IHC0IHC3+IHC1+IHC2+10精選2021版課件正常HER2基因于DNA復制時若發(fā)生分子轉換可能會轉變成癌基因正常細胞：無基因擴增HER2陽性細胞：基因擴增FISHFISH11精選2021版課件HER家族——HER二聚體觸發(fā)信號傳導Cellmembrane基因轉錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生長和增殖轉移化療耐藥腫瘤生長EGFEGFREGFRTGF

TGF

EGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信號級聯(lián)放大核膜IntracellularYardenYandSliwkowskMX.NatRevMolCellBiol2001;2:127–137.12精選2021版課件HER2過表達的結果正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER2過表達導致腫瘤增殖促進細胞的生長和增殖------腫瘤發(fā)生抑制細胞的凋亡誘導血管新生提高細胞運動能力,增強腫瘤的浸潤轉移作用MoasserMM.Oncogene,2007.26(46):6577FreudenberyJA,WangQ,Katsumata,etal.ExpMolPathol.2009.87(1):113精選2021版課件HER2檢測的臨床意義14精選2021版課件HER2對乳腺癌的臨床意義15精選2021版課件腫瘤流行病調查－中國Incidence–Thenumberofnewcasesofaspecificdisease(peryear)Mortality–Thenumberofdeathsofaspecificdisease(peryear)16精選2021版課件早期乳腺癌患者*

HER2陰性(n=771) HER2陽性(n=189)HER2過表達對早期乳腺癌預后不利存活率(%)01260961201009080706050402436487284108時間等級檢驗p=0.0004

Wilcoxon檢驗p=0.0009*未經(jīng)選擇的I,II和III期乳腺癌患者時間(月)PaulettiGetal.JClinOncol.2000;18:3651–3664.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.17精選2021版課件HER2過表達會降低乳腺癌轉移/復發(fā)患者的存活率DawoodSetal.JClinOncol201028:92–98.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.0.80.60.40.20.001224364860整體存活率確診后時間(月) HER2陰性(n=1,782) HER2陽性(n=118)1.018精選2021版課件HER2陽性與含蒽環(huán)類藥物的化療療效相關FISH:乳腺癌HER2陽性(n=160)FISH:乳腺癌HER2陰性(n=460)CEFCMF整體存活率(%)p=0.681008060402000510p=0.061008060402000510時間（年）時間(年)CEF,環(huán)磷酰胺、表阿霉素和氟尿嘧啶;CMF,環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤和氟尿嘧啶CEFCMFPritchardKIetal.NEnglJMed2006;354:2103–2107.整體存活率(%)19精選2021版課件HER2過表達和（或）擴增與紫杉醇臨床獲益有關乳腺癌HER2-陽性乳腺癌HER2-陰性紫杉醇無紫杉醇

無病存活率1008060402000510

無病存活率1.00.80.60.40.200510時間(年)時間(年)紫杉醇無紫杉醇HayesDFetal.ASCOAnnualMeeting2006;Abstract510.HER2/紫杉醇相關性（p=0.0093）20精選2021版課件曲妥珠單抗有效改善HER2陽性轉移性乳腺癌患者預后10080604020001224364860確診后時間(月)存活率(%)DawoodSetal.JClinOncol2010;28:92–98.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.HER2陽性狀態(tài)與患者存活率無關HER2陽性,曲妥珠單抗

(n=191)HER2陰性(n=1782)HER2陽性,無曲妥珠單抗

(n=118)一項回顧性研究數(shù)據(jù)顯示，與HER2陰性乳腺癌相比，HER2陽性乳腺癌患者接受曲妥珠單抗治療后的死亡率下降44%[多變量分析后危險比（HR）為0.56;95%CI0.45–0.69;p<0.0001]21精選2021版課件HER2狀態(tài)對乳腺癌的臨床重要性乳腺癌的HER2陽性率約為15–20%對于乳腺癌患者，HER2狀態(tài)與無病生存期（DFS）及總體存活（OS）密切相關，是患者預后的重要預測因子HER2狀態(tài)也可預測乳腺癌的藥物治療效果，包括對曲妥珠單抗治療的反應對紫杉醇及蒽環(huán)類藥物治療的反應對三苯氧胺的耐藥性CarlsonRW,etal.JNCCN2006:4(Suppl.3):S1–S22.

HER2狀態(tài)評估對于確定患者是否接受抗HER2靶向治療至關重要22精選2021版課件HER2對胃癌的臨床意義23精選2021版課件胃癌

世界第二致死癌癥，中國為高發(fā)區(qū)早期診斷，較困難預后差，絕大多數(shù)患者直到晚期才出現(xiàn)相應癥狀約16%轉移性胃癌或胃-食管腫瘤患者為HER2陽性(ToGA實驗)24精選2021版課件

HER2對胃癌患者預后的影響SongYetal.ChinJCancer2010;29:76–81.中國研究：晚期胃癌患者的生存率平均生存率(月)p有HER2過表達5.90.021沒有HER2過表達12.6平均生存率(月)p有HER2擴增5.50.028沒有HER2擴增12.6有或沒有HER2過表達

(n=83)有或沒有HER2擴增

(n=83)100806040200061218總體生存率

(%)*時間(月)100806040200061218總體生存率

(%)*沒有HER2過表達有

HER2過表達沒有

HER2擴增有HER2擴增時間(月)25精選2021版課件應用HER2靶向治療藥物進行化療能突破進展型胃癌12個月平均總體存活時間EOX6XP7ECX6ECF6DCF4EOF6IF5FP4FAMTX2BSC1SP3BSC,最佳支持治療;F,5－氟尿嘧啶;A,阿霉素;MTX,甲氨蝶呤;S,S-1;C/P,順鉑;I,喜樹堿;X,順鉑;

E,表柔比星;O,奧沙利鉑;

D,多西紫杉醇FP/XP+T8FP/XP+T(探索性)81.MuradA.M,etal.Cancer1993;72:37–41;2.VanhoeferU,etal.JClinOncol2000;18:2648–2657;3.AjaniJA,etal.ASCOGastrointestinalCancersSymposium2009;Abstract8;4.VanCutsemE,etal.JClinOncol2006;24:4991–4997;

5.DankM,etal.AnnOncol2008;19:1450–1457;6.CunninghamD,etal.NEJM2008;358:36–46;

7.KangY.K,etal.AnnOncol2009;20:666–673;8.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.061218時間

(月)FP/XP+T:IHC3+或FISH陽性的患者FP/XP+T(探索性):IHC2+/FISH陽性或IHC3+的患者26精選2021版課件ToGA研究提供的HER2陽性率的數(shù)據(jù)目標

人群(IHC2+/FISH+或IHC3+)探索性分析ToGA人群符合

ToGA資格(IHC3+和/或

FISH+)78%22%78%16%不符合

ToGA資格不符合

ToGA資格IHC0/FISH+或IHC1+/FISH+6%27精選2021版課件主要研究終點:OS（總生存）IHC3+orFISH+28精選2021版課件主要研究終點:OS（總生存）IHC3+orIHC2+/FISH+29精選2021版課件HER2狀態(tài)對胃癌的臨床意義所有的胃或胃食管結合部癌患者都應在初次診斷時檢測腫瘤的HER2狀態(tài)。HER2在胃癌中過表達預示更差的疾病結局以及進展性更強的疾病類型準確的胃癌HER2表達和基因擴增檢測結果是進展期胃癌HER2靶向治療患者篩選和療效預測的前提2010年，歐洲和美國先后批準化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃食管交界癌患者KelleyJRandDugganJM.JClinEpidemiol2003;56:1–9.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.BangYJ,etal.JClinOncol2008;26:Abstract4526.GravalosCandJimenoA.AnnOncol2008;19:1523–1529.30精選2021版課件HER2檢測對乳腺癌及胃癌患者得到正確診療有很重要的意義HER2檢測的意義31精選2021版課件HER2常用檢測方法32精選2021版課件HER2常用檢測方法免疫組織化學(IHC):應用抗體檢測蛋白過表達是乳腺及胃組織檢測HER2狀態(tài)的首要方式1原位雜交

技術(ISH):利用核酸探針檢測HER2基因擴增，可用于復檢經(jīng)IHC檢測難以確定結果的病例及疑難病例11.WolffACetal.JClinOncol2007;25:118–145.IHC：顯示組織細胞蛋白質表達狀態(tài)ISH：顯示組織細胞基因的擴增狀態(tài)33精選2021版課件實驗室HER2檢測方法總結IHC通過抗體檢測HER2蛋白表達FISH通過熒光標記的DNA探針檢測HER2基因擴增SISH通過DNP標記之DNA探針并通過后續(xù)顯色反應(銀染)來檢測HER2基因擴增通過地高辛標記之DNA探針并通過后續(xù)顯色反應(DAB信號)來檢測HER2基因擴增CISH通過DNP標記之DNA和染色體著絲粒探針并通過后續(xù)顯色反應(HER2銀染及17號染色體堿性磷酸酶紅染)檢測HER2DualSISH34精選2021版課件HER2檢測方法之優(yōu)缺點檢測方法優(yōu)點缺點IHC大多病理實驗室均采用，相對較易，較快，較便宜，可自動化操作，免疫組化切片保存較久并可反復檢評可同時觀察細胞形態(tài)檢測結果易受檢測步驟影響產(chǎn)生偏倚檢測結果較主觀，半定量FISH檢測結果相對免疫組化更加定量化穩(wěn)定性好可自動化操作檢測價格昂貴，信號強度隨時間衰減較難鑒定乳腺癌侵微小浸潤灶不能同時觀察細胞形態(tài)病理醫(yī)生及技術員接受相關技術操作及檢測結果分析的訓練較少CISH與原位雜交相比較少受實驗前分析及處理步驟影響操作較快，普通光鏡觀察即可染色長期穩(wěn)定可同時觀察細胞形態(tài)與熒光原位雜交相比技術較新，操作欠相關經(jīng)驗缺乏經(jīng)驗之人員較難分析檢測結果檢測HER2及CEP17拷貝數(shù)需制備不同切片SISH全自動顯色原位雜交(自動圖像分析)其他優(yōu)點與顯色原位雜交相同可檢測HER2過表達之微小腫瘤灶(胃癌)可觀察HER2異質性染色結果(胃癌）檢測HER2基因及CEP17拷貝數(shù)需制備不同切片DSISH全自動顯色原位雜交(自動圖像分析)HER2及CEP17可于亮視野顯微鏡觀察其他優(yōu)點與顯色原位雜交/銀染原位雜交相同缺乏經(jīng)驗之人員較難分析檢測結果多體性時較難分析35精選2021版課件國內(nèi)外相關指南國外指南：ASCO/CAP乳腺癌HER2檢測指南（2007）NCCN乳腺癌臨床實踐指南（2012）NCCN胃癌臨床實踐指南（2011）歐洲胃癌HER2檢測指南（2011）國內(nèi)指南：乳腺癌HER2檢測指南（2009版）胃癌HER2檢測指南(2011)3636精選2021版課件NCCN乳腺癌及胃癌臨床實踐指南37精選2021版課件乳腺癌HER2檢測指南（2009版）38精選2021版課件胃癌HER2檢測指南（2011版）39精選2021版課件BilousMetal.ModPathol2003;16:173─182.WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.AlbarelloL,etal.AdvAnatPathol

2011;18(1):53–5940精選2021版課件我國HER2檢測目前仍面臨哪些問題？41精選2021版課件*IHC3+或IHC2+/FISH陽性05101520253035HER2陽性率(%)1234567891011121314151617181920212223242526272829303132333435363738394041424344454647484950515253545556575859606162636465666768697071727374757677787980avmaxmin檢測中心(匿名)HER2陽性率:15%

范圍:9%–35%英國各檢測中心的HER2檢測陽性率*不盡相同MillerK,UKNEQAS(私人交流).42精選2021版課件中國各檢測中心乳腺癌

HER2IHC檢測結果數(shù)據(jù)來源于中國抗