【高中生物】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體+課件+高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

第2章

細(xì)胞工程2第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程二

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體目錄/CONTENTS0102動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體及其應(yīng)用一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1、概念：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。2、原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)方式物理法：電融合法化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活病毒誘導(dǎo)法——?jiǎng)游锛?xì)胞融合特有與植物原生質(zhì)體融合的方法相同4、結(jié)果：形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息的雜交細(xì)胞

一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)知識(shí)延伸動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，一般將多個(gè)細(xì)胞混合進(jìn)行處理，因?yàn)榫湍壳俺Ｓ玫募?xì)胞融合方法來(lái)看，不管是用物理、化學(xué)方法，還是用生物方法，其融合率都不可能是100%。若僅有少數(shù)細(xì)胞進(jìn)行融合，則不一定能得到融合細(xì)胞，更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，也并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類型。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是制備單克隆抗體。一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)5、過(guò)程:動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)（1）“滅活病毒”中滅活的具體含義是什么？相關(guān)信息滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)。仙臺(tái)病毒紫外線滅活喪失感染活性（不感染細(xì)胞）保留融合活性（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）（2）滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么？病毒表面的糖蛋白和一些酶與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)相關(guān)信息（3）滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合過(guò)程：

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)6、意義：細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。7、應(yīng)用：至今，種間、屬間、科間，甚至動(dòng)物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得成功。研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。正在融合的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞（1）受精作用：是在同種生物之間進(jìn)行的，精子與卵細(xì)胞的融合不需要任何誘導(dǎo)劑，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)（2）動(dòng)物細(xì)胞融合可在不同物種間進(jìn)行，由于物種間存在生殖隔離，所以自然條件下不能融合成雜交細(xì)胞，必須有誘導(dǎo)劑才能融合。形成的雜交細(xì)胞具備兩個(gè)親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個(gè)親本的遺傳特性注意：一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合與受精作用的區(qū)別小結(jié)：動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理步驟誘導(dǎo)方法結(jié)果意義細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性酶解法去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)形成雜種植株分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒形成雜種植株形成雜種細(xì)胞克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙一

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)二

單克隆抗體及其應(yīng)用1.定義：機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的，能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。

抗體抗體體液免疫2.抗體的分布：1）血清（主要）2）組織液及外分泌液（如乳汁中）1）每個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性的抗體2）體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類多達(dá)百萬(wàn)種以上抗原傳統(tǒng)抗血清（所有抗體混合）免疫1

1234二

單克隆抗體及其應(yīng)用1、傳統(tǒng)抗體制備方法及缺陷動(dòng)物體內(nèi)1抗原注射漿細(xì)胞1抗體

1B淋巴細(xì)胞增殖分化（不能無(wú)限增殖）缺陷：產(chǎn)量低、純度低，特異性差。二

單克隆抗體及其應(yīng)用（1）概念：由單一的B淋巴細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體(2)基本原理①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能在體外無(wú)限增殖②小鼠骨髓瘤細(xì)胞能在體外無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體③利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞可以保持親代雙方的特性，既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體(3)來(lái)源：?jiǎn)慰寺】贵w是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交形成的單一雜交瘤細(xì)胞增值產(chǎn)生的高度專一的抗體①B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性強(qiáng)的抗體②骨髓瘤細(xì)胞：在體外能無(wú)限增殖2、單克隆抗體的制備過(guò)程二

單克隆抗體及其應(yīng)用注射特定抗原多種已免疫B淋巴細(xì)胞小鼠的脾臟中獲取骨髓瘤細(xì)胞從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)取骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)2、單克隆抗體的制備過(guò)程二

單克隆抗體及其應(yīng)用融合的細(xì)胞BB132B置于選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)

第一次篩選√B瘤2雜交瘤細(xì)胞(多種)13瘤瘤瘤2、單克隆抗體的制備過(guò)程雜交瘤細(xì)胞(多種)克隆化培養(yǎng)第二次篩選抗體檢測(cè)(抗原-抗體雜交技術(shù))陽(yáng)性細(xì)胞能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞二

單克隆抗體及其應(yīng)用2、單克隆抗體的制備過(guò)程能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)或體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔體外培養(yǎng)單克隆抗體二

單克隆抗體及其應(yīng)用2、單克隆抗體的制備過(guò)程二

單克隆抗體及其應(yīng)用篩選原理：①細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖。篩選出雜交瘤細(xì)胞方法？培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤B淋巴細(xì)胞及同型融合細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞及同型融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞不能無(wú)限增殖，死亡D途徑被阻斷，無(wú)法增殖死亡能無(wú)限增殖，生長(zhǎng)二

單克隆抗體及其應(yīng)用1、診斷試劑——最廣泛應(yīng)用抗人絨毛促性腺激素單克隆抗體在妊娠第8天就可以作出診斷，比原來(lái)診斷方法提前了10d左右，準(zhǔn)確率在90﹪以上。診斷優(yōu)點(diǎn)：具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速特點(diǎn)3、單克隆抗體的應(yīng)用二

單克隆抗體及其應(yīng)用乙肝測(cè)定試劑艾滋病檢測(cè)試劑新冠病毒檢測(cè)試劑3、單克隆抗體的應(yīng)用血型檢測(cè)試劑二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用2021年12月8日晚，由清華大學(xué)張林琦教授團(tuán)隊(duì)及其他公司共同研發(fā)的抗新冠病毒抗體組合藥物——安巴韋單抗注射液及羅米司韋單抗注射液，正式被中國(guó)藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市，成為我國(guó)首個(gè)自主研發(fā)的抗新冠病毒抗體藥物。注入體內(nèi)后馬上起效，可以降低80%新冠患者的住院率與死亡率”2、作為藥物治療疾病張林琦教授團(tuán)隊(duì)二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用3、運(yùn)載藥物

ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成。閱讀教材50頁(yè)思考：ADC的抗體和藥物各具有什么作用？

抗體主要發(fā)揮靶向運(yùn)輸作用；藥物發(fā)揮治療效應(yīng)，如殺傷靶細(xì)胞。二

單克隆抗體及其應(yīng)用3、單克隆抗體的應(yīng)用對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練√下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交比較的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.它們的原理都涉及細(xì)胞膜的流動(dòng)性

B.都可以用電融合法或PEG融合法誘導(dǎo)融合C.融合前都需用纖維素酶或果膠酶處理細(xì)胞D.前者主要為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品，后者主要為了獲得雜種植株對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練科研人員將抗癌藥物連接在單克隆抗體上制成“生物導(dǎo)彈”用于癌癥治療。“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是“殺傷性彈頭”。分析下列有關(guān)描述，其中不正確的是A.“瞄準(zhǔn)裝置”由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體組成B.“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物或毒素等物質(zhì)構(gòu)成C.“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能D.“生物導(dǎo)彈”的制備應(yīng)用了細(xì)胞工程√對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)，過(guò)程如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)本實(shí)驗(yàn)中，小鼠注射的特定抗原應(yīng)取自_______________。(2)步驟①常用方法包括_____融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等