動物學(xué)復(fù)習(xí)總結(jié)(全部)

PAGEPAGE7緒論實驗動物科學(xué)1、實驗動物科學(xué)包含的內(nèi)容分為兩個領(lǐng)域1、實驗動物學(xué)（實驗動物）2、比較醫(yī)學(xué)（動物實驗）包括1個研究（通過人工培育或人工改造等研究）3個控制（對動物攜帶的微生物及其遺傳、營養(yǎng)、環(huán)境等因素實行控制；使實現(xiàn)動物的來源清楚，遺傳背景明確；為科學(xué)研究、教學(xué)、藥品和生物制品的生產(chǎn)及其質(zhì)量檢定，以及其他科學(xué)實驗提供專用的標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物。）內(nèi)容包括：1、實驗動物遺傳育種學(xué)2、實驗動物醫(yī)學(xué)3、比較醫(yī)學(xué)4、實驗動物環(huán)境生態(tài)學(xué)5、動物實驗技術(shù)2、實驗用動物的分類①經(jīng)濟動物②野生動物③觀賞動物=4\*GB3④實驗動物3、實驗動物的定義指經(jīng)過人工培育和改造，對其攜帶的微生物、遺傳及營養(yǎng)、環(huán)境因子實行控制，來源清楚，遺傳背景明確；為滿足科學(xué)研究，教學(xué)，藥品，生物制品的生產(chǎn)及檢定，及其他科學(xué)實驗的需要而馴養(yǎng)，繁殖，育成的動物。4、我國第一部實驗動物法規(guī)，1988年《實驗動物管理條例》衛(wèi)生部2項法規(guī)《醫(yī)學(xué)實驗動物管理實施細則》《醫(yī)學(xué)實驗動物標(biāo)準(zhǔn)》第二章遺傳學(xué)質(zhì)量控制實驗動物的遺傳學(xué)分類①原生動物門②海綿動物門③腔腸動物門④扁形動物門⑤線性動物門⑥環(huán)節(jié)動物門⑦軟體動物門⑧節(jié)肢動物門⑨棘皮動物門⑩原索動物門11脊椎動物門 2.近交系動物(1)近交系動物的定義（3點）經(jīng)連續(xù)20代以上的全同胞兄妹或親子交配培育而成，同品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于20代或以后的一對共同祖先的遺傳群體，近交系數(shù)達98.6%，該品系稱為近交系。(2)近交系動物的命名一般以大寫英文字母命名，亦可以用大寫英文字母加阿拉伯?dāng)?shù)字命名，阿拉伯?dāng)?shù)字與英文字母等高，符號應(yīng)盡量簡短。C3HBALB/c(3)近交系動物的遺傳學(xué)特性①基因純和性②同基因性③表現(xiàn)型的均一性④遺傳穩(wěn)定性⑤個體性⑥分布廣泛性⑦背景資料和數(shù)據(jù)比較完整⑧可分辨性(4)近親交配的弊端意義：①實驗動物獲得遺傳均一性的典型方法。②使用較少的近交系動物，即可達到統(tǒng)計學(xué)要求的精密度③同一近交系的全部動物，在遺傳上相同，從而減少了表現(xiàn)型的變異④在個體之間能相互接受皮膚和腫瘤移植弊端：①在固定基因時，有害的隱性基因也會純合，出現(xiàn)不利的性狀而造成育種失敗②近交還可能導(dǎo)致多基因之間喪失平衡，從而使高度純化的動物對不良環(huán)境的調(diào)節(jié)適應(yīng)能力降低③近交使動物失去為保持足夠生物適合度所必需的最低水平的基因雜合性，從而影響動物生長率，壽命，對疾病的感受性，生活力，體力及繁殖能力。（5）近交系數(shù)Fn=1-(1-△F)nn：d代數(shù)△F每一代近交系數(shù)的上升率，連續(xù)合同胞的兄弟妹交配，每代△F=19%（舉例：近交系數(shù)F20=1-（1-0.19）20=0.9863.封閉群動物1.封閉群動物的定義以非近交交配方式進行繁殖生產(chǎn)的一個實驗動物種群，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群，或叫遠交群。2.封閉群動物的命名封閉群由2~4個大寫英文字母命名，種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫名稱，第一個字母須大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名字之間用冒號分開。Ssmu:KM3.封閉群動物的遺傳學(xué)特性①基因庫大，雜合率高②群體基因頻率基本保持穩(wěn)定③在封閉群體內(nèi)，個體間差異程度主要取決于其祖代起源=4\*GB3④封閉群動物每代近交系數(shù)上升率必須低于1%。（隨機交配時，至少200對）4.實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量控制嚴格的繁育制度和遺傳學(xué)質(zhì)量檢測1.遺傳學(xué)質(zhì)量檢測的“四E”原則四E原則：準(zhǔn)確exact、簡便easy、有效efficient、經(jīng)濟economic2.遺傳學(xué)質(zhì)量檢測的方法：生化標(biāo)志基因位點測定——鑒定某個品系或個體的基本方法皮膚移植同品系的個體間能互相接受皮膚移植(對調(diào)皮膚，旋轉(zhuǎn)180度)常用尾部皮膚移植法，植皮后至少觀察100天，只有在100天以上植皮雙方均不發(fā)生排斥，才能正式待測小鼠或大鼠的遺傳純和性。在對已知品系檢測時，若急性排斥占手術(shù)例數(shù)30%，須重新考慮采樣，以確認是技術(shù)性還是其他原因造成的結(jié)果。=1\*GB3①兩塊皮膚同時長好，可能無遺傳污染。=2\*GB3②兩塊皮膚均脫落，手術(shù)失敗。=3\*GB3③兩塊皮膚，自體移植的正常生長，異體移植的排異脫落，說明一定發(fā)生了遺傳污染。下頜骨形態(tài)學(xué)分析下頜骨的形態(tài)是高度遺傳的性狀，由多態(tài)性位點確定。毛色基因交配試驗A-B-C野生色A-bb-C桂皮色aaB-C黑色aabbC棕色cc白化通常將待測小鼠雌鼠與已知有所謂基因結(jié)構(gòu)的DBA/2（aabbCC棕色）雄鼠雜交，根據(jù)F1的毛色確定待測小鼠主要毛色基因，檢定是否純和。如待測小鼠A、B位點是純和的，則雜交F1的毛色只出現(xiàn)一種顏色。第三章微生物和寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制1.實驗動物的微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)分類普通動物(CV)的概念普通動物須不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；通常飼養(yǎng)在開放環(huán)境里的動物。清潔動物（CL）的概念此類動物必須是不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；又不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究影響大的病原體。通常飼養(yǎng)在屏障環(huán)境。無特定病原體動物（SPF）的概念不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體；又不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究影響大的病原體；還不攜帶主要潛在感染或條件致病菌和對科學(xué)實驗影響大的病原體的動物。通常飼養(yǎng)在屏障環(huán)境。無菌動物（GF）與悉生動物(GN)的概念無菌動物：指動物體內(nèi)外無可檢出的一切生命體的動物。此種動物在自然界中并不存在，必須用人為的方法培育出來。通常飼養(yǎng)在封閉環(huán)境。悉生動物：指動物體內(nèi)外攜帶的生命體是已知的。此種動物原是無菌動物，系人為的將指定微生物叢定居其體內(nèi)外。2.CV普通動物中的弓形蟲污染，必須排除。3.CL清潔動物易感染流行性仙臺?。ǘ荆┖托∈蟾窝撞。ǘ荆?，必須排除。4.SPF動物易感染綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌，必須排除。第四章環(huán)境對動物實驗的影響1.實驗動物的環(huán)境因素組成。（1）物理因素：溫度、濕度、氣流（包括換氣次數(shù)和壓強梯度）、光照、噪聲和空氣潔凈度。（2）化學(xué)因素：營養(yǎng)（飼料、飲水）、空氣質(zhì)地（氨濃度）、消毒劑、殺蟲劑。（3）生物因素：同種生物間、異種生物間的影響。（4）居住因素：建筑設(shè)備、籠具、飼養(yǎng)設(shè)備、供食器、供水器等2.物理因素7項、空氣質(zhì)地（氨濃度）的基本含義（照度，空氣潔凈度）和國標(biāo)要求。實驗動物設(shè)施環(huán)境指標(biāo)（溫度）物理因素：溫度、濕度、換氣次數(shù)、氣流速度、壓強梯度、噪聲、光照和空氣潔凈度?？諝赓|(zhì)地（有害氣體）：主要來源：動物糞、尿?qū)κ覂?nèi)空氣的污染。特征指標(biāo)：氨濃度（NH3），我國對有害氣體的控制標(biāo)準(zhǔn)和檢測項目均以氨濃度為主。照度和照度單位：勒克司（LX）離1國際燭光光源1米遠直角面的照度為1LX空氣潔凈度是衡量空氣中塵埃顆粒濃度的計量單位。空氣潔凈度計量單位—級：每立方英尺空氣中含有大于等于0.5微米塵埃粒子數(shù)（Φ≧0.5μ塵埃粒子數(shù)/ft3）。國際單位：Φ≧0.5μ塵埃粒子數(shù)/升；1ft3=28.3L級（Φ≧0.5μ個/ft3）=個/升×28.3大鼠對濕度要求很高，在空氣相對濕度低于40%時易患環(huán)尾癥。（尾巴出現(xiàn)圓形環(huán)尾紋，初期呈現(xiàn)水腫，出血，皮膚壞死及脫皮，嚴重者尾根及尾巴成干性壞疽病變，留下永久性環(huán)行。）3居住因素：主要設(shè)施的類型、基本操作要求，相應(yīng)的微生物和寄生蟲級別動物。a.按環(huán)境凈化控制程度分類：1.開放環(huán)境（OpenSystem）：室內(nèi)正壓，保持溫度，空氣潔凈度不作要求。（一般室內(nèi)配備獨立空調(diào)，用以調(diào)節(jié)溫度，并設(shè)有進氣風(fēng)扇和排氣風(fēng)扇，要求室內(nèi)保持正壓（進氣量>排氣量）。一般沒有空氣過濾、凈化裝置，對操作實驗人員、物品、氣流等也不作單向流程要求。）可飼養(yǎng)普通級動物或進行普通級動物實驗。

2.屏障環(huán)境（BarrierSystem）：空氣潔凈度10000級。恒溫?？諝馔ㄟ^調(diào)節(jié)形成清潔走廊、動物實驗室、污染走廊和外界的空氣壓強梯度差（≥20帕）。（屏障環(huán)境設(shè)施內(nèi)動物生活環(huán)境受氣候影響較小，設(shè)施內(nèi)外空氣由專門通道送入和排出。屏障環(huán)境空氣實施過濾凈化，送入內(nèi)部區(qū)域的空氣潔凈度要求達到10000級。恒溫處理后的空氣通過調(diào)節(jié)形成清潔走廊、動物實驗室、污染走廊和外界的空氣壓強梯度差（≥20帕）。操作人員穿戴滅菌衣帽鞋和手套、口罩，并遵循單向流程進、出。飼料、墊料、籠器具等動物生產(chǎn)和實驗所需物品必須進行滅菌。有條件的地方實行電腦監(jiān)控。）在屏障環(huán)境設(shè)施內(nèi)可以進行SPF級或清潔級動物飼養(yǎng)和實驗。

3.隔離環(huán)境（IsolationSystem）：空氣經(jīng)過超高效過濾（濾過率達99.97%），靜態(tài)空氣潔凈度為100級。恒溫恒濕。正壓（100-150帕）。（隔離環(huán)境動物實驗設(shè)施是在普通環(huán)境下利用專用動物實驗隔離器（Isolator）進行動物飼養(yǎng)和動物實驗。隔離器內(nèi)送入和排出的空氣都經(jīng)過超高效過濾（達到99.97%濾過率），靜態(tài)空氣潔凈度為100級。操作人員通過透明薄膜或有機玻璃進行觀察，通過附設(shè)在隔離器上的手套進行實驗和飼養(yǎng)操作。物品經(jīng)過嚴密包裝、高壓滅菌傳入，而溫濕度需要室內(nèi)空調(diào)或中央空調(diào)控制調(diào)節(jié)。）b.按設(shè)施用途和主要功能分類：實驗動物生成設(shè)施，動物實驗設(shè)施，特殊動物實驗設(shè)施。2、屏障環(huán)境操作要求（人員、物品、氣流等）→人員走向…物品走向“箭頭指向不可逆行”人員移動路線(雙走廊或三走廊式)脫衣（更衣室1）→穿衣（更衣室2）→淋浴→風(fēng)淋→清潔走廊→飼養(yǎng)室或動物實驗室→污染走廊→更衣→外部區(qū)域物品的移動路線(雙走廊或三走廊式)物品→高壓蒸汽滅菌器—→→傳遞窗—→清潔走廊→動物實驗室→污染走廊→外部區(qū)域→渡槽—→動物的移動路線(雙走廊或三走廊式)外來動物→傳遞窗→檢疫室或健康動物觀察室→清潔走廊→動物實驗室→污染走廊→外部區(qū)域空氣的流動路線(雙走廊或三走廊式)清潔走廊→動物實驗室→污染走廊→外部區(qū)域（壓力依次遞減20Pa）4.居住因素：主要設(shè)備的結(jié)構(gòu)、工作原理和環(huán)境控制原理（屏障設(shè)施中的一般飼養(yǎng)設(shè)備、層流架、IVC、隔離器）、基本操作要求，相應(yīng)的微生物和寄生蟲級別動物。不銹鋼平板架+塑料飼育盒：用途：嚙齒類動物實驗觀察。對環(huán)境要求：安放在屏障系統(tǒng)內(nèi)，可達到清潔級標(biāo)準(zhǔn)。不銹鋼兔籠+托盤：用途：兔子、豚鼠等動物實驗觀察。對環(huán)境要求：安放在屏障系統(tǒng)內(nèi)，可達到清潔級標(biāo)準(zhǔn)。自動水沖式不銹鋼兔籠架：用途：兔子、豚鼠等動物實驗觀察。對環(huán)境要求：安放在開放環(huán)境內(nèi)，可達到普通級標(biāo)準(zhǔn)。消化籠、代謝籠：動物實驗中定量收集糞尿。潔凈層流柜（LaminarAirFlowRack，層流架）：層流架可看作是一個小型屏障系統(tǒng)，是一種動物實驗飼育的專用設(shè)備。層流架通過連續(xù)送入高效過濾空氣，在動物飼養(yǎng)層內(nèi)及玻璃移門前相應(yīng)范圍形成20帕以上的正壓，為實驗動物提供并保持了安全、潔凈、舒適的清潔級或SPF級生活環(huán)境，尤其適合進行各種嚙齒類動物實驗。結(jié)構(gòu)：層流架主要由送風(fēng)機、空氣過濾系統(tǒng)、動物飼養(yǎng)層和控制指示系統(tǒng)等部分組成。一般層流架設(shè)有操作層，雙體層流架還配有操作臺和物品儲藏室。工作原理：以36型層流架為例:室內(nèi)恒溫空氣由送風(fēng)機從進風(fēng)口吸入，經(jīng)初效過濾膜、中效過濾袋、高效過濾器三級過濾，潔凈空氣進入靜壓倉，再送入各個動物飼養(yǎng)層；廢氣通過回風(fēng)槽匯集后，經(jīng)位于頂端的排風(fēng)口集中排出室外。層流架的風(fēng)量、風(fēng)速和換氣次數(shù)可以通過控制面板上的調(diào)速器進行調(diào)節(jié)。基本操作要求：☆有關(guān)動物飼養(yǎng)和動物實驗的操作都應(yīng)在層流架操作層或配套超凈工作臺內(nèi)行?！铒曫B(yǎng)和實驗所需的物品如籠具、飲水瓶、實驗器械等必須進行滅菌處理。☆飼料可選用小包裝真空Co60輻照滅菌料。（6）獨立通氣籠盒系統(tǒng)（IndividuallyVentilatedCages，簡稱IVC）：☆I(lǐng)VC是一種新型的動物飼育和動物實驗設(shè)備?！領(lǐng)VC主要由籠盒、籠架和控制機箱等三部分組成?！顒游镲曫B(yǎng)和動物實驗操作在配套設(shè)備超凈工作臺中進行。（7）無菌隔離器：是一個相對封閉的環(huán)境，內(nèi)部保持正壓100-150帕斯卡，靜態(tài)環(huán)境隔離器室內(nèi)空氣潔凈度達到100級。隔離器只需放置于一般干凈室內(nèi)，對環(huán)境要求相對低。室內(nèi)空氣經(jīng)超高效濾過，由送風(fēng)機送入隔離器室。動物飼養(yǎng)和基本實驗操作通過附著于隔離器上的手套進行。微生物級別飼育環(huán)境要求普通動物開放環(huán)境清潔動物屏障環(huán)境、層流架、IVC無特定病原體動物屏障環(huán)境、層流架、IVC無菌動物及悉生動物隔離環(huán)境（隔離器）5.生物因素：（1）同種生物掌握群內(nèi)地位分類；A．群內(nèi)地位：直線型即地位高低呈一、二、三……單個直線排列，如猴、兔、犬和豬；專制型即經(jīng)過爭奪，產(chǎn)生一個首領(lǐng)，其余動物地位基本不分高低，如貓、鼠。B.性別影響：雄性成年動物好斗，撕咬打斗等。用成年雄性動物做實驗，陌生動物個體在一起往往會引起斗毆，尤以犬、猴、小鼠中的津白1號多見，有條件應(yīng)當(dāng)單個飼養(yǎng)。室（籠、盒）內(nèi)飼養(yǎng)動物過多，會造成局部溫度過高，有害氣體濃度增加并積聚不散，動物容易患病死亡，并導(dǎo)致打斗、撕咬。在有條件的情況下，動物實驗以單只盒（籠）養(yǎng)為好，尤其是大動物、腫瘤接種動物和成年雄性動物。（2）動物性別和飼養(yǎng)密度對實驗的影響。飼養(yǎng)密度不同，會使動物的實驗反應(yīng)產(chǎn)生差異，傳染病的發(fā)生率隨飼養(yǎng)密度的增加而上升。局部溫度過高，廢氣多，潮濕，飼料不足，易打斗。書P56表4-5第五章飼料營養(yǎng)對實驗動物的影響動物的營養(yǎng)和食性；營養(yǎng)動物從外界攝取自身所需要的食物，經(jīng)消化、吸收，用來維持生命活動的行為或作用。食性因消化器官結(jié)構(gòu)和生理功能上的差異，動物對選擇食物的不同習(xí)性。標(biāo)準(zhǔn)化飼料根據(jù)不同動物的營養(yǎng)需求和動物的食性，經(jīng)人工配合、加工而成的營養(yǎng)全面、適口性好、符合微生物要求的飼料。掌握實驗動物飼料概略養(yǎng)分的組成。飼料分為：有機飼料：蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物（無氮浸出物、粗纖維）、維生素。無機飼料：水分、灰分（無機鹽）。熟悉草食、雜食、肉食動物對某些營養(yǎng)成分的需求量的區(qū)別。脂肪、蛋白質(zhì)：草食動物<雜食動物<肉食動物粗纖維：草食動物>雜食動物>肉食動物4.了解各類動物常規(guī)營養(yǎng)要求，掌握各種動物對營養(yǎng)的特殊要求。特殊營養(yǎng)要求：大小鼠☆大鼠和小鼠對營養(yǎng)需要大致相同?！畲值鞍踪|(zhì)要求在20%以上，消化能15910KJ/kg?！顬樘岣叻庇甘蟮氖茉新?，飼料中應(yīng)有足夠的維生素E?！畲笮∈笞陨砟軌蚝铣删S生素C，無須在飼料中特意添加。豚鼠☆屬草食動物，懷孕期長，成熟較晚。飼料粗蛋白含量要求20%左右?！钣捎诿つc發(fā)達，能有效地消化利用粗纖維，飼料粗纖維在16%左右。☆豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C，必須在飼料中添加。兔子☆亦屬草食動物。兔飼料中粗纖維含量不低于15%，粗蛋白質(zhì)比例也在15%左右?！钜话阃蔑暳现屑尤胍欢康母刹荩蕴岣叽掷w維百分比，這對防止兔腹瀉這種常見病是至關(guān)重要的?！钔米佑小笆臣S癖”。犬☆屬于肉食動物，飼料中粗蛋白含量要求達到25-30%，而粗纖維相對比例低一些?！钊畬S生素A、D、B1、B2需要量較大。猴☆屬于非人靈長類，食性與人相近，對營養(yǎng)要求比較高。☆一般以面粉、豆粉、玉米粉、雞蛋、食鹽等制成餅干作為主食?！詈镲暳现写值鞍踪|(zhì)含量占24-26%左右。猴對維生素C特別敏感，如果缺乏可造成牙齦出血，精神萎靡，長期缺乏或不足會導(dǎo)致死亡?！蠲刻於抗┙o新鮮水果和蔬菜，或在主食中加入維生素添加劑，可以避免猴維生素缺乏癥的產(chǎn)生。5.實驗動物的飲水要求（一般要求、滅菌要求、酸化要求）。水質(zhì)要求：城市飲用水三級標(biāo)準(zhǔn)凈化處理：過濾；凈水酸化處理：用鹽酸將飲水pH調(diào)整到2.5-3.0，抑制細菌的生長滅菌處理：普通級動物可直接給飲自來水，清潔級以上實驗動物將自來水瓶裝后，進行滅菌處理。6.掌握物品（飼料、飲水等）主要滅菌方法。消毒主要用化學(xué)方法在一般環(huán)境中抑制或殺死微生物滅菌在特殊包裝的條件下，徹底殺滅微生物（1）高溫高壓蒸氣滅菌：最經(jīng)典、可靠A.

預(yù)真空滅菌（俗稱“干消毒”）：131℃4min；適合于飼料、B.一般高壓滅菌（俗稱“濕消毒”）：120℃20min左右；（2）輻射滅菌☆俗稱“冷消毒”?！铒暳项A(yù)先分成定量小包裝（一般每包2kg），密封、抽真空，然后用一定劑量的Co60照射。由于射線穿透力強、滅菌效果好，飼料中營養(yǎng)成分保持完好。動物實驗首選這種小包裝輻照料，使用方便，儲藏時間也相對要長一些。（3）微波滅菌：采用專用工業(yè)微波爐，小規(guī)模也可以使用家用微波爐進行飼料滅菌。磁控管發(fā)生高頻微波（108-11/秒），微波具有對金屬固體產(chǎn)生反射、對非金屬固體產(chǎn)生穿透、對液體產(chǎn)生吸收作用。飼料含有8-10%水分，吸收微波后水分子產(chǎn)生高頻震蕩，在產(chǎn)熱的同時達到了滅菌作用。（4）干烤：在80-100℃（5）環(huán)氧乙烷滅菌：方法簡單，可能污染環(huán)境。第六章人類疾病動物模型1.人類疾病動物模型的定義。人類疾病動物模型(Animalmodelsofhumandiseases)是指在醫(yī)學(xué)研究中，在動物身上建立，或形成類似人類疾病動物。通過動物模型直接，或間接反映疾病的發(fā)生和發(fā)展過程，在了解疾病的基礎(chǔ)上開創(chuàng)和改進、優(yōu)化疾病的治療。2.醫(yī)學(xué)動物模型基本分類。（1）誘發(fā)性動物疾病模型(Experimentalanimalmodel)是指以物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)等致病手段，人為導(dǎo)致動物組織、器官或整體成為人類疾病動物模型；使其在功能、代謝、形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面發(fā)生改變，即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類疾病模型。（2）自發(fā)性動物模型(Spontaneousanimalmodel)是指不加任何人工誘發(fā)，在自然條件下動物自然產(chǎn)生的疾病，或者由于基因突變的異常表現(xiàn)，通過遺傳育種保留下來的動物疾病模型。其中包括近交系的腫瘤疾病模型和突變系的遺傳性疾病模型。（3）抗疾病型動物模型(Negativeanimalmodel)是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生。因此，可借以探討何種動物對該疾病有天然的抵抗力。（4）生物醫(yī)學(xué)動物模型(Biomedicalanimalmodel)是指以動物生物學(xué)特征提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。3.使用人類疾病動物模型意義。(1)避免直接實驗所造成危險。(2)臨床上平時不易見的疾病可以隨時復(fù)制。(3)增加方法學(xué)上的可比性。(4)樣品易得，實驗方法簡化。(5)有助于了解疾病的本質(zhì)。4.了解常用的模型動物(SHR、WKY)。高血壓模型（SHR大鼠）：該鼠自發(fā)性高血壓的變化與人類相似，并且可產(chǎn)生腦血栓、梗塞、出血、腎硬化、心肌梗死和纖維化等變化。在SHR的基礎(chǔ)上，又培育了兩個亞系SHRSP和SHRSR，前者出生后，除出現(xiàn)嚴重高血壓外,90％以上患腦卒中(腦出血和腦栓塞)；SHRSR則是抗腦卒中的自發(fā)性高血壓大鼠。SHR：自發(fā)性高血壓大鼠（是近交系）SHRSP：高卒中自發(fā)性高血壓大鼠SHRSR：抗卒中自發(fā)性高血壓大鼠WKY(wistar-Kyoto,)與自發(fā)性高血壓大鼠相匹配的同源正常血壓大鼠5.免疫缺陷動物的定義免疫缺陷動物是指由于先天性遺傳突變，或用人工方法，培育一種或多種免疫功能缺陷的動物。6.熟悉常見的免疫缺陷動物、基因符號按免疫功能缺陷的種類常分為:(1)T-淋巴細胞功能缺陷動物：裸小鼠、裸大鼠、裸豚鼠等。裸基因:nu(2)B-淋巴細胞功能缺陷動物：CBA/N小鼠、Arabin馬和Quarter馬等馬屬動物。(3)NK細胞功能缺陷動物：Beige小鼠。(4)聯(lián)合免疫缺陷動物：Scid小鼠（T、B淋巴細胞功能雙缺陷）等其他人工定向培育的多種免疫功能缺陷動物。裸小鼠:常見的有BALB/c-nu、C3H-nu、C57BL/6-nu等。裸大鼠:-Rnn雌不孕Beige（bg）小鼠：純合子的親本，雌可孕SCID小鼠：16號染色體上，單突變基因，突變符合為scidMotheaten小鼠：突變基因位于第6號染色體人工定向培育的多聯(lián)免疫缺陷型小鼠：NK細胞缺陷的Beige基因、T細胞缺陷的nu基因和B細胞缺陷的Xid基因7.掌握裸小鼠基本生物學(xué)特征裸小鼠：是指先天性無胸腺，且無被毛的小鼠,簡稱為裸小鼠。其突變基因為裸基因,符號為:nu,是一個隱性突變基因,位于小鼠的第11號染色體上。目前，此基因已導(dǎo)入到不同品系的小鼠中,常見的有BALB/c-nu、C3H-nu、C57BL/6-nu等裸鼠的解剖生理特點：①毛囊發(fā)育不良，外觀上看幾乎沒有被毛，故稱“裸鼠”；②無胸腺，僅有胸腺殘跡或異常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使T細胞正常分化，而T細胞是移植排異的主要細胞。Ｂ細胞基本正常但功能欠佳。有較高的NK細胞數(shù)量和活性。③因為IgG的產(chǎn)生需要T細胞和巨噬細胞的參與，其免疫球蛋白主要是IgM，只有極少量的IgG。④自發(fā)腫瘤現(xiàn)象罕見，可能與NK細胞的活性高有關(guān)。⑤裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎。⑥純合裸鼠母性極差，且受孕率低，乳房發(fā)育不良。通常以純合雄鼠與帶有nu基因的雜合雌鼠（♀nu/+′♂nu/nu）可獲1/2裸鼠。⑦裸鼠需飼養(yǎng)在屏障環(huán)境中。8.掌握裸小鼠繁育、保持方式通常以純合雄鼠與帶有nu基因的雜合雌鼠（♀nu/+′♂nu/nu）可獲1/2裸鼠。9.掌握近交系裸小鼠裸基因?qū)敕椒ǎ?）保持原種（把題目給的具體名稱寫入）近交系（B×S）（2）導(dǎo)入Nu（裸基因）（3）反復(fù)自交+回交（4）Nu/Nu×Nu/+♀裸鼠繁育采用該方式（5）獲得與原近交系背景一致的BALB/c-nu10.SCID小鼠SCID小鼠的全稱為“重癥聯(lián)合免疫缺陷”小鼠。其突變點在16號染色體上，為單基因突變，突變符號為scid，當(dāng)其純合時，性狀表現(xiàn)為淋巴細胞抗原受體基因編碼順序異常，造成T、B淋巴細胞不能分化為特異性的淋巴細胞，目前已有多種不同品系的SCID小鼠。SCID小鼠的生物學(xué)特征：外觀與普通小鼠無異樣，但其胸腺、脾、淋巴結(jié)等免役器官的重量不到正常小鼠的30%。其胸腺多為脂肪組織包圍，沒有皮質(zhì)結(jié)構(gòu)，僅殘存的髓質(zhì)。外周白細胞較少，淋巴細胞僅占總數(shù)的10-20%（正常小鼠為70%）。飼養(yǎng)環(huán)境:SCID小鼠需在屏障環(huán)境（空氣潔凈度萬級以下）中，方能存活一年以上。其繁殖生產(chǎn)，以近交系繁殖方式進行，產(chǎn)子率和離乳率均低于正常小鼠。第七章動物實驗的設(shè)計和實施1.動物實驗設(shè)計的原則a.課本P116避免直接在人身上作進行實驗，在生命科學(xué)研究的設(shè)計中必須遵循以下原則：相似性在人為設(shè)計的條件下，盡可能選擇相似的動物作為人的替代者。所獲得的實驗結(jié)果應(yīng)金可能類似于人類的情況。若能找到與人類疾病相同的動物自發(fā)模型時最為理想的，但此類動物畢竟有限，通常需要誘發(fā)。可靠性科研結(jié)果必須具備可靠性，要求在研究中使用可靠性高的實驗動物即遺傳學(xué)質(zhì)量和微生物學(xué)質(zhì)量，寄生蟲學(xué)質(zhì)量均符合國家標(biāo)準(zhǔn)的動物，并在符合實驗動物環(huán)境及設(shè)施的國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的實驗環(huán)境中完成實驗。重復(fù)性科研結(jié)果必須能夠重復(fù)，不能重復(fù)的研究結(jié)果毫無意義。所以動物模型應(yīng)能重復(fù)培育，且能實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化?？煽匦栽谘芯空n題中使用的動物模型應(yīng)考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于分析實驗結(jié)果。經(jīng)濟性在設(shè)計和執(zhí)行課題計劃時，對選用的動物和采用的方法應(yīng)符合課題經(jīng)費預(yù)算?！颾.PPT：動物實驗的設(shè)計:1.分組隨機化；每組（包括各實驗組和對照組）數(shù)量盡量相等，目的是減少實驗誤差。2.預(yù)試驗3.數(shù)據(jù)處理方法三個原則：=1\*GB3①.對照：用以控制試驗條件；=2\*GB3②.隨機：使試驗分組的客觀化，減少抽樣誤差；=3\*GB3③重復(fù)：試驗要有足夠的樣本數(shù)及重復(fù)次數(shù)，以提高結(jié)果的可靠性。2.實驗動物選擇的4項基本原則P1181）選擇標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物2）選擇在結(jié)構(gòu)、技能、代謝以及發(fā)病機理與人相似的實驗動物3）選用解剖、生理上有特點的動物4）選用特殊生理反應(yīng)的動物以符合不同的實驗要求3.動物實驗的分組P1211)分組原則——隨機性（機遇相等的原則），目的是減少干擾因素造成的實驗誤差；各組內(nèi)動物（包括對照組）數(shù)目——盡量相等；2)對照組設(shè)立的幾種方法空白、實驗、有效、配對、交叉對照、實驗重復(fù)和肯定、歷史對照。第八章動物實驗的“3R”原則一、“3R”的概念P1521.Replacement替代——用其他方法而不用（高等）動物達到實驗?zāi)康?。（是使用其他方法而不用動物，以達到某一試驗?zāi)康?，或者說使用沒有知覺的試驗材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎動物進行試驗的方法。簡單的說就是應(yīng)用無知覺的材料的科學(xué)方法來代替活體試驗。）（1）低等動物替代高等動物（2）用組織、細胞替代整體動物（3）用分子生物學(xué)方法替代整體動物實驗（4）計算機模擬、聲像教學(xué)（5）人工合成材料替代動物原料2.Reduction減少——用較少的動物獲得同樣多的實驗數(shù)據(jù)；用同樣多的動物獲得更多的實驗數(shù)據(jù)。（是在科學(xué)研究中，用較少量的動物獲取同樣多的試驗數(shù)據(jù)，或者使用一定數(shù)量的動物能獲得更多試驗數(shù)據(jù)的方法，即在動物試驗過程中減少動物使用數(shù)量。）(1）利用已有數(shù)據(jù)（2）合理設(shè)計，合理使用數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法（3）替代:低等替代高等（4）重復(fù)使用動物（5）合理選擇動物(6）規(guī)范實驗操作，注意環(huán)境控制（7）實驗協(xié)作，提高使用率3.Refinement優(yōu)化——改進或完善實驗程序，減輕或減少因?qū)嶒灲o動物造成的疼痛和不安。（通過改進和完善試驗程序，盡可能減輕或減少給動物造成的藤東和不安，提高動物福利的方法，以利動物試驗獲得可靠的結(jié)果。）（1）優(yōu)化實驗方案、實驗指標(biāo)（2）優(yōu)化實驗條件、實驗技術(shù)（3）改進涉及動物的操作技術(shù)二、動物福利法的核心：“善待活著的動物，減少死亡的痛苦”三、安樂死概念和方法實驗過程中或?qū)嶒炌瓿珊?，不欲保留的動物實行“無痛苦”處死的科學(xué)方法。（1）頸椎脫臼法（適合小動物）（2）空氣栓塞法（3）急性大出血法（適合較大的動物）（4）過量麻醉法（都適合）四、保護動物的意義1、挽救瀕臨滅絕的動物物種。2、使動物免受傷害。3、使動物康樂。五、動物福利的價值1.社會價值：愛護動物、善待動物是人類的責(zé)任，是人類道德文明的體現(xiàn)，是人與大自然和諧發(fā)展的需要。具有愛心的人社會責(zé)任感強。2科學(xué)價值：實施動物福利將使科學(xué)實驗效果更好，結(jié)果可信，客觀真實，使科研水平與國際接軌。3.經(jīng)濟價值：實施動物福利，減少了應(yīng)激反應(yīng)，有助于提供優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的動物產(chǎn)品，提高實驗效率4.實用價值：避免敵對，使實驗更順利，節(jié)省時間。第九章動物實驗的基本技術(shù)和方法1.動物編號永久性標(biāo)記方法（背側(cè)）（背側(cè)）左耳（十位數(shù)）右耳（個位數(shù)）402090圓孔為為1、2、3單缺口為4、5、6雙缺口為7、8、973由內(nèi)側(cè)到外側(cè)2.動物被毛去除方法1.剪毛法：用彎頭剪逆毛方向剪適用于各種實驗動物2.拔毛法：常用于兔的耳緣靜脈注射3.剃毛法：專用剃毛刀。適用于大動物。為對動物刺激或可能造成損傷最小的方法。4.脫毛法：脫毛劑3.常用動物安全采血量、最大灌胃劑量動物種類最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.30.5大鼠25豚鼠510兔1040犬50300猴1560動物種類體重（g）最大容積（ml）動物種類體重（g）最大容積（ml）小鼠20-240.5豚鼠250-3004-525-300.8>3006.0>301.0兔2kg100大鼠100-1993.02.5kg150200-2494-5>3.5kg200250-3006.0貓2.5kg50-80>3008.0>3.0kg100-050犬10kg200-5004.常用麻醉方法和麻醉時的注意事項麻醉的目的是，消除實驗過程中引起的痛苦和不適，確保實驗動物的安全和動物實驗的順利進行，也是動物實驗倫理的一個重要方面。麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉兩種。1）大多數(shù)采用全身麻醉，麻醉藥通過呼吸道吸入、靜脈、肌肉、腹腔注射等途徑，進入實驗動物體內(nèi)，使其產(chǎn)生短時間意識喪失、痛覺消失、肌肉松弛和反射抑制等中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制現(xiàn)象。當(dāng)麻醉藥從體內(nèi)排出或在體內(nèi)代謝破壞后，實驗動物逐漸清醒，不留后遺癥。全麻有吸入麻醉法和注射麻醉法兩種途徑，吸入麻醉法用揮發(fā)性麻醉藥，注射麻醉法用非揮發(fā)性麻醉藥。2）局部麻醉：普魯卡因：是無刺激性的局麻藥物。特點：麻醉速度快，注射后1~3分鐘就可產(chǎn)生麻醉。可以維持30~45分鐘。對皮膚和黏膜穿透力很弱，需要注射給藥才能產(chǎn)生局麻效果。它可以使血管舒張，易被吸收入血液而失去效果。在其溶液中加入腎上腺素（每100ml加入0.1%腎上腺素0.2~0.5ml）可以使麻醉時間延長1~2小時。利多卡因：效力和穿透力比普魯卡因強的卡因：化學(xué)結(jié)構(gòu)和普魯卡因類似，效力和穿透力比普魯卡因強。實驗動物麻醉應(yīng)注意的事項=1\*GB3①麻醉之前應(yīng)禁食。=2\*GB3②麻醉之前應(yīng)準(zhǔn)確稱量動物體重，作為計算麻醉劑用量的依據(jù)。=3\*GB3③應(yīng)注意不同麻醉藥對動物的作用是不同的，如戊巴比妥鈉、硫賁妥鈉等能抑制心肌收縮力，使肌肉松弛，而氯胺酮則相反。=4\*GB3④大動物犬、猴、羊等麻醉前半小時應(yīng)注射麻醉前給藥如阿托品和苯巴比妥鈉。=5\*GB3⑤靜脈注射麻醉藥時必須緩慢，邊注射邊觀察動物的意識、角膜反射、肌肉緊張性和對疼痛的反應(yīng)，達到麻醉要求時應(yīng)停止注射。=6\*GB3⑥大動物手術(shù)時應(yīng)配備麻醉師，在麻醉過程中密切觀察動物的反應(yīng)，如血壓、脈搏、呼吸和體溫，及時調(diào)節(jié)麻醉藥劑量，保證手術(shù)順利進行。=7\*GB3⑦動物在麻醉期間、手術(shù)后至蘇醒期體溫會下降，應(yīng)注意手術(shù)室的室溫。=8\*GB3⑧注意術(shù)后護理。=9\*GB3⑨準(zhǔn)備好補充麻醉劑和解藥。5.動物處死方法，以過量麻醉為優(yōu)選6."SYXK"、“SCXK”含義實驗動物使用許可證：SYXK（滬）2003-0026實驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK（滬）2004-00017.*廢棄物處理方式——焚燒、深埋8.常用動物一些顯著特征小鼠沒有汗腺，通過身體水份的蒸發(fā)來防止體溫升高；體溫升高并不引起血壓升高。ICR小鼠是國際通用的封閉群小鼠NIH小鼠白化，免疫反應(yīng)敏感性較好AKR小鼠白化，是白血病高發(fā)品系;缺乏補體C5易誘發(fā)免疫耐受性，對白血病因子敏感，對百日咳組織胺易感因子敏感，常用于腫瘤學(xué)和免疫學(xué)等的研究。BALB/cA小鼠白化。6月齡后出現(xiàn)免疫球蛋白增多癥，主要是IgG和IgA量增加；老齡鼠易發(fā)生心臟病變，DBA/2小鼠淡棕色。血細胞多，血壓低，維生素K缺乏引起死亡率高，心臟有鈣鹽沉積大鼠不會嘔吐（前胃和胃體由一界限嵴隔開，食管通過此嵴進入胃小彎）；無膽囊。汗腺不發(fā)達，爪底有汗腺，尾上有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片是散熱器官。雄性大鼠有許多發(fā)達的副性腺不宜作為鉤體病的研究（余敏感）F344大鼠白化腫瘤自發(fā)率高SHR大鼠自發(fā)性高血壓大鼠WKY大鼠SHR大鼠的正常血壓對照組豚鼠不能合成維生素C兔子食糞癖動物編號永久性標(biāo)記方法示意圖（操作題）（背側(cè)）（背側(cè)）左耳（十位數(shù)）右耳（個位數(shù)）402090圓孔為為1、2、3單缺口為4、5、6雙缺口為7、8、973由內(nèi)側(cè)到外側(cè)A-B-C野生色A-bb-C桂皮色aaB-C黑色aabbC棕色一.用復(fù)隱性灰色小鼠DBA（雄性，毛色基因型為：aabbCC)對某白化小鼠（雌性）進行毛色基因交配試驗，它們的F1代出現(xiàn)黑色和棕色兩種毛色小鼠：（1）該白化小鼠毛色基因是否純合？（2）該白化小鼠毛色基因型是什么？（3）用簡圖說明檢測過程。答：（3）DBA♂（aabbCC）×待測鼠♀（????cc)abC×??c↓F1代:a?b?Cc（aaBbCcaabbCc）（1）由于F1代出現(xiàn)兩種毛色,該白化小鼠毛色基因為雜合。（2）由于F1代出現(xiàn)黑色和棕色兩種毛色小鼠，說明“B”位點雜合，該白化小鼠毛色基因型是：aaBbcc。（F1代中黑色鼠毛色基因型為aaBbCc;棕色鼠毛色基因型為：aabbCc）二．用復(fù)隱性灰色小鼠DBA（雄性，毛色基因型為：aabbCC)對某白化小鼠（雌性）進行毛色基因交配試驗，它們的F1代全都是野生色小鼠：（1）該白化小鼠毛色基因是否純合？（2）該白化小鼠毛色基因型是什么？（3）用簡圖說明檢測過程。（４）對照下表，該白化小鼠可能是什么品系。答：（3）DBA♂（aabbCC）×待測鼠♀（????cc)abC×??c↓F1代:a?b?Cc（1）由于F1代出現(xiàn)一種毛色,該白化小鼠毛色基因為純合。（2）由于F1代全為野生色小鼠，說明“A、B”位點均為顯性純合，該白化小鼠毛色基因型是：AABBcc。（F1代野生色鼠毛色基因型為AaBbCc）(4)該白化小鼠可能是SJL/J品系.小鼠品系名稱毛色基因型BALB/cAAbbccTA1aabbccSJL/JAABBccSSMUaaBBcc三.已有近交系小鼠BALB/c（白化）和封閉群裸小鼠N：NIH-nu（白化），根據(jù)實驗需要現(xiàn)欲培育以BALB/c