食用菌制種工藝流程工藝

食用菌制種工藝流程尤昌建隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的蓬勃開(kāi)展，菌種需要量隨之增加，而現(xiàn)有菌種生產(chǎn)單位明顯偏少，許多菇農(nóng)不得不向外引種。長(zhǎng)途購(gòu)運(yùn)菌種不僅花費(fèi)大，本錢高而且菌種因破瓶而易引起雜菌污染，從而嚴(yán)重影響栽培食用菌的經(jīng)濟(jì)效益。菇農(nóng)假設(shè)能掌握菌種生產(chǎn)程序和制種技術(shù)，自行制種，逐步開(kāi)展成制種專業(yè)戶，也是一項(xiàng)很好的致富門路。菌種生產(chǎn)程序，通常分為母種、原種和栽培種，也就是通常所說(shuō)的一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)菌種。其中母種的別離選育技術(shù)性強(qiáng)，要求精化；而原種和栽培種的制作那么比較簡(jiǎn)單。一、母種的別離選育母種主要采用人工選擇、誘變育種、雜交育種和原生質(zhì)融合等手段獲得。作為一般制種專業(yè)戶，可以采用人工選擇方式別離培育母種。1、采集種源

從野生或人工栽培群體中，選擇有代表性的優(yōu)良菇體作為種源。種菇的標(biāo)準(zhǔn)是：八成熟，朵形圓正、肉質(zhì)肥厚，無(wú)病蟲(chóng)害。采集1--2朵符合上述標(biāo)準(zhǔn)的種菇編上號(hào)碼，作為別離母種的材料。從栽培室采集的應(yīng)標(biāo)有原菌株代號(hào)。2、培養(yǎng)基配制瓊脂培養(yǎng)基〔PDA培養(yǎng)基〕馬鈴薯200--250克，瓊脂15--20克，葡萄糖20--25克，清水1000毫升。也可以加硫酸鎂1--1．5克，維生素B1微量，磷酸二氫鉀2--3克。先將馬鈴薯洗凈去皮，挖去芽眼，切成薄片，置于鋁鍋內(nèi)加水煮沸30分鐘，撈起后用4層紗布過(guò)濾，取汁。然后將瓊脂參加汁內(nèi)，邊加熱邊攪拌，讓瓊脂充分溶化；再將葡萄糖等參加，稍煮幾分鐘后，同樣用4層紗布過(guò)濾，取其汁液。將汁液趁熱裝入玻璃試管內(nèi)。裝至管長(zhǎng)的1／5，管口用棉花塞緊，或?qū)⒅貉b入玻璃三角瓶?jī)?nèi)，裝量20毫升。然后置于高壓鍋內(nèi)，在98--108千帕／厘米的壓力下滅菌30分鐘左右。滅菌后及時(shí)取出，趁熱將試管斜排于桌面上，冷卻后即成為固體斜面培養(yǎng)基。3、母種別離方法(1)孢子彈射法。將種菇外表消毒，吸干水分后，將菇體懸掛于裝有瓊脂培養(yǎng)基的三角瓶?jī)?nèi)，讓菇體內(nèi)的袍子自然散落在培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲。也可以剪取一小塊菇體，貼附在試管斜面培養(yǎng)基外表，讓孢子散落在培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲，即能獲得母種。(2)組織別離法。將消毒過(guò)的種菇，在接種箱內(nèi)用手從菇柄處對(duì)半掰開(kāi)，或用刀片切開(kāi)，使菇體形成對(duì)開(kāi)。在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處，用接種刀切取一小塊菇體，然后縱切成5毫米x10毫米的小薄片，用接種針挑取一小塊，接入斜面培養(yǎng)基的中央，待其萌發(fā)菌絲，即可得到母種；(3)基內(nèi)別離法。選擇已長(zhǎng)菇的木段，削去樹(shù)皮及表層木質(zhì)部，用75％的酒精消毒后，鋸成1厘米厚的薄片，放入0．1％的升汞水中消毒1--2分鐘，再用滅菌水洗去殘液。然后再將小薄片劈成0．5--1厘米寬的小條，接入斜面培養(yǎng)基中央，待長(zhǎng)出菌絲后即得母種。也可以在已長(zhǎng)菇的菌袋中，經(jīng)消毒處理后，用接種針鉤取袋內(nèi)色澤純、長(zhǎng)勢(shì)旺的菌絲體，接種在試管斜面培養(yǎng)基中央，待萌發(fā)菌絲后，同樣獲得菌種。4、適溫培養(yǎng)通過(guò)上述不同方式將菌種別離接種于試管后，要及時(shí)將試管移入已消毒的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，溫度控制在25℃左右，使別離獲得的孢子或菌絲在適溫下發(fā)育。一般孢子彈射3--4天后孢子萌發(fā)成菌落，10天后菌絲長(zhǎng)滿管；組織別離接種后2--3天，菌絲即萌發(fā)，并在培養(yǎng)基上蔓延生長(zhǎng)；菇木別離接種后，7天菌絲即恢復(fù)生長(zhǎng)。5、選育提純

通過(guò)上述方法得到的菌絲，不一定都是優(yōu)質(zhì)的，還需要選育提純。因此，在菌絲萌發(fā)后，要認(rèn)真觀察，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常、無(wú)間斷的菌絲，在接種箱內(nèi)連同培養(yǎng)基鉤取菌絲，接入另備的試管培養(yǎng)基上。在23--25℃的恒溫條件下，培養(yǎng)7--10天，待菌絲長(zhǎng)滿管后，再進(jìn)行觀察，從中擇優(yōu)取用，即為“母代〞母種。6、轉(zhuǎn)管擴(kuò)接母代母種可以轉(zhuǎn)管擴(kuò)接成“子代〞母種。采用同樣的斜面培養(yǎng)基，每支可擴(kuò)接30--50支子代母種。生產(chǎn)上供給的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接。一般每支可擴(kuò)接成20--25支子代母種，但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過(guò)5次。7、出菇試驗(yàn)別離選育的母種，還必須進(jìn)行出菇試驗(yàn)。方法是：把母種接種于瓶或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，根據(jù)各種菇耳種性對(duì)溫度的要求，進(jìn)行適溫培養(yǎng)，直至出菇才證實(shí)可用于生產(chǎn)。二、原種繁殖培養(yǎng)將母種接在瓶或袋的木屑培養(yǎng)基上，通過(guò)培養(yǎng)，即成原種。1、原種木屑培養(yǎng)基配方雜木屑77．5％，麥麩20％，蔗糖1％，石膏粉1．2％，硫酸鎂0．3％。pH值(滅菌前)6．5--7，含水量調(diào)至60％。將上述原、輔料混合拌勻，裝入750毫升的玻璃菌種瓶?jī)?nèi)，裝料要求下松上緊。瓶口塞緊棉花，再用牛皮紙包住瓶頸與棉塞。然后置于高壓滅菌鍋內(nèi)，在147千帕／平方厘米壓力下滅菌2--2．5小時(shí)。也可進(jìn)行常壓滅菌，在100℃下保持10--11小時(shí)，達(dá)標(biāo)后趁熱取出，讓其冷卻。2、接入菌種待料溫降至25℃以下時(shí)，在無(wú)菌條件下，將試管種分割成假設(shè)干決，通過(guò)酒精燈火焰迅速接入原種培養(yǎng)基上，每支母種可按4--6瓶原種。3、發(fā)菌培養(yǎng)接種后及時(shí)將玻璃菌種瓶移入25℃菌種培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。空間相對(duì)濕度控制在70℃以上，防止強(qiáng)光照射。原種培養(yǎng)時(shí)間一般菇類需要40--50天，草菇、銀耳只需15--20天即可。4、去雜選優(yōu)原種培育過(guò)程中，要每天進(jìn)行觀察，如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的，應(yīng)立即淘汰三、栽培種擴(kuò)大培育將原種再次擴(kuò)接在同樣的木屑培養(yǎng)基上，在適溫條件下培養(yǎng)30--35天即為栽培種(又叫生產(chǎn)種)，可用于生產(chǎn)栽培。栽培種可用750毫升菌種專用瓶，由于使用量大，所以通常多采用聚丙烯菌種袋。袋的規(guī)格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等，可根據(jù)各種菇耳特性和當(dāng)?shù)亓?xí)慣選擇使用。培養(yǎng)基滅菌采用常壓滅菌灶滅菌，要求滅菌溫度達(dá)100℃，保持8--10小時(shí)，達(dá)標(biāo)后趁熱卸袋冷卻。待料溫降至25℃以下時(shí)，在無(wú)菌條件下接入選定品種的原種。每瓶原種可擴(kuò)接成50--60瓶栽培種。菌種培育室要求潔凈，防強(qiáng)光，室溫掌握在23--25℃，并經(jīng)常檢查，發(fā)現(xiàn)雜菌污染應(yīng)及時(shí)淘汰，不斷選優(yōu)去劣。當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿袋，尖端菌絲反轉(zhuǎn)上爬1--3厘米時(shí)，為適齡的栽培種

在自然界里，食用菌都不是單獨(dú)存在的，而是和許多細(xì)菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。所謂菌種別離，就是把這些和食用菌一起生活的雜菌別離出來(lái)，通過(guò)培養(yǎng)，獲得純的優(yōu)良菌種。(一〕母種的別離培養(yǎng)食用菌母種的別離，可分為孢子別離法、組織別離法以及基內(nèi)菌絲別離等。1.孢子別離法孢子別離法，是用食用菌的有性孢子或無(wú)性孢子萌發(fā)成菌絲，培養(yǎng)成菌種的方法。這種菌種生活力較強(qiáng)，但孢子個(gè)體之間有差異，且自然分化現(xiàn)象較嚴(yán)重，變異大，需經(jīng)出菇試驗(yàn)才能在生產(chǎn)上應(yīng)用。

〔1〕單孢別離法是每次或每支試管只取一個(gè)擔(dān)孢子，讓它萌發(fā)成菌絲體來(lái)獲得純菌種的方法。蘑菇和草菇用單孢別離得到的菌絲，有結(jié)實(shí)能力，可采用此法別離生產(chǎn)純菌種。單孢別離生產(chǎn)上較少采用，而且技術(shù)復(fù)雜，一般采用多孢別離法?！?〕多孢別離法就是把許多孢子接種在同一培養(yǎng)基上，讓它們萌發(fā)、自由交配來(lái)獲得食用菌純菌種的一種方法。①種菇孢子彈射法選擇個(gè)體健壯、朵形圓正，無(wú)病蟲(chóng)害、出菇均勻、高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，適應(yīng)性強(qiáng)的八九分成熟的種菇，切去大局部，菌柄用無(wú)菌水沖洗數(shù)遍后再用已滅菌的紗布或脫脂棉、濾紙吸干外表水分。在接種箱或無(wú)菌室內(nèi)，把種菇的菌褶朝下用鐵絲倒掛在玻璃漏斗下面，漏斗倒蓋在培養(yǎng)皿上面；上端小孔用棉花塞住。培養(yǎng)皿放在一個(gè)鋪有紗布的搪瓷盤(pán)上，靜置12～20小時(shí)，菌褶上的孢子就會(huì)散落在培養(yǎng)皿內(nèi)。形成一層粉末狀孢子印〔平菇極淡紫色，蘑菇、草菇為褐色，香菇、金針菇孢子印白色〕。用接種針沾取少量孢子在試管中的瓊脂外面或培養(yǎng)皿上劃線接種。待孢子萌發(fā)，生成菌落時(shí)，選孢子萌發(fā)早、長(zhǎng)勢(shì)好的菌落進(jìn)行試管培養(yǎng)。還可用孢子采集器收集孢子。方法是選好種菇后，按上述程序，輕輕掀開(kāi)玻璃鐘罩，將種菇柄朝下插在孢子采收器的鋼絲架上，放在培養(yǎng)皿正中央。隨即蓋好玻璃罩，用紗布將鐘掌周圍塞好。并在紗布上倒少許升汞或無(wú)菌水。移入20℃左右恒溫箱培養(yǎng)。②褶上涂抹法按無(wú)菌操作別離時(shí)；應(yīng)選擇成熟的種菇，用接種針直接插入褶片之間，輕輕抹取褶片外表子實(shí)體尚未彈射的孢子，再在培養(yǎng)基上劃線接種。③鉤懸法取成熟菌蓋的幾片菌褶或一小塊耳片〔黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用無(wú)菌不銹鋼絲〔或鐵絲、棉線等其他懸掛材料〕懸掛于三角瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基的上方，勿使接觸到培養(yǎng)基或四周瓶壁。置適宜溫度下培養(yǎng)、轉(zhuǎn)接即可。④貼附法按無(wú)菌操作將成熟的菌褶或耳片取一小塊，用溶化的瓊脂培養(yǎng)基或阿拉伯膠、漿糊等貼附在配管斜面培養(yǎng)基正上方的試管壁上。經(jīng)6～12小時(shí)的培養(yǎng)，待孢子落在斜面上，立即把孢子連同局部瓊脂培養(yǎng)基移植到新的試管中培養(yǎng)即可。孢子別離得到的母種、必須進(jìn)一步提純復(fù)壯，當(dāng)母種定植一星期左右，菌絲布滿斜面時(shí)，選擇菌絲健壯、生長(zhǎng)旺盛無(wú)老化、無(wú)感染雜茵的母種試管，進(jìn)而轉(zhuǎn)管擴(kuò)大，一般到栽培種，轉(zhuǎn)管不宜超過(guò)5次。

孢子別離得到的母種，必須通過(guò)出菇試驗(yàn)，鑒定為優(yōu)質(zhì)菌種后，才可供生產(chǎn)使用。

一般菌類如蘑菇、平菇、鳳尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢別離法獲得母種。例：銀耳孢子別離按無(wú)菌操作獲取種耳后，懸掛種耳的三角瓶經(jīng)12小時(shí)培養(yǎng)后，瓶底培養(yǎng)基外表就有“孢子印〞。取出種耳，置20℃—25℃溫箱培養(yǎng)2～3天，培養(yǎng)基外表會(huì)出現(xiàn)乳白色透明的糊狀小菌落，就是銀耳的酵母狀分生孢子形成的少量銀耳菌絲。此時(shí)移接入試管斜面培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)滿斜面后，再移接入營(yíng)養(yǎng)豐富，且外表比較枯燥的培養(yǎng)基上。經(jīng)30天左右，菌落長(zhǎng)出白色菌絲。

銀耳的酵母狀分生孢子、菌絲只有與羽毛狀菌絲的子囊菌〔香灰菌絲〕混合培養(yǎng)時(shí)，由后者幫助分解木材及其他一些纖維物質(zhì)，提供營(yíng)養(yǎng)，才能利于銀耳孢子萌發(fā)，菌絲的定植和子實(shí)體的形成。在兩種菌絲交會(huì)時(shí)，先選出兩種純菌絲。

羽毛狀菌絲要純化選育，一般要選取生長(zhǎng)迅速，爬壁力強(qiáng)的試管斜面或種瓶，取先端菌絲，轉(zhuǎn)管移接，置25℃—28℃上培養(yǎng)，重復(fù)轉(zhuǎn)管幾次即可得到優(yōu)良純種銀耳菌絲的特點(diǎn)，菌絲生長(zhǎng)緩慢，擔(dān)孢子也不易萌發(fā)。在進(jìn)行兩菌混合時(shí)，先取經(jīng)8～I(xiàn)O天培養(yǎng)的銀耳菌絲斜面，按無(wú)菌操作方法在該斜面上距銀耳菌絲約0.5厘米處接入一小塊羽毛狀菌絲。置25℃下培養(yǎng)1周即得到混合好的銀耳母種。2．組織別離培養(yǎng)法利用子實(shí)體內(nèi)部組織，進(jìn)行無(wú)性繁殖而獲得母種的簡(jiǎn)便方法，即組織別離。該法操作簡(jiǎn)便，菌絲生長(zhǎng)發(fā)育快，品種特性易保存下來(lái)，特別是雜交育種后，優(yōu)良菌株用組織別離法能使遺傳特性穩(wěn)定下來(lái)。〔1〕子實(shí)體別離種菇要選朵大蓋厚，柄短，八九分成熟的優(yōu)良品種。切去菇兩基部，在無(wú)菌箱內(nèi)以0.1％的升汞水浸幾分鐘，再用無(wú)菌水沖洗并揩干或用75％酒精棉球擦拭菌蓋與菌柄2次，進(jìn)行外表消毒。接種時(shí)，只要將種菇撕開(kāi)，在萌蓋和菌柄交界處或菌褶處，挑取一小塊組織；移接到PDA培養(yǎng)基上。置25℃左右溫度下培養(yǎng)3-5天，就可以看到組織上產(chǎn)生白色絨毛狀菌絲，轉(zhuǎn)管擴(kuò)大即得到菌種。如香菇、平菇等可以用此方法?！?〕菌核別離茯苓、豬苓、雷丸等菌的子實(shí)體不易采集。而常見(jiàn)的是它貯藏營(yíng)養(yǎng)的菌核。用菌核別離，同樣可以獲得菌種。方法是將菌核外表洗凈，用酒精或升汞消毒后，切開(kāi)菌核，取中間組織一小塊，約黃豆大小，接種在PDA培養(yǎng)基斜面上，保溫培養(yǎng)。應(yīng)注意的是，菌核是貯藏器官，大局部是多糖類物質(zhì)，只含有少量的菌絲，因此挑取的組織塊要大一些，如果組織塊過(guò)小，那么不易分出菌種?！?〕菌素別離有一局部子實(shí)體不易找到，也沒(méi)有菌核，可以用菌素進(jìn)行別離。如蜜環(huán)菌、假蜜環(huán)菌。其操作方法是先用酒精或升汞將菌素外表黑色皮層輕輕擦拭2～3次，然后去掉黑色外皮層〔菌鞘〕，抽出白色菌髓局部；用無(wú)菌剪刀將菌髓剪一小段，接種在培養(yǎng)基上，保溫培養(yǎng)，即得該菌菌種。菌素別離要注意：因菌素比較細(xì)小，別離素也比較細(xì)小，別離時(shí)極易污染雜菌，所以要嚴(yán)格操作。3．基內(nèi)菌絲別離培養(yǎng)法利用食用菌生育的基質(zhì)作為別離材料，來(lái)得到純菌種的一種方法，叫基內(nèi)菌絲別離法。

此種別離方法是適宜只有在特定的季節(jié)才出現(xiàn)，而且是朝生暮死，不易采得的子實(shí)體?；鶅?nèi)別離法與組織別離法不同之點(diǎn)是，枯燥的菇木或耳木中的菌絲常呈休眠狀態(tài)。接種后有時(shí)并不立刻恢復(fù)生長(zhǎng)。因此，有必要保存較長(zhǎng)的時(shí)間〔約1個(gè)月〕，以斷定菌絲是否能成活。基內(nèi)菌絲別離法又可分為，材中菌絲別離〔即菇木或耳木別離法〕及土中菌絲別離法等?！?〕材中菌絲別離法就是菇木或耳木別離法，為了減少雜菌的感染，菇〔耳〕木在別離之前，必須進(jìn)行無(wú)菌處理。可以把菇〔耳〕水外表用酒精燈火焰輕輕燒過(guò)，以燒死霉菌的孢子，或再用0.1％的升汞水浸孢幾分鐘，然后用無(wú)菌水沖洗后用無(wú)菌濾紙吸干。接種塊切取時(shí)應(yīng)注意。接種塊必須在該菌菌絲分布的范圍內(nèi)切取。所以，菌絲生長(zhǎng)緩慢的種類應(yīng)淺?。痪N生長(zhǎng)快的種類可以深取。同時(shí)。還應(yīng)根據(jù)菇菌的種類、木材質(zhì)地、菇〔耳〕木粗細(xì)、發(fā)育時(shí)間的長(zhǎng)短來(lái)確定菌絲分布的范圍。然后用一把利刀進(jìn)行切取。接種塊應(yīng)盡量小些，以減少雜菌感染時(shí)機(jī)，提離菌種的純度。接種塊移到培養(yǎng)基上，就應(yīng)該放到適合菌絲生長(zhǎng)的22℃～26℃的溫室或溫箱中培養(yǎng)，使菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)。〔2〕土中菌絲別離食用菌種類很多，許多土生的食用菌；孢子不易萌發(fā)。組織別離也不易成功，用土中菌絲別離獲得純種的方法，叫土中菌絲別離。土中菌絲別離時(shí)要注意，由于土中菌絲體的周圍生活著多種多樣的土壤微生物，因此別離時(shí)必須盡可能避開(kāi)這些微生物的干擾，盡可能批取清潔菌絲素的尖端、不帶雜物的菌絲接種，反復(fù)用無(wú)菌水沖洗，在培養(yǎng)基中參加一些抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物，如40微克／升的鏈霉素或金霉素。如發(fā)現(xiàn)感染細(xì)菌，可以把菌落邊緣的菌絲挑出來(lái)，接種到木屑培養(yǎng)基中。因細(xì)菌沒(méi)有分解木質(zhì)素的能力，因此在木屑培養(yǎng)基中不易擴(kuò)展；只局限于接種處。待菌絲長(zhǎng)出感染區(qū)后，就可以再進(jìn)行擴(kuò)大提純了。

〔3〕子實(shí)體基局部離從瓶栽、袋栽或大床栽培的子實(shí)體基局部離出新菌絲的方法，叫子實(shí)體基局部離，例：袋栽銀耳從出耳早、出耳率離、無(wú)病蟲(chóng)害的栽培室中；選擇生活力最強(qiáng)的幼耳5袋，移到氣候溫和，有散射光的野外場(chǎng)所進(jìn)行后期培養(yǎng)，以增強(qiáng)菌絲體的生活力。經(jīng)培養(yǎng)7～10天后，待子實(shí)體直徑達(dá)4～5厘米時(shí)便可取回，作為別離的母體。再?gòu)闹泻Y選最理想的一朵，用利刀割掉銀耳子實(shí)體，放置于0℃的冰箱或有敵敵畏的容器中過(guò)夜，以便殺死瓶中的害蟲(chóng)。然后用75％酒精或升汞擦洗耳基和袋子外邊的雜質(zhì)，連同接種工具、接種培養(yǎng)基等移進(jìn)無(wú)菌室。經(jīng)滅菌后，用接種刀把袋口上部約15毫米厚的老菌根挖除，并進(jìn)行培養(yǎng)。待袋口露出白色菌絲時(shí)，用接種針挑取一塊半粒米大的白色菌結(jié)體，迅速移入母種試管培養(yǎng)基的中央，輕輕地脫去接種針，塞上棉塞。為了能夠獲得較多的母種，一次接種量要有100—200支試管，以便從中選擇。別離后應(yīng)及時(shí)移入22℃—24℃恒溫箱或溫室中培養(yǎng)。由于培養(yǎng)基內(nèi)水分較多，菌絲恢復(fù)要比耳木別離得快。經(jīng)2-3天后，別離物的邊緣就可看到白色菌絲。每天要至少觀察兩次，以便提純。觀察、提純方法與耳木別離法擔(dān)同。經(jīng)適溫培養(yǎng)10-15天后，當(dāng)接種塊扭結(jié)團(tuán)出現(xiàn)紅、黃色水珠時(shí)，即可擴(kuò)大原種。

〔二〕原種和栽培種的接種培養(yǎng)母種獲得以后，為了滿足菌種生產(chǎn)的需要。應(yīng)選出優(yōu)良、純度高的母種進(jìn)一步擴(kuò)大為原種。原種培養(yǎng)基一般采用棉籽殼、木屑、草類等培養(yǎng)基。瓶裝或袋裝的原種培養(yǎng)基滅菌后，可送入滅過(guò)菌的接種箱內(nèi)，待瓶中的培養(yǎng)基冷至30℃以下，可按照無(wú)菌操作程序進(jìn)行接種。菌種瓶〔袋〕放入培養(yǎng)室時(shí)，要經(jīng)常進(jìn)行檢查，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)雜菌污染，立即取出。培養(yǎng)成的原種，菌絲體必須健壯有力，緊貼瓶壁而不干縮，顏色純粹，具有一定清香味，生活力強(qiáng)，擴(kuò)制成栽培種時(shí)吃料快。栽培種就是將原種進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)成三級(jí)種，它和原種的接種及培養(yǎng)相同。一般香菇、平菇、冬菇、猴頭、木耳、銀耳的栽培種多用鋸木、棉皮作培養(yǎng)基。蘑菇多用糞草做培養(yǎng)料。栽培種要求料塊不脫水干縮。菌絲體健壯有力、顏色純粹，有清香味，無(wú)老化現(xiàn)象，無(wú)雜菌污染，有的種許可有少量原基，接入栽培料后，發(fā)菌快，長(zhǎng)勢(shì)好，生活力強(qiáng)。原種在接栽培種時(shí)，原種瓶口的一層菌絲體應(yīng)挖去不用。〔三〕液體種的簡(jiǎn)單培養(yǎng)目前，用液體深層發(fā)酵法生產(chǎn)菌種，具有生產(chǎn)量大、周期短、菌齡整齊、本錢低廉、接種方便等特點(diǎn)，是實(shí)現(xiàn)食用菌工廠化生產(chǎn)的目標(biāo)。現(xiàn)將液體種培育過(guò)程簡(jiǎn)述于后，供參考。

簡(jiǎn)言之就是將純粹優(yōu)良的菌種，接入液體培養(yǎng)基〔固體培養(yǎng)基不加凝固劑〕，使菌絲繁殖形成大量小菌球，然后將這種培養(yǎng)基拌入木屑或棉籽皮料內(nèi)，制成菌塊、培養(yǎng)其形成子實(shí)體。還可用于制原種、栽培種。

培養(yǎng)液體菌種，可將培養(yǎng)液裝入三角瓶中，約占空瓶的五分之一重量。用搖瓶機(jī)〔也稱搖床〕來(lái)培養(yǎng)。搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式和往復(fù)式兩種，一般多用往復(fù)式。液體培養(yǎng)基可用馬鈴薯汁〔加糖〕，麥芽汁配制，也可用玉米粉、豆餅粉、糖、無(wú)機(jī)鹽等配制?？梢曰旌吓囵B(yǎng)基，因適用于多種食用菌和藥用菌的培養(yǎng)，均有好效果。組分：豆餅粉2％，玉米粉1％，葡萄糖3％，酵母粉0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，碳酸鈣0.2％，pH自然，12℃滅菌半小時(shí)。然后接種培養(yǎng)。

如果生產(chǎn)量較大，在三角瓶的根底上，再逐級(jí)擴(kuò)大種子缸，發(fā)酵罐中進(jìn)行液體深層通氣發(fā)酵，產(chǎn)生大量菌種。但由于生產(chǎn)中要求設(shè)備繁多，技術(shù)性強(qiáng)，我們還應(yīng)創(chuàng)造條件；實(shí)現(xiàn)食用菌栽培的現(xiàn)代化。

〔四〕菌種質(zhì)量的鑒定菌種質(zhì)量鑒定最好的方法是，做出菇試驗(yàn)。但是時(shí)間比較長(zhǎng)。在購(gòu)置菌種時(shí)，或在菌種生產(chǎn)中，如何能知菌絲生長(zhǎng)情況，快速判斷菌種質(zhì)量？我們介紹幾種方法1.肉眼觀察優(yōu)良菌種菌絲濃白，絨狀，粗壯密集，生長(zhǎng)整齊，速度快，香味濃厚。2.優(yōu)良菌種標(biāo)準(zhǔn)可歸納為："純、香、正、壯、潤(rùn)"五個(gè)字。檢查時(shí)，翻開(kāi)瓶塞，從菌種瓶中部取出小塊菌絲體，觀察色澤，聞其氣味，手捏料塊檢