JJF 2023-2023 黃曲霉毒素快速檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范

中華人民共和國國家計量技術(shù)規(guī)黃曲霉毒素快速檢測儀校準(zhǔn)規(guī)5發(fā) 5實黃曲霉毒素快速檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范

歸位:全國物理化學(xué)計量技術(shù)委員會主要起草單位:中國計量科學(xué)研究院參加起草單位:北京市計量檢測科學(xué)研究院國家糧食和物資儲備局科學(xué)研究院本規(guī)范委托全國物理化學(xué)計量技術(shù)委員會負(fù)責(zé)解釋本規(guī)范主要起草人馬康中國計量科學(xué)研究院趙海波北京市計量檢測科學(xué)研究院參加起草人張宜文北京市計量檢測科學(xué)研究院王松雪國家糧食和物資儲備局科學(xué)研究院 引言………………………范圍……………………引用文件………………術(shù)語……………………概述……………………計量特性………………濃度示值誤差………………………測量重復(fù)性…………檢出限………………校準(zhǔn)條件………………環(huán)境條件……………測量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備………………校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法…………………校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工作……………………濃度示值誤差………………………測量重復(fù)性…………檢出限………………校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)…………復(fù)校時間間隔…………

Ⅱ)1)1)1)1)2)2)2)2)2)2)2)2)2)3)3)3)3)4)附錄 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備及使用方

……………

5)附錄B 校準(zhǔn)原始記錄參考格式附錄 校準(zhǔn)證書內(nèi)頁參考格

………………

6)8)附錄 儀器示值誤差測量不確定度評定示

………

9)Ⅰ 本規(guī)范依據(jù)0國家計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則1通用計量術(shù)語及定義2測量不確定度評定與表示》的相關(guān)規(guī)定編寫。本規(guī)范主要參考7食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限量》中黃曲霉毒素的限量要求7糧油檢驗設(shè)備和方法標(biāo)準(zhǔn)適用性驗證結(jié)果評價一般原則本規(guī)范為首次發(fā)布Ⅱ黃曲霉毒素快速檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范圍本規(guī)范適用于基于酶聯(lián)免疫或免疫層析膠體金/熒光)原理定量檢測黃曲霉毒素快速檢測儀的校準(zhǔn)。引用文件本規(guī)范引用了下列文件7食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限7糧油檢驗設(shè)備和方法標(biāo)準(zhǔn)適用性驗證及結(jié)果評價一般原則凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版包括所有的修改單適用于本規(guī)范術(shù)語下列術(shù)語和定義適用于本文件酶聯(lián)免疫分析法采用間接競爭酶標(biāo)原理,將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法膠體金免疫層析法采用競爭抑制免疫層析的原理,樣本在層析過程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆體結(jié)合,進(jìn)行免疫層析的定性和定量檢測方法概述黃曲霉毒素快速檢測儀以下簡稱檢測儀)主要用于測定糧食、飼料、中藥、乳制品等中的黃曲霉毒素含量。其檢測原理分為兩種:一是A法,樣本中的黃曲霉毒素與酶標(biāo)板上的黃曲霉抗原競爭黃曲霉毒素的抗體,用底物顯色后,樣本所對應(yīng)微孔的吸光度減小,吸光度值與樣本中的黃曲霉毒素含量呈負(fù)相關(guān);二是免疫層析膠體金/熒光)法,樣品中的黃曲霉毒素在層析的過程中與膠體金熒光標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,從而抑制抗體和硝酸纖維素膜檢測線上的黃曲霉毒素偶聯(lián)物的結(jié)合,使得檢測線顯色或熒光強度降低,顯色或熒光強度與樣本中的黃曲霉毒素含量相關(guān)。檢測儀由光路系統(tǒng)、圖像傳感器或光電傳感器、試劑包酶聯(lián)免疫試劑盒或免疫層析試紙條/卡、信號處理系統(tǒng)和數(shù)據(jù)顯示系統(tǒng)組成,其結(jié)構(gòu)如圖1所示。1圖1黃曲霉毒素快速檢測儀的結(jié)構(gòu)示意計量特性 濃度示值誤差% 測量重復(fù)性%檢出限不大于注:??技術(shù)指標(biāo)僅作為參考,不作為合格性判定校準(zhǔn)條件環(huán)境條件環(huán)境溫度:℃%%供電電源:,應(yīng)無粉塵、振動及電磁場干擾測量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用國家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)其相對擴展不確定度應(yīng)不大于5%容量瓶和移液器容量瓶符合A級要求,移液器檢定合格甲醇色譜級校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法校準(zhǔn)項目可根據(jù)被校儀器的預(yù)期用途選擇使用校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工作根據(jù)使用說明書,檢查檢測儀功能及試劑包是否正常。使用試劑包進(jìn)行檢測時,按說明書要求升至室溫或在恒溫孵育器中恒溫。按照附錄A要求配制系列校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)2溶液濃度示值誤差依據(jù)使用說明書,將配制濃度為L和L的黃曲霉毒素1標(biāo)準(zhǔn)溶液用試劑包進(jìn)行處理。將處理后的樣本放入被校檢測儀中,讀取儀器的濃度示值,每個濃度重復(fù)試驗7次,按公式)計算檢測儀各濃度校準(zhǔn)點的示值誤差。c =式中c濃度示值誤差ci7次測量結(jié)果的平均值cs標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值測量重復(fù)性n n->i測量重復(fù)性:采用2中濃度為0L黃曲霉毒B1標(biāo)準(zhǔn)溶液的7次測量數(shù)據(jù),按照公)計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏n n->is

式中sr相對標(biāo)準(zhǔn)偏差ci檢測儀各次的測量值c標(biāo)準(zhǔn)溶液7次測量結(jié)果的平均值;n檢出限用被校檢測儀連續(xù)測量空白樣品如甲醇)0次計算測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差按)計算檢測儀的檢出限。+s 式中LOD檢出限 空白樣品0次測量結(jié)果的平均值 0次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在證書中反映校準(zhǔn)證書內(nèi)頁格式見附錄,校準(zhǔn)證書應(yīng)至少應(yīng)包含以下信息標(biāo)題:校準(zhǔn)證書實驗室名稱和地址進(jìn)行校準(zhǔn)的地點如果與實驗室地址不同證書的唯一性標(biāo)識如編號,每頁及總頁數(shù)的標(biāo)識3客戶的名稱和地址被校對象的描述和明確標(biāo)識進(jìn)行校準(zhǔn)的日期,如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)時,應(yīng)說明被校對象的接收日期;校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范的標(biāo)識,包括名稱及代號本次校準(zhǔn)所用測量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說明校準(zhǔn)環(huán)境的描述校準(zhǔn)結(jié)果及其測量不確定度的說明對校準(zhǔn)規(guī)范的偏離的說明校準(zhǔn)證書或校準(zhǔn)報告簽發(fā)人的簽名、職務(wù)或等效標(biāo)識校準(zhǔn)結(jié)果僅對被校對象有效的聲明未經(jīng)實驗室書面批準(zhǔn),不得部分復(fù)制證書的說明復(fù)校時間間隔由于復(fù)校時間時隔的長短是由儀器的使用情況、使用者、儀器本身質(zhì)量等因素所決定的,因此檢測儀的復(fù)校時間間隔由送校單位根據(jù)使用情況確定,建議不超過1年。當(dāng)檢測儀更換了配件及修理后,或?qū)ζ錂z測數(shù)據(jù)有懷疑時,應(yīng)及時校準(zhǔn)。4附錄系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備及使用方法使用國家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋配制的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液建議現(xiàn)用現(xiàn)配。配制用移液器準(zhǔn)確移取表1所示不同體積的國家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW6,至0mL容量瓶中用甲醇稀釋至刻度并搖勻,即可得到不同濃度黃曲霉毒素B1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,1所示。1黃曲霉毒素B1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制濃標(biāo)準(zhǔn)溶液序號取L有證溶液最終定容體配制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度123標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)移液體積的計算配制一定體積的黃曲霉毒素1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,所移取的國家有證黃曲霉毒素1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積i按式)計算: V×10 式中

i=Vi移取的國家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積,;si配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度值V配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液定容體積,;c國家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度5附錄校準(zhǔn)原始記錄參考格式記錄編號 證書編號委托單單位地校準(zhǔn)地儀器型生產(chǎn)廠儀器編儀器量試劑包測量范試劑包批校準(zhǔn)日校準(zhǔn)依環(huán)境溫相對濕校準(zhǔn)核驗校準(zhǔn)用測量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工 是否就緒是 否 濃度示值誤差標(biāo)準(zhǔn)溶液濃儀器示值平均值示值誤差%相對不確定k=)6續(xù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃儀器示值平均值示值誤差%相對不確定k=)測量重復(fù)平均相對標(biāo)準(zhǔn)偏%檢出限次數(shù)12345空白樣測量值次數(shù)6789空白樣測量值平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差檢出限濃度示值誤差的測量不確定度7附錄校準(zhǔn)證書內(nèi)頁參考格式濃度示值誤差標(biāo)準(zhǔn)溶液濃測量平均示值誤差%擴展不確定k=)測量重復(fù)性%8附錄儀器示值誤差測量不確定度評定示例校準(zhǔn)條件2%校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)W,標(biāo)稱值為UL被校準(zhǔn)設(shè)備:黃曲霉毒素快速檢測儀測量方法及測量模型按照附錄A配制濃度為L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,使用檢測儀分別測量相應(yīng)濃度點的示值誤差。測量時應(yīng)參照儀器說明書,采用配套試劑并孵育或恒溫至相應(yīng)溫度。每個標(biāo)準(zhǔn)溶液測定7次,按公式)分別計算儀器各濃度校準(zhǔn)點的示值誤差。測量模型示值誤差的計算公式為c =式中c濃度示值誤差ci7次測量結(jié)果的平均值cs標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值不確定度的計算公式靈敏系數(shù)為:c=1

c=?c

s s由公式)可知,儀器示值誤差的不確定度來源于由測量結(jié)果平均值引入的不確定度和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液引入的不確定度。各輸入量的不確定度之間彼此不相關(guān),根據(jù)不確定度傳播律可以得到公式)和公式。i i s+c

u)

uc2+uc r r儀器示值誤差的不確定度主要來源于由測量結(jié)果平均值引入的不確定度i和由標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度,包括)黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的不確定度u>;)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋過程中可調(diào)移液器取液體積引入的不確定9V1>;)V>℃玻璃膨脹系數(shù)較小,所以由溫度引起的容量瓶的體積引入的不確定度可忽略。不確定度分量的評定各不確定度分量來源及描述見1不確定度分量來源及描不確定度分不確定度來分量描ri)測量結(jié)果平均值引入的不確定測量重復(fù)性引入的不確定標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的不確定度移液器移液體積引入的不確定度uV1i>容量瓶定容體積引入的不確定度uV>測量結(jié)果平均值引入的不確定度由儀器測量重復(fù)性引入的不確定度見2儀器測量結(jié)果的重復(fù)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制ci測量值平均值%1234567儀器測量重復(fù)性引入的不確定度777%%%777標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度2+2+2+式中

有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的相對不確定度uV1i>uV> 0L容量瓶定容體積引入的相對不確定度黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值的不確定度由黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書,黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值的擴展不確定3標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值和擴展不確定標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)擴展不確定度k=2)黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物ucr 移液器移液體積引入的相對不確定度配制濃度為、、3個校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液時L的移液器分別移取了、、L的溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。溫度的變化引入的不確定度忽略不計移液器對應(yīng)移液體積的最大允許誤差分別為8、5,按均勻分布,則由移液器移液體積引入的最大的相對不確定度為11=8%×21=5%×31= %%×容量瓶定容體積引入的相對不確定度容量瓶校準(zhǔn)對體積影響0L容量瓶最大允差為2。按三角形分布,此項標(biāo)準(zhǔn)不確定度為8溫度對體積影響實驗室溫控在23℃,實驗室溫度與容量瓶校準(zhǔn)時的溫度有偏差,以3℃計。容量瓶材質(zhì)玻璃膨脹系數(shù)與甲醇膨脹系數(shù)相比很小可忽略不計。甲醇膨脹系數(shù)2℃1,因此產(chǎn)生的體積變化為±)6mL。假定溫度變化為均勻分布,標(biāo)準(zhǔn)不確定度為/1mL。則由容量瓶定容體積引入的相對不確定度為:u