湖北省咸寧市五校2024屆高考生物全真模擬密押卷含解析

湖北省咸寧市五校2024屆高考生物全真模擬密押卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持，各器官之間功能的協(xié)調，以及對外界刺激作出的反應，都是通過機體復雜而精巧的調節(jié)實現(xiàn)的。下列相關敘述中，正確的是（）A．神經元之間傳遞興奮依靠突觸，突觸后膜一定是神經元的細胞膜B．下丘腦有體溫調節(jié)中樞、水平衡的調節(jié)中樞，還與身體平衡的維持有關C．性腺和垂體的細胞表面不都存在能夠接受對方分泌激素的受體D．在吞噬細胞、B細胞、T細胞、漿細胞、記憶細胞中，能特異性識別抗原的有3種2．甲圖表示反應物濃度對酶促反應速率的影響；乙圖表示將A、B兩種物質混合，再在T1時加入某種酶后，A、B兩種物質的濃度變化曲線。實驗均在最適溫度和最適pH條件下完成，下列敘述錯誤的是（）A．甲圖中反應速率達到最大后，限制酶促反應速率的主要因素是酶的數(shù)量B．若乙圖中的物質A是淀粉，則B可以是麥芽糖，該酶可以是唾液淀粉酶C．乙圖中T2時刻后限制酶促反應速率的主要因素是酶的活性D．甲、乙兩圖所示的實驗中，溫度和pH都屬于無關變量3．研究發(fā)現(xiàn)，與正常女性相比，Turner綜合征患者(女性)易患血友病(伴Ⅹ染色體隱性遺傳病)，據(jù)此可推測Turner綜合征患者體內可能（）A．多一條X染色體B．少一條X染色體C．血小板凝集成團D．紅細胞凝集成團4．下列有關實驗操作流程的敘述中，正確的是（）A．腐乳制作：豆腐長毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制B．制作植物細胞有絲分裂臨時裝片：解離→染色→漂洗→制片C．血球計數(shù)板的使用：蓋蓋玻片→滴培養(yǎng)液→等待沉降→鏡檢計數(shù)→刷洗D．果酒果醋制作：挑選葡萄→沖洗→榨汁→果醋發(fā)酵→果醋→酒精發(fā)酵→果酒5．下列關于各種生物細胞參與物質運輸?shù)臄⑹稣_的是（）A．將動物細胞放入清水中，細胞都會吸水脹破B．細胞內外物質濃度差的維持主要靠被動轉運C．隨著氧氣濃度的增大，細胞主動轉運的速率可能下降D．破壞細胞膜上載體會阻礙氧氣進入細胞6．下列關于物質出入細胞方式的敘述，正確的是（）A．胞吐過程一定會產生分泌泡與質膜的融合B．溫度對動物細胞吸收鉀離子不會造成影響C．加入蛋白質變性劑會提高鉀離子吸收速率D．葡萄糖擴散進入紅細胞的轉運方向由載體蛋白決定二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）尿生成量與機體水鹽平衡有關，抗利尿激素（ADH）是調節(jié)機體水鹽平衡的重要激素?；卮鹨韵掠嘘P問題。（1）抗利尿激素在___________（器官）合成，能引起抗利尿激素分泌量增加的有效刺激是____________。（2）有研究表明，適量的乙醇會抑制ADH的分泌，某實驗小組以雌性家兔為實驗對象對該研究結果進行驗證，實驗步驟如下：①將健康的生理狀態(tài)相同的雌性家兔均分為A、B兩組。②A組注射適量的乙醇溶液，B組注射______________。③一段時間后測定A、B兩組雌性家兔的________________。預測實驗結果為_______________。（3）實驗小組刺激雌性家兔的迷走神經，發(fā)現(xiàn)雌性家兔的尿量明顯增加，說明參與尿量調節(jié)的信息分子除了抗利尿激素外還有__________________，機體調節(jié)尿量的方式是_________________。8．（10分）一般信息傳遞有三個基本環(huán)節(jié)：信息產生（信源）、信息傳輸（信道）、信息接收（信宿）。任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都會導致信息傳遞失敗。（1）尿崩癥患者水分調節(jié)過程中信息傳遞出現(xiàn)問題，臨床上表現(xiàn)為排出大量低滲尿液?？煞譃閮深惽闆r：一類是信源環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，發(fā)病原因是由于_____________分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一類是信宿環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，病因是_____________，而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用。（2）生態(tài)系統(tǒng)中有些昆蟲的雌性個體能釋放性外激素吸引雄性個體，這類信息屬于_____________信息。有科學家發(fā)現(xiàn)，如果將雄性昆蟲的觸角切除，兩性個體間不能再通過這種方式傳播信息，這屬于破壞了信息傳遞的_____________環(huán)節(jié)。農林生產中可以利用生態(tài)系統(tǒng)信息傳遞的作用來防治害蟲，例如人們利用性外激素誘殺雄蟲，以達到防治害蟲的效果。請分析其中的生物學原理__________________________。9．（10分）圖甲是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列。（l）圖中選擇培養(yǎng)基應以尿素為唯一_____________________；鑒別培養(yǎng)基還需添加_________________作指示劑，產脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成_________________色。（2）在4個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為115的土壤樣品溶液1．lmL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)的數(shù)值分別為13、156、178和191。該過程采取的接種方法是_________________，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為_________________個；與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較少，其原因是____。（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了11個核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉錄的mRNA中，終止密碼為_________________，突變基因表達的蛋白質含_____個氨基酸。10．（10分）近年來煙草葉綠體基因工程在提高光合效率、抗性和品質等方面取得了研究進展。下圖是將擬南芥果糖1，6-二磷酸醛縮酶基因（簡稱“醛縮酶基因”）轉人煙草葉綠體基因組的部分流程示意圖，請據(jù)圖同答下列問題：（1）在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是_______圖1中，利用PCR技術擴增擬南芥醛縮酶基因時，應選用的引物是_______。（2）圖2重組質粒中未標注出的必需元件還有____，構建該重組質料用的限制性核酸內切酶有_______。（3）將擬南芥醛縮酶基因導人煙草葉綠體基因組時，一般將含有目的基因的質粒包裹在金粉上，通過轟擊進入葉綠體中，這種方法稱為_______，葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū)，應將目的基因導入葉綠體基因組中的基因間隔區(qū)，其原因是____。（4）檢測目的基因是否成功導入受體細胞的方法是_______，該項技術用到的基因探針的制作方法是：在____上用放射性同位素等做標記。11．（15分）正常細胞不能合成干擾素，但含有干擾素基因。我國科學家釆用基因工程技術生產干擾素a-2b已實現(xiàn)量產。具體做法是將產生干擾素的人白細胞的mRNA分離，反轉錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質粒PBR322和干擾素基因進行雙酶切，用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導入大腸桿菌，在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)，檢測干擾素的表達量，選出高效表達的工程菌。請回答：（1）在分化誘導因子作用下，正常細胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實質是________________________________（2）據(jù)下圖分析，構建重組載體DNA分子時，可以選用_____兩種限制酶對質粒pBR322和干擾素基因進行雙酶切，目的是既能保證目的基因和質粒正向連接，又能防止_____________________________(答兩點)。（3）將重組質粒導入大腸桿菌中，然后將細菌涂布到含_____的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質粒PBR322或重組質粒的細菌單菌落；再從每一個單菌落中挑取部分細菌轉涂到含有_____的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質粒的細菌，原因是_____（4）干擾素在體外保存非常困難，如果將其分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸，在-70°C條件下可以保存半年。實現(xiàn)這一轉變需要直接對_____進行修飾或改造，這屬于蛋白質工程的范疇。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

內環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指在正常生理情況下機體內環(huán)境的各種成分和理化性質只在很小的范圍內發(fā)生變動，不是處于固定不變的靜止狀態(tài)，而是處于動態(tài)平衡狀態(tài)。正常機體通過調節(jié)作用，使各個器官、系統(tǒng)協(xié)調活動，共同維持內環(huán)境的相對穩(wěn)定狀態(tài)?！驹斀狻緼、在特定的情況下，突觸釋放的神經遞質，也能使肌肉收縮和某些腺體分泌，故突觸后膜不一定是神經元的細胞膜，A錯誤；B、下丘腦有體溫調節(jié)中樞、水平衡的調節(jié)中樞，還與生物節(jié)律等控制有關，身體平衡與小腦有關，B錯誤；C、性激素的分泌存在分級調節(jié)和反饋調節(jié)，性腺分泌的性激素可反饋作用于垂體，垂體分泌的促性腺激素作用于性腺，C錯誤；D、在吞噬細胞、B細胞、T細胞、漿細胞、記憶細胞中，能特異性識別抗原的是B細胞、T細胞以及記憶細胞，D正確。故選D。2、C【解析】

影響酶促反應速率的因素有：溫度、pH、酶濃度、底物濃度等。甲圖中，反應速率隨反應物濃度增加而增加，當反應速率達到一定值時，此時再增加反應物濃度，反應速率不再增加，是因為起催化作用的酶已經飽和。乙圖中，隨著反應進行，濃度不斷增加的是生成物即B，濃度不斷減少的是反應物即A，T1時刻反應開始，T2時刻反應速度變緩，A反應物的含量趨于0，直到最后生成物和反應物的濃度不再變化，此時限制酶促反應的因素為底物濃度?！驹斀狻緼、甲圖中反應速率達到最大后，此時再增加反應物濃度，反應速率不再增加，限制酶促反應速率的主要因素是酶的數(shù)量，A正確；B、若乙圖中的物質A是淀粉，則B可以是麥芽糖，該圖表示的反應為A（淀粉）B（麥芽糖），該酶可以是唾液淀粉酶，B正確；C、乙圖中T2時刻后限制酶促反應速率的主要因素是底物濃度，C錯誤；D、甲、乙兩圖所示的實驗探究均在最適溫度和最適pH條件下完成，溫度和pH都屬于無關變量，D正確。故選C。【點睛】本題以曲線圖為載體，考查了影響酶促反應因素的知識，要求考生具有一定的曲線分析能力和理解判斷能力。3、B【解析】

染色體數(shù)目變異的基本類型：（1）細胞內的個別染色體增加或減少，如21三體綜合征，患者比正常人多了一條21號染色體。（2）細胞內的染色體數(shù)目以染色體組的形式增加或減少?！驹斀狻垦巡榘閄隱性遺傳病，正常情況下，女性患者需要滿足兩條X染色體上都是隱性基因時才患病，而Turner綜合征的女性患者更容易患血友病，說明很有可能是少一條X染色體，B正確，故選B。4、A【解析】

酵母菌計數(shù)方法-抽樣檢測法：先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待細菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內的酵母菌數(shù)量。再以此為根據(jù)估算試管中的酵母菌總數(shù)。腐乳制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉、加鹽腌制、加鹵湯裝瓶、密封腌制。讓豆腐上長出毛霉的主要條件是溫度保持在15～18℃；加鹽腌制時，為防止污染將長滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，大約8d以后，豆腐因水分大量被析出而變硬；鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右?！驹斀狻緼、腐乳制作的流程：豆腐長毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制，A正確；B、制作植物細胞有絲分裂臨時裝片的流程：解離→漂洗→染色→制片，B錯誤；C、血球計數(shù)板的使用：蓋蓋玻片→滴培養(yǎng)液→等待沉降→鏡檢計數(shù)→清洗，C錯誤；D、果酒果醋制作流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒→果醋發(fā)酵→果醋，D錯誤。故選A。5、C【解析】

小分子物質跨膜運輸?shù)姆绞胶吞攸c：名稱運輸方向載體能量實例自由擴散高濃度→低濃度不需不需水，CO2，O2，甘油，苯、酒精等協(xié)助擴散高濃度→低濃度需要不需紅細胞吸收葡萄糖主動運輸?shù)蜐舛取邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細胞吸收氨基酸、葡萄糖、K+、Na+等【詳解】A、變形蟲生活在水環(huán)境中，將其放入水中會吸水，但其有排水機制，不會吸水過多脹破細胞，A錯誤；B、細胞內外物質濃度差的維持主要靠主動轉運，B錯誤；C、乳酸菌是厭氧型生物，主動轉運需要消耗能量，所以隨著氧氣濃度的增大，細胞主動轉運的速率會下降，C正確；D、氧氣運輸方式是簡單擴散，不需要載體，D錯誤。故選C。6、A【解析】

（1）大分子物質進出細胞的方式一般是胞吞、胞吐；（2）小分子物質跨膜運輸?shù)姆绞饺缦拢鹤杂蓴U散協(xié)助擴散主動轉運運輸方向順濃度梯度

高濃度→低濃度順濃度梯度

高濃度→低濃度逆濃度梯度

低濃度→高濃度載體不需要需要需要能量不消耗不消耗消耗舉例O2、CO2、H2O、N2

甘油、乙醇、苯、尿素葡萄糖進入紅細胞Na+、K+、Ca2+等離子；

小腸吸收葡萄糖、氨基酸【詳解】A、胞吐時物質會被一部分質膜包起，然后這一部分質膜與整個質膜脫離，裹著該物質運到細胞的外側，故胞吐過程一定會產生分泌泡與質膜的融合，A正確；B、細胞吸收鉀離子是主動轉運，需要載體蛋白和能量，溫度影響膜的流動性和酶的活性，對主動轉運方式會造成影響，B錯誤；C、鉀離子吸收是主動轉運，離子的跨膜運輸需要載體蛋白，因此加入蛋白質變性劑會降低離子吸收的速率，C錯誤；D、葡萄糖進入紅細胞是易化擴散，而不是擴散，D錯誤。故選A?！军c睛】掌握物質進出細胞的方式及實例是解答本題的關鍵。二、綜合題：本大題共4小題7、下丘腦細胞外液滲透壓升高等量的生理鹽水尿量A組尿量比B組多神經遞質神經--體液調節(jié)【解析】

水鹽平衡的調節(jié)。1．體內水少或吃的食物過咸時→細胞外液滲透壓升高→下丘腦感受器受到刺激→垂體釋放抗利尿激素多→腎小管、集合管重吸收增加→尿量減少，同時大腦皮層產生渴覺（飲水）；2．體內水多→細胞外液滲透壓降低→下丘腦感受器受到刺激→垂體釋放抗利尿激素少→腎小管、集合管重吸收減少→尿量增加?！驹斀狻浚?）抗利尿激素是下丘腦神經分泌細胞合成的，通過垂體釋放的激素，能促進腎小管、集合管對水分的重吸收，從而使細胞外液滲透壓下降，顯然細胞外液滲透壓升高能引起抗利尿激素分泌量增加。（2）實驗目的是驗證適量的乙醇會抑制ADH的分泌，據(jù)此可知實驗中的自變量是有、無乙醇刺激，因變量是抗利尿激素的分泌量的變化，也可檢測抗利尿激素的作用效果，即尿量變化，據(jù)此實驗步驟為：①分組編號：將健康的生理狀態(tài)相同的雌性家兔均分為A、B兩組。②給與不同處理：A組（實驗組）注射適量的乙醇溶液，B組（對照組）注射等量的生理鹽水。③一段時間后測定A、B兩組雌性家兔的尿量變化。由于使用乙醇后，抑制了抗利尿激素分泌，則A組家兔體內抗利尿激素減少，導致尿量增多，故實驗結果為A組家兔尿量對多于B組，則能得出適量的乙醇會抑制ADH的分泌的結論。（3）實驗小組刺激雌性家兔的迷走神經，發(fā)現(xiàn)雌性家兔的尿量明顯增加，說明參與尿量調節(jié)為神經調節(jié)--體液調節(jié)，其中涉及的信息分子除了抗利尿激素外還有神經遞質，即機體調節(jié)尿量的方式是神經--體液調節(jié)?！军c睛】熟知水鹽平衡調節(jié)的過程是解答本題的關鍵！掌握抗利尿激素的合成、釋放部位以及作用效果是解答本題的另一關鍵！8、下丘腦腎臟相應細胞表而缺乏受體（腎臟相應細胞表而受體對抗利尿激素不敏感）化學信息接收（信宿）通過大量誘殺害蟲的雄性個體，破壞害蟲種群正常的性別比例，使很多雌性個體不能完成交配，降低出生率，從而使該種害蟲的種群密度明顯降低，以達到防治害蟲的效果【解析】

1、生態(tài)系統(tǒng)中信息的類型（1）物理信息：生態(tài)系統(tǒng)中的光、聲、顏色、溫度、濕度、磁力等，通過物理過程傳遞的信息。（2）化學信息：生物在生命活動過程中，產生的一些可以傳遞信息的化學物質。（3）行為信息：是指某些動物通過某些特殊行為，在同種或異種生物間傳遞的某種信息。2、信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用（1）個體：生命活動的正常進行，離不開信息的作用。（2）種群：生物種群的繁衍，離不開信息傳遞（3）群落和生態(tài)系統(tǒng)：能調節(jié)生物的種間關系，維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。【詳解】（1）尿崩癥患者水分調節(jié)過程中信息傳遞出現(xiàn)問題，可分為兩類情況：一類是信源環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，發(fā)病原因是由于下丘腦分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一類是信宿環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，腎臟相應細胞表而缺乏受體（腎臟相應細胞表而受體對抗利尿激素不敏感），而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用。（2）生態(tài)系統(tǒng)中有些昆蟲的雌性個體能釋放性外激素吸引雄性個體，這類信息屬于化學信息。如果將雄性昆蟲的觸角切除，兩性個體間不能再通過這種方式傳播信息，這屬于破壞了信息傳遞的信息接收環(huán)節(jié)。農林生產中通過大量誘殺害蟲的雄性個體，破壞害蟲種群正常的性別比例，使很多雌性個體不能完成交配，降低出生率，從而使該種害蟲的種群密度明顯降低，以達到防治害蟲的效果?！军c睛】本題考查個體和生態(tài)系統(tǒng)層次信息傳遞相關知識點，掌握相關知識結合題意答題。9、氮源酚紅紅稀釋涂布平板法由于兩個或多個細菌連在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落UGA95【解析】

1、鑒定分解尿素的細菌：細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠產生脲酶，并分解尿素。2、mRNA是以DNA的一條鏈為模板轉錄形成的，翻譯過程中，mRNA中每3個堿基決定一個氨基酸，所以經翻譯合成的蛋白質分子中氨基酸的數(shù)目是mRNA堿基數(shù)目的1/3，是DNA（基因）中堿基數(shù)目的1/6。即DNA（或基因）中堿基數(shù)：mRNA上堿基數(shù)：氨基酸個數(shù)=6：3：1。【詳解】（1）脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被脲酶分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，從而使酚紅指示劑變紅。（2）用于計數(shù)細菌菌落數(shù)的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)應介于31~311之間，故選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應的應該是每毫升菌液中的細菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為（156+178+191）÷3÷1.1×115=1.75×118。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，所以用此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較少。（3）密碼子是由三個相鄰的堿基組成，271個堿基和后面2個堿基一起共構成91個密碼子，插入的11個核苷酸和后面2個堿基一起共構成4個密碼子，后面是UGA，為終止密碼子，表示翻譯結束，所以表達的蛋白質含有95個氨基酸?！军c睛】本題考查微生物的分離和轉錄、翻譯的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查。10、加熱至90~95℃引物甲、引物丙復制原點HindⅢ和BclI基因槍法避免對葉綠體自身的基因組的表達造成影響DNA分子雜交技術含有目的基因的DNA單鏈片段（或“與目的基因互補的RNA單鏈片段”）【解析】

（1）目的基因的獲取的方法有：從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有：農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法昰：顯微注射法；將目的基因導入微生物絀胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質—抗原-抗體雜交技術個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在體外利用PCR技術擴增目的基因時，利用高溫條件使模板DNA解鏈為單鏈，即加熱至90~95℃條件下使模板DNA解旋，圖1中，基因中兩條鏈是反向平行的，故利用PCR技術擴增目的基因時，應該選基因上下游、方向相反的一對引物，故所選的引物是引物甲、引物丙。（2）重組質粒應包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點等，圖2重組質粒中未標注出的必需元件還有復制原點，由圖2可知，BamHI會破壞標記基因，結合圖1目的基因兩端的限制酶切點可判斷構建該重組質粒用的限制性核酸內切酶應選擇HindIII和BclI。（3）將目的基因導入煙草葉綠體基因組時，一般將含有目的基因的質粒包裹在金粉上，通過轟擊進入葉綠體中，這種方法稱為基因槍法。葉綠體基因組中存在基因區(qū)和基因間隔區(qū)，為避免對葉綠體自身的基因組的表達造成影響，應將目的基因導入葉綠體基因組中的基因間隔區(qū)。（4）檢測目的基因是否成功導入受體細胞的方法是DNA分子雜交技術，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標記，以此作為探針。