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課時(shí)分層作業(yè)(十一)酵母細(xì)胞的固定化(建議用時(shí):40分鐘)題組一固定化酶1.下圖所示的固定化方式中,適宜固定化酶的是()A.①②③ B.①②C.②③ D.①③D[固定化酶適宜用化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法。]2.下列有關(guān)利用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的說(shuō)法不正確的是()A.葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成的是果糖B.從固定化酶反應(yīng)柱下端流出的只有果糖C.高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管疾病,對(duì)人類的健康更有益D.酶溶解于葡萄糖溶液后,可從糖漿中回收B[用固定化酶生產(chǎn)高果糖漿過(guò)程中,反應(yīng)柱下端的篩板不允許固定化酶顆粒通過(guò),但是不影響反應(yīng)物和產(chǎn)物的通過(guò),因此下端流出的既有果糖,又有沒(méi)反應(yīng)完的葡萄糖。]3.關(guān)于固定化酶中酶的說(shuō)法,正確的是()A.酶的種類多樣,可催化一系列的酶促反應(yīng)B.酶被固定在不溶于水的載體上,可反復(fù)利用C.酶作為催化劑,反應(yīng)前后結(jié)構(gòu)不改變,所以固定化酶可永遠(yuǎn)利用下去D.固定化酶由于被固定在載體上,所以喪失了酶的高效性和專一性特點(diǎn)B[固定化酶不能催化一系列酶促反應(yīng)的進(jìn)行;固定化酶被固定在不溶于水的載體上,可以反復(fù)利用,但是隨著利用次數(shù)的增加,受到外界因素的影響,其活性會(huì)逐漸降低;固定化酶具有高效性和專一性的特點(diǎn)。]題組二固定化細(xì)胞4.下列關(guān)于固定化技術(shù)的敘述,不正確的是()A.從操作角度來(lái)考慮,固定化細(xì)胞比固定化酶更容易B.固定化細(xì)胞比固定化酶對(duì)酶活性影響更小C.固定化細(xì)胞固定的是一種酶D.將微生物的發(fā)酵過(guò)程變成連續(xù)的酶反應(yīng)應(yīng)選擇固定化細(xì)胞C[在應(yīng)用操作過(guò)程中,固定化細(xì)胞固定的是一系列酶,比固定化酶更容易、更便捷,對(duì)酶活性影響更小,可使發(fā)酵過(guò)程變成連續(xù)反應(yīng)過(guò)程。]5.下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述,錯(cuò)誤的是()A.固定化酶可以實(shí)現(xiàn)對(duì)酶的重復(fù)利用B.溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素C.固定化細(xì)胞中的酶可催化一系列的化學(xué)反應(yīng)D.利用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的方法是包埋法B[固定化酶可以實(shí)現(xiàn)對(duì)酶的重復(fù)利用;固定化酶可以與反應(yīng)物充分接觸,因此固定化酶應(yīng)用過(guò)程中不存在溶解氧交換受阻;固定化細(xì)胞固定了一系列酶,因此其中的酶可催化一系列的化學(xué)反應(yīng);利用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的方法是包埋法。]6.在制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中,CaCl2溶液的作用是()A.用于調(diào)節(jié)溶液pHB.用于進(jìn)行離子交換C.用于膠體聚沉D.用于為酵母菌提供Ca2+C[海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質(zhì)溶液的作用下,發(fā)生聚沉,形成凝膠珠,其作用機(jī)理是由于鹽離子的電荷與膠體微粒電荷相互吸引,形成更大的膠體顆粒,類似于人體紅細(xì)胞與抗凝集素之間的凝集反應(yīng)。]7.制備好的凝膠珠是否符合應(yīng)用要求,常用的檢測(cè)方法有()①擠壓法②摔打法③觀察法④培養(yǎng)法A.①②④ B.①③④C.②③④ D.①②③D[檢測(cè)凝膠珠是否合格,經(jīng)常使用下列檢測(cè)方法:一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不容易破裂,沒(méi)有液體流出,就表明凝膠珠制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也能表明制備的凝膠珠是成功的。還可以通過(guò)觀察凝膠珠的顏色和形狀來(lái)判斷。]8.下列有關(guān)固定化酵母細(xì)胞及使用過(guò)程中,錯(cuò)誤的是()A.干酵母活化的時(shí)間大約為1小時(shí)B.將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已活化的酵母細(xì)胞C.檢測(cè)是否有酒精發(fā)酵的有效指標(biāo)之一為是否有氣泡發(fā)生D.將海藻酸鈉與酵母菌的混合液緩緩滴加到氯化鈣溶液中,即形成固定化細(xì)胞顆粒C[檢測(cè)是否有酒精發(fā)酵的有效指標(biāo)之一是聞聞是否有酒味,因?yàn)榻湍妇醒鹾粑蜔o(wú)氧呼吸均可產(chǎn)生氣體——CO2。]9.某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行固定化酵母細(xì)胞的制備,并開(kāi)展游離酵母和固定化酵母發(fā)酵產(chǎn)酒酒精度的比較,結(jié)果如下表。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:產(chǎn)酒酒精度的比較時(shí)間(d)024681012游離酵母01.02.13.23.94.24.6固定化酵母02.54.25.05.46.06.4(1)制作凝膠珠的實(shí)驗(yàn)步驟是:酵母細(xì)胞的活化→__________________→配制海藻酸鈉溶液→____________________→固定化酵母細(xì)胞。(2)影響實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟是_________________________,此步的操作應(yīng)采用__________________________。(3)鈣離子的作用是使膠體聚沉,海藻酸鹽起______________________的作用。(4)該小組將制備好的固定化酵母與游離酵母分別放在一定的條件下發(fā)酵,定時(shí)記錄發(fā)酵液中酒精度的變化。①實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的“在一定的條件下發(fā)酵”的條件是______________,要求條件相同是為了確保______________________。②由表可知,固定化酵母和游離酵母發(fā)酵都能產(chǎn)生酒精,但固定化酵母在發(fā)酵前期的延遲期的時(shí)間比游離酵母發(fā)酵前期的延遲期的時(shí)間要________。[解析]制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟為:酵母細(xì)胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞;該實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是配制海藻酸鈉溶液。海藻酸鹽起載體的作用,用于包埋酵母細(xì)胞。酵母菌酒精發(fā)酵過(guò)程是細(xì)胞內(nèi)酶的催化過(guò)程,需要在適宜的溫度、pH等條件下進(jìn)行,兩組實(shí)驗(yàn)的條件相同,才能夠確保無(wú)關(guān)變量相同,且遵循單一變量原則。由表可知,在12d的發(fā)酵時(shí)間里,固定化酵母發(fā)酵產(chǎn)酒酒精度從0度到6.4度,游離酵母發(fā)酵產(chǎn)酒酒精度從0度到4.6度,而且固定化酵母發(fā)酵產(chǎn)酒酒精度在第4d即達(dá)到4.2度,表明其延遲期短。[答案](1)配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合(2)配制海藻酸鈉溶液小火或間斷加熱(3)包埋酵母細(xì)胞(或載體)(4)①適宜的溫度、pH等單一變量②短10.如圖表示某同學(xué)進(jìn)行的澄清蘋(píng)果汁生產(chǎn)實(shí)驗(yàn),下列相關(guān)敘述正確的是()A.實(shí)驗(yàn)中所用的固定化果膠酶由海藻酸鈉直接包埋獲得B.為防止雜菌污染,圖示裝置制作完畢后應(yīng)瞬間高溫滅菌C.通過(guò)控制閥調(diào)節(jié)蘋(píng)果汁流出的速率,保證反應(yīng)充分進(jìn)行D.固定化果膠酶不可重復(fù)使用,每次生產(chǎn)前應(yīng)重新填裝反應(yīng)柱C[酶的固定化一般不用包埋法,A錯(cuò)誤;瞬間高溫滅菌會(huì)使固定化酶失去活性,B錯(cuò)誤;加入蘋(píng)果汁后可關(guān)閉控制閥一段時(shí)間,再通過(guò)減慢蘋(píng)果汁流出的速率,讓底物與酶充分接觸,使反應(yīng)充分進(jìn)行,C正確;固定化果膠酶可重復(fù)使用,D錯(cuò)誤。]11.下列關(guān)于配制海藻酸鈉溶液的措施,正確的是()A.用酒精燈加熱,加熱時(shí)不能攪拌B.由于海藻酸鈉溶解速度快,所以不用加熱C.海藻酸鈉在水中溶解的速度慢,需用酒精噴燈加熱D.采用小火或間斷加熱,促進(jìn)溶解,防止發(fā)生焦糊D[海藻酸鈉采用小火或間斷加熱,需攪拌防止焦糊;酒精噴燈產(chǎn)生高溫火焰,主要用于需強(qiáng)熱的實(shí)驗(yàn),此實(shí)驗(yàn)中不使用。]12.下列屬于固定化酶應(yīng)用特點(diǎn)的是()①可以被反復(fù)使用②有利于酶與產(chǎn)物分離③能自由出入載體④一種固定化酶只催化一種酶促反應(yīng)⑤酶多用包埋法固定化A.①②③ B.③⑤C.①②④ D.①②⑤C[酶被固定后可與產(chǎn)品分離,故可反復(fù)使用,但不能自由出入依附的載體。通常情況下,固定化酶種類單一,所以不能催化一系列酶促反應(yīng)。]13.某校學(xué)生嘗試用瓊脂作載體,用包埋法固定α-淀粉酶來(lái)探究固定化酶的催化效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表(假設(shè)加入試管中的固定化淀粉酶量與普通α-淀粉酶量相同)。實(shí)驗(yàn)表明1號(hào)試管中淀粉未被水解,你認(rèn)為最可能的原因是()比較項(xiàng)目1號(hào)試管2號(hào)試管固定化淀粉酶√普通α-淀粉酶√淀粉溶液√√60℃保溫5分鐘,取出冷卻至室溫,滴加碘液現(xiàn)象變藍(lán)不變藍(lán)A.實(shí)驗(yàn)中的溫度過(guò)高,導(dǎo)致固定化淀粉酶失去活性B.淀粉是大分子物質(zhì),難以通過(guò)瓊脂與淀粉酶接觸C.水浴保溫時(shí)間過(guò)短,固定化淀粉酶未將淀粉水解D.實(shí)驗(yàn)程序出現(xiàn)錯(cuò)誤,試管中應(yīng)先加入碘液后保溫B[由于固定化酶是用包埋法固定的,而淀粉是大分子物質(zhì),它不能通過(guò)瓊脂與酶充分接觸,導(dǎo)致淀粉不能被水解而遇碘液呈現(xiàn)藍(lán)色。]14.在20世紀(jì)50年代,酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域,到了70年代又發(fā)明了固定化酶與固定化細(xì)胞技術(shù)。(1)在實(shí)際生產(chǎn)中,固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是___________________。與固定化酶技術(shù)相比,固定化細(xì)胞技術(shù)固定的是___________________________________________________________________。(2)制備固定化酵母細(xì)胞,常用的包埋材料是________,應(yīng)使用下圖中方法[]________(填序號(hào)及名稱),而制備固定化酶則不宜用此方法,原因是___________________________________________________________________。①②③(3)制作固定化酵母細(xì)胞時(shí),混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和________溶液中形成凝膠珠。觀察形成的凝膠珠的顏色和形狀,如果顏色過(guò)淺,說(shuō)明海藻酸鈉溶液濃度__________,形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目________。如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,說(shuō)明_______________________。[解析](1)將酶固定化后,能使酶在催化反應(yīng)之后并不進(jìn)入產(chǎn)物溶液,可反復(fù)使用;將細(xì)胞固定化后,可以將一種細(xì)胞內(nèi)的多種酶同時(shí)進(jìn)行固定。(2)海藻酸鈉不能參與化學(xué)反應(yīng),在高溫時(shí)容易溶化,溫度降低時(shí)又可以形成多孔性固體顆粒,是包埋酵母菌的好材料。圖示①為化學(xué)結(jié)合法,②為吸附法,③為包埋法。固定化酶適宜用化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法;固定化酵母細(xì)胞適宜用包埋法。(3)凝膠珠是用溶化后冷卻的海藻酸鈉與酵母菌混合后在CaCl2溶液中形成的。如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、呈白色,說(shuō)明海藻酸鈉溶液的濃度偏低,形成的凝膠珠所包埋的酵母菌細(xì)胞的數(shù)目少,影響實(shí)驗(yàn)效果;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,說(shuō)明海藻酸鈉溶液的濃度偏高,制作失敗,需要再嘗試。[答案](1)酶既能與反應(yīng)物接觸,又容易與產(chǎn)物分離,固定在載體上的酶能反復(fù)使用多酶系統(tǒng)(或一系列酶、多種酶)(2)海藻酸鈉[③]包埋法酶分子很小,容易從包埋材料中漏出(3)CaCl2偏低較少海藻酸鈉溶液濃度偏高,制作失敗不能正確辨析固定化酶和固定化細(xì)胞15.相對(duì)于固定化酶,下列不屬于固定化細(xì)胞制備和應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)的是()A.制備過(guò)程中無(wú)需進(jìn)行酶的分離和純化,減少酶的活力損失 B.可以利用細(xì)胞中所含的復(fù)合酶系完成一系列的催化反應(yīng)
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