基因工程復(fù)習(xí)

1、用酚—氯仿抽提時，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少許異戊醇，這是因為異戊醇可以防止氣泡；分別時要運用金屬離子螯合劑，如和檸檬酸鈉等，其目的是抑制了。2、根據(jù)質(zhì)?？截悢?shù)的多少，質(zhì)?？梢苑譃閲?yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒。和松弛型質(zhì)粒。3、λ噬菌體在感染大腸桿菌以后，可以進(jìn)入也可以進(jìn)入。假如其基因組通過專一性重組整合到宿主染色體中，則其進(jìn)入融源狀態(tài)。；它也可以選擇進(jìn)入融菌狀態(tài)，大量復(fù)制并組裝子代噬菌體顆粒。4、與一般的的不同之處在于2’和3’雙脫氧，它們可以在聚合酶的作用下，通過其5’摻入到正在增長的鏈中，導(dǎo)致鏈延長反應(yīng)終止。5、聚合酶是聚合酶Ⅰ經(jīng)蛋白酶裂解而從全酶中除去5’—3’外切酶活性的多肽大片斷，而其他活性保持不變。1、酚是蛋白變性劑，用酚抽提細(xì)胞時，具有兩方面的作用，分別為變性劑和抑制了。2、能進(jìn)行自我復(fù)制，大多數(shù)為雙鏈閉合環(huán)狀分子。3、寄主限制的限制與修飾現(xiàn)象由兩種酶活性協(xié)作完成的，一種叫內(nèi)切酶，另一種叫修飾酶。4、反轉(zhuǎn)錄酶來自或－，即依靠于的聚合酶，它有聚合酶活性，但無外切酶活性。5、末端轉(zhuǎn)移酶來源于小牛胸腺，是存在于前淋巴細(xì)胞與分化早期的類淋巴樣細(xì)胞內(nèi)的一種不尋常的聚合酶，在二價陽離子存在下，末端轉(zhuǎn)移酶催化加于分子的3'羥基端。得分三、選擇題(每小題1.5分，共15分)1、迄今為止所發(fā)覺的限制性內(nèi)切核酸酶可以作用于（C）。A、既可以作用于雙鏈，又可以作用于單鏈；B、只能作用于單鏈；C、只能作用于雙鏈；D、只能作用于。2、下列哪一種酶作用時須要引物(B)。A、末端轉(zhuǎn)移酶；B、反轉(zhuǎn)錄酶；C、連接酶；D、限制酶。3、被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散，下列緣由中，哪一項不太可能(D)。A、蛋白質(zhì)（如）同結(jié)合；B、有外切核酸酶污染；C、酶失活；D、酶切條件不適合。4、以下各項中不是反應(yīng)所必需的是（D）。A、模板和引物；B、；C、酶和；D、甘油。5、關(guān)于技術(shù)的敘述，下列哪項是錯誤的？（B）A、以復(fù)制為基礎(chǔ)而建立起來的技術(shù)；B、利用技術(shù)可完全無誤地擴增基因；C、反應(yīng)體系需模板、一對引物、4種、耐熱聚合酶和緩沖溶液；D、以變性-退火-延長為一周期。6、以下不是表達(dá)載體所必需的條件是（C）。A、必需具備很強的啟動子；B、必需具備很強的終止子；C、啟動子須要受限制；D、所產(chǎn)生的必需具有翻譯的起始信號。7、以下不屬于核酸探針的是（D）。A、探針；B、基因組探針；C、探針；D、抗體。8、關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體，下面哪一種說法最正確（B）。A、在不同的宿主細(xì)胞中運用不同的復(fù)制起點；B、在不同的宿主中具有不同的復(fù)制機制；C、在不同的宿主細(xì)胞中運用不同的復(fù)制酶；D、在不同的宿主中具有不同的復(fù)制速率。9、從細(xì)胞或組織中分別時常用蔗糖的作用是(C)。A、抑制核酸酶的活性；B、加速蛋白質(zhì)的變性；C、愛護(hù)，防止斷裂；D、有利于細(xì)胞破裂。10、氯霉素的工作原理為（D）。A、可以抑制細(xì)胞壁肽聚糖的合成；B、可以與核糖體30S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成；C、可以抑制核糖體的轉(zhuǎn)位；D、可以與核糖50S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成。得分三、選擇題(每小題1.5分，共15分)1、限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性地識別（C）。A、特定的三聯(lián)密碼；B、雙鏈的特定堿基對；C、雙鏈的特定堿基序列；D、單鏈的特定堿基序列。2、在切口平移方法標(biāo)記探針時只能運用（B）。A、酶；B、聚合酶Ⅰ；C、聚合酶Ⅱ；D、聚合酶Ⅲ。3、在下列進(jìn)行部分酶切的條件中，限制哪一項最好（C）。A、反應(yīng)體積；B、酶反應(yīng)溫度；C、反應(yīng)時間；D、酶量。4、擴增有時會出現(xiàn)彌散的條帶，以下緣由闡述不正確的是（B）。A、退火溫度過低；B、退火溫度過高；C、濃度過高；D、循環(huán)次數(shù)過多。5、以下不屬于的應(yīng)用的為（D）。A、隨機擴增多態(tài)性（）；B、擴增片段長度多態(tài)性（）；C、；D、S1酶作圖。6、18與19的區(qū)分在于（B）。A、二者的選擇標(biāo)記不同；B、二者的多克隆位點方向相反；C、18無基因；D、19無基因。7、有關(guān)序列自動化測定的不正確敘述是（D）。A、用熒光代替了同位素標(biāo)記；B、激光掃描分析代替人工讀序基；C、本原理與手工測序相同；D、不再須要引物。8、下列哪一項不是質(zhì)粒載體必備的基本特征(D)。A、可以獨立復(fù)制；B、有選擇標(biāo)記；C、有多克隆位點；D、含。9、在分別過程造成分子斷裂的因素很多，下列說法中哪一項是不正確的（C）。A、核酸酶的降解；B、化學(xué)降解；C、保存液中未加一滴氯仿；D、物理剪切。10、氨芐青霉素的工作原理為（A）。A、可以抑制細(xì)胞壁肽聚糖的合成；B、可以與核糖體30S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成；C、可以抑制核糖體的轉(zhuǎn)位；D、可以與核糖50S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成。1、酚是蛋白變性劑，用酚抽提細(xì)胞時，具有兩方面的作用，分別為變性劑和抑制了。2、能進(jìn)行自我復(fù)制，大多數(shù)為雙鏈閉合環(huán)狀分子。3、寄主限制的限制與修飾現(xiàn)象由兩種酶活性協(xié)作完成的，一種叫內(nèi)切酶，另一種叫修飾酶。4、反轉(zhuǎn)錄酶來自或－，即依靠于的聚合酶，它有聚合酶活性，但無外切酶活性。5、末端轉(zhuǎn)移酶來源于小牛胸腺，是存在于前淋巴細(xì)胞與分化早期的類淋巴樣細(xì)胞內(nèi)的一種不尋常的聚合酶，在二價陽離子存在下，末端轉(zhuǎn)移酶催化加于分子的3'羥基端。得分三、選擇題(每小題1.5分，共15分)1、迄今為止所發(fā)覺的限制性內(nèi)切核酸酶可以作用于（C）。A、既可以作用于雙鏈，又可以作用于單鏈；B、只能作用于單鏈；C、只能作用于雙鏈；D、只能作用于。2、下列哪一種酶作用時須要引物(B)。A、末端轉(zhuǎn)移酶；B、反轉(zhuǎn)錄酶；C、連接酶；D、限制酶。3、被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散，下列緣由中，哪一項不太可能(D)。A、蛋白質(zhì)（如）同結(jié)合；B、有外切核酸酶污染；C、酶失活；D、酶切條件不適合。4、以下各項中不是反應(yīng)所必需的是（D）。A、模板和引物；B、；C、酶和；D、甘油。5、關(guān)于技術(shù)的敘述，下列哪項是錯誤的？（B）A、以復(fù)制為基礎(chǔ)而建立起來的技術(shù)；B、利用技術(shù)可完全無誤地擴增基因；C、反應(yīng)體系需模板、一對引物、4種、耐熱聚合酶和緩沖溶液；D、以變性-退火-延長為一周期。6、以下不是表達(dá)載體所必需的條件是（C）。A、必需具備很強的啟動子；B、必需具備很強的終止子；C、啟動子須要受限制；D、所產(chǎn)生的必需具有翻譯的起始信號。7、以下不屬于核酸探針的是（D）。A、探針；B、基因組探針；C、探針；D、抗體。8、關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體，下面哪一種說法最正確（B）。A、在不同的宿主細(xì)胞中運用不同的復(fù)制起點；B、在不同的宿主中具有不同的復(fù)制機制；C、在不同的宿主細(xì)胞中運用不同的復(fù)制酶；D、在不同的宿主中具有不同的復(fù)制速率。9、從細(xì)胞或組織中分別時常用蔗糖的作用是(C)。A、抑制核酸酶的活性；B、加速蛋白質(zhì)的變性；C、愛護(hù)，防止斷裂；D、有利于細(xì)胞破裂。10、氯霉素的工作原理為（D）。A、可以抑制細(xì)胞壁肽聚糖的合成；B、可以與核糖體30S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成；C、可以抑制核糖體的轉(zhuǎn)位；D、可以與核糖50S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成。星活性：高濃度的酶、高濃度的甘油、低離子強度、極端值等，會使一些核酸內(nèi)切酶的識別和切割序列發(fā)生低特異性，即現(xiàn)象。插入型載體：只具有一個可供外源插入的克隆位點。反轉(zhuǎn)錄：在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下、以為模板合成互補的，再以為模板進(jìn)行反應(yīng)。感受態(tài)：受體細(xì)胞經(jīng)過一些特別方法（如：2，等化學(xué)試劑法）的處理后，細(xì)胞膜的通透性發(fā)生改變，成為能容很多有外源的載體分子通過的感受態(tài)細(xì)胞?？妓官|(zhì)粒：考斯質(zhì)粒是一類人工構(gòu)建的含有序列和質(zhì)粒復(fù)制子的特別類型的載體片段：用枯草桿菌蛋白