霍亂弧菌講解

三、弧菌科及檢驗3形態(tài)鞭毛葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗氧化酶試驗?zāi)c桿菌科桿菌周鞭毛或無發(fā)酵—弧菌科弧狀、桿狀單鞭毛發(fā)酵+非發(fā)酵革蘭陰性菌桿狀單、叢、周鞭毛或無氧化或不分解+注：不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌氧化酶試驗為陰性學(xué)習(xí)要求：

掌握霍亂弧菌的主要生物學(xué)性狀、檢驗方法與依據(jù)。

熟悉霍亂弧菌的分型。

了解副溶血性弧菌的主要生物學(xué)性狀、鑒定要點。什么是弧菌科？

——包括一群氧化酶陽性、具有端極鞭毛、直或微彎的G-細菌。

弧菌科的共同特點：

1、G-、菌體微彎或直、端極鞭毛；

2、營養(yǎng)要求不高，生長多需2%~3%NaCl；

3、氧化酶（+）、O/F（F）弧菌科常見種類：◆弧菌屬◆氣單胞菌屬（現(xiàn)屬氣單胞菌科）◆鄰單胞菌屬（類志賀鄰單胞菌）試驗弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬O/129SRSTCBS生長+--鳥氨酸+/--+甘露醇+/-+-精氨酸+/-+/-+嗜鹽性+/---第一節(jié)弧菌屬代表菌種：霍亂弧菌副溶血性弧菌特點：氧化酶（+）、O/F（F）、O/129（S）、耐鹽或嗜鹽。

第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌霍亂七次世界性大流行

第一次1817~1823持續(xù)7年

第二次1826~1837持續(xù)7年

第三次1846~1863持續(xù)18年

第四次1865~1875持續(xù)11年

第五次1883~1896持續(xù)14年

第六次1899~1923持續(xù)25年

第七次1961~至今

1992年

古典生物型ElTor型O139型第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌抗原結(jié)構(gòu)與分型O抗原有群、型特異性分類的依據(jù)H抗原共同抗原無分類作用兩種抗原第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌抗原結(jié)構(gòu)與分型群特異性O(shè)抗原：霍亂弧菌分群的依據(jù)，可依此

O抗原將霍亂弧菌分為155個血

清群，可引起霍亂的有O1群、O139群；型特異性O(shè)抗原：霍亂弧菌分型的依據(jù)第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌抗原結(jié)構(gòu)與分型155個血清群按群特異性O(shè)抗原三個血清型稻葉型（AC）小川型（AB）彥島型（ABC）

第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌

根據(jù)O-1群霍亂弧菌的生物性狀的差異，國際弧菌命名委員會將其分為兩個生物型（表8-12）：

抗原結(jié)構(gòu)與分型1古典生物型2ElTor生物型第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌形態(tài)與染色

革蘭陰性弧形或逗點狀，人工培養(yǎng)后易呈桿狀單鞭毛，運動活潑，呈“穿梭樣”或“流星樣”無芽孢，無莢膜在新鮮糞便中成“魚群樣”排列，有菌毛第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌形態(tài)與染色第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌形態(tài)與染色電鏡下觀察第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌培養(yǎng)特性兼性厭氧；營養(yǎng)要求不高耐堿，常用pH8.4～9.2堿性培養(yǎng)基耐鹽（亦可在無鹽培養(yǎng)基中生長）——培養(yǎng)條件第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌培養(yǎng)特性——生長現(xiàn)象液體培養(yǎng)基——形成菌膜堿性平板——水滴樣菌落TCBS平板——黃色菌落（蔗糖+）亞碲酸鉀平板——灰褐色TCBS平板第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌培養(yǎng)特性——生長現(xiàn)象含亞碲酸鉀的瓊脂平板第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌培養(yǎng)特性——生長現(xiàn)象第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌生化反應(yīng)d:10%-89%陽性第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌抵抗力

對熱、干燥、日光、消毒劑敏感在水中存活時間長（約20d）

耐堿怕酸

ElTor型抵抗力較古典型強對慶大霉素耐受（選擇性平板）多粘菌素B平板選擇性培養(yǎng)ElTor型第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌臨床意義所致疾病：霍亂（法定甲類傳染?。﹤魅驹矗翰∪恕Ь邆鞑ネ緩剑合劳緩剑S-口途徑）易感者：人是唯一易感者第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌臨床意義1．致病物質(zhì)

霍亂腸毒素：刺激腸上皮細胞分泌功能亢進，使腸液大量分泌，導(dǎo)致嚴重的腹瀉、嘔吐、尿閉、休克死亡。

鞭毛、菌毛、毒力因子：增強侵襲能力。2．免疫性病后可獲牢固免疫（以SIgA為主）。O139與O1群無交叉免疫。第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌臨床意義流行期典型病例易診斷，但散發(fā)、輕癥病例易與其他腹瀉混淆第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌微生物學(xué)檢查1．標(biāo)本采集

“米泔水”樣便尸體腸內(nèi)容物嘔吐物或肛門拭子

（1）標(biāo)本及時送檢，就地接種。否則應(yīng)放保存液或運送培養(yǎng)基內(nèi)（堿性蛋白胨水或卡－布培養(yǎng)基）。（2）避免使用甘油鹽水緩沖運送培養(yǎng)基（3）嚴密包裝，專人送檢第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌微生物學(xué)檢查2、檢驗方法（1）標(biāo)本直接檢查涂片染色標(biāo)本直接涂片革蘭染色（乙醇固定）：形態(tài)、染色性、魚群狀排列？動力觀察壓（懸）滴法→暗視野鏡檢：運動、運動方式？制動試驗霍亂多價O診斷血清+“米泔水”樣便→凝集成塊、動力消失、制動試驗（+）第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌微生物學(xué)檢查（2）分離培養(yǎng)

“米泔水”樣便TCBS平板、慶大霉素平板

6~8h

帶菌者標(biāo)本堿性蛋白胨水注意：凡在流行季節(jié)有腹瀉癥狀并有食用海鮮史或與海水、海魚、海洋動物接觸后發(fā)生傷口感染者均需進行TCBS培養(yǎng)以分離病原性弧菌第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌微生物學(xué)檢查

（3）初步鑒定可疑菌落與O1、O139抗血清進行玻凝，結(jié)合：菌落特征、菌體形態(tài)、運動等初步報告（多價）（單價）第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌生化反應(yīng)氧化酶、O/129敏感試驗蔗糖、靛基質(zhì)實驗、粘絲試驗、霍亂紅試驗、耐鹽生長試驗等血清學(xué)分類血清學(xué)分群：O1群？非O1群？血清學(xué)分型：小川型？稻葉型？彥島型？O1群生物分型古典生物型？ElTor生物型？最后鑒定表8-10、13表8-11、13表8-12第一節(jié)弧菌屬一、霍亂弧菌霍亂紅試驗：

霍亂弧菌

分解色氨酸

還原硝酸鹽

吲哚

亞硝酸鹽

亞硝酸吲哚

+濃硫酸

薔薇紅

粘絲試驗：

診斷血清血清型或型O1+O139O1O139