球菌檢驗 - 微生物學檢驗（醫(yī)檢資源庫）講解

5、病原性球菌檢驗技能訓練2．熟練革蘭染色技術的標準化操作3．掌握常見病原性球菌的鑒定要點1、學會病原性球菌的形態(tài)學鑒定。4.養(yǎng)成認真、細致、精益求精的工作作風實訓物品：菌種：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎鏈球菌試劑：革蘭染液一套、載玻片、3%H2O2、抗凝人血漿培養(yǎng)基：MH瓊脂平板、血平板、甘露醇發(fā)酵管實訓內(nèi)容一、細菌分離培養(yǎng)二、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎鏈球菌菌落觀察。三、細菌形態(tài)學鑒定——染色鏡檢。四、細菌生化鑒定菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)接種技術金黃色葡萄球菌血平板35℃需氧培養(yǎng)18-20小時

分區(qū)劃線接種技術表皮葡萄球菌血平板35℃需氧培養(yǎng)18-20小時肺炎鏈球菌血平板35℃5-10%CO2培養(yǎng)18-20小時一、細菌分離培養(yǎng)二、細菌菌落觀察觀察項目：大小、形態(tài)、邊緣、表面（光滑、粗糙、粘液型）、透明度、顏色、溶血性試驗菌種BA上菌落特征金黃色葡萄球菌1-2mm圓形凸起邊緣整齊不透明的金黃色光滑型菌落，有β溶血環(huán)表皮葡萄球菌1-2mm圓形凸起邊緣整齊不透明的白色光滑型菌落，無溶血現(xiàn)象肺炎鏈球菌1-2mm表面扁平、邊緣整齊、不透明的灰白色光滑型菌落，有α溶血環(huán)三、革蘭染色鏡檢1、操作：每個同學對一個菌種進行革蘭染色鏡檢，2人次/菌種/組2、記錄結果：形態(tài)、排列、顏色、染色性、特殊結構菌種/觀察項目金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌肺炎鏈球菌形態(tài)球形球形球形排列葡萄串狀葡萄串狀呈雙排列顏色紫色紫色紫色染色性G+G+G+1、觸酶試驗：玻片法（金、表、肺鏈）2、血漿凝固酶試驗：玻片法（金、表）3、新生霉素藥敏

：MH培養(yǎng)基—密集劃線接種：表葡

4、膽汁溶菌試驗

：肺鏈：菌落法—單菌落+10%去氧膽酸鈉---15分鐘后觀察5、optochin藥敏

：血平板---密集劃線接種：肺鏈6、甘露醇發(fā)酵試驗：液體培養(yǎng)基接種法（金、表）四、生化鑒定--（一）實驗項目生化試驗金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌肺炎鏈球菌觸酶試驗??????血漿凝固酶試驗????膽汁溶菌試驗??新生霉素藥敏試驗??奧普托欣藥敏試驗??甘露醇發(fā)酵試驗????生化試驗金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌肺炎鏈球菌觸酶試驗++-血漿凝固酶試驗+-膽汁溶菌試驗+四、生化鑒定-（二）生化試驗結果方法：背面量取抑菌環(huán)，讀整數(shù)mm直徑≤16mm耐藥

>16mm敏感新生霉素敏感試驗

結果：表皮葡萄球菌：敏感（S）方法：背面量取抑菌環(huán)，讀整數(shù)mm抑菌環(huán)直徑>14mm：S奧普托欣敏感試驗

結果：肺炎鏈球菌：敏感（S）甘露醇發(fā)酵實驗金黃色葡萄球菌+表皮葡萄球菌-金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌菌落BA：金黃色、β溶血的光滑型菌落BA：白色光滑型菌落，無溶血現(xiàn)象鏡下G+、球形、葡萄串狀G+、球形、葡萄串狀觸酶++血漿凝固酶+-新生霉素敏感試驗SS甘露醇發(fā)酵+-鑒