假單胞菌屬 (1)講解

第二節(jié)

非發(fā)酵革蘭陰性桿菌學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求掌握非發(fā)酵菌的概念、主要特點(diǎn)、初步分類方法了解產(chǎn)堿桿菌及其他非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的主要生物學(xué)性狀掌握銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的主要生物學(xué)性狀及微生物學(xué)檢驗(yàn)非發(fā)酵菌的概念什么是非發(fā)酵菌？一群不發(fā)酵葡萄糖（不利用或以氧化形式利用）的需氧或兼性厭氧、無(wú)芽胞的革蘭陰性桿菌。發(fā)酵型（F）氧化型(O)產(chǎn)堿型(-)非發(fā)酵菌的主要特點(diǎn)：1、G-桿菌、無(wú)芽胞；2、專性需氧（少數(shù)兼性厭氧）3、O/F試驗(yàn)：-/O；4、氧化酶為：+（不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌為-）5、動(dòng)力試驗(yàn)（懸滴法為主，穿刺法在培養(yǎng)基頂部4mm，培養(yǎng)4-6h）常見種類：假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、莫拉菌屬、（假單胞菌科）（奈瑟菌科）（產(chǎn)堿桿菌科）（奈瑟菌科）初步分類：可通過(guò)氧化酶、O/F、動(dòng)力等試驗(yàn)加以初步分類。假單胞菌屬不動(dòng)桿菌屬莫拉菌屬產(chǎn)堿桿菌屬氧化酶+-++O/FO/-O/---動(dòng)力+--+臨床特點(diǎn)：1、多為條件致病菌（標(biāo)本中反復(fù)檢出結(jié)合臨床表現(xiàn)確定感染病原菌）2、對(duì)抗生素有天然耐藥（重復(fù)藥敏試驗(yàn)及聯(lián)合用藥）3、臨床分離率高，占革蘭陰性菌的40%第一節(jié)假單胞菌屬假單胞菌屬主要種類：銅綠假單胞菌；熒光假單胞菌；惡臭假單胞菌；

產(chǎn)堿假單胞菌；……代表菌種:銅綠假單胞菌自然界、人體廣泛分布第一節(jié)假單胞菌屬共同特征：

1．G-桿菌，無(wú)芽胞，有莢膜，有單端鞭毛或叢鞭毛；

2．動(dòng)力（+）、氧化酶（+）、觸酶（+）、O/F（O）；

3.專性需氧（少數(shù)兼性厭氧）、營(yíng)養(yǎng)要求不高、某些菌株可產(chǎn)水溶性色素；4.最適生長(zhǎng)溫度35℃，4℃及42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)可起到鑒別作用第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀1．形態(tài)染色

G-桿菌、長(zhǎng)短不一，形態(tài)多樣；端單鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑；臨床分離株有莢膜和菌毛；產(chǎn)熒光素（青膿素）和綠膿素（特征）。革蘭染色第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性

條件：營(yíng)養(yǎng)要求不高、某些菌株可在兼性厭氧條件下生長(zhǎng)最適35℃；4℃不生長(zhǎng)、42℃生長(zhǎng)第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性（典型型、大腸桿菌型、黏液型、侏儒型、粗糙型）第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌普通平板：傘狀伸展普通平板第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌血平板金屬光澤，生姜味，β溶血第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀3．生化反應(yīng)氧化酶：+O/F：O硝酸鹽還原試驗(yàn)：+精氨酸雙水解：+明膠液化：+枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：+*

抗原結(jié)構(gòu)*

抵抗力>其他G-無(wú)芽孢菌，耐受多種抗生素和消毒劑，在潮濕環(huán)境中能長(zhǎng)期生存。H抗原：鞭毛蛋白，分型脂多糖外膜蛋白

保護(hù)性抗原、免疫原性強(qiáng)

屬特異性O(shè)抗原第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌4.抗原構(gòu)造及抵抗力

型特異性第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（二）臨床意義1、致病物質(zhì)：

內(nèi)毒素、外毒素、酶、菌毛、莢膜等。2、所致疾病條件致病菌（抵抗力下降者）醫(yī)院感染的重要病原菌（消毒不嚴(yán)的器皿和溶液、侵入性治療等）

第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集血液、腦脊液、胸腹水、分泌物、痰、引流液等醫(yī)院環(huán)境監(jiān)控：空氣、水、地面、醫(yī)療器械等第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法(1)顯微鏡檢查：標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡檢：為革蘭陰性桿菌（腦脊液等離心后取沉淀鏡檢）第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法體液、血液、環(huán)境用品增菌（營(yíng)養(yǎng)肉湯）其他標(biāo)本血平板、MAC平板、SS平板(2)分離培養(yǎng)：(3)生化鑒定第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)3、檢驗(yàn)要點(diǎn)：（1）鏡下：形態(tài)、染色性（2）培養(yǎng)：菌落多樣性、色素、氣味、溶血環(huán)（3）生化：氧化酶、O/F根據(jù)以上鑒定特征，可初步鑒定為銅綠假單胞菌若色素產(chǎn)生不典型，可加做硝酸鹽還原、明膠液化、精氨酸雙水解酶及4℃不生長(zhǎng)而42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行最終鑒定。銅綠假單胞菌快速鑒定微生物教研組段巧玲

95%以上的銅綠假單胞菌可通過(guò)以下觀察而得到初步鑒定：菌落特征：較大、呈灰綠色或藍(lán)綠色、有生姜樣氣味氧化酶：陽(yáng)性（10秒內(nèi)）水溶性綠膿素產(chǎn)生

若無(wú)色素（或色素不典型），則：42℃培養(yǎng)：能夠生長(zhǎng)乙酰胺酶：+硝酸鹽還原：+端鞭毛（1根），有動(dòng)力42℃生長(zhǎng)明膠液化鞭毛++極單鞭毛···銅綠假單胞菌-+極多鞭毛···熒光假單胞菌--極多鞭毛···惡臭假單胞菌O/F試驗(yàn)：O氧化酶：+硝酸鹽還原：+明膠液化：+精氨酸雙水解酶：+標(biāo)本分離培養(yǎng)基涂片檢查肉湯培養(yǎng)基血瓊脂平板S