《等我也長了胡子》-課件

第十二章翻譯翻譯：translation即蛋白質生物合成。把核酸中四種符號(AGCT/U)組成的遺傳信息，以遺傳密碼破讀的手段轉變?yōu)榈鞍踪|的氨基酸排列順序的過程。4/1/20241第十二章翻譯翻譯：translation第一節(jié)、參與蛋白質合成的物質各種RNA、核糖體、氨基酸、酶起始階段：起始因子延長階段：延長因子終止階段：核糖體釋放因子4/1/20242第一節(jié)、參與蛋白質合成的物質各種RNA、核糖體、氨基酸、酶3一、mRNA是翻譯的模板原核生物的一種mRNA往往編碼幾種功能相近的蛋白質。真核生物的mRNA比原核生物多，但一個RNA分子一般只帶有一種蛋白質的編碼信息。4/1/20243一、mRNA是翻譯的模板原核生物的一種mRNA往往編碼幾種遺傳密碼的特點連續(xù)性(commaless)：密碼之間沒有間斷簡并性(degeneracy)：大多數(shù)氨基酸有2~6個密碼擺動性(wobble)：密碼的第三位堿基與反密碼的第一位堿基配對不嚴格通用性(universal)：全世界生物共用4/1/20244遺傳密碼的特點連續(xù)性(commaless)：密碼之間沒有間斷連續(xù)性GCA

GUA

CAU

GUC不連續(xù)的讀法：GCACAGAGU

GUA………….密碼之間沒有核苷酸間斷4/1/20245連續(xù)性GCAGUACAUGUC密碼之間簡并性除了色氨酸和蛋氨酸外，其余氨基酸均有2

-6個三聯(lián)體為其編碼。*4/1/20246簡并性除了色氨酸和蛋氨酸外，其余氨基酸均有2-6個三聯(lián)體為擺動性密碼與反密碼配對辨認時，有時并不完全按照堿基互補規(guī)律。尤其是密碼的第三堿基對反密碼的第一位堿基，更常出現(xiàn)這種擺動現(xiàn)象。mRNA密碼子C－G－I反密碼子G－C－C密碼子4/1/20247擺動性密碼與反密碼配對辨認時，有時并不完全按照堿基互補規(guī)律。通用性除了動物細胞中的線粒體和植物細胞中的葉綠體外，從最簡單的病毒、原核生物到人類都使用一套遺傳密碼。4/1/20248通用性除了動物細胞中的線粒體和植物細胞中的葉綠體外，從最簡單二、核糖體是肽鏈合成的場所氨基酸首先在核糖體內合成蛋白質，再輸送至細胞其它組分中。核糖體由大、小亞基構成。亞基中含有不同的蛋白質和RNA。4/1/20249二、核糖體是肽鏈合成的場所氨基酸首先在核糖體內合成蛋白質，再二、核糖體是肽鏈合成的場所大亞基：tRNA結合位點：P位：給出AA，釋放tRNAA位：接受tRNA-AA轉肽酶，合成肽鍵轉位酶小亞基：識別起始位點與mRNA形成復合物4/1/202410二、核糖體是肽鏈合成的場所大亞基：3/31/2024104/1/2024113/31/202411三、tRNA和氨基酰tRNAtRNA在蛋白質翻譯中起接合的作用。tRNA的氨基酸臂上攜帶氨基酸。tRNA分子的反密碼環(huán)與mRNA上的密碼配對。密碼-反密碼-氨基酸三聯(lián)體保證了翻譯的準確性。4/1/202412三、tRNA和氨基酰tRNAtRNA在蛋白質翻譯中起接合的作氨基酰-tRNA的生成氨基酰-AMP-E+tRNA氨基酰-tRNA+AMP+E氨基酸＋ATP－E

氨基酰－AMP-E+PPiE:氨基酰-tRNA合成酶，具高度專一性1.存在于胞質中2.需ATP供能,需Mg++,Mn++3.有二個識別位點4/1/202413氨基酰-tRNA的生成氨基酰-AMP-E+tRNA氨氨基酰-tRNA的書寫Arg-tRNAarg

Met-tRNAmetmfMet-tRNAmetf原核生物起始密碼子需要在Met-tRNAmetf上進行甲酰化，而真核生物不需要。Met-tRNAmetf+FH4-CHO

轉甲?；?/p>

fMet-tRNAmetf

4/1/202414氨基酰-tRNA的書寫Arg-tRNAarg第二節(jié)、蛋白質生物合成過程起始延長終止4/1/202415第二節(jié)、蛋白質生物合成過程起始3/31/202415原核生物的翻譯起始起始因子(IF)：胞液中的可溶性因子。已知有三種：IF-1：促進IF-3與小亞基結合IF-2：使fMet-tRNAmetf與小亞基結合IF-3：使大小亞基分離核糖體結合序列：原核生物的mRNA有一非常保守的序列，與核糖體的16S-rRNA結合，引導mRNA進入核糖體，這樣的序列稱為S-D序列，也叫核糖體結合序列。4/1/202416原核生物的翻譯起始起始因子(IF)：胞液中的可溶性因子。核糖體結合序列4/1/202417核糖體結合序列3/31/202417原核生物起始過程

70S核糖體＋IF3＋IF130S小亞基IF3IF1+50S大亞基

fmet-tRNAfmet先形成fmettRNAfmetIF2GTP，再與小亞基和mRNA形成復合物，最后形成70S起始復合物。P位為mRNA上的AUG及fmet

tRNAfmet所占據(jù),A位空缺。70SmRNAfmettRNAfmet70S起始復合物fmet-tRNAfmet+GTP+IF2fmettRNAfmetIF2GTP+mRNA30SmRNAfmettRNAfmetGTPIF1IF2IF3＋50S－IF1,IF2,IF3,GDP+Pi4/1/202418原核生物起始過程70S核糖體＋IF3＋IF1原核生物起始過程4/1/202419原核生物起始過程3/31/202419真核生物的翻譯起始起始因子（eIF）：有10種起始甲硫氨酰tRNAmet無甲?；痬RNA結構有所不同核糖體有所不同原核生物與真核生物的翻譯起始比較4/1/202420真核生物的翻譯起始起始因子（eIF）：有10種3/31/20真核生物的翻譯起始4/1/202421真核生物的翻譯起始3/31/202421二、肽鏈的延長核糖體循環(huán)：翻譯過程中的肽鏈延長，延長因子：延長過程所需的蛋白質因子稱

(EF)。核糖體循環(huán)分為注冊、成肽和轉位三個步驟。4/1/202422二、肽鏈的延長核糖體循環(huán)：翻譯過程中的肽鏈延長，3/31/2二、肽鏈的延長4/1/202423二、肽鏈的延長3/31/202423注冊注冊：氨基酰-tRNA根據(jù)遺傳密碼的指引，進入核糖體的A位。mRNA4/1/202424注冊注冊：氨基酰-tRNA根據(jù)遺傳密碼的指引，進入核糖體的A成肽和轉位成肽由轉肽酶催化，反應在A位上進行，即P位上的蛋氨酸退位到A位成肽。成肽后無負載的tRNA從核糖體上脫落下來。轉位：在A位上的肽連同mRNA從A位進入P位。由轉位酶催化。這實際上是肽-tRNA-mRNA與核糖體位置的相對變更。注冊、成肽和轉位三個步驟多次反復，肽鏈就不斷延長。4/1/202425成肽和轉位成肽由轉肽酶催化，反應在A位上進行，即P位上的蛋氨4/1/2024263/31/202426三、肽鏈合成的終止肽鏈合成終止包括：終止密碼的辨認肽鏈從肽-tRNA上水解mRNA從核糖體中分離核糖體大小亞基的拆分4/1/202427三、肽鏈合成的終止肽鏈合成終止包括：3/31/20三、肽鏈合成的終止釋放因子RF：終止過程中的蛋白質因子辨認終止密碼促進肽鏈C端與tRNA3’-OH酯鍵的水解，使肽鏈從翻譯中的核糖體上釋放下來。RF-1：UAA和UAG；RF-2：UAA和UGA；RF-3：結合GTP，促進RF-1和RF-2對核糖體的結合。4/1/202428三、肽鏈合成的終止釋放因子RF：終止過程中的蛋白質因子翻譯的終止過程當翻譯到A位出現(xiàn)mRNA的終止密碼時，由RF-1或RF-2識別終止密碼，進入A位。釋放因子的結合誘導核糖體上的轉肽酶將合成的肽鏈轉移到水分子，將P位上肽鏈從tRNA分離出來。通過GTP水解GDP及Pi，使殘留在核糖體上的tRNA和各種釋放因子脫離，最后核糖體從mRNA上脫落下來。4/1/202429翻譯的終止過程當翻譯到A位出現(xiàn)mRNA的終止密碼時，由RF-翻譯的終止示意圖4/1/202430翻譯的終止示意圖3/31/202430翻譯的終止示意圖4/1/202431翻譯的終止示意圖3/31/202431翻譯的終止示意圖4/1/202432翻譯的終止示意圖3/31/202432多聚核糖體在一條mRNA上常有多個核糖體呈串珠狀排列，核糖體是以多核糖體形式存在。多核糖體的形成是由于一條mRNA鏈上多個部位有核糖體在進行蛋白質合成，這樣可以大大加速蛋白質合成的速度，mRNA得到充分的利用。4/1/202433多聚核糖體在一條mRNA上常有多個核糖體呈串珠狀排列，核糖體翻譯全過程IF-1IF-3IF-2GTPfMet起始4/1/202434翻譯全過程IF-1IF-3IF-2GTPfMet起始3/31翻譯全過程IF-1IF-3IF-2GTPfMetfMet核糖體循環(huán)4/1/202435翻譯全過程IF-1IF-3IF-2GTPfMetfMet核糖翻譯全過程fMet核糖體循環(huán)fMet4/1/202436翻譯全過程fMet核糖體循環(huán)fMet3/31/202436翻譯全過程終止IF-1IF-34/1/202437翻譯全過程終止IF-1IF-33/31/202437核糖體循環(huán)原核生物中：復制、轉錄、翻譯同步，多肽合成后，進入大亞基的管腔內，經滑面內質網(wǎng)進高爾基體，進行后加工。4/1/202438核糖體循環(huán)原核生物中：3/31/202438翻譯后加工翻譯后加工：posttranslationalprocession蛋白質合成后，還必須進行后加工，才能表現(xiàn)出生理活性，這些蛋白質的修飾過程稱為翻譯后加工。4/1/202439翻譯后加工翻譯后加工：翻譯后加工去除N-甲?；騈-蛋氨酸個別氨基酸的修飾亞基聚合輔基連接水解修飾分泌性蛋白質4/1/202440翻譯后加工去除N-甲?；騈-蛋氨酸3/31/202440去除N-甲?；騈-蛋氨酸由脫甲酰基酶或氨基肽酶催化可與翻譯同步4/1/202441去除N-甲?；騈-蛋氨酸3/31/202441個別氨基酸的修飾脯氨酸羥脯氨酸賴氨酸羥賴氨酸磷酸化：Ser、Thr、Tyr二硫鍵的形成：空間相鄰的二個Cys氧化而成4/1/202442個別氨基酸的修飾脯氨酸羥脯氨酸3/31/202442亞基聚合具有四級結構的蛋白質由兩條以上肽鏈通過非共價鍵聚合，形成寡聚體，才有生物活性。Hb：

2

2PKC：R2C24/1/202443亞基聚合具有四級結構的蛋白質由兩條以上肽鏈通過非共價鍵聚合，輔基連接蛋白質分為單純蛋白質和結合蛋白質兩類。如糖蛋白、脂蛋白等都需要加工后才能生成。4/1/202444輔基連接蛋白質分為單純蛋白質和結合蛋白質兩類。3/31/20水解修飾在真核生物中，往往會有一條已合成的多肽鏈經翻譯后加工產生多種不同活性的蛋白質或肽。信號肽

ACTH

-LT

-MSHEndophin

-MSH103肽POMC4/1/202445水解修飾在真核生物中，往往會有一條已合成的多肽鏈經翻譯后加分泌性蛋白質分泌蛋白質：合成后分泌到血液循環(huán)中，或再到靶細胞去發(fā)揮功能的蛋白質。信號肽：具疏水性的肽段，可使蛋白質移向細胞膜并與細胞膜結合，然后將合成的蛋白質送出細胞。大多數(shù)分泌性蛋白質是一種蛋白質前身。肽類激素、血漿蛋白、凝血因子、抗體蛋白、蛋白酶等4/1/202446分泌性蛋白質分泌蛋白質：合成后分泌到血液循環(huán)中，或再到靶細第四節(jié)、抗生素對翻譯的抑制作用抗生素一般是細菌或真菌所產生的具有抑制其它生物生長的物質?？股匾蚓哂袣⒕蛞种萍毦L的作用而被廣泛用于臨床，部分用于科研。某些抗生素可抑制翻譯4/1/202447第四節(jié)、抗生素對翻譯的抑制作用抗生素一般是細菌或真菌所產生的四環(huán)素抑制起始氨基酰-tRNA與原核生物或真核細胞的核糖體小亞基的結合而抑制翻譯由于不能透過真核細胞膜，故只能對原核細胞的翻譯過程發(fā)生抑制。4/1/202448四環(huán)素抑制起始氨基酰-tRNA與原核生物或真核細胞的核糖體小氯霉素能與原核生物的核糖體大亞基結合，抑制轉肽酶活性而阻斷翻譯的延長過程。4/1/202449氯霉素能與原核生物的核糖體大亞基結合，抑制轉肽酶活性而阻斷翻鏈霉素和卡那霉素能與原核生物核糖體小亞基結合，改變其構象，引起讀碼錯誤，使毒素類的細菌蛋白失活。結核桿菌敏感4/1/202450鏈霉素和卡那霉素能與原核生物核糖體小亞基結合，改變其構象，引嘌呤霉素結構與酪氨酸-tRNA相似，從而取代一些氨基酰-tRNA進入翻譯進入翻譯中的核糖體的A位。對原核和真核都有作用4/1/202451嘌呤霉素結構與酪氨酸-tRNA相似，從而取代一些氨基酰-tR放線菌酮抑制核糖體轉肽酶只對真核生物有特異性作用用于科研4/1/202452放線菌酮抑制核糖體轉肽酶3/31/202452白喉毒素白喉桿菌產生對真核生物有劇毒的毒素蛋白質共價修飾