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白喉棒狀桿菌、病毒白喉棒狀桿菌、病毒1一,白喉棒狀桿菌Albert染色法(操作)
一人一組一,白喉棒狀桿菌Albert染色法(操作)
一人一組2白喉棒狀桿菌(Corynebacteriumdiphtheria)白喉棒狀桿菌(Corynebacteriumdiphth3
PseudomembraneDiphtheria,atypicaltoxigenicinfectiousdiseasePseudomembraneDiphtheria,at4九年級(jí)部編版(山西)上冊(cè)課件第二素養(yǎng)提升5異染顆粒
metachromaticgranules細(xì)胞內(nèi)顆粒,主要成分為RNA及嗜堿性的多偏磷酸鹽,對(duì)某些染料有特殊反應(yīng),產(chǎn)生與所用染料不同的顏色,因而得名異染顆粒。其染色有助于細(xì)菌鑒定。亞甲藍(lán)染色Albert染色異染顆粒
metachromaticgranules細(xì)胞內(nèi)6實(shí)驗(yàn)步驟(制備玻片標(biāo)本)涂片:先取一接種環(huán)生理鹽水放于載玻片的一端,左手持菌液試管,右手持接種環(huán),用接種環(huán)從試管培養(yǎng)液中挑取少許白喉棒狀桿菌培養(yǎng)物與鹽水混勻,涂成直徑約1厘米的涂片,涂片應(yīng)薄而均勻。干燥:涂片最好放置室溫中,待其自然干燥。固定:手執(zhí)玻片的一端,標(biāo)本面向上,在火焰外層較快地來回通過三次,約2~3秒,以玻片反面觸及皮膚,以不覺過分地燙為度。(待放置冷卻后,進(jìn)行染色。)實(shí)驗(yàn)步驟(制備玻片標(biāo)本)涂片:先取一接種環(huán)生理鹽水放于載玻片7實(shí)驗(yàn)步驟(Albert染色法)甲液染5分鐘→水洗再以乙液(碘液)染1分鐘→水洗瀝干→油鏡檢甲液:甲苯胺藍(lán)0.15g,孔雀綠0.2g,冰醋酸1ml,95%乙醇2ml,蒸餾水100ml乙液:碘2g,碘化鉀3g,蒸餾水300ml實(shí)驗(yàn)步驟(Albert染色法)甲液染5分鐘→水洗8二,病毒血凝試驗(yàn)(操作)
2人一組二,病毒血凝試驗(yàn)(操作)
2人一組9HA-hemagglutinin(血凝素)HA-hemagglutinin(血凝素)10血凝素(hemagglutinin,HA)由某些病毒基因編碼的糖蛋白刺突;與病毒吸附和進(jìn)入宿主細(xì)胞有關(guān);HA能與人或其它動(dòng)物多種紅細(xì)胞表面N-乙酰神經(jīng)氨酸酶結(jié)合引起紅細(xì)胞凝集。血凝素(hemagglutinin,HA)由某些病毒基因編碼11病毒血凝試驗(yàn)原理根據(jù)HA能與人或其它動(dòng)物多種紅細(xì)胞表面N-乙酰神經(jīng)氨酸酶結(jié)合引起紅細(xì)胞凝集的原理,滴定病毒的導(dǎo)致血凝效價(jià)(稀釋度)。病毒血凝試驗(yàn)原理根據(jù)HA能與人或其它動(dòng)物多種紅細(xì)胞表面N-乙12實(shí)驗(yàn)步驟將有機(jī)玻璃板孔從1~9進(jìn)行編號(hào),從第1孔起至第9孔,按下表加樣。將病毒液按下表進(jìn)行稀釋??滋?hào)123456789生理鹽水(ml)病毒液(ml)0.9+0.10.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.50.5棄掉病毒稀釋度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401∶12801:2560實(shí)驗(yàn)步驟將有機(jī)玻璃板孔從1~9進(jìn)行編號(hào),從第1孔起至第9孔,13自第9孔開始反方向向前每孔加入0.5%雞紅血球0.5ml,搖勻后放置室溫45分鐘孔號(hào)123456789生理鹽水(ml)病毒液(ml)0.9+0.10.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.50.5棄掉病毒稀釋度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401∶12801:2560雞紅血球細(xì)胞懸液(ml)各0.5ml自第9孔開始反方向向前每孔加入0.5%雞紅血球0.5ml,搖14血凝試驗(yàn)結(jié)果判定結(jié)果判定:薄層(凝集)圓點(diǎn)(不凝集)凝集特別顯著:“++++”凝集現(xiàn)象次之:“+++”凝集清楚可見:“++”稍顯凝集者:“+”血凝單位:呈“++”凝集時(shí)的最高稀釋度。此時(shí)的稀釋度即為1個(gè)血凝單位。血凝試驗(yàn)結(jié)果判定結(jié)果判定:薄層(凝集)15示教一,血凝抑制試驗(yàn)二、培養(yǎng)特性觀察破傷風(fēng)梭菌(Clostridiumtetani)產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridiumperfringens)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)病原性真菌(黑曲霉、白色念珠菌、新型隱球菌)示教一,血凝抑制試驗(yàn)16實(shí)驗(yàn)原理病毒引起的血凝現(xiàn)象能被相應(yīng)的抗血凝素抗體所抑制,稱血凝抑制。利用血凝素特異性抗體與病毒表面相應(yīng)的HA相互作用,使病毒血凝現(xiàn)象抑制的試驗(yàn)稱血凝抑制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)原理病毒引起的血凝現(xiàn)象能被相應(yīng)的抗血凝素抗體所抑制,稱血17圓點(diǎn)(不凝集)薄層(凝集)圓點(diǎn)(不凝集)圓點(diǎn)薄層圓點(diǎn)18二、培養(yǎng)特性觀察破傷風(fēng)梭菌(Clostridiumtetani)產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridiumperfringens)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)病原性真菌(黑曲霉、白色念珠菌、新型隱球菌)二、培養(yǎng)特性觀察19血平板庖肉培養(yǎng)基牛奶培養(yǎng)基破傷風(fēng)梭菌37℃48h,薄膜狀爬行生長(zhǎng)物,邊緣不齊,伴輕度β溶血肉湯混濁,肉渣部分被消化,呈灰白色產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落平整,光滑,邊緣齊。有雙層溶血環(huán):內(nèi)層完全溶血(θ毒素引起),外層不完全溶血(α毒素引起)分解肉渣中糖類而產(chǎn)生大量氣體。分解乳糖產(chǎn)酸,指示劑變黃,培養(yǎng)基凝固,產(chǎn)生大量氣體,呈蜂窩狀,將液面凡士林上推,甚至沖走管口棉篩?!皼坝堪l(fā)酵”示教:破傷風(fēng)梭菌及產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)特性的培養(yǎng)特性血平板庖肉培養(yǎng)基牛奶培養(yǎng)基破傷風(fēng)梭菌37℃48h,薄膜狀20Formdoublehemolysiscirclesonbloodagarplates.Theα-hemolysisiscausedbyα-toxinwhiletheβ-hemolysisbyθ-toxin.Formdoublehemolysiscircles21StormyfermentationClostridiumperfringensshows“stormyfermentation”inlitmus(石蕊)milk.AcidturnsthepHindicatorlitmusfrombluetopink.Theacidandenzymescoagulateproteinstocurd.Thegasgeneratedinthemilkbreaksthecoagulatedproteins.StormyfermentationClostridium22九年級(jí)部編版(山西)上冊(cè)課件第二素養(yǎng)提升23示教:結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)特性專性需氧,最適37℃,營(yíng)養(yǎng)要求高,生長(zhǎng)緩慢,18h分裂一代。羅氏(Lowenstein-Jensen)培養(yǎng)基含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽、孔雀綠,2~6周可見菌落生長(zhǎng)菌落特點(diǎn):菜花、顆粒或結(jié)節(jié)狀菌落,乳白色或黃色,不透明。示教:結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)特性專性需氧,最適37℃,營(yíng)養(yǎng)要求24Thecoloniesareformedafter3-6weeksofincubationonLowenstein-Jensenmedium.Thecoloniesarebuffcoloredanddrybreadcrumb-like.Thecoloniesareformedafter25黃曲霉示教
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