色譜應用與化合物

關于色譜應用與化合物TLC方法建立（Rf要求）

第2頁,共37頁，2024年2月25日，星期天舉例物質中可能含有的雜質1、碳鏈長短帶來的雜質;2、含氟多少帶來的雜質3、氧化雜質（反應方程式如下）第3頁,共37頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共37頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---

甲氟奎

常見問題解決拖尾問題:由于載體對被分離物質吸附太強所致.解決辦法是:對鹼性化合物,在展開劑中添加比其極性強的不干擾測定的鹼性物.如氨水、三乙胺等，置換解決。對酸性化合物，在展開劑中添加比其極性強的不干擾測定的酸性物.如甲酸、冰乙酸等，置換解決,舉例見幻燈片5.邊沿效應問題：特別是對鋁泊板，可用食指與拇指沿邊沿上下撫平整后，先空白爬行一次看是否有邊沿效應，無則熱風吹干后使用。第5頁,共37頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---甲氟奎Syntheticprocess

(1):過渡物(2):產品

第6頁,共37頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立及其驗證第7頁,共37頁，2024年2月25日，星期天某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體1檢測TLC方法建立分離試驗:△Rf=0.10

滿足分離要求.檢測限試驗:中間體1為3.00μg,SM為

2.02μg.加樣試驗:SM取檢測限的2-3倍(最少),中間體1取SM量的50-60倍,然后混合.SM:中間體1=4.69:250第8頁,共37頁，2024年2月25日，星期天某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體結構式中間體2中間體3中間體4

極性:中間體4＞3＞2第9頁,共37頁，2024年2月25日，星期天薄層原位化學反應簡介一、創(chuàng)立時間：1953年由Miller及Kirchner提出二、原始發(fā)表文章：MillerM.KirchnerJG.Analchem，1953三、定義：根據不同的目的在點樣處點加試劑或以其他方式使被測物質在點樣原位處進行化學反應，當反應完成后再進行展開，從而測定反應進行情況。四、研究內容：氧化還原、光解、水解、脫水、鹵化、酯化、硝化、重氮化等反應以及制備衍生物都可以用此方法進行。第10頁,共37頁，2024年2月25日，星期天薄層原位化學反應的應用藥物穩(wěn)定性研究化學反應摸索化學鑒別反應第11頁,共37頁，2024年2月25日，星期天

應用舉例

硝苯地平對光穩(wěn)定性研究

第12頁,共37頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平對光的穩(wěn)定性第13頁,共37頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平的氧化反應第14頁,共37頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平氧化反應TLC檢測第15頁,共37頁，2024年2月25日，星期天脫水反應舉例

尼群地平中間體制備第16頁,共37頁，2024年2月25日，星期天TLC方法演示第17頁,共37頁，2024年2月25日，星期天雙異丙酚的氧化純品雙異丙酚是無色液體，在TLC板上展開時如不顯色則看不出，但在點樣原點處將其用氧化劑氧化后生成了玫瑰紅色的醌類物質，展開時可見紅色斑點在上行。第18頁,共37頁，2024年2月25日，星期天利用色譜分析圖構思分離方法利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系舉例說明利用色譜分析圖構思分離方法第19頁,共37頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程組分出峰順序及其依據一、對一般常用的毛細管氣相色譜柱和填充柱來說：各被測定組分主要按照由低到高的沸點順序、由小（大）到大（?。┑臉O性順序依次出峰。二、a.程序升溫情況下，各組分按照由低到高的沸點順序依次出峰。

b.沸點相近的組分，如使用極性柱分離，則按照由小到大的極性順序依次出峰；反之相反。應用舉例第20頁,共37頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程應用舉例(程序升溫)1、氟苯、氯苯、溴苯的分離沸點順序：氟苯＜氯苯＜溴苯GC譜圖第21頁,共37頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程2、沸點相近組分的分離a.組分A與B第22頁,共37頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程2、沸點相近組分的分離b.組分A與B分離色譜圖（A極性大于B）第23頁,共37頁，2024年2月25日，星期天GC圖譜與蒸餾、精餾的關系

未知沸點的液體組分分離（程序升溫情況下）當保留時間差（ΔRT）很大時，可直接用蒸餾的方法分離。當保留時間差較小時，只能考慮用精餾的方法分離或分子蒸餾技術。一條經驗：當在HP6890型GC上安裝30M毛細管柱，且當載氣流速為1.6ML/min時，如ΔRT≥1min，則可以用精餾的方法提純組分，理論塔板數一般小于50；如

ΔRT＜0.5min，則較難用精餾的方法提純。分子蒸餾：高真空較低溫度下，利用液體組分間揮發(fā)時具有的分子平均自由程差進行分離的一種技術。第24頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系反相色譜與正相色譜概念1、反相色譜：柱子極性小于流動相2、正相色譜：柱子極性大于流動相出峰順序1、反相色譜：極性大的組分先出峰，小的后出。2、正相色譜：極性小的組分先出峰，大的后出。舉例說明1、硝苯地平（Nifedipine）2、某藥物第25頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系

舉例說明1（硝苯地平）反相測定HPLC圖顯示極性順序為A＞B＞Nifedipine，雜質A、B為致癌物質，均不得超過0.2%第26頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系

舉例說明1（硝苯地平）重結晶提純工藝設計1、原重結晶用溶劑-95%工業(yè)乙醇2、根據HPLC圖設計現用重結晶用溶劑-80%乙醇+1%HOAc（混合溶劑）3、硝苯地平粗品及其雜質（B）在兩種溶劑中的溶解度（60℃下測定）

名稱

用量工業(yè)乙醇混合溶劑硝苯地平粗品1g5ml7ml

雜質（B）1g6ml2ml第27頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系

舉例說明1（硝苯地平）

用混合溶劑重結晶后：收率有所提高，HPLC顯示幾乎全部去掉了雜質A及B第28頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系

舉例說明2（抗高血壓藥）反相測定HPLC圖顯示該產品粗品中主要雜質M-IP極性遠小于主物質第29頁,共37頁，2024年2月25日，星期天該藥物與主要雜質結構分析1.藥物分子結構中含有磺酰氨基，為強極性基團。2.雜質分子結構中不含有磺酰氨基。3.除去雜質方法：堿溶液處理、過濾、濾液酸處理，過濾、洗滌即可。第30頁,共37頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結晶、吸附工藝關系

舉例說明2（抗高血壓藥）重結晶：原用變性乙醇重結晶進一步去除雜質，后用正丁醇重結晶去除雜質，效果更好。（因為正丁醇極性小于乙醇）第31頁,共37頁，2024年2月25日，星期天總結1-相似相溶原理應用?。?！在反相HPLC圖中：一般先出峰的組分極性較強，可用極性溶劑重結晶將其除去。在反相HPLC圖中：一般后出峰的組分極性較弱，可用非極性或弱極性溶劑重結晶將其除去。第32頁,共37頁，2024年2月25日，星期天總結2-吸附-固體萃取應用?。?！在反相HPLC圖中：一般先出峰的組分極性較強，可用硅膠或硅藻土吸附將其除去。在反相HPLC圖中：一般后出峰的組分極性較弱，可用活性炭吸附將其除去。第33頁,共37頁，2024年2月25日，星期天總結3-重結晶、吸附綜合應用?。?！對于既有極性又有非極性雜質的組分，可通過重結晶、吸附綜合交叉使用的辦法來除去雜質。舉例：硝苯地平除雜

使用混合溶劑溶解硝苯地平粗品后，加入10%的活性炭，回流30分鐘后，熱過濾，然后緩慢冷凍結晶，……..所得產品純度大于99.6%，各單個雜質均小于0.1%。HPLC圖見后：在極性大的溶劑中，活性炭吸附極性小的雜質，反之相反。第34頁,共37頁，2024年2月25日，星期天