組織學(xué)與胚胎學(xué)第一章緒論

組織學(xué)與胚胎學(xué)主講：趙培榮1可編輯版第一章緒論一、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究?jī)?nèi)容與意義1、組織學(xué)定義是用顯微鏡研究正常人體的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系的科學(xué)。2、組織學(xué)研究?jī)?nèi)容細(xì)胞——組織——器官——系統(tǒng)3、胚胎學(xué)定義是研究出生前的個(gè)體發(fā)生和生長(zhǎng)規(guī)律及其發(fā)育機(jī)制的科學(xué)。4、胚胎學(xué)研究?jī)?nèi)容受精——卵裂——胚泡——胚層——胎兒娩出2可編輯版5、意義組織學(xué)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的一門(mén)重要基礎(chǔ)學(xué)科，是臨床醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)。胚胎學(xué)是優(yōu)生優(yōu)育的理論基礎(chǔ)，對(duì)臨床診治起指導(dǎo)作用。3可編輯版二、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法（一）一般光學(xué)顯微鏡技術(shù)光鏡分辨率0.2μm放大倍數(shù)幾百倍至千倍。生物制片技術(shù)1、石蠟組織切片；2、冰凍切片；3、火棉膠切片；4、磨片；5、涂片；6、鋪片；石蠟組織切片的過(guò)程：取材——固定——脫水——透明——浸蠟——包埋——切片——染色——封片。4可編輯版HE染色蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍(lán)色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細(xì)胞核中的DNA、RNA細(xì)胞質(zhì)中的RNA細(xì)胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）5可編輯版光鏡6可編輯版HE圖片7可編輯版涂片8可編輯版9可編輯版（二）組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)原理：是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)或物理反應(yīng)的原理顯示組織細(xì)胞內(nèi)某種化學(xué)成分，并可進(jìn)行定位、定性、半定量研究。如：PAS反應(yīng)（過(guò)碘酸—希夫反應(yīng)）多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀10可編輯版PAS圖片11可編輯版（三）免疫組織化學(xué)技術(shù)原理：是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)多肽、蛋白質(zhì)或受體等大分子物質(zhì)的技術(shù)。直接法：用標(biāo)記的抗體與細(xì)胞的相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。間接法：標(biāo)記二抗。靈敏度高于直接法。1.PAP法：其原理是一抗同抗原相結(jié)合，二抗既能同一抗相結(jié)合，又能同PAP復(fù)合物相結(jié)合，后者由過(guò)氧化物酶和抗過(guò)氧化物酶抗體組成，最后以DAB顯色。12可編輯版直接法和間接法圖13可編輯版PAP法14可編輯版2.ABC法：是用一抗同抗原結(jié)合，生物素化的二抗再與一抗結(jié)合，最后用親合素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物處理，使復(fù)合物同生物素化的二抗結(jié)合，顯色部位即表明抗原存在的部位。該法比PAP法敏感20-40倍。15可編輯版ABC法16可編輯版（四）電子顯微鏡技術(shù)分辨率0.2nm，放大倍數(shù)幾千倍至幾百萬(wàn)倍。1.透射電子顯微鏡技術(shù)觀察細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。2.掃描電子顯微鏡技術(shù)觀察細(xì)胞表面的結(jié)構(gòu)。17可編輯版電鏡18可編輯版電鏡技術(shù)過(guò)程19可編輯版電鏡圖片20可編輯版21可編輯版(2)掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。掃描電鏡22可編輯版（五）冷凍蝕刻復(fù)型是用透射電鏡觀察組織或細(xì)胞斷裂面的金屬?gòu)?fù)制膜。組織經(jīng)甘油處理后快速冷凍（-190℃），高真空下用鋼刀將組織劈開(kāi)，升溫至-100℃使組織升華，出現(xiàn)自然的凸凹面。先噴一層鉑膜，再?lài)娨粚犹寄?，以加固鉑膜。用次氯酸等將組織腐蝕掉，清理復(fù)型，電鏡觀察。其凸凹結(jié)構(gòu)影像恰與實(shí)物相反。此法可以觀察細(xì)胞膜內(nèi)部?jī)蓪又|(zhì)分子的結(jié)構(gòu)。23可編輯版冷凍蝕刻24可編輯版（六）細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)將人或動(dòng)物的活細(xì)胞在體外適宜的環(huán)境中（如溫度、PH值、營(yíng)養(yǎng)等）培養(yǎng)成活，可以進(jìn)行細(xì)胞增殖、分化、代謝、吞噬及癌變機(jī)理等多方面的研究，獲得體內(nèi)實(shí)驗(yàn)難以達(dá)到的目的。25可編輯版倒置相差顯微鏡26可編輯版細(xì)胞培養(yǎng)