免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析技術(shù)課件

2021/10/10星期日1膠體金免疫層析技術(shù)（colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA）

2021/10/10星期日220世紀(jì)80-90年代在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展了新型體外診斷技術(shù)——膠體金免疫層析技術(shù)（colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA）。

膠體金免疫層析技術(shù)2021/10/10星期日3

GICA是一種新型檢測方法，具有簡單快速、結(jié)果清晰，可通過肉眼判定結(jié)果、無需復(fù)雜操作技巧和特殊設(shè)備、靈敏度高、無污染、攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)。己成為臨床快速診斷領(lǐng)域發(fā)展的一個(gè)新方向，在發(fā)達(dá)國家己得到廣泛應(yīng)用。疾病的快速診斷及藥物殘留分析2021/10/10星期日4類別應(yīng)用領(lǐng)域檢測的物質(zhì)人類醫(yī)學(xué)各級(jí)醫(yī)院,血站,CDC,防疫站,診斷中心；家庭自檢；商檢系統(tǒng)；邊檢口岸；公安系統(tǒng).傳染?。ㄒ腋挝屙?xiàng),HIV,SARS等）標(biāo)志物（AFP、肌鈣蛋白、糞便血紅蛋白等）女性妊娠hCG(早孕)毒品（嗎啡,K粉,搖頭丸,冰毒）農(nóng)牧業(yè)畜牧獸醫(yī)站,商檢系統(tǒng),邊檢口岸,農(nóng)牧類院系和研究所傳染病（禽流感,鏈球菌等）病毒（煙草花葉病毒、犬細(xì)小病毒等）環(huán)境環(huán)保監(jiān)測部門,研究機(jī)構(gòu)有害物質(zhì)超標(biāo)食品安全食品安全檢測中心,各監(jiān)管部門農(nóng)獸藥殘留（磺胺類、瘦肉精等）,大腸桿菌,黃曲霉素2021/10/10星期日5

膠體金（colloidalgold）也稱金溶膠（goldsol），是金鹽被還原成原子金后形成的金顆粒懸液。膠體金2021/10/10星期日6zeta電位可以使膠體金顆粒之間相互排斥，以維持膠體金的穩(wěn)定狀態(tài)。

基礎(chǔ)金核雙離子內(nèi)層負(fù)離子（AuC12－）zeta電位外層離子層H+分散在膠體間的溶液中2021/10/10星期日7

膠體金顆粒對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，而不被壞其生物活性，可以與蛋白質(zhì)等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非共價(jià)結(jié)合，形成膠體金標(biāo)記物。2021/10/10星期日8襯板樣品墊金標(biāo)墊吸收墊膜膠體金免疫層析試紙條的構(gòu)成2021/10/10星期日9膠體金免疫層析試紙條類型：2021/10/10星期日102021/10/10星期日11夾心法反應(yīng)原理C陰性B陽性GICA有三種反應(yīng)模式：夾心法，間接法，競爭抑制法。2021/10/10星期日12間接法反應(yīng)原理C陰性B陽性2021/10/10星期日13陰性弱陽性陽性競爭抑制法反應(yīng)原理檢測線顏色強(qiáng)度與SD濃度負(fù)相關(guān)2021/10/10星期日14目的：掌握間接試紙卡的檢測原理，操作方法及結(jié)果判定方法2021/10/10星期日151、禽流感H9亞型抗原檢測試紙卡2、禽流感抗體檢測試紙卡3、磺胺嘧啶殘留檢測試紙卡4、禽流感H9亞型病毒陽性對(duì)照5、禽流感H9亞型病毒陰性對(duì)照6、禽流感抗體陽性對(duì)照7、磺胺嘧啶殘留陽性對(duì)照8、磺胺嘧啶殘留陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)材料：2021/10/10星期日161、加被檢樣品：100ul/孔，陽性、陰性對(duì)照。2、5min后觀察結(jié)果。實(shí)驗(yàn)步驟：2021/10/10星期日17結(jié)果判定：1、禽流感H9亞型抗原檢測試紙卡：兩條紅線，陽性；一條紅線，陰性；無紅線，試紙失效。2、禽流感抗體檢測試紙卡：兩條紅線，陽性；一條紅線，陰性；無紅線，試紙失