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關于放射性同位素檢測技術同位素示蹤法(isotopictracermethod)是利用放射性核素作為示蹤劑對研究對象進行標記的微量分析方法,示蹤實驗的創(chuàng)建者是Hevesy。Hevesy于1923年首先用天然放射性212Pb研究鉛鹽在豆科植物內的分布和轉移。繼后Jolit和Curie于1934年發(fā)現了人工放射性,以及其后生產方法的建立(加速器、反應堆等),為放射性同位素示蹤法的更快的發(fā)展和廣泛應用提供了基本的條件和有力的保障第2頁,共15頁,2024年2月25日,星期天同位素示蹤法基本原理和特點靈敏度高:它比目前較敏感的分析天平要敏感107-108倍,而迄今最準確的化學分析法很難測定到10-12克水平。.方法簡便:不受其它非放射性物質的干擾,可以省略許多復雜的物質分離步驟。定位定量準確:能準確定量地測定代謝物質的轉移和轉變符合生理條件:重量改變是微不足道,體內生理過程仍保持正常的平衡狀態(tài)。第3頁,共15頁,2024年2月25日,星期天示蹤實驗的設計的三個階段實驗準備階段正式實驗階段放射性去污染和放射性廢物處理

第4頁,共15頁,2024年2月25日,星期天實驗準備階段

示蹤劑的選擇:選定放射性示蹤劑的比活度λqδ的值必須足夠大,以保證實驗所需要的靈敏度,而又要盡可能地小,使得在該實驗條件下輻射自分解可忽略。放射性同位素測量方法的選擇:測量方法的選擇取決于射線種類,對于α射線通常可用硫化鋅晶體、電離室、核乳膠等方法探測。進行非放射性的模擬實驗,把實驗全過程預演一遍第5頁,共15頁,2024年2月25日,星期天正式實驗階段選擇放射性同位素的劑量:應以相關部位對示蹤劑的蓄積率來考慮示蹤劑用量。選擇示蹤劑給入途徑:根據實驗目的,選擇易吸收、易操作的給入途徑。放射性生物樣品的制備:根據實驗目的和示蹤劑的標記放射性同位素的性質制備放射性生物樣品。放射性樣品的測量:要糾正一些因素對測量結果的影響。第6頁,共15頁,2024年2月25日,星期天放射性去污染和放射性廢物處理放射性實驗,無論是每次實驗或階段性實驗結束后,都可能有不同程度的放射性污染和放射性廢物的出現,因此,在實驗結束后,要作去污染處理和放射性廢物處理。必要時在實驗過程進行中,就要作除污染和清理放射性廢物的工作。第7頁,共15頁,2024年2月25日,星期天同位素示蹤法在生物化學和分子生物學中的應用放射性同位素示蹤法在生物化學和分子生物學領域應用極為廣泛。近幾年來,同位素示蹤技術在原基礎上又有許多新發(fā)展,如雙標記和多標記技術,穩(wěn)定性同位素示蹤技術,活化分析,電子顯微鏡技術,同位素技術與其它新技術相結合等。闡明了一系列重大問題,如遺傳密碼、細胞膜受體、RNA-DNA逆轉錄等,使人類對生命基本現象的認識開辟了一條新的途徑。第8頁,共15頁,2024年2月25日,星期天物質代放謝的研究體內存在著很多種物質,究竟它們之間是如何轉變的,如果在研究中應用適當的同位素標記物作示蹤劑分析這些物質中同位素含量的變化,就可以知道它們之間相互轉變的關系,還能分辯出誰是前身物,誰是產物,分析同位素示蹤劑存在于物質分子的哪些原子上,可以進一步推斷各種物質之間的轉變機制。第9頁,共15頁,2024年2月25日,星期天物質轉化的研究物質在機體內相互轉化的規(guī)律是生命活動中重要的本質內容,在過去的物質轉化研究中,一般都采用用離體酶學方法,但是離體酶學方法的研究結果,不一定能代表整體情況,同位素示蹤技術的應用,使有關物質轉化的實驗的周期大大縮短,而且在離體、整體、無細胞體系的情況下都可應用,操作簡化,測定靈敏度提高,不僅能定性,還可作定量分析。第10頁,共15頁,2024年2月25日,星期天動態(tài)平衡的研究闡明生物體內物質處于不斷更新的動態(tài)平衡之中,是放射性同位素示蹤法對生命科學的重大貢獻之一,向體內引入適當的同位素標記物,在不同時間測定物質中同位素含量的變化,就能了解該物質在體內的變動情況,定量計算出體內物質的代謝率,計算出物質的更新速度和更新時間等等。第11頁,共15頁,2024年2月25日,星期天生物樣品中微量物質的分析在放射性同位素示蹤技術被應用之前,由于制備樣品時的丟失而造成回收率低以及測量靈敏度不高等問題,使得對機體正常功能起很重要作用的微量物質不易被測定。近年來迅速發(fā)展、應用愈來愈廣泛的放射免疫分(radioimmunoassay)技術是一種超微量的分析方法,它可測定的物質300多種,其中激素類居多,包括類固醇激素,多肽類激素,非肽類激素,蛋白質物質,環(huán)核苷酸,酶,腫瘤相關的抗原,抗體以及病原體,微量藥物等其它物質。第12頁,共15頁,2024年2月25日,星期天最近鄰序列分析法放射性同位素示蹤技術,是分子生物學研究中的重要手段之一,對蛋白質生物合成的研究,從DNA復制、RNA轉錄到蛋白質翻譯均起了很大的作用。為了更好地應用放射性同位素示蹤技術,除了有賴于示蹤劑的高質量和核探測器的高靈敏度外,關鍵還在于有科學根據的設想和創(chuàng)造性的實驗設計以及各種新技術的綜合應用。第

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