基因工程和發(fā)酵工程在飼料和飼料添加劑中的應(yīng)用

關(guān)于基因工程和發(fā)酵工程在飼料和飼料添加劑中的應(yīng)用因此，從這個(gè)意義上說(shuō)，在我國(guó)糧食問(wèn)題實(shí)質(zhì)上是飼料問(wèn)題。飼料總量是否充足，供求總量是否安全，直接關(guān)系著我國(guó)的糧食安全戰(zhàn)略和動(dòng)物性食品的供求平衡。自從我國(guó)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)戰(zhàn)略性調(diào)整以來(lái)，玉米播種面積和產(chǎn)量都有所增加，但仍滿足不了飼料生產(chǎn)需求，已經(jīng)連續(xù)數(shù)年動(dòng)用國(guó)家儲(chǔ)備糧作為飼料糧。我國(guó)是蛋白質(zhì)飼料資源短缺的國(guó)家，蛋白質(zhì)飼料原料加工業(yè)發(fā)展滯后，目前生產(chǎn)豆粕的大豆約70％需要進(jìn)口。第2頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天一.基因工程技術(shù)1.基因工程簡(jiǎn)介基因工程是利用DNA重組技術(shù)進(jìn)行生產(chǎn)或改造生物產(chǎn)品的技術(shù)。是將外源的或是人工合成的基因即DNA片段(目的基因)與適宜的載體DNA重組,然后將重組DNA轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞或生物體內(nèi),以使其高效表達(dá),而獲得基因產(chǎn)物?；蚬こ碳夹g(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的主體。第3頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.基因工程的主要技術(shù)環(huán)節(jié)包括：獲得目的基因制備重組DNA分子轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞篩選重組細(xì)胞實(shí)現(xiàn)功能表達(dá)基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)基本步驟：1）目的基因的獲取2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4）目的基因的檢測(cè)與鑒定第4頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天轉(zhuǎn)基因植物發(fā)展進(jìn)程與規(guī)模

1983年，首批轉(zhuǎn)基因作物（煙草、馬鈴薯）問(wèn)世。1986年，首批轉(zhuǎn)基因作物（抗蟲(chóng)、抗除草劑）進(jìn)入田間實(shí)驗(yàn)，美國(guó)和法國(guó)同時(shí)對(duì)抗除草劑轉(zhuǎn)基因煙草進(jìn)行了田間試驗(yàn)

1992年，中國(guó)首先在大田種植轉(zhuǎn)基因抗病毒煙草，揭開(kāi)了全球轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化的序幕。1994年，美國(guó)轉(zhuǎn)基因作物產(chǎn)品（耐儲(chǔ)存番茄FlavorSavor

）進(jìn)入市場(chǎng)。1994年，商品化種植抗黃瓜花葉病毒（CMV）和抗煙草花葉病毒（TMV）雙價(jià)的轉(zhuǎn)基因煙草

1996年后，轉(zhuǎn)基因作物的產(chǎn)業(yè)化得到迅速發(fā)展。同時(shí)帶有八種基因代碼的轉(zhuǎn)基因玉米將于2010年在美國(guó)問(wèn)世。第5頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天研究方向抗病毒方面抗蟲(chóng)害方面抗除草劑方面提高產(chǎn)量方面改良品質(zhì)方面抗逆境方面第6頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.基因工程技術(shù)在動(dòng)物飼料中的應(yīng)用（1）提高飼料作物產(chǎn)量

①固氮和固碳工程利用基因工程技術(shù)對(duì)以肺炎克氏桿菌為代表的自生固氮菌、以大豆和苜蓿根瘤菌為代表的共生固氮菌以及以固氮螺菌為代表的聯(lián)合共生固氮菌的固氮基因結(jié)構(gòu)、表達(dá)調(diào)制機(jī)制與固氮酶活性的調(diào)節(jié)等進(jìn)行了深入的研究。美國(guó)科學(xué)家采用基因工程技術(shù)改造了大豆和苜蓿根瘤菌的固氮酶基因，使這兩種作物的產(chǎn)量提高了15%。通過(guò)基因工程改造固氮菌，在發(fā)酵罐中發(fā)酵，在制作成菌肥使用，不但能提高豆科植物的結(jié)瘤量，甚至可以使非豆科植物也固氮?？茖W(xué)家正在研究采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將固氮基因直接轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞染色體中，使植物不依賴固氮菌自身就能固氮。光合作用效率的高低同樣也是決定作物產(chǎn)量的重要因素。如果能將光合作用效率較高的作物中的決定光合作用酶的基因轉(zhuǎn)移到光合作用效率較低的作物中便能使光合作用效率提高。第7頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天

“超級(jí)水稻”——在水稻基因中插入玉米高光效基因，從而使水稻擁有更高速度的光合作用，使大米產(chǎn)量提高了35%。這項(xiàng)工程是由我國(guó)首先完成的。

一種轉(zhuǎn)谷氨酸脫氫酶基因的玉米，由于它可以大大提高對(duì)氮肥的利用率，所以其產(chǎn)量提高了10%。第8頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天a.抗病毒方面煙草花葉病毒的外殼蛋白基因+普通番茄抗煙草花葉病毒的番茄繼抗煙草花葉病毒的番茄培育成功之后，抗黃瓜花葉病毒的轉(zhuǎn)基因植株也陸續(xù)獲得成功。我國(guó)科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因方法，培育出了抗病毒煙草、抗病毒甜椒和抗病毒番茄，而且已進(jìn)行了田間試驗(yàn)，并被批準(zhǔn)進(jìn)行商品化生產(chǎn)。⑵提高抗病、抗蟲(chóng)能力第9頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天b.抗蟲(chóng)害方面迄今研究最多并取得成效的有兩類基因蘇云金桿菌的殺蟲(chóng)蛋白基因（Bt）從豇豆馬鈴薯中分離的蛋白酶抑制劑基因試驗(yàn)已證明，如果將蘇云金桿菌殺蟲(chóng)蛋白與蛋白酶抑制劑配合使用，可提高殺蟲(chóng)2～20倍，效果更佳?？梢灶A(yù)料，未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)是將兩類基因同時(shí)轉(zhuǎn)入植物，以提高抗蟲(chóng)能力。第10頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天

c.抗菌、抗真菌作物

e.微生物農(nóng)藥③提高抗逆能力農(nóng)作物所處的非生物逆境包括鹽堿、干旱、洪澇、嚴(yán)寒或高溫、營(yíng)養(yǎng)貧瘠、重金屬脅迫、紫外線等。利用基因工程手段讓作物獲得對(duì)非生物的抗性。植物體內(nèi)的糖醇類化合物是一種滲透調(diào)節(jié)劑，提高這些物質(zhì)的生物合成水平成為植物耐旱、耐鹽基因工程的首選策略。將山梨醇-6-磷酸脫氫酶或甘露醇-3-磷酸脫氫酶轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)，可以提高細(xì)胞內(nèi)山梨醇或甘露醇的水平，具有一定抗旱、抗鹽能力。乙醇脫氫酶轉(zhuǎn)基因植物有一定的抗?jié)衬芰?。在抗?fàn)I養(yǎng)逆境方面,轉(zhuǎn)谷氨酸脫氫酶基因玉米可以大大提高對(duì)氮肥的利用率，其生長(zhǎng)量提高了10%。大部分除草劑對(duì)作物有影響，從細(xì)菌中分離得到的除草劑抗性基因可使植物獲得抗除草劑能力。

第11頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天⑵改善飼料營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)①改善蛋白質(zhì)品質(zhì)通過(guò)轉(zhuǎn)基因可以提高牧草的總蛋白含量和必需氨基酸含量。目前已成功培育出高含硫氨基酸豆牧草、高賴氨酸玉米等。②改變碳水化合物含量與品質(zhì)③改善脂類含量和品質(zhì)④其他品質(zhì)的改善甜蛋白轉(zhuǎn)基因植物可以提高甜度。轉(zhuǎn)植酸酶的玉米其營(yíng)養(yǎng)利用率更高。第12頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天一個(gè)被稱作“金水稻”的轉(zhuǎn)基因品種（孟山都等公司開(kāi)發(fā)的），可以使食用者避免維生素A缺乏癥。因?yàn)檫@種水稻通過(guò)轉(zhuǎn)基因后高含胡蘿卜素，人體可以將胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為維生素A。再如，美國(guó)生物技術(shù)研究人員把月桂樹(shù)基因?qū)胗筒酥校a(chǎn)出含月桂酸油達(dá)40％的油菜籽，大大降低了成本并增加了產(chǎn)量。第13頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天⑶開(kāi)發(fā)新飼料添加劑①益生菌基因工程改造采用基因工程技術(shù)，可將外源基因轉(zhuǎn)移到益生菌細(xì)胞中，構(gòu)建的重組子菌株可以直接添加到飼料中或者回植到腸道內(nèi)，發(fā)揮外源基因的功能。有人將富含賴氨酸基因的人工合成基因轉(zhuǎn)入到乳酸桿菌和芽孢桿菌細(xì)胞中，重組的乳酸桿菌和芽孢桿菌的賴氨酸分泌量提高了。同樣利用基因工程手段對(duì)酵母菌雙歧桿菌等改造得到很好的效果。利用基因工程手段有可能使益生菌獲得自我產(chǎn)生益生元的能力，從而可在腸道持續(xù)發(fā)揮作用。②采用基因工程技術(shù)開(kāi)發(fā)抗生素替代品

抗菌肽、白細(xì)胞介素和干擾素等都可以應(yīng)用基因工程手段獲得。③基因工程飼用酶制劑采用基因工程生產(chǎn)的飼用酶具有產(chǎn)量高活性強(qiáng)穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。采用基因工程技術(shù)大量生產(chǎn)植酸酶已獲得成功。第14頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天導(dǎo)入植物細(xì)胞：土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法土壤農(nóng)桿菌：具有趨化性（酚），感染雙子葉植物和裸子植物第15頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天二.發(fā)酵工程技術(shù)的應(yīng)用⑴發(fā)酵飼料的作用機(jī)理①缺氧和酸性環(huán)境抑制有害菌的生長(zhǎng)②競(jìng)爭(zhēng)性抑制③抑菌物質(zhì)的產(chǎn)生④營(yíng)養(yǎng)作用⑤增強(qiáng)免疫力

第16頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天⑵.發(fā)酵飼料的質(zhì)量評(píng)定

蛋白質(zhì)：發(fā)酵改善了蛋白質(zhì)的品質(zhì)，由于微生物繁殖快、世代時(shí)間短，對(duì)蛋白質(zhì)的利用一方面使自身細(xì)胞數(shù)量的增加，另一方面是分泌大量的胞外產(chǎn)物，從而使原有的蛋白質(zhì)被分解利用后形成新的蛋白質(zhì)。

微生物：飼料經(jīng)發(fā)酵后，其微生物種類及數(shù)量都會(huì)有所變化。研究發(fā)現(xiàn)，隨著發(fā)酵時(shí)間的增加，有益菌增加，有害菌減少。

pH值:飼料在發(fā)酵過(guò)程中，微生物的代謝產(chǎn)物包括很多有機(jī)酸類，其中乳酸的含量可達(dá)到3%,使得飼料的酸度增加。谷類發(fā)酵飼料的pH為5.0，液態(tài)發(fā)酵飼料的pH為4.45。這將有力地破壞了病原菌的生長(zhǎng)環(huán)境，抑制了其生長(zhǎng)。第17頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.發(fā)酵工程技術(shù)在飼料添加劑中的應(yīng)用商品氨基酸、飼用抗生素、酶制劑、飼料酵母或者單細(xì)胞蛋白等對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)都是有益的。⑴賴氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)、賴氨酸發(fā)酵蛋白粉的生產(chǎn)⑵單細(xì)胞蛋白細(xì)胞

單細(xì)胞蛋白飼料?(SingleCellProtei?n)主要是指通過(guò)發(fā)酵方法生產(chǎn)的酵母菌、細(xì)菌、霉菌及藻類細(xì)胞生物體等。單細(xì)胞蛋白飼料營(yíng)養(yǎng)豐富、蛋白質(zhì)含量較高，且含有18～20種氨基酸，組份齊全，富含多種維生素。除此之外，單細(xì)胞蛋白飼料的生產(chǎn)具有繁育速度快、生產(chǎn)效率高、占地面積小、不受氣候影響等優(yōu)點(diǎn)。因此，在當(dāng)今世界蛋白質(zhì)資源嚴(yán)重不足的情況下，發(fā)展單細(xì)胞蛋白飼料的生產(chǎn)越來(lái)越受到各國(guó)的重視。第18頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天

農(nóng)作物秸稈、秕殼發(fā)酵處理我國(guó)每年的秸稈與秕殼產(chǎn)量十分巨大。這類飼料主要包括水稻秸稈和秕殼、小麥秸稈和秕殼、玉米秸稈和玉米芯、高粱秸稈和秕殼、谷子秸稈和秕殼、大豆秸稈和莢殼、薯干、薯秧、花生蔓等。秸稈的主要成分是粗纖維，礦物質(zhì)含量也較豐富。目前這類資源主要通過(guò)物理加工、化學(xué)及微生物發(fā)酵處理方式，可分解其中的粗纖維為單糖或低聚糖供動(dòng)物利用，而且可改善適口性，提高蛋白質(zhì)含量。第19頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天林業(yè)副產(chǎn)物

主要包括樹(shù)葉、樹(shù)籽、嫩枝和木材加工下腳料。且采摘的槐樹(shù)葉、榆樹(shù)葉、松樹(shù)針等蛋白質(zhì)含量一般占干物質(zhì)的25％～29％，是很好的蛋白質(zhì)補(bǔ)充料；同時(shí)，還含有大量的維生素和生物激素。樹(shù)葉可直接飼喂畜禽，而嫩枝、木材加工下腳料可通過(guò)青貯、發(fā)酵、糖化、膨化、水解等處理方式加以利用。第20頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天

槽渣、廢液類飼料糟渣主要包括酒糟、醬油糟、醋糟、玉米淀粉工業(yè)下腳料、粉絲尾水、果渣、檸檬酸濾渣、糖蜜、甜菜渣、甘蔗渣、菌糠等；廢液主要指味精、造紙、淀粉工業(yè)、酒精、檸檬酸廢液等。菌糠、粉漿蛋白、全價(jià)干酒精、啤酒酵母等可作為蛋白質(zhì)飼料；酒糟、醬油糟、甜菜渣、飴糖糟、檸檬酸渣、某些藥渣、廢糖蜜等可作能量飼料；纖維含量高的甜菜粕、果渣、甘蔗渣、檸檬酸渣等可作為反芻動(dòng)物的飼料。而糖蜜可發(fā)酵生產(chǎn)賴氯酸，造紙廢渣、味精廢液、淀粉渣等渣液可用來(lái)生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白。第21頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天酒渣酒糟富含粗蛋白質(zhì)、維生素B、鉀、磷酸鹽，但含鈣少，且有酒精殘留，因此必須與青飼料和配合飼料搭配飼喂，且不宜飼喂孕畜。第22頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天蘋果渣

我國(guó)是世界上蘋果產(chǎn)量最大的國(guó)家之一，可年產(chǎn)蘋果渣約100萬(wàn)噸。目前，蘋果渣除少量被用于深加工外，絕大部分被遺棄。這樣不僅浪費(fèi)了資源，還嚴(yán)重污染了環(huán)境。蘋果渣由果皮、果核和殘余果肉組成(大約果皮、果肉占96.2%0，果籽占3.100，果梗占0.70o)，含有可溶性糖、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和纖維素等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)豐富，適口性好，具有開(kāi)胃健脾的功效，是良好的多汁飼料資源。第23頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天

干物質(zhì)中含量（%）微量元素含量(mg/kg)含水量粗蛋白粗脂肪粗纖維粗灰分鈣磷CuFeZnMnSe7.8006.26.816.902.3000.0600.05011.815.815.414.00.08據(jù)測(cè)定，蘋果渣的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值成分如下表：第24頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天總能值比小麥鼓高1.02MJ/Kg，粗蛋白含量比甘薯干高，Ca,P、微量元素、氨基酸含量與甘薯干較為接近，鐵含量是玉米的4.9倍;賴氨酸、蛋氨酸和精氨酸的含量分別是玉米的1.7倍、1.2倍和2.75倍，維生素殘是玉米的3.5倍，在無(wú)氮浸出物中總糖占15%以上。蘋果渣還含有豐富的維