基因工程的基本操作程序四班

基因工程的基本操作程序四班基因工程的基本操作程序四班第1頁(yè)基因工程基礎(chǔ)操作程序1、目標(biāo)基因獲取2、基因表示載體構(gòu)建3、將目標(biāo)基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目標(biāo)基因檢測(cè)與判定基因工程的基本操作程序四班第2頁(yè)當(dāng)前被較廣泛提取使用目標(biāo)基因有：蘇云金桿菌抗蟲(chóng)基因、人胰島素基因、人干擾素基因、種子貯藏蛋白基因、植物抗病基因等?；虿僮骰A(chǔ)步驟一、目標(biāo)基因獲取——將需要基因從供體生物

細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái)。供體生物細(xì)胞取出DNA用限制酶剪去多出個(gè)別目標(biāo)基因限制酶基因工程的基本操作程序四班第3頁(yè)原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)(補(bǔ)充內(nèi)容）非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)開(kāi)啟子終止子①不編碼蛋白質(zhì)。：編碼蛋白質(zhì),連續(xù)不間斷編碼區(qū)非編碼區(qū)原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)②調(diào)控遺傳信息表示,上游有開(kāi)啟子，下游有終止子開(kāi)啟子基因工程的基本操作程序四班第4頁(yè)真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)（補(bǔ)充內(nèi)容）編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)含子外顯子開(kāi)啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)序列：有調(diào)控作用,上游有開(kāi)啟子，下游有終止子非編碼序列：包含非編碼區(qū)和內(nèi)含子基因工程的基本操作程序四班第5頁(yè)原核細(xì)胞真核細(xì)胞不一樣點(diǎn)編碼區(qū)是_____編碼區(qū)是間隔、_____相同點(diǎn)都由能夠編碼蛋白質(zhì)______和含有調(diào)控作用______區(qū)組成原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)比較連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)非編碼基因工程的基本操作程序四班第6頁(yè)1．以下關(guān)于基因結(jié)構(gòu)認(rèn)識(shí)中，正確是（）A．大豆基因中內(nèi)含子是能夠編碼蛋白質(zhì)序列B．乳酸菌與酵母菌基因結(jié)構(gòu)中都存在外顯子和內(nèi)含子C．大腸桿菌基因與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)位于編碼區(qū)下游D．水稻細(xì)胞基因編碼區(qū)中存在非編碼序列2．（多項(xiàng)選擇）原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)共同特點(diǎn)是（）A．編碼區(qū)都有能編碼蛋白質(zhì)序列B．編碼區(qū)都是連續(xù)C．非編碼區(qū)都能調(diào)控遺傳信息表示D．非編碼區(qū)都有RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)DACD基因工程的基本操作程序四班第7頁(yè)一、目標(biāo)基因獲取(一)、目標(biāo)基因主要是______________________編碼蛋白質(zhì)基因（二）、獲取目標(biāo)基因常見(jiàn)方法有哪些?1、從基因文庫(kù)中獲取2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增3、人工合成閱讀教材P8-11如：與生物抗逆性相關(guān)基因、與優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)基因、與生物藥品和保健品相關(guān)基因、與毒物降解相關(guān)基因、與工業(yè)用酶相關(guān)基因等也能夠是具調(diào)控作用因子等。基因工程的基本操作程序四班第8頁(yè)(1)從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因什么是基因文庫(kù)？什么是基因組文庫(kù)？什么是個(gè)別基因文庫(kù)？怎樣從基因文庫(kù)中得到咱們所需目標(biāo)基因？目標(biāo)基因相關(guān)信息與什么相聯(lián)絡(luò)？基因工程的基本操作程序四班第9頁(yè)概念：基因文庫(kù)（genelibrary）基因組文庫(kù)個(gè)別基因文庫(kù)（如cDNA文庫(kù)）將含有某種生物不一樣基因許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物不一樣基因,稱(chēng)為基因文庫(kù)(genelibrary)基因工程的基本操作程序四班第10頁(yè)基因組文庫(kù):

基因文庫(kù)中包含了一個(gè)生物全部基因,這種基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù).個(gè)別基因文庫(kù):

基因文庫(kù)中包含了一個(gè)生物一個(gè)別基因,這種基因文庫(kù)叫做個(gè)別基因文庫(kù).基因工程的基本操作程序四班第11頁(yè)基因組文庫(kù)與個(gè)別基因文庫(kù)關(guān)系基因工程的基本操作程序四班第12頁(yè)提取某種生物全部DNA用適當(dāng)限制酶酶切一定大小DNA片段將DNA片段與載體連接重組載體基因組文庫(kù)導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（2）.基因文庫(kù)構(gòu)建方法①基因組文庫(kù)構(gòu)建基因工程的基本操作程序四班第13頁(yè)思索：基因文庫(kù)怎樣構(gòu)建？

假如用某種生物發(fā)育某個(gè)時(shí)期mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生各種互補(bǔ)DNA（也叫cDNA）片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，那么，這個(gè)受體菌群體就組成了這種生物cDNA文庫(kù)。這種方法稱(chēng)——反轉(zhuǎn)錄法基因工程的基本操作程序四班第14頁(yè)提取某種生物某器官或特定發(fā)育時(shí)期mRNA單鏈DNA雙鏈cDNA片段重組載體與載體連接cDNA文庫(kù)反（逆）轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存②

cDNA文庫(kù)構(gòu)建-----逆轉(zhuǎn)錄法：

基因工程的基本操作程序四班第15頁(yè)mRNARNA－DNA雜合雙鏈單鏈DNA雙鏈DNA逆轉(zhuǎn)錄（cDNA）DNA聚合酶基因工程的基本操作程序四班第16頁(yè)真核生物基因用逆轉(zhuǎn)錄法得到cDNA與原基因相同嗎？有哪些差異？原核生物基因呢？思索？基因工程的基本操作程序四班第17頁(yè)基因組DNA文庫(kù)cDNA文庫(kù)基因組DNA文庫(kù)與cDNA文庫(kù)比較基因工程的基本操作程序四班第18頁(yè)基因組DNA文庫(kù)與cDNA文庫(kù)比較基因工程的基本操作程序四班第19頁(yè)依據(jù)：目標(biāo)基因相關(guān)信息。如：依據(jù)基因核苷酸序列基因功效基因在染色體上位置基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA

基因表示產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特征（4）從基因文庫(kù)中得到目標(biāo)基因方法——直接分離法(鳥(niǎo)槍法)基因工程的基本操作程序四班第20頁(yè)1、構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞A、染色體DNA

B、線粒體DNAC、總mRNA

D、tRNA2、目標(biāo)基因可從基因文庫(kù)中取得，以下相關(guān)基因文庫(kù)描述正確是A、某生物全套基因就是一個(gè)基因文庫(kù)B、將含有某種生物不一樣許多DNA片段，導(dǎo)入某個(gè)生物體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫(kù)C、含有一個(gè)生物全部基因基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)D、含有一個(gè)生物一個(gè)別基因基因文庫(kù)叫cDNA文庫(kù)AC基因工程的基本操作程序四班第21頁(yè)（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一項(xiàng)生物體外復(fù)制特定DNA片段核酸合成技術(shù)。經(jīng)過(guò)此技術(shù)，可獲取大量目標(biāo)基因?；蚬こ痰幕静僮鞒绦蛩陌嗟?2頁(yè)P(yáng)CR技術(shù)原理：前提：原料方式PCR擴(kuò)增儀DNA復(fù)制一段已知目標(biāo)基因核苷酸序列：以_____方式擴(kuò)增，即____（n為擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)）指數(shù)2n模板DNA；DNA引物；四種脫氧核苷酸；TaqDNA聚合酶；離子基因工程的基本操作程序四班第23頁(yè)

過(guò)程變性、退火、延伸三步曲變性：加熱至90～95℃雙鏈DNA解鏈成為單鏈DNA退火：冷卻至55～60℃?zhèn)€別引物與模板單鏈DNA特定互補(bǔ)部位相配對(duì)和結(jié)合延伸：加熱至70～75℃以目標(biāo)基因?yàn)槟０澹铣苫パa(bǔ)新DNA鏈變性退火延伸基因工程的基本操作程序四班第24頁(yè)1、在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀DNA分子片段為ATGTG／TACAC，要使其數(shù)量增多，可用PCR技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予條件是①雙鏈DNA分子為模板②ATGTG或TACAC模板鏈③四種脫氧核苷酸④四種核苷酸⑤DNA聚合酶⑥熱穩(wěn)定DNA聚合酶⑦引物⑧溫度改變⑨恒溫A．①③④⑦⑨B．①④⑥⑦⑧C．②⑤⑥⑦⑨D．①③⑥⑦⑧D2、在基因工程中，把選出目標(biāo)基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是460個(gè)）放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸個(gè)數(shù)是A.540個(gè) B.8100個(gè) C.17280個(gè) D.7560個(gè)B基因工程的基本操作程序四班第25頁(yè)（3）人工合成——依據(jù)已知氨基酸序列合成DNA蛋白質(zhì)氨基酸序列mRNA核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因核苷酸序列推測(cè)推測(cè)目標(biāo)基因化學(xué)合成基因工程的基本操作程序四班第26頁(yè)1、在已知序列信息情況下，獲取目標(biāo)基因最方便方法是A、化學(xué)合成法

B、基因組文庫(kù)法C、cDNA文庫(kù)法

D、聚合酶鏈反應(yīng)2、以下獲取目標(biāo)基因方法中需要模板鏈?zhǔn)洽購(gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目標(biāo)基因②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因③反轉(zhuǎn)錄法④經(jīng)過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成A．①②③④B．①②③C．②③④ D．②③AD基因工程的基本操作程序四班第27頁(yè)3、目標(biāo)基因主要是指_______________結(jié)構(gòu)基因。取得目標(biāo)基因常見(jiàn)方法有三種：（1）從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因，依據(jù)基因_________序列，基因在________上位置，基因________產(chǎn)物mRNA，基因_______產(chǎn)物蛋白質(zhì)等獲取目標(biāo)基因。（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在________完成核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目標(biāo)基因________序列，方便于合成_________。（3）假如基因較小且核苷酸序列已知，能夠經(jīng)過(guò)____________方法。編碼蛋白質(zhì)核苷酸染色體轉(zhuǎn)錄表示體外核苷酸引物人工合成基因工程的基本操作程序四班第28頁(yè)二、基因表示載體構(gòu)建——關(guān)鍵（1）用一定_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出____________。（2）用___________切斷目基因，使其產(chǎn)生_________________。（3）將切下目標(biāo)基因片段插入質(zhì)粒______處，再加入適量___________，形成了一個(gè)重組

DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一個(gè)限制酶黏性末端切口DNA連接酶相同1.過(guò)程:基因工程的基本操作程序四班第29頁(yè)質(zhì)粒目標(biāo)基因限制酶處理一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口取得目標(biāo)基因DNA連接酶表示載體同種1.過(guò)程:基因工程的基本操作程序四班第30頁(yè)2、基因表示載體作用a、使目標(biāo)基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代b、同時(shí)使目標(biāo)基因能表示和發(fā)揮作用思索：作為基因工程表示載體，只需含有目標(biāo)基因就能夠完成任務(wù)嗎？為何？基因工程的基本操作程序四班第31頁(yè)不能夠。因?yàn)槟繕?biāo)基因在表示載體中得到表示并發(fā)揮作用，還需要有其它控制元件，如開(kāi)啟子、終止子和標(biāo)識(shí)基因等。必須構(gòu)建上述元件主要理由是：（1）生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物本身基因開(kāi)啟子才能比較有利于基因表示；（2）經(jīng)過(guò)cDNA文庫(kù)取得目標(biāo)基因沒(méi)有開(kāi)啟子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄；（3）目標(biāo)基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)識(shí)；（4）為了增強(qiáng)目標(biāo)基因表示水平，往往還要增加一些其它調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；（5）有時(shí)需要確定目標(biāo)基因表示產(chǎn)物存在于細(xì)胞什么部位，往往要加上能夠標(biāo)識(shí)存在部位基因（或做成目標(biāo)基因與標(biāo)識(shí)基因融合基因），如綠色熒光蛋白基因等?；蚬こ痰幕静僮鞒绦蛩陌嗟?2頁(yè)3.基因表示載體組成：它們有什么作用？a、目標(biāo)基因b、開(kāi)啟子c、終止子d、標(biāo)識(shí)基因位于基因首端,是mRNA結(jié)合位點(diǎn)位于基因末端,終止轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目標(biāo)基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞基因工程的基本操作程序四班第33頁(yè)1、（多項(xiàng)選擇）一個(gè)基因表示載體構(gòu)建應(yīng)包含A．目標(biāo)基因B．開(kāi)啟子C．終止子D．標(biāo)識(shí)基因ABCD2、以下關(guān)于基因表示載體敘述不正確是A．開(kāi)啟子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，是起始密碼B．開(kāi)啟子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)DNA短片段，對(duì)mRNA轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C．標(biāo)識(shí)基因是為了判別受體細(xì)胞中是否有目標(biāo)基因從而便于篩選D．基因表示載體構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不一樣而有所差異A3、當(dāng)前轉(zhuǎn)基因工程能夠A.打破地理隔離但不能突破生殖隔離B.打破生殖隔離但不能突破地理隔離C.完全突破地理隔離和生殖隔離D.個(gè)別突破地理隔離和生殖隔離C基因工程的基本操作程序四班第34頁(yè)常見(jiàn)受體細(xì)胞：有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。將目標(biāo)基因?qū)胧荏w細(xì)胞原理借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞路徑。三、將目標(biāo)基因?qū)胧荏w細(xì)胞吸附、注入、合成、裝配、釋放基因工程的基本操作程序四班第35頁(yè)1、將目標(biāo)基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法特點(diǎn):能感染雙子葉植物和祼子植物,對(duì)單子葉植物無(wú)感染能力Ti質(zhì)粒T—DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上轉(zhuǎn)化過(guò)程:Ti質(zhì)粒目標(biāo)基因構(gòu)建表示載體導(dǎo)入植物細(xì)胞插入植物細(xì)胞染色DNA表示新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌基因工程的基本操作程序四班第36頁(yè)（2）基因槍法

基因槍法又稱(chēng)微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒表面表示載體DNA打入受體細(xì)胞中，使目標(biāo)基因與其整合并表示方法?；蚬こ痰幕静僮鞒绦蛩陌嗟?7頁(yè)（3）花粉通道法植物花粉在柱頭上萌發(fā)后，花粉管要穿過(guò)花柱直通胚囊?；ǚ酃芡ǖ婪ň褪窃谥参锸芊酆?，花粉形成花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加DNA（含目標(biāo)基因），使目標(biāo)基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞?；蚬こ痰幕静僮鞒绦蛩陌嗟?8頁(yè)2、將目標(biāo)基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:顯微注射技術(shù)操作程序:提純含目標(biāo)基因表示載體取受精卵顯微注射移植到子宮受精卵發(fā)育新性狀動(dòng)物基因工程的基本操作程序四班第39頁(yè)3、將目標(biāo)基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常見(jiàn)法：Ca2+處理常見(jiàn)菌：大腸桿菌微生物作受體細(xì)胞原因：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)少過(guò)程：Ca2+處理大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞表示載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA基因工程的基本操作程序四班第40頁(yè)1、基因工程中科學(xué)家常見(jiàn)細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，原因是A．結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便B．繁殖速度快C．遺傳物質(zhì)含量少、簡(jiǎn)單D．性狀穩(wěn)定、變異少2、基因工程常見(jiàn)受體細(xì)胞有①大腸桿菌②枯草桿菌③支原體④動(dòng)植物細(xì)胞A．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④BD3、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工，在基因操作基礎(chǔ)步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配正確步驟是A.人工合成基因B.目標(biāo)基因與運(yùn)載體結(jié)合C.將目標(biāo)基因?qū)胧荏w細(xì)胞D.目標(biāo)基因檢測(cè)和表示C基因工程的基本操作程序四班第41頁(yè)4.采取基因工程方法培育抗蟲(chóng)棉，以下導(dǎo)入目標(biāo)基因做法正確是①將毒素蛋白質(zhì)注射到棉受精卵中②將編碼毒素蛋白DNA序列注射到棉受精卵中③將編碼毒素蛋白DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉子房并進(jìn)入受精卵中④將編碼毒素蛋白DNA序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌感染棉體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)A．①②B．②③C．③④D．①④C5.以下屬于基因工程中導(dǎo)入目標(biāo)基因方法是①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法②基因槍法③花粉管道法④顯微注射法⑤胚胎移植⑥D(zhuǎn)NA分子雜交法A．①②③④⑤⑥B．①②③④⑤C．①②③④D．①③④⑤⑥C基因工程的基本操作程序四班第42頁(yè)(四)目標(biāo)基因檢測(cè)與判定檢測(cè)①導(dǎo)入檢測(cè)：目標(biāo)基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞方法——DNA分子雜交②表示檢測(cè)轉(zhuǎn)錄檢測(cè)——分子雜交翻譯檢測(cè)——抗原抗體雜交分子檢測(cè)法判定抗蟲(chóng)判定抗病判定活性判定等個(gè)體水平判定基因工程的基本操作程序四班第43頁(yè)知識(shí)延伸——DNA分子雜交技術(shù)該方法是依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)標(biāo)準(zhǔn)，把互補(bǔ)雙鏈DNA解開(kāi)，把單股DNA小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光催化劑等進(jìn)行標(biāo)識(shí)，之后同被檢測(cè)DNA中同源互補(bǔ)序列雜交，從而檢出所要查明DNA或基因?；蚬こ痰幕静僮鞒绦蛩陌嗟?4頁(yè)返回基因工程的基本操作程序四班第45頁(yè)1、用β-珠蛋白DNA探針能夠檢測(cè)出遺傳病是A．鐮刀狀細(xì)胞貧血癥B．白血病C．壞血病D．苯丙酮尿癥A2、應(yīng)用基因工程技術(shù)診療疾病過(guò)程中必須使用基因探針才能到達(dá)檢測(cè)疾病目標(biāo)。這里基因探針是A．用于檢測(cè)疾病醫(yī)療器械B．用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)識(shí)DNA分子C．合成β-珠蛋白DNAD．合成苯丙羥化酶DNA片段BA基因工程的基本操作程序四班第46頁(yè)思索與探究：2.依據(jù)農(nóng)桿菌可將目標(biāo)基因?qū)腚p子葉植物機(jī)理,你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物原因嗎?若將一個(gè)抗病基因?qū)胄←溨?理論上講你應(yīng)該怎樣做?①要選擇適當(dāng)農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇侨哭r(nóng)桿菌菌株都能夠侵染單子葉植物；②要加趨化和誘導(dǎo)物質(zhì)，普通為乙酰丁香酮等，目標(biāo)是使農(nóng)桿菌向植物組織受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌Vir區(qū)（誘導(dǎo)）基因，使T-DNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體DNA上。3.利用大腸桿菌能夠生產(chǎn)出人胰島素，聯(lián)絡(luò)前面相關(guān)細(xì)胞器功效知識(shí)，結(jié)合基因工程操作程序基礎(chǔ)思緒，思索一下，若要生產(chǎn)人糖蛋白，能夠用大腸桿菌嗎？有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合糖鏈，這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細(xì)胞中，大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器，所以，在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能。基因工程的基本操作程序四班第47頁(yè)4.β-珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白主要組成成份。當(dāng)它成份異常時(shí)，動(dòng)物有可能患某種疾病，如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如讓你用基因工程方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠β-珠蛋白，想一想，應(yīng)怎樣進(jìn)行設(shè)計(jì)？（1）從小鼠中克隆出β-珠蛋白基因編碼序列（cDNA)。（2）將cDNA前接上在大腸桿菌中能夠適用開(kāi)啟子，另外加上抗四環(huán)素基因，構(gòu)建成一個(gè)表示載體。（3）將表示載體導(dǎo)入無(wú)四環(huán)素抗性大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。假如表示載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)不含有抗四環(huán)素基因而死掉；假如培養(yǎng)基上長(zhǎng)出大腸桿菌菌落，則表明β-珠蛋白基因已進(jìn)入其中。（4）培養(yǎng)進(jìn)入了β-珠蛋白基