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實(shí)驗(yàn)七、理化因素對(duì)微生物生長的影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)和掌握研究理化因素對(duì)微生物生長的影響2、學(xué)習(xí)和掌握利用濁度法測(cè)量微生物生長的方法;3、了解不同pH對(duì)大腸桿菌生長的影響。研究方法:利用液體培養(yǎng)——定量測(cè)定生長量定量測(cè)定微生物生長量的常用方法濁度法重量法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法菌落計(jì)數(shù)法濁度法原理:在一定范圍內(nèi),菌懸液中的細(xì)胞濃度與混濁度成正比,即與光吸收值(OD)成正比,菌數(shù)越多,OD越大。因此,借助于分光光度計(jì),在一定波長下測(cè)定菌懸液的OD,就可反應(yīng)出菌液的濃度。測(cè)定方法:測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)物在600nm光吸收優(yōu)缺點(diǎn)適應(yīng)范圍:?jiǎn)渭?xì)胞無分支的微生物生長的測(cè)定注意事項(xiàng):特點(diǎn):快速、簡(jiǎn)便;但易受干擾。重量法原理:將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離出來,然后烘干至恒重(干燥溫度可采用105℃、100℃或80℃)、稱重。優(yōu)缺點(diǎn):快速、簡(jiǎn)便;但易受干擾。適應(yīng)范圍:絲狀微生物生長的測(cè)定測(cè)定方法干重法濕重法注意事項(xiàng)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法不足:不能區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞,應(yīng)用范圍較窄一些小的細(xì)胞在顯微鏡下很難看到;樣品中菌液濃度不能低于106個(gè)/mL不能用于菌絲體或呈鏈狀而不分散的微生物測(cè)定。

優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)單、快速;重復(fù)性高平板菌落計(jì)數(shù)法優(yōu)點(diǎn)靈敏度高可以區(qū)分死活細(xì)胞應(yīng)用廣食品、飲料等微生物檢查消毒滅菌效果檢查不足測(cè)定的結(jié)果誤差也較大。操作也比較煩瑣需要的時(shí)間較長實(shí)驗(yàn)操作步驟配制牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(每組500mL)分裝于6個(gè)三角瓶中(50mL/瓶)將上述培養(yǎng)基中pH分別調(diào)到3、5、7、9、11、13(每種樣品留出10ml以作空白)包扎121度滅菌20分鐘,冷卻接種(0.5ml/瓶大腸桿菌過夜培養(yǎng)物)37度恒溫震蕩培養(yǎng)24小時(shí),測(cè)定光吸收值(OD600)實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求格式:按照正式發(fā)表論文格式題目:環(huán)境中四大類細(xì)胞型微生物的分離和生物學(xué)性質(zhì)研究作者,學(xué)號(hào)摘要:主要方法和和主要結(jié)果前言(為什么要進(jìn)行該實(shí)驗(yàn),要達(dá)到什么目的等)實(shí)驗(yàn)方法(培養(yǎng)基配制、采樣、分離、純化、性質(zhì)研究(菌株形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察、大小測(cè)定、生理生化實(shí)驗(yàn)、環(huán)境因素影響等)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:分離實(shí)驗(yàn)結(jié)果、形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特征觀察結(jié)果、初步鑒

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