生化分離分析技術(shù)與原理智慧樹知到期末考試答案2024年

生化分離分析技術(shù)與原理智慧樹知到期末考試答案2024年生化分離分析技術(shù)與原理請(qǐng)根據(jù)存在于層析基質(zhì)上的交換容量從大到小排序（）

A:薄層層析＞柱層析＞紙層析B:柱層析＞紙層析＞薄層層析C:薄層層析＞紙層析＞柱層析D:柱層析＞薄層層析＞紙層析答案:柱層析＞薄層層析＞紙層析在層析技術(shù)中，分配系數(shù)是指（）

A:二種化合物在固相與流動(dòng)相中的分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度比B:一種化合物在固相與流動(dòng)相中的分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度比C:二種化合物在固相與流動(dòng)相中的分配達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量比D:一種化合物在固相與流動(dòng)相中的分配達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量比答案:一種化合物在固相與流動(dòng)相中的分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度比關(guān)于凝膠層析加樣的說(shuō)法正確的是（）

A:測(cè)定樣品含量的方法靈敏或床體積大時(shí)，加樣量可少B:加樣量多少與分離效果無(wú)關(guān)C:加樣量與層析柱大小無(wú)關(guān)D:加樣量與測(cè)定方法有關(guān)答案:加樣量與測(cè)定方法有關(guān)下列哪項(xiàng)（）不是層析技術(shù)中的速率理論指出的影響柱效的因素

A:分子擴(kuò)散B:理論塔板高度C:傳質(zhì)阻力D:渦流擴(kuò)散答案:理論塔板高度以下不屬于常用載氣的氣體是（）

A:氧氣B:氫C:二氧化碳D:氮答案:氧氣關(guān)于氣液色譜，以下說(shuō)法正確的是（）

A:各組分分配系數(shù)差異越大，越不利于分離B:各組分沿柱子移動(dòng)速度取決于它們?cè)谝后w固定相中的溶解程度C:利用惰性氣體如氮?dú)饣蜓鯕獾韧ㄟ^(guò)柱子進(jìn)行洗脫D:樣品以液體形式從柱子前端引入答案:各組分沿柱子移動(dòng)速度取決于它們?cè)谝后w固定相中的溶解程度柱層析中的洗脫劑是（）

A:流動(dòng)相B:固定相C:固體相D:氣相答案:流動(dòng)相一般來(lái)說(shuō)，不是理想基質(zhì)的要求的有（）

A:當(dāng)配體固化和各種因素變化時(shí)，基質(zhì)較易受影響B(tài):極低的非特異吸附性C:高度親水性D:具有適當(dāng)?shù)亩嗫仔源鸢?當(dāng)配體固化和各種因素變化時(shí)，基質(zhì)較易受影響關(guān)于離子交換劑的處理，以下說(shuō)法不正確的是（）

A:取適量的固體離子交換劑先用水浸泡，充分膨脹后即可處理B:加過(guò)量水懸浮除去細(xì)顆粒，用酸堿浸泡，除去雜質(zhì)并使其帶上需要的反離子C:每次用酸或堿處理后，均應(yīng)先用水洗滌至近中性，再用堿或酸處理，再用水洗滌至中性后使用或裝柱D:酸堿處理的次序決定了離子交換劑攜帶反離子的類型答案:每次用酸或堿處理后，均應(yīng)先用水洗滌至近中性，再用堿或酸處理，再用水洗滌至中性后使用或裝柱聚焦層析的原理之一蛋白質(zhì)的行為說(shuō)法不正確的是（）

A:蛋白質(zhì)所帶電荷取決于等電點(diǎn)pI與層析柱中pH的關(guān)系B:層析一開始柱中pH＜pI時(shí)，蛋白質(zhì)帶正電，不與陰離子交換劑結(jié)合C:隨著洗脫液遷移，pH反復(fù)變化，蛋白質(zhì)就在各自等電點(diǎn)被洗下來(lái)D:隨著洗脫劑移動(dòng)至環(huán)境pH＞pI時(shí)，蛋白質(zhì)帶正電，并從交換劑解吸附答案:隨著洗脫劑移動(dòng)至環(huán)境pH＞pI時(shí)，蛋白質(zhì)帶正電，并從交換劑解吸附高效液相色譜儀的檢測(cè)系統(tǒng)常用的檢測(cè)器有紫外檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等；下列關(guān)于這三種檢測(cè)器的說(shuō)法中正確的是（）

A:檢測(cè)器的選擇主要取決于待檢測(cè)組分的性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)對(duì)靈敏度的要求B:凡具有與流動(dòng)相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測(cè)器檢測(cè)C:熒光檢測(cè)器的靈敏度是這三種檢測(cè)器中最高的，常用于痕量分析和梯度洗脫樣品D:紫外檢測(cè)器對(duì)溫度和流速變化不敏感答案:示差折光檢測(cè)器抗原和抗體在體外進(jìn)行的反應(yīng)，又稱血清學(xué)反應(yīng)，可借助免疫學(xué)方法檢測(cè)。對(duì)抗原或抗體進(jìn)行適當(dāng)?shù)臉?biāo)記的方法有同位素標(biāo)記法、酶標(biāo)記法和熒光標(biāo)記法等。下列關(guān)于這三種標(biāo)記方法的說(shuō)法中正確的有（）

A:與H標(biāo)記相比，I標(biāo)記的方法更簡(jiǎn)便且易獲得高比放射性標(biāo)記物B:酶標(biāo)記法使用的酶類，其活性不受機(jī)體組織、血清及其提取物的影響C:用同位素標(biāo)記法時(shí)，比活性（或比放射性強(qiáng)度）大小不會(huì)直接影響測(cè)定的靈敏度D:用熒光素標(biāo)記時(shí)，被標(biāo)抗體或抗原溶液一定要比較純，效果才好答案:與H標(biāo)記相比，I標(biāo)記的方法更簡(jiǎn)便且易獲得高比放射性標(biāo)記物;酶標(biāo)記法使用的酶類，其活性不受機(jī)體組織、血清及其提取物的影響;用熒光素標(biāo)記時(shí)，被標(biāo)抗體或抗原溶液一定要比較純，效果才好下列關(guān)于親和層析實(shí)質(zhì)性描述中正確的有（）

A:當(dāng)把固相載體裝入小層析柱后，讓欲分離的樣品液通過(guò)該柱，無(wú)親和力或非特異吸附的物質(zhì)被緩沖液首先洗滌出來(lái)，形成第一個(gè)層析峰B:在親和層析中，如果樣品液中存在兩個(gè)以上的物質(zhì)與固相載體具有親和力，它們不可能被分離開C:固化后的配體仍保持識(shí)別、束縛特異物質(zhì)的能力D:把物質(zhì)S從固相載體上解離下來(lái)的方法包括改變緩沖液的pH值、增加離子強(qiáng)度、加入抑制劑等答案:固化后的配體仍保持識(shí)別、束縛特異物質(zhì)的能力;當(dāng)把固相載體裝入小層析柱后，讓欲分離的樣品液通過(guò)該柱，無(wú)親和力或非特異吸附的物質(zhì)被緩沖液首先洗滌出來(lái)，形成第一個(gè)層析峰;把物質(zhì)S從固相載體上解離下來(lái)的方法包括改變緩沖液的pH值、增加離子強(qiáng)度、加入抑制劑等下列關(guān)于凝膠過(guò)濾時(shí)加樣和洗脫的描述中正確的有（）

A:洗脫一般都以單一緩沖液（如磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液等）或者鹽溶液作為洗脫液，必要的時(shí)候也可用蒸餾水作洗脫液B:所有的洗脫液均以能溶解被洗脫物質(zhì)和不使其變性或失活為原則C:可以通過(guò)恒流泵或控制操作壓嚴(yán)格控制洗脫時(shí)的流速，保證收集的每一部分洗脫體積恒定D:加樣量與測(cè)定方法和層析柱大小有關(guān)，且加樣量掌握得當(dāng)可提高分離效果答案:加樣量與測(cè)定方法和層析柱大小有關(guān)，且加樣量掌握得當(dāng)可提高分離效果;所有的洗脫液均以能溶解被洗脫物質(zhì)和不使其變性或失活為原則;洗脫一般都以單一緩沖液（如磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液等）或者鹽溶液作為洗脫液，必要的時(shí)候也可用蒸餾水作洗脫液;可以通過(guò)恒流泵或控制操作壓嚴(yán)格控制洗脫時(shí)的流速，保證收集的每一部分洗脫體積恒定酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）現(xiàn)在已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)（immunoenzymatictechniques）的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù)。下列關(guān)于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法的說(shuō)法中正確的有（）

A:“用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標(biāo)抗體，加底物顯色”是雙抗體夾心法的操作B:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原C:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法可大致分為包被、反應(yīng)、洗滌、底物顯色等四個(gè)步驟D:免疫吸附劑、標(biāo)記物、和顯色劑是ELISA中3種必要的試劑答案:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原;酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法可大致分為包被、反應(yīng)、洗滌、底物顯色等四個(gè)步驟;免疫吸附劑、標(biāo)記物、和顯色劑是ELISA中3種必要的試劑;“用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標(biāo)抗體，加底物顯色”是雙抗體夾心法的操作影響吸附劑操作容量的因素包括配體性質(zhì)、配體在吸附劑中的含量、配體與吸附物結(jié)合時(shí)的位阻效應(yīng)大小、基質(zhì)的多孔性、操作條件。下列哪些操作可以有效提高吸附劑的操作容量？（）

A:在配體和基質(zhì)之間引入“手臂”B:對(duì)解離常數(shù)較大的配體，增加配體在基質(zhì)上的濃度C:選擇合適的樣品濃度、pH、離子強(qiáng)度及上樣速度D:蛋白質(zhì)和多肽作配體時(shí)，以最少的共價(jià)鍵連接到載體上答案:在配體和基質(zhì)之間引入“手臂”;對(duì)解離常數(shù)較大的配體，增加配體在基質(zhì)上的濃度;蛋白質(zhì)和多肽作配體時(shí)，以最少的共價(jià)鍵連接到載體上;選擇合適的樣品濃度、p下列關(guān)于聚丙烯酰胺凝膠的說(shuō)法中正確的有（）

A:一般聚丙烯酰胺凝膠均制成珠狀顆粒，以干凝膠形式出售，使用前必須溶脹B:聚丙烯酰胺凝膠對(duì)芳香族的、酸性和堿性的化合物有吸附現(xiàn)象，并且這種吸附現(xiàn)象無(wú)法通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作來(lái)避免C:聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺（單體）在甲叉雙丙烯酰胺（雙體）作交聯(lián)劑，過(guò)硫酸胺作催化劑，N,N,N',N'-四甲基乙二胺（TEMED)作加速劑的條件下聚合而成D:聚丙烯酰胺凝膠要避免長(zhǎng)期與強(qiáng)酸和強(qiáng)堿接觸，否則，酰胺基將迅速發(fā)生分解（高溫條件）答案:聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺（單體）在甲叉雙丙烯酰胺（雙體）作交聯(lián)劑，過(guò)硫酸胺作催化劑，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺（TEME;作加速劑的條件下聚合而成;聚丙烯酰胺凝膠對(duì)芳香族的、酸性和堿性的化合物有吸附現(xiàn)象，并且這種吸附現(xiàn)象無(wú)法通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作來(lái)避免下列關(guān)于薄層層析過(guò)程中操作及注意事項(xiàng)的說(shuō)法中你認(rèn)為正確的有（）

A:活化時(shí)應(yīng)避免突然升溫和降溫操作,否則薄層在展層過(guò)程易于脫落B:用于柱層柱的吸附劑不能涂布薄層板C:選擇展層劑的標(biāo)準(zhǔn)是分離物的極性和固定相的性質(zhì)D:薄層均一性和厚度對(duì)樣品的分離效果以及Rf值的重復(fù)性影響很大答案:用于柱層柱的吸附劑不能涂布薄層板;薄層均一性和厚度對(duì)樣品的分離效果以及Rf值的重復(fù)性影響很大;活化時(shí)應(yīng)避免突然升溫和降溫操作,否則薄層在展層過(guò)程易于脫落;選擇展層劑的標(biāo)準(zhǔn)是分離物的極性和固定相的性質(zhì)利用親和層析可以分離酶和雜質(zhì)，下面是一些關(guān)于這個(gè)實(shí)驗(yàn)中洗脫的描述，請(qǐng)選出你認(rèn)為正確的選項(xiàng)（）

A:特異性洗脫再次利用生物學(xué)特異性，只洗脫和配基專一作用的酶B:非特異性洗脫的原理是改變緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、介電常數(shù)或溫度使物質(zhì)構(gòu)象改變C:當(dāng)洗脫結(jié)束后，連續(xù)用大量的洗脫液或高濃度的鹽溶液徹底洗滌柱子，再用平衡緩沖液使層析柱重新平衡；經(jīng)過(guò)這樣處理的柱子可再次上樣，進(jìn)行第二次親和層析D:可能出現(xiàn)的洗脫結(jié)果只會(huì)是酶與雜質(zhì)沒(méi)有完全分離或酶與雜質(zhì)完全分開兩種答案:特異性洗脫再次利用生物學(xué)特異性，只洗脫和配基專一作用的酶;非特異性洗脫的原理是改變緩沖液的p;離子強(qiáng)度、介電常數(shù)或溫度使物質(zhì)構(gòu)象改變下面是一些關(guān)于聚焦層析原理的說(shuō)法，請(qǐng)選出你認(rèn)為正確的選項(xiàng)（）

A:聚焦層析柱中的pH梯度溶液是在淋洗過(guò)程中自動(dòng)形成的，但是隨著淋洗的進(jìn)行，pH梯度會(huì)逐漸向下遷移；從底部流出液的pH最后恒定于某值，這時(shí)層析柱的pH梯度消失B:不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，它們?cè)诒浑x子交換劑結(jié)合以前，移動(dòng)距離是不同的，洗脫出來(lái)的先后次序按等電點(diǎn)排列C:在聚焦層析中，當(dāng)洗脫液流進(jìn)多緩沖交換劑時(shí)，pH梯度溶液可以自動(dòng)形成的原因是交換劑帶具有有緩沖能力的電荷基團(tuán)D:在聚焦層析過(guò)程中，一種樣品分次加入時(shí)，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的時(shí)間進(jìn)行聚焦，剩余樣品再加到柱上，其聚焦過(guò)程能順利完成答案:在聚焦層析中，當(dāng)洗脫液流進(jìn)多緩沖交換劑時(shí)，pH梯度溶液可以自動(dòng)形成的原因是交換劑帶具有有緩沖能力的電荷基團(tuán);聚焦層析柱中的pH梯度溶液是在淋洗過(guò)程中自動(dòng)形成的，但是隨著淋洗的進(jìn)行，pH梯度會(huì)逐漸向下遷移；從底部流出液的pH最后恒定于某值，這時(shí)層析柱的pH梯度消失;不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，它們?cè)诒浑x子交換劑結(jié)合以前，移動(dòng)距離是不同的，洗脫出來(lái)的先后次序按等電點(diǎn)排列;在聚焦層析過(guò)程中，一種樣品分次加入時(shí)，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的時(shí)間進(jìn)行聚焦，剩余樣品再加到柱上，其聚焦過(guò)程能順利完成吸附柱層析是以固體吸附劑（極性和非極性）為固定相，以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動(dòng)相構(gòu)成柱狀的一種層析方法。下面關(guān)于吸附柱層析的說(shuō)法中你認(rèn)為正確的有（）

A:在層析過(guò)程中推動(dòng)固定相上的物質(zhì)向一定方向移動(dòng)的液體或氣體稱為流動(dòng)相B:操作容量數(shù)值大表明基質(zhì)對(duì)某種成分的結(jié)合力強(qiáng)C:固定相能與相關(guān)的化合物進(jìn)行可逆性的吸附、溶解和交換作用D:外水體積、內(nèi)水體積、基質(zhì)體積都是隨著床體積和基質(zhì)性質(zhì)變化而變化的答案:固定相能與相關(guān)的化合物進(jìn)行可逆性的吸附、溶解和交換作用;在層析過(guò)程中推動(dòng)固定相上的物質(zhì)向一定方向移動(dòng)的液體或氣體稱為流動(dòng)相;操作容量數(shù)值大表明基質(zhì)對(duì)某種成分的結(jié)合力強(qiáng);外水體積、內(nèi)水體積、基質(zhì)體積都是隨著床體積和基質(zhì)性質(zhì)變化而變化的下列關(guān)于有機(jī)溶劑沉淀法的描述中正確的有（）

A:有機(jī)溶劑加入水溶液時(shí)產(chǎn)生放熱反應(yīng)會(huì)引起蛋白質(zhì)變性，所以有機(jī)溶劑需預(yù)冷至-10℃，并且在低溫下進(jìn)行操作B:有機(jī)溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因與其脫水作用和介電常數(shù)有關(guān)C:用有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)時(shí)，宜在稀鹽溶液或低濃度緩沖液中進(jìn)行D:在某些蛋白質(zhì)溶液中加入多價(jià)陽(yáng)離子（如Zn2+和Cu2+等）可大大減少有機(jī)溶劑的用量答案:有機(jī)溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因與其脫水作用和介電常數(shù)有關(guān);有機(jī)溶劑加入水溶液時(shí)產(chǎn)生放熱反應(yīng)會(huì)引起蛋白質(zhì)變性，所以有機(jī)溶劑需預(yù)冷至-10℃，并且在低溫下進(jìn)行操作;用有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)時(shí)，宜在稀鹽溶液或低濃度緩沖液中進(jìn)行;在某些蛋白質(zhì)溶液中加入多價(jià)陽(yáng)離子（如Zn2+和Cu2+等）可大大減少有機(jī)溶劑的用量高效液相色譜儀的分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。下列說(shuō)法中正確的是（）

A:色譜柱的固定相由基質(zhì)和固定液構(gòu)成B:正相色譜適宜于分離極性化合物，反相色譜則適宜于分離非極性或弱極性化合物C:填充色譜柱的方法有干法和濕法兩種，顆粒直徑大于20μm的可用干法填充，顆粒直徑10μm以下的采用濕法裝柱D:固定相中的基質(zhì)表面經(jīng)過(guò)機(jī)械涂漬/化學(xué)法偶聯(lián)各種基團(tuán)/配體的有機(jī)化合物，對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性答案:色譜柱的固定相由基質(zhì)和固定液構(gòu)成;固定相中的基質(zhì)表面經(jīng)過(guò)機(jī)械涂漬/化學(xué)法偶聯(lián)各種基團(tuán)/配體的有機(jī)化合物，對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性;填充色譜柱的方法有干法和濕法兩種，顆粒直徑大于20μm的可用干法填充，顆粒直徑10μm以下的采用濕法裝柱;正相色譜適宜于分離極性化合物，反相色譜則適宜于分離非極性或弱極性化合物抽提溶液應(yīng)選擇對(duì)有效成分溶解度大，破壞作用小的溶液。（）

A:錯(cuò)誤B:正確答案:正確堿性蛋白質(zhì)應(yīng)該選用低pH值得溶液抽提，酸性蛋白質(zhì)則相反。（）

A:錯(cuò)B:對(duì)答案:錯(cuò)總交換容量受測(cè)定條件的影響。（）

A:錯(cuò)B:對(duì)答案:對(duì)帶有強(qiáng)電荷基團(tuán)的離子交換劑由于在任何pH值的溶液中部處于解離狀態(tài)，所以交換容量基本與pH值變化有密切關(guān)系

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確正相色譜是固定液的極性大于流動(dòng)相的極性。（）

A:錯(cuò)誤B:正確答案:正確當(dāng)溶液中的離子強(qiáng)度增大時(shí)，交換劑的有效交換容量降低。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確有機(jī)溶劑與鹽溶液一樣具有脫水作用，而且介電系數(shù)比水大而導(dǎo)致溶劑的極性減小。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:錯(cuò)誤當(dāng)用同樣直徑的層析柱分離兩種以上的物質(zhì)時(shí)，長(zhǎng)層析柱比短的分辨率低。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:錯(cuò)誤凝集素在糖蛋白上的作用位點(diǎn)是糖蛋白中糖鏈的末端糖序列。()

A:錯(cuò)誤B:正確答案:正確在聚焦層析中，當(dāng)洗脫液流進(jìn)多緩沖交換劑時(shí)，由于交換劑帶具有緩沖能力的電荷基團(tuán)，故pH梯度溶液可以自動(dòng)形成。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確為了提高分離效果，在一定范圍內(nèi)，加樣體積越小越好。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確若用陽(yáng)離子交換劑，梯度緩沖液的pH要從低到高。（）

A:對(duì)B:錯(cuò)答案:錯(cuò)雙抗體夾心法是用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標(biāo)抗體，加底物顯色。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確聚酰胺薄膜層析法可用于酚類、醚類、硝基化合物、氨基酸及其衍生物等化合物的分析，因?yàn)榫埘０纺芎捅环蛛x物之間形成氫鍵，氫鍵的強(qiáng)弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確多緩沖交換劑和起始緩沖液的反離子只能是Cl。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:正確不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，它們?cè)诒浑x子交換劑結(jié)合以前，移動(dòng)之距離是不同的，洗脫出來(lái)的先后次序是按等電點(diǎn)排列的。（）

A:錯(cuò)誤B:正確答案:正確不可以通過(guò)加入EDTA來(lái)減弱巰基與金屬離子如鉛、鐵或銅等的相互作用。（）

A:正確B:錯(cuò)誤答案:錯(cuò)誤可將組成復(fù)雜的樣品直接注入色譜柱內(nèi)。（）

A:錯(cuò)誤B