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第第頁植物根系活力的測定試驗(yàn)方法
試驗(yàn)二植物根系活力的測定
植物根系是活躍的汲取器官和合成器官,根的生長狀況和活力水平徑直影響地上部的營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。本試驗(yàn)學(xué)習(xí)測定根系活力的甲烯藍(lán)法?!驹怼?/p>
依據(jù)沙比寧等的理論,植物對溶質(zhì)的汲取具有表面吸附的特性,并假定被吸附物質(zhì)在根系表面形成一層勻稱的單分子層;當(dāng)根系對溶質(zhì)的吸附達(dá)到飽和后,根系的活躍部分能將吸附著的物質(zhì)進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中去,并繼續(xù)產(chǎn)生吸附作用。在測定根系活力時(shí)常用甲烯藍(lán)作為吸附物質(zhì),其被吸附量可以依據(jù)吸附前后甲烯藍(lán)濃度的轉(zhuǎn)變算出,甲烯藍(lán)濃度可用比色法測定。已知1mg甲烯藍(lán)形成單分子層時(shí)掩蓋的面積為1.1m2,據(jù)此可算出根系的總汲取面積。從吸附飽和后再吸附的甲烯藍(lán)的量,可算出根系的活躍汲取表面積,作為根系汲取活力的指標(biāo)?!静牧?、儀器與試劑】1.材料:植物根系。
2.儀器及用具:分光光度計(jì);移液管;燒杯;比色管。
3.試劑:0.01mgmL-1甲烯藍(lán)溶液;0.0002molL-1〔0.075mgmL-1〕甲烯藍(lán)溶液?!痉椒ㄅc步驟】
1.甲烯藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作按表2-1用0.01mgmL-1甲烯藍(lán)溶液配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,于660nm處測定吸光度,以甲烯藍(lán)濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。表2-1甲烯藍(lán)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
2.將待測的植物根系洗凈瀝干,浸在裝有肯定量水的量筒中,用排水法測定根系的體積〔或用體積計(jì)測定〕。
3.將0.0002molL的甲烯藍(lán)溶液〔每毫升溶液中應(yīng)含0.075mg甲烯藍(lán),為清除溶液配制和比色誤差,其含量需要重新進(jìn)行比色,查標(biāo)準(zhǔn)曲線確定〕分別倒入3個(gè)小燒杯中,編號,每個(gè)燒杯中溶液體積約10倍于根系的體積。精確記住每個(gè)燒杯中的溶液量。
4.將洗凈的待測根系,用吸水紙當(dāng)心吸干,然后依次浸入盛有甲烯藍(lán)溶液的燒杯中,每杯中浸1.5min,留意每次取出時(shí),都要使根上的甲烯藍(lán)溶液流回到原杯中去。
5.從3個(gè)小燒杯中各吸取甲烯藍(lán)溶液1mL,用去離子水稀釋10倍后,于660nm處測定吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,查得各杯浸根后甲烯藍(lán)的濃度。【結(jié)果與計(jì)算】
〔1〕總汲取面積〔m2〕=[〔c1—c1’〕v1+〔c2—c2’〕v2]1.1〔2〕活躍汲取面積〔m〕=[〔c3—c3’〕v3]1.1
〔3〕活躍汲取面積%=根系活躍汲取面積〔m2〕/根系總汲取面積〔m2〕100%〔4〕比表面積〔cm2cm-3〕=根系總汲取面積〔cm2〕/根體積〔cm3〕式中c:各杯未浸泡根系前的甲烯藍(lán)濃度〔mgmL-1〕;
2-1
c’:各杯浸泡根系后的甲烯藍(lán)濃度〔mgmL-1〕;v:各杯中的溶液量〔mL〕。
【思索題】
1.在TTC法和甲烯藍(lán)法測定根系活力的過程中哪些環(huán)節(jié)簡單產(chǎn)生誤差?如何減削這些誤差?2.在TTC法中,保溫結(jié)束后加硫酸與否對試驗(yàn)結(jié)果有何影響?
試驗(yàn)方法
試驗(yàn)方法
試驗(yàn)二植物根系活力的測定
植物根系是活躍的汲取器官和合成器官,根的生長狀況和活力水平徑直影響地上部的營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。本試驗(yàn)學(xué)習(xí)測定根系活力的甲烯藍(lán)法?!驹怼?/p>
依據(jù)沙比寧等的理論,植物對溶質(zhì)的汲取具有表面吸附的特性,并假定被吸附物質(zhì)在根系表面形成一層勻稱的單分子層;當(dāng)根系對溶質(zhì)的吸附達(dá)到飽和后,根系的活躍部分能將吸附著的物質(zhì)進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中去,并繼續(xù)產(chǎn)生吸附作用。在測定根系活力時(shí)常用甲烯藍(lán)作為吸附物質(zhì),其被吸附量可以依據(jù)吸附前后甲烯藍(lán)濃度的轉(zhuǎn)變算出,甲烯藍(lán)濃度可用比色法測定。已知1mg甲烯藍(lán)形成單分子層時(shí)掩蓋的面積為1.1m2,據(jù)此可算出根系的總汲取面積。從吸附飽和后再吸附的甲烯藍(lán)的量,可算出根系的活躍汲取表面積,作為根系汲取活力的指標(biāo)。【材料、儀器與試劑】1.材料:植物根系。
2.儀器及用具:分光光度計(jì);移液管;燒杯;比色管。
3.試劑:0.01mgmL-1甲烯藍(lán)溶液;0.0002molL-1〔0.075mgmL-1〕甲烯藍(lán)溶液?!痉椒ㄅc步驟】
1.甲烯藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作按表2-1用0.01mgmL-1甲烯藍(lán)溶液配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,于660nm處測定吸光度,以甲烯藍(lán)濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。表2-1甲烯藍(lán)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
2.將待測的植物根系洗凈瀝干,浸在裝有肯定量水的量筒中,用排水法測定根系的體積〔或用體積計(jì)測定〕。
3.將0.0002molL的甲烯藍(lán)溶液〔每毫升溶液中應(yīng)含0.075mg甲烯藍(lán),為清除溶液配制和比色誤差,其含量需要重新進(jìn)行比色,查標(biāo)準(zhǔn)曲線確定〕分別倒入3個(gè)小燒杯中,編號,每個(gè)燒杯中溶液體積約10倍于根系的體積。精確記住每個(gè)燒杯中的溶液量。
4.將洗凈的待測根系,用吸水紙當(dāng)心吸干,然后依次浸入盛有甲烯藍(lán)溶液的燒杯中,每杯中浸1.5min,留意每次取出時(shí),都要使根上的甲烯藍(lán)溶液流回到原杯中去。
5.從3個(gè)小燒杯中各吸取甲烯藍(lán)溶液1mL,用去離子水稀釋10倍后,于660nm處測定吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,查得各杯浸根后甲烯藍(lán)的濃度?!窘Y(jié)果與計(jì)算】
〔1〕總汲取面積〔m2〕=[〔c1—c1’〕v1+〔c2—c2’〕v2]1.1〔2〕活躍汲取面積〔m〕=[〔c3—c3’〕v3]1.1
〔3〕活躍汲取面積%=根系活躍汲取面積〔m2〕/根系總汲取面積〔m2〕100%〔4〕比表面積〔cm2cm-3〕=根系總汲取面積〔cm2〕/根體積〔cm3〕式中c:各杯未浸泡根系前的甲烯藍(lán)濃度〔mgmL-1〕;
2-1
c’:各杯浸泡根系后的甲烯藍(lán)濃度〔mgmL
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