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北京DB市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T507—2007玉米品種純度及真實(shí)性SSR分子檢測(cè)方法SSR-basedMethodtoAssayPurityandGenuinenessinZeamaysL.2007-11-22發(fā)布2008-02-01實(shí)施北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1存條件為-20℃;TaqDNA聚合酶（5U/μL保存條件為-20℃;SSR引物，保存條件為-20℃;礦物油；2Silane剝離硅烷（RepelSilane無(wú)水乙醇；四甲基乙二胺；過(guò)硫酸銨；冰醋酸；硝酸銀；甲醛將玻璃板洗凈，用無(wú)水乙醇擦洗兩遍，干燥。在長(zhǎng)玻璃板上涂0.5%親和硅烷（Bin3送檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品有一對(duì)以上（包括一對(duì)）引物檢測(cè)出差異，判定送檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品不屬于4aOH溶液，加熱至完全溶解后，冷卻至室溫，用10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8.0，加水定容至1000A.2.2SSR引物：用超純水分別配制左引物（L）和右引物（R）終濃度均為40μmol/L的儲(chǔ)存液，等體A.3.5親和硅烷（BindingSilane）緩A.3.60.5%親和硅烷（BindA.4.1固定液：取冰醋酸100mA.4.2染色液：取硝酸銀2gA.4.3顯影液：取氫氧化鈉30g和甲醛5mL，加去離子水定容至100051bnlg4392bnlg1613bnlg125左引物（L）:GGGACAAAAGAAG4bnlg1985bnlg2386bnlg2407bnlg1078phi0349phi053phi056右引物（R）:CGCACACCACTphi065phi072phi080phi085phi96100左引物（L）:AGGAGGACCCCAACumc1061bnlg233umc2084bnlg1450bnlg194061bnlg1252bnlg4393phi0724bnlg1625bnlg1616bnlg19878phi1239phi065umc1040umc1944phi077bnlg240bnlg238phi085bnlg1006bnlg1621phi295450phi0537umc1904phi048phi080phi099phi015phi037bnlg1306bnlg1505bnlg1884umc2105p
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