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關(guān)于人工合成結(jié)晶牛胰島素結(jié)晶牛胰島素
結(jié)晶牛胰島素(crystallizedbovineinsulin)是牛的胰島素結(jié)晶。牛胰島素是牛胰臟中胰島β-細(xì)胞所分泌的一種調(diào)節(jié)糖代謝的蛋白質(zhì)激素。胰島素主要是降糖作用,也可以用于精神病人的興奮期
。其一級(jí)結(jié)構(gòu)1955年由英國(guó)桑格(S.Sanger)首先確定牛胰島素中氨基酸的組成和排列順序。
第2頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天結(jié)晶牛胰島素發(fā)現(xiàn)歷程1948年,英國(guó)生物化學(xué)家桑格就選擇了一種分子量小,但具有蛋白質(zhì)全部結(jié)構(gòu)特征的牛胰島素作為實(shí)驗(yàn)的典型材料進(jìn)行研究。于1952年搞清了牛胰島素的G鏈和P鏈上所有氨基酸的排列次序以及這兩個(gè)鏈的結(jié)合方式。次年,他宣布破譯出由17種51個(gè)氨基酸組成的兩條多肽鏈牛胰島素的全部結(jié)構(gòu)。這是人類第一次搞清一種重要蛋白質(zhì)分子的全部結(jié)構(gòu)。桑格也因此榮獲1958年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。
第3頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天第4頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天中國(guó)研究成果從1958年開(kāi)始,中國(guó)科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所、中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所和北京大學(xué)生物系三個(gè)單位聯(lián)合,以鈕經(jīng)義為首,由龔岳亭、鄒承魯、杜雨花、季愛(ài)雪、邢其毅、汪猷、徐杰誠(chéng)等人共同組成一個(gè)協(xié)作組,在前人對(duì)胰島素結(jié)構(gòu)和肽鏈合成方法研究的基礎(chǔ)上,開(kāi)始探索用化學(xué)方法合成胰島素。經(jīng)過(guò)周密研究,他們確立了合成牛胰島素的程序。第5頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天合成工作是分三步完成的:第一步,先把天然胰島素拆成兩條鏈,再把它們重新合成為胰島素,并于1959年突破了這一難題,重新合成的胰島素是同原來(lái)活力相同、形狀一樣的結(jié)晶。第二步,在合成了胰島素的兩條鏈后,用人工合成的B鏈同天然的A鏈相連接。這種牛胰島素的半合成在1964年獲得成功。第三步,把經(jīng)過(guò)考驗(yàn)的半合成的A鏈與B鏈相結(jié)合。第6頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天在1965年9月17日完成了結(jié)晶牛胰島素的全合成。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格鑒定,它的結(jié)構(gòu)、生物活力、物理化學(xué)性質(zhì)、結(jié)晶形狀都和天然的牛胰島素完全一樣。這是世界上第一個(gè)人工合成的蛋白質(zhì),為人類認(rèn)識(shí)生命、揭開(kāi)生命奧秘邁出了可喜的一大步。這項(xiàng)成果獲1982年中國(guó)自然科學(xué)一等獎(jiǎng)。
第7頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天第8頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天我國(guó)中科院生化研究所、北大化學(xué)系及中科院有機(jī)化學(xué)研究所通力合作,于1959年開(kāi)始工作、1965年9月獲得了用人工方法合成的、有生物活性的結(jié)晶牛胰島素,這是第一個(gè)在實(shí)驗(yàn)室中用人工方法合成的蛋白質(zhì),
實(shí)現(xiàn)了世界上首次人工合成蛋白質(zhì)的壯舉。這是當(dāng)時(shí)人工合成的具有生物活力的最大的天然有機(jī)化合物,實(shí)驗(yàn)的成功使中國(guó)成為第一個(gè)合成蛋白質(zhì)的國(guó)家。第9頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天我國(guó)科學(xué)工作者在進(jìn)行牛胰島素的合成實(shí)驗(yàn)
第10頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1965年9月17日,中國(guó)首次人工合成了結(jié)晶牛胰島素。這是當(dāng)時(shí)人工合成的具有生物活力的最大的天然有機(jī)化合物,實(shí)驗(yàn)的成功使中國(guó)成為第一個(gè)合成蛋白質(zhì)的國(guó)家。這是科學(xué)工作者將人工合成的產(chǎn)物注入小白鼠體內(nèi),測(cè)驗(yàn)它的生物活力。小白鼠因體內(nèi)胰島素增多而發(fā)生了驚厥反應(yīng),證明這種人工合成的產(chǎn)物就是具有生物活力的人工合成胰島素。第11頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天第12頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天人工合成牛胰島素的幾個(gè)謎團(tuán)謎團(tuán)一:合成的是不是蛋白質(zhì)?曾參與合成牛胰島素工作的中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院研究員施溥濤在接受訪談時(shí)曾提到這樣一個(gè)問(wèn)題:“(人工合成牛胰島素)作為最小的蛋白質(zhì),它比第一代有機(jī)分子要神秘一些。但是,現(xiàn)在,我們?cè)谝恍┑胤匠姓J(rèn)它是蛋白質(zhì),在另一些地方又根本不承認(rèn)它是蛋白質(zhì)?!f(shuō)它是多肽激素,因?yàn)樗橛诙嚯募に睾偷鞍踪|(zhì)二者之間。不管怎么樣,它是一種相當(dāng)復(fù)雜的大分子,在當(dāng)時(shí)情況下,人工用化學(xué)方法把它合成,這對(duì)人們的思想觀念還是有相當(dāng)大的促進(jìn)。這個(gè)還是可以說(shuō)的?!钡?3頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天謎團(tuán)二:是不是人工合成的第一個(gè)蛋白質(zhì)?在不考慮謎團(tuán)一的前提下,另一個(gè)疑問(wèn)仍然懸在這項(xiàng)取之不易的成果頭頂,影響著它在國(guó)際科學(xué)界的地位。那就是:人工合成牛胰島素,究竟是不是人工合成的第一個(gè)蛋白質(zhì)。情況似乎有些復(fù)雜。蛋白質(zhì)和多肽之間其實(shí)并沒(méi)有絕對(duì)的區(qū)別,把催產(chǎn)素列為多肽,而把胰島素(其分子量為5733道爾頓)列為蛋白質(zhì),主要是一個(gè)人為的規(guī)定——我們把分子量超過(guò)5000道爾頓的多肽稱為蛋白質(zhì)。催產(chǎn)素的合成曾經(jīng)被授予了諾貝爾獎(jiǎng),胰島素主要只是比催產(chǎn)素長(zhǎng)點(diǎn),比催產(chǎn)素分子量大點(diǎn),它的合成只是一個(gè)與催產(chǎn)素的合成類似的工作。第14頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天謎團(tuán)三:我們與國(guó)外,誰(shuí)先合成?在我們報(bào)道合成胰島素之前,美國(guó)和聯(lián)邦德國(guó)都曾報(bào)道他們已完成了胰島素的合成;在我們之后不久,他們又報(bào)道了自己新的合成成果。雖然他們的文章中的數(shù)據(jù)沒(méi)我們的扎實(shí),他們得到的產(chǎn)物也不及我們純,活性沒(méi)我們高,而且從來(lái)都沒(méi)得到過(guò)結(jié)晶,但要說(shuō)是我們最早完成了胰島素的合成,這還是有些勉強(qiáng)的。事實(shí)上,各國(guó)幾乎是在相同的時(shí)間完成了合成工作,雖然工作完成的好壞是有區(qū)別的,但在完成時(shí)間上確實(shí)難說(shuō)誰(shuí)先誰(shuí)后。第15頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天謎團(tuán)四:因何未得諾貝爾獎(jiǎng)?A、廣泛流傳的幾種解釋都站不住腳人工合成牛胰島素錯(cuò)失諾貝爾獎(jiǎng)的原因,一直流傳著多種解釋。歸納起來(lái)有這么幾種:1、特殊時(shí)期,西方世界對(duì)中國(guó)的歧視。2、申報(bào)時(shí)間太晚。3、我們推薦的獲獎(jiǎng)?wù)呙麊纬鲋Z貝爾獎(jiǎng)的名額限制。第一種解釋屬于臆測(cè),很難證實(shí)或者證偽,姑且不論;第二種解釋屬于不了解諾貝爾科學(xué)獎(jiǎng)的篩選過(guò)程——成果的完成與獲獎(jiǎng)大多要間隔12年左右。中國(guó)的申報(bào)時(shí)間上并不算晚。第三種解釋則是不了解歷史——最后我們只推薦了鈕經(jīng)義一人代表中國(guó)參加人工全合成研究工作的全體人員去申請(qǐng)諾貝爾獎(jiǎng)。第16頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天B、與同類諾獎(jiǎng)項(xiàng)目相比,我們是遜色的為什么最終沒(méi)有能夠獲獎(jiǎng)?我們不妨考察一下與牛胰島素合成工作相關(guān)的那些獲得了諾貝爾獎(jiǎng)的項(xiàng)目:第17頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1923年,班丁(F.G.Banting)和麥克勞德(J.J.R.Mac.1eod)因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)胰島素和使用胰島素治療糖尿病而榮獲了醫(yī)學(xué)和生理學(xué)諾貝爾獎(jiǎng);諾貝爾科學(xué)獎(jiǎng)所針對(duì)的,主要是理論和實(shí)踐上的那些重大突破。班丁和麥克勞德的研究導(dǎo)致了糖尿病治療的革命性進(jìn)步,它的實(shí)用價(jià)值是如此之大,以至于在完成后只經(jīng)過(guò)一年就榮獲了諾貝爾獎(jiǎng),成為特例。在實(shí)用價(jià)值上我們的牛胰島素合成工作無(wú)法與班丁、麥克勞德的工作相提并論:我們成本太貴,在當(dāng)時(shí)根本不具實(shí)用性,當(dāng)時(shí)國(guó)際上給予的評(píng)價(jià)是:“中國(guó)人的成就沒(méi)有經(jīng)濟(jì)上的重要意義?!?0年代我們的方法曾短暫地在基因科學(xué)里被采用,但又迅速被其他更廉價(jià)和便利的方法取代。第18頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1955年,維格納奧德因?yàn)楹铣啥嚯募に卮弋a(chǎn)素而獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng);維格納奧德毫無(wú)爭(zhēng)議地在世界上第一次合成了多肽激素,他所采用的多肽合成方法一度成為多肽合成的傳統(tǒng)方法;而我們“第一次合成蛋白質(zhì)”本身是存在爭(zhēng)議的,合成時(shí)主要也是沿用了維格納奧德的方法,雖有創(chuàng)新,卻并不關(guān)鍵。第19頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1958年,桑格因?yàn)榉蛛x和確定胰島素的氨基酸組分的構(gòu)成而榮獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng);桑格的蛋白質(zhì)測(cè)序方法是整個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ),想知道蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),就必須用上它。其理論價(jià)值之大,是我們所望塵莫及的。
第20頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1972年,安芬森(C.B.Anfinsen)等人因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)氧化被還原的核糖核酸酶肽鏈能恢復(fù)活力而獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng);唯有相對(duì)于安芬森的工作,我們似乎有超出之處。安芬森的貢獻(xiàn)主要在于發(fā)現(xiàn)氧化被還原的肽鏈可能使其活力恢復(fù),而我們通過(guò)對(duì)胰島素的拆、合,早已從實(shí)踐上得到了那個(gè)結(jié)論。而且我們的工作比安芬森的要困難,所得到的效果比他的要好。但問(wèn)題是,我們前期對(duì)成果嚴(yán)格保密,最后發(fā)表成果時(shí),自己又沒(méi)有能夠充分意識(shí)到在這方面發(fā)現(xiàn)的重要意義。
第21頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天1984年,梅里菲爾德(R.B.Merrifleld)因?yàn)榘l(fā)明固相合成方法而獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。梅里菲爾德在1963年首創(chuàng)的固相合成法,是化學(xué)合成史上的一個(gè)里程碑,用他的方法,“我們……(只需在)合成儀中加進(jìn)所需的氨基酸和其他試劑,按下按鈕,機(jī)器就自動(dòng)工作,幾天之后我們就能收到所要的肽段?!蔽覀?cè)诙嚯暮铣煞椒ǚ矫娴呢暙I(xiàn)顯然沒(méi)法與之相比。第22頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天但是,人工合成牛胰島素,畢竟是新中國(guó)在極端困難的情形下,獨(dú)立完成的一項(xiàng)世界級(jí)難度的科學(xué)項(xiàng)目,仍然是值得肯定的。第23頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天袁騰飛袁騰飛,現(xiàn)任北京海淀教師進(jìn)修學(xué)校高級(jí)教師,北京市歷史高級(jí)教師,海淀區(qū)歷史學(xué)科帶頭人,新課標(biāo)歷史教材編寫(xiě)者之一,曾參與北京市高考?xì)v史命題工作。2008年7月13日—8月11日,他登上《百家講壇》主講《兩宋風(fēng)云》。被譽(yù)為網(wǎng)上“最牛歷史老師”。出版圖書(shū)《歷史是個(gè)什么玩意》、《兩宋風(fēng)云》、《塞北三朝》。先后被中國(guó)教育電視臺(tái)《教育人生》和中央電視臺(tái)《小崔說(shuō)事》應(yīng)邀,錄制訪談節(jié)目。第24頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天結(jié)晶牛胰島素為何未獲諾貝爾獎(jiǎng)——袁騰飛“真話”剖析“這個(gè)結(jié)晶牛胰島素,是咱們中國(guó)唯一一次獲得諾貝爾獎(jiǎng)的機(jī)會(huì),結(jié)果諾貝爾獎(jiǎng)委員會(huì)給咱們發(fā)來(lái)邀請(qǐng)函,讓咱們往上報(bào),你有幾個(gè)人能夠獲獎(jiǎng)啊,應(yīng)該有幾個(gè)啊,報(bào)幾個(gè)啊。單項(xiàng)獎(jiǎng),至多三個(gè),我們報(bào)了二百多人,我們把研究所掃地的,做飯的,刷廁所的全報(bào)上去了。我們是社會(huì)主義,我們只有集體主義,沒(méi)有個(gè)人主義,沒(méi)有工人給你掃地,做飯,刷廁所,你臭知識(shí)分子你結(jié)晶什么牛啊你,結(jié)晶耗子去吧,就報(bào)上去了。那報(bào)上去了,那你想人家能批準(zhǔn)嗎?瑞典國(guó)王跟掃地的刷廁所的握手?你侮辱的是瑞典民族!對(duì)吧!那咱這事就吹了。”
第25頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天歷史事實(shí)與真相:
1965年9月17日,中國(guó)科學(xué)院生物化學(xué)研究所等單位,經(jīng)過(guò)六年多的艱苦工作,在世界上第一次用人工方法合成了一種具有生物活力的蛋白質(zhì)——結(jié)晶牛胰島素。蛋白質(zhì)研究一直被喻為破解生命之謎的關(guān)節(jié)點(diǎn),胰島素是蛋白質(zhì)的一種。它的人工合成成功,標(biāo)志著人類在揭開(kāi)生命奧秘的道路上又邁出了一大步。第26頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天那么,為什么我國(guó)科學(xué)家的這一成果,當(dāng)年沒(méi)有獲得諾貝爾獎(jiǎng)呢?是不是像袁騰飛所說(shuō)的,是因?yàn)樯蠄?bào)的獲獎(jiǎng)人數(shù)太多呢?不,這完全是袁騰飛的蓄意造謠??!“1978年9月,楊振寧向鄧小平提出他準(zhǔn)備提名人工合成胰島素的中國(guó)科學(xué)家為諾貝爾獎(jiǎng)候選人。與此同時(shí),中國(guó)科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所所長(zhǎng)王應(yīng)睞收到瑞典皇家科學(xué)院諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)委員會(huì)主席B·烏爾姆斯特洛姆等6位教授的來(lái)信,要他在1979年1月31日前推薦1979年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)候選人。
第27頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天接下來(lái)的難題是按諾貝爾獎(jiǎng)的有關(guān)規(guī)定,從參與人工合成胰島素的眾多科學(xué)家中推選出代表,作為諾貝爾獎(jiǎng)的候選人。我國(guó)人工合成胰島素研究成果,是3個(gè)不同單位人員共同合作的結(jié)晶,僅最后一兩年直接參加研究工作的人員就有30余人,其中:生物化學(xué)研究所20余人,負(fù)責(zé)胰島素A、B鏈的拆合和B鏈(30肽)的人工合成;北京大學(xué)化學(xué)系和有機(jī)化學(xué)研究所各六七人,共同負(fù)責(zé)A鏈(21肽)的人工合成。
第28頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天為此,1978年12月11日至13日,錢(qián)三強(qiáng)組織并主持召開(kāi)了人工合成胰島素工作總結(jié)評(píng)選會(huì)議。評(píng)選委員會(huì)的任務(wù)是對(duì)會(huì)議最后推出的候選人進(jìn)行無(wú)記名投票。會(huì)議初步選出在合成工作中4名成績(jī)突出者:鈕經(jīng)義(生物化學(xué)研究所)、鄒承魯(原生物化學(xué)研究所,1970年調(diào)北京生物物理研究所)、季愛(ài)雪(北京大學(xué)化學(xué)系,女)和汪猷(有機(jī)化學(xué)研究所)。第29頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天評(píng)選委員會(huì)建議,以鈕經(jīng)義同志一人名義,代表我國(guó)參加人工合成胰島素研究工作的全體人員申請(qǐng)諾貝爾獎(jiǎng)金,擬由楊振寧教授和王應(yīng)睞教授分別推薦。
我國(guó)人工合成胰島素研究集體的代表鈕經(jīng)義,被推薦為諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)1979年度候選人的過(guò)程和事實(shí)就是如此。鈕經(jīng)義(1920-1995)生物化學(xué)家,江蘇興化人。1942年畢業(yè)于昆明西南聯(lián)合大學(xué)化學(xué)系。1953年獲美國(guó)德克薩斯大學(xué)哲學(xué)博士學(xué)位。中國(guó)科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所研究員。
第30頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天最后,1979年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的得主為美國(guó)人布朗和德國(guó)人維提希。我國(guó)鈕經(jīng)義未能獲選,自然令人惋惜。1982年,人工合成胰島素研究成果獲得國(guó)家自然科學(xué)一等獎(jiǎng),這是后話。1979年H.C.布朗(美國(guó)人)、G.維蒂希(德國(guó)人)研制了新的有機(jī)合成法。第31頁(yè),共43頁(yè),2024年2月25日,星期天中國(guó)沒(méi)有獲得諾貝爾獎(jiǎng)淺析中國(guó)沒(méi)有因人工合成胰島素獲得諾貝爾獎(jiǎng),不過(guò)也沒(méi)有其他國(guó)家因?yàn)楹铣梢葝u素而獲獎(jiǎng)。因?yàn)橹Z貝爾獎(jiǎng)有一個(gè)要求,那就是必須完全創(chuàng)新的成果。1958年,英國(guó)化學(xué)家桑格獲獎(jiǎng)的原因是他的發(fā)現(xiàn)完全是新的,前無(wú)古人。但為什
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