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文檔簡介

生物第2章細(xì)胞工程第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體01教材自主導(dǎo)讀02核心知識突破03隨堂達(dá)標(biāo)檢測課程標(biāo)準(zhǔn)素養(yǎng)要求1.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段,使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。1.科學(xué)思維:通過學(xué)習(xí)單克隆抗體的制備過程,養(yǎng)成獨(dú)立思考和獨(dú)立學(xué)習(xí)的習(xí)慣,培養(yǎng)自學(xué)能力。2.社會責(zé)任:認(rèn)同單克隆抗體技術(shù)在實(shí)際生產(chǎn)與生活中的應(yīng)用。一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性雜交遺傳信息PEG滅活病毒誘導(dǎo)法有性雜交遠(yuǎn)緣雜交細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫單克隆抗體二、單克隆抗體及其應(yīng)用1.傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法:向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生______,從動(dòng)物______中分離所需抗體。(2)缺點(diǎn):產(chǎn)量低、純度低、____________。抗體血清特異性差2.單克隆抗體的制備(1)制備原理①B淋巴細(xì)胞的特點(diǎn):一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。②骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn):能在體外大量______。③B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的融合細(xì)胞,既能____________又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的____________。增殖大量增殖特定抗體(2)制備過程骨髓瘤能分泌所需抗體[提醒]在進(jìn)行免疫處理時(shí),一般要每間隔一段時(shí)間重復(fù)注射相同抗原,以獲得更多的B淋巴細(xì)胞。3.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用抗原抗原同位素或熒光標(biāo)記運(yùn)載藥物腫瘤治療疾病抗原(1)動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜融合也有細(xì)胞核的融合。(

)(2)與植物原生質(zhì)體融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒。(

)(3)動(dòng)物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞仍然是二倍體細(xì)胞。(

)(4)單克隆抗體制備過程中兩次篩選的目的相同。(

)(5)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)可以采取體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式。(

)(6)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通常由抗體和藥物組成,對腫瘤細(xì)胞能選擇性殺傷。(

)×√××√×知識點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

1.生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個(gè)體的遺傳物質(zhì)或基因來源(1)雜種植株:遺傳物質(zhì)來自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。(2)經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的動(dòng)物細(xì)胞:遺傳物質(zhì)只來自一個(gè)親本。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞:遺傳物質(zhì)來自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性步驟用酶解法去掉細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,形成雜種體細(xì)胞,再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)形成雜種植株分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒結(jié)果形成雜種植株形成雜種細(xì)胞[溫馨提示]

病毒在生物技術(shù)中的應(yīng)用(1)滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑,未滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑。(2)病毒在不同過程或操作中的“身份不同”。在免疫調(diào)節(jié)中病毒屬于抗原,在基因工程中可作為載體,在細(xì)胞工程中可作為誘導(dǎo)劑。1.(2021·山東菏澤期中改編)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述,正確的是(

)A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理不同B.動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的雜交細(xì)胞一般為雙核細(xì)胞C.常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素或方法有PEG融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合法、紫外線照射等D.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能√解析:動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理相同,都為細(xì)胞膜的流動(dòng)性,A錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞,B錯(cuò)誤;紫外線照射常用來進(jìn)行人工誘變,它不是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的物理法有電融合法等,C錯(cuò)誤;細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,D正確。2.下圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(

)

A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性無關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因√解析:a、b細(xì)胞如果為植物細(xì)胞,則需要去細(xì)胞壁,但不需要去分化,A項(xiàng)錯(cuò)誤;兩細(xì)胞融合需要用物理或化學(xué)等方法促融,其融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,B項(xiàng)正確,C項(xiàng)錯(cuò)誤;融合后的雜交細(xì)胞中的基因仍是選擇性表達(dá)的,不會表達(dá)全部的基因,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

發(fā)展素養(yǎng)

長句特訓(xùn)

與高考接軌1.(科學(xué)思維)動(dòng)物細(xì)胞之間或動(dòng)物與人細(xì)胞之間都可以進(jìn)行融合,進(jìn)行細(xì)胞融合后的細(xì)胞有多少種?_________________。(不考慮兩個(gè)以上細(xì)胞之間的融合)答案:5種2.(科學(xué)思維)動(dòng)物細(xì)胞融合與受精作用的區(qū)別:________________。答案:①受精作用是在同種生物之間進(jìn)行的,精子和卵子不需要任何誘導(dǎo)劑,就可以融合形成受精卵。②動(dòng)物細(xì)胞融合可在不同物種間進(jìn)行,由于物種間存在生殖隔離,所以自然條件下不能融合成雜種細(xì)胞,必須誘導(dǎo)才能融合知識點(diǎn)二單克隆抗體及其應(yīng)用

1.兩種抗體的比較2.漿細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的比較3.兩次篩選的比較4.植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體制備的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交(番茄—馬鈴薯植株)單克隆抗體制備過程第1步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠的處理(注射特定抗原)第2步原生質(zhì)體的融合(物理法、化學(xué)法)動(dòng)物細(xì)胞融合(物理法、化學(xué)法、生物法)第3步雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)第4步雜種植株鑒定提純單克隆抗體比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交(番茄—馬鈴薯植株)單克隆抗體制備融合前處理用酶解法除去細(xì)胞壁:纖維素酶、果膠酶注射特定抗原,免疫處理正常小鼠意義和用途①打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種;②培育作物新品種①制備單克隆抗體;②有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防[溫馨提示]

(1)給健康小鼠注射的是特定抗原。目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生相應(yīng)漿細(xì)胞或相應(yīng)B淋巴細(xì)胞。(2)在用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞的過程中,篩選淘汰了未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會被淘汰,只有融合的雜交瘤細(xì)胞被選擇保留了下來。1.(不定項(xiàng))對于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述,不正確的是(

)

A.圖中有1處明顯錯(cuò)誤B.②中兩兩融合的細(xì)胞有5種,篩選保留了1種C.③雜交瘤細(xì)胞均能產(chǎn)生抗體D.⑤可以無限增殖并分泌相應(yīng)抗體√√解析:圖中的錯(cuò)誤是用于提取B淋巴細(xì)胞的小鼠沒有經(jīng)過免疫,A正確;②中兩兩融合的細(xì)胞有3種,為第一次篩選,目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞,B錯(cuò)誤;③雜交瘤細(xì)胞是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的,但由脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞包括非免疫的B淋巴細(xì)胞和已免疫的漿細(xì)胞,因此,③雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生抗體,C錯(cuò)誤;⑤是經(jīng)過兩次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞群,具有無限增殖和分泌相應(yīng)抗體的特點(diǎn),D正確。2.(2020·高考全國卷Ⅰ)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是_________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:___________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于____________,使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是________________________________________。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有______________________(答出2點(diǎn)即可)。解析:(1)實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A,其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng),從而產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:從健康動(dòng)物體內(nèi)取出組織塊,剪碎,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間,這樣組織就會分散成單個(gè)細(xì)胞,然后用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成單細(xì)胞懸液。(3)圖中篩選1采用特定的選擇培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基上,未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡,只有融合的雜種細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)才能生存。圖中篩選2含多次篩選,利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,就可獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。答案:(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)核心知識小結(jié)[要點(diǎn)回眸]核心知識小結(jié)[答題必備]1.動(dòng)物細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的方法有PEG融

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