化學發(fā)光免疫檢測技術(shù)在臨床中的應用

安圖客服中心化學發(fā)光免疫檢測技術(shù)在臨床中的應用內(nèi)容提要一、化學發(fā)光產(chǎn)品的優(yōu)勢二、化學發(fā)光系列產(chǎn)品的臨床應用三、生殖內(nèi)分泌激素檢測中的單位換算及參考范圍的確定第一部分化學發(fā)光產(chǎn)品的優(yōu)勢放射免疫診斷技術(shù)（RIA）酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)（ELISA）化學發(fā)光免疫診斷技術(shù)（CLIA）20世紀60年代70年代80年代90年代2000年2020年時間臨床免疫診斷技術(shù)的發(fā)展基本歷經(jīng)了以下三個階段：

化學發(fā)光（CLIA）酶免（EIA）放免（RIA）檢測限（M/L）10-17-10-1910-1510-15-10-16標記物酶蛋白或發(fā)光物質(zhì)酶蛋白放射性元素靈敏度高低高線性范圍寬窄寬放射污染無無有試劑穩(wěn)定性6-12個月6-12個月1-3個月操作易易繁瑣第二部分化學發(fā)光系列產(chǎn)品的臨床應用一生殖內(nèi)分泌激素檢測分類：垂體激素（由腦垂體分泌）

LH

人促黃體生成素

FSH

人促卵泡生成素

PRL

催乳素

甾體激素（由性腺分泌）

E2

雌二醇

P

孕酮

T

睪酮糖蛋白激素，分子量約26000，是由垂體前葉分泌的一種促性腺激素。在女性主要作用于卵巢，促使排卵（在FSH協(xié)同作用下），形成黃體并分泌孕激素；在男性又稱作間質(zhì)細胞刺激素，主要作用于睪丸間質(zhì)細胞，促進睪酮的合成和分泌。LH—人促黃體生成素LuteinizingHormone糖蛋白激素，分子量約30000，是垂體前葉分泌的另一種促性腺激素。在女性主要作用于卵巢的卵泡，促進卵泡發(fā)育和成熟及分泌雌性激素。在男性，主要是促進精子生成，又稱作精子生成素。FSH—人促卵泡生成素Follicle-stimulatinghormone垂體前葉分泌的單鏈多肽激素，是一種單純的蛋白質(zhì)，由198個氨基酸組成，分子量約為23000。主要功能是促進乳腺的增生、乳汁的生成和排乳。PRL—催乳素（泌乳素）Prolactin為21C的類固醇激素，分子量為314.5。未孕女性主要由黃體分泌，促使子宮內(nèi)膜從增殖期轉(zhuǎn)變?yōu)榉置谄?。孕婦主要由胎盤分泌。

男性主要由腎上腺皮質(zhì)及睪丸分泌。P—孕酮Progesterone18C的類固醇激素，分子量為272.38，是人體內(nèi)活性最強的雌激素。未孕女性由卵巢分泌，使子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)變?yōu)樵鲋称诤痛龠M女性第二性征的發(fā)育。妊娠期間主要來源于胎兒—胎盤復合體。男性主要由睪丸間質(zhì)細胞合成分泌。E2—雌二醇Estradiol19C的類固醇激素，分子量為288.42。男性主要由睪丸間質(zhì)細胞分泌，主要促進男性第二性征的發(fā)育。女性主要由腎上腺分泌。促進陰蒂、陰唇和陰阜的發(fā)育。對雌激素有拮抗作用，對全身代謝有一定影響。T—睪酮Testosterone下丘腦垂體前葉（腺垂體）促卵泡生成素促黃體生成素催乳素孕酮雄激素雌激素絨毛膜促性腺激素性腺(卵巢，乳腺，睪丸等)邊緣腦大腦皮層中樞

表示促進

表示抑制下丘腦-垂體-性腺機能軸女性月經(jīng)周期中各種激素濃度變化女性月經(jīng)周期中各種激素濃度變化

性激素檢測的臨床意義

生殖內(nèi)分泌激素在機體內(nèi)對性征發(fā)育、種族繁衍起重要的調(diào)控作用，并且其含量、濃度對其功能的實現(xiàn)具有決定作用。因此，生殖內(nèi)分泌激素的檢測結(jié)果和臨床癥狀相結(jié)合，對男女性功能減退、性早熟、青春期發(fā)育延遲，女性閉經(jīng)、不孕不育、更年期綜合征等病因的診斷、治療及愈后評價都具有重要意義。性激素檢測最常見的臨床應用青春期前兒童性早熟，判斷真性性早熟和假性性早熟青春期延遲及性幼稚癥的診斷和判別

女性閉經(jīng)和不孕癥，有助于查找病因女性多毛癥、多囊卵巢綜合征的診斷男女性高催乳素血癥的診斷男性性功能減退和不育癥，有助于查找病因更年期綜合征和卵巢功能衰竭的判斷體外受孕（IFV）作為監(jiān)測工具生殖激素檢測及相關(guān)疾病—女性相關(guān)疾病檢測項目性早熟FSH、LH、E2、P青春期發(fā)育延遲FSH、LH、E2、P閉經(jīng)和不孕癥FSH、LH、PRL、E2、P多毛癥FSH、LH、PRL、E2、P、T多囊卵巢綜合征FSH、LH、PRL、E2、P、T高催乳素血癥PRL更年期和卵巢衰竭FSH、LH、E2、P生殖激素檢測及相關(guān)疾病—男性相關(guān)疾病檢測項目性早熟FSH、LH、T青春期發(fā)育延遲FSH、LH、T性功能減退和不育癥FSH、LH、PRL、T高催乳素血癥PRL精子缺乏FSH、LH、T乳腺發(fā)育過度T、E2、PRL真性性早熟：

系由于各種原因（特發(fā)性性早熟，腦性、多發(fā)性骨纖維異樣增生癥和重度甲狀腺功能低下等）導致的下丘腦-腺垂體-性腺軸對性發(fā)育的促進提前發(fā)動。假性性早熟：下丘腦-腺垂體-性腺軸的功能還未正常建立，而是由于各種內(nèi)分泌腫瘤（如卵巢腫瘤、睪丸間質(zhì)細胞瘤、腎上腺瘤等）或服用含激素類藥物或食物引起。一般根據(jù)臨床表現(xiàn)就可判別，而真性和假性性早熟的鑒別則有賴于激素水平的檢測。真性性早熟者

FSH、LH、E2、P或T均會異常增高；假性性早熟者

僅有性腺激素（E2、P或T）的異常升高，但FSH、LH基本正常性早熟的診斷

指已進入青春期年齡仍無性發(fā)育的病人青春期延期主要為體質(zhì)性的，一般到較大年齡時副性征又逐漸出現(xiàn)。

性幼稚癥也稱為性發(fā)育不全癥，主要由下丘腦疾病或垂體疾病引起的促性腺激素分泌不足或性腺(睪丸或卵巢)疾病導致。

兩者的激素水平都低于正常值，通過GnRH興奮試驗可判別二者。青春期延遲和性幼稚癥

原發(fā)性性腺功能低下：由性腺（卵巢）本身造成的性腺功能低下。LH、FSH會升高，E2、P會下降。繼發(fā)性性腺功能低下：由于下丘腦或垂體原因，垂體促性腺激素分泌缺乏導致的性腺功能低下。LH、FSH、P、E2都會較低。女性性腺功能低下繼發(fā)性睪丸功能低下：FSH、LH、T均低原發(fā)性睪丸功能低下：T低，F(xiàn)SH、LH高

若FSH、LH、T都正常，則說明睪丸功能正常，PRL的異常增高也是性功能低下的主要原因。男性性腺功能低下女性閉經(jīng)和不孕癥對于閉經(jīng)和不孕癥女性，測定FSH、LH、E2、P等可鑒別病變部位：

FSH、LH同時低或僅LH異常低，則病因在下丘腦或垂體；FSH、LH均正常，E2、P含量低者，則病因在性腺（卵巢）。此外，LH/FSH比值增高提示排卵障礙，常見于多囊卵巢綜合癥及雄性激素升高患者；垂體瘤和高催乳素血癥，也可抑制排卵導致不孕。是一組以月經(jīng)失調(diào)、無排卵性不孕、多毛、肥胖伴雙側(cè)卵巢增大、多囊性病變等為特征的癥候。本病患者一般情況下LH持續(xù)升高，F(xiàn)SH正?；蚱停琇H/FSH比值增加。T大量分泌，含量增高。多囊卵巢綜合征卵巢功能衰竭和更年期更年期是卵巢功能生理性的衰竭：激素水平表現(xiàn)為LH、FSH升高，P、E2降低。年輕女性出現(xiàn)上述的激素變化，則可診斷為卵巢早衰。生命過程中LH和FSH濃度的變化高催乳素血癥生理性：

妊娠、產(chǎn)后泌乳、應激反應病理性：

分泌催乳素的垂體腺瘤泌乳素抑制激素（PIH）運輸至垂體前葉產(chǎn)生異常藥物其他過高的催乳素可抑制LH和FSH分泌，抑制卵巢功能，抑制排卵高催乳素血癥的臨床癥狀女性男性閉經(jīng)性欲減退月經(jīng)稀少性功能低下黃體功能不全乳腺發(fā)育伴或不伴性腺功能減退無排卵溢乳（罕見）溢乳性欲減退多毛癥溢脂性皮炎二糖尿病檢測INS和C-肽1.區(qū)分1型糖尿病和2型糖尿病，對臨床治療有重要指導意義2.診斷胰島瘤3.應用激發(fā)性實驗檢測有臨床意義獲河南省重大科技攻關(guān)項目基金支持

PI、INS和C-P三者的關(guān)系

糖尿病分型

1型2型發(fā)病原因免疫與遺傳遺傳與生活方式發(fā)病年齡青少年中老年發(fā)病方式急緩慢或無癥狀體重情況多偏瘦多偏胖胰島素分泌絕對缺乏相對缺乏酮癥酸中毒容易發(fā)生不易發(fā)生一般治療注射胰島素口服降糖藥胰島素（C-肽）測定方法及試驗結(jié)果三腫瘤標志物檢測HCGCA125CA15-3PSAfPSAAFPCEAHCG正常妊娠檢測檢測異位妊娠和正確指導人工流產(chǎn)檢測亞臨床自然流產(chǎn)滋養(yǎng)層細胞腫瘤的診斷其他腫瘤的重要標志（如胃癌、胰腺癌、肝癌、多發(fā)性骨髓癌、卵巢癌、乳癌等）CA125CA125是主要用于卵巢癌早期篩查、診斷、治療以及術(shù)后觀察療效的一種重要的腫瘤標志物CA125早期敏感性僅60%左右，但在連續(xù)檢測中敏感性可達83%CA125用于卵巢癌篩查假陽性主要出現(xiàn)在妊娠、月經(jīng)期、子宮內(nèi)膜炎等婦科炎癥情況。在妊娠頭3個月和月經(jīng)期CA125假陽性分別可達57%和16%CA15-3CA15-3是檢測乳腺癌一個重要腫瘤標志物。其它惡性腫瘤也可使CA15-3出現(xiàn)不同程度的陽性率。常用于女性體檢。常用于術(shù)后觀察療效。CA15-3對蛋白酶等酶類很敏感。因此，血清標本應避免微生物的污染和保存。PSA與f-PSA游離PSA結(jié)合PSA(PSA-ACT)-1-antichymotrypsin抗原結(jié)合部位PSAPSAACT 前列腺癌的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢。在歐美國家前列腺癌是發(fā)病率最高的惡性腫瘤，死亡率僅次于肺癌位于男性腫瘤的第二位。我國前列腺癌發(fā)病率約為3.4/10萬人口，遠低于西方國家，但國人良性前列腺增生手術(shù)發(fā)現(xiàn)的偶發(fā)癌和尸檢前列腺標本的潛伏癌約為歐美一半左右。而前列腺癌的早期診斷是決定能否進行根治性治療的關(guān)鍵。老年性疾病，建議50歲以上的男性，有條件時每年作一次檢測。

當血清PSA>10ng/ml時，應高度懷疑前列腺癌；而PSA4-10ng/ml時，則為灰色區(qū)。前列腺癌診斷主要通過直腸指檢（DRE）、血清PSA檢測或直腸B超（TRUS）針刺活檢確定診斷。血清游離PSA(f-PSA)與總PSA的比值（fPSA/tPSA）更為準確。正常fPSA僅占tPSA的10%-20%，若fPSA/tPSA>25%，前列腺癌的可能性極小（<10%）。當fPSA/tPSA<10%時，則前列腺癌的可能性極大（>80%），必須作前列腺活檢以確診。連續(xù)觀察血清PSA濃度的變化，前列腺癌組PSA速率顯著高于良性前列腺增生組和正常人組，正常值上限為每年0.75ng/ml。這樣，即使在兩次檢側(cè)中PSA的濃度均在正常范圍，但根據(jù)PSA的速率變化，可進一步檢查發(fā)現(xiàn)早期前列腺癌。大量的篩選資料證明，如果PSA速率超過每年0.75ng/ml，則可發(fā)現(xiàn)47%的患者患前列腺癌。35%30%25%20%15%10%5%0%良性疾病的可能性增加前列腺癌的可能性增加FREEPSA%結(jié)果解釋P-Ca10%34%70%AFP檢測血清AFP含量是診斷原發(fā)性肝癌的重要手段之一。原發(fā)性肝癌患者血清AFP多數(shù)在500ng/ml左右，持續(xù)一個月以上。急慢性肝炎、肝硬化患者血清中可檢出AFP一般僅為50-200ng/ml，少數(shù)病人可暫時升高到400ng/ml以上。先天性胎兒畸形診斷和惡性畸胎瘤的診斷。CEACEA是非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，升高主要見于肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌等大多數(shù)惡性腫瘤。很適合用于體檢可以用于術(shù)后觀察肝炎、肝硬化及肺部疾病等也可以造成升高吸煙者的CEA普遍偏高。第三部分生殖內(nèi)分泌激素檢測中的單位換算及參考范圍的確定人促黃體生成素（LH）WHO2ndIRP-HMGWHO1stIRP68/40WHO2ndIS80/55231.81062012402410060200120