HYT 078-2005 海洋生物質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)程

中華人民共和國海洋行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)程Technicalspecificationofmarinebiologicalqualitymonitoring2005-05-18發(fā)布 I Ⅱ 2規(guī)范性引用文件 3監(jiān)測方案設(shè)計 3.1監(jiān)測生物 3.2測站布設(shè) 3.2.1布設(shè)原則 3.2.2布站方法 3.3監(jiān)測頻率和時間 3.4監(jiān)測項目 24.1樣品采集 4.1.1樣品類型 4.1.2現(xiàn)場樣品采集 4.1.3采樣工具與試劑 34.1.4采樣現(xiàn)場描述與樣品登記編號 34.2樣品的保存與運輸 34.2.1樣品的保存 4.2.2樣品的運輸 34.3樣品制備 4.3.1貝類樣品的制備 44.3.2蝦樣制備 4.3.3魚樣制備 4.3.4大型藻類樣制備 44.3.5無菌樣品制備 5質(zhì)量保證 45.2樣品測定的質(zhì)量保證 56樣品測定及其監(jiān)測結(jié)果 7監(jiān)測報告編寫 5附錄A(規(guī)范性附錄)海洋生物樣品采集登記 6附錄B(規(guī)范性附錄)海洋生物標(biāo)本標(biāo)簽 7附錄C(規(guī)范性附錄)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測樣品測定方法 8附錄D(規(guī)范性附錄)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果報表 9附錄E(規(guī)范性附錄)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告格式與內(nèi)容 I本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D、附錄E均為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國家海洋局海洋環(huán)境保護司提出。本標(biāo)準(zhǔn)由國家海洋標(biāo)準(zhǔn)計量中心歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心。Ⅱ為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護法》和《中華人民共和國海洋環(huán)境保護法》,防止和控制海洋生物的污染，在保障經(jīng)濟發(fā)展的前提下，更有效地保護海洋生物資源和其他海洋資源，有利于海洋資源的可持續(xù)利用，維護海洋生態(tài)平衡，提高海洋生物質(zhì)量，保障人體健康，特制定本標(biāo)準(zhǔn)。1海洋生物質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了海洋生物質(zhì)量監(jiān)測的主要內(nèi)容、技術(shù)要求和方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華人民共和國領(lǐng)海、毗連區(qū)、專屬經(jīng)濟區(qū)、大陸架以及中華人民共和國管轄的其他海域所進行的海洋生物質(zhì)量監(jiān)測工作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB17378.2海洋監(jiān)測規(guī)范第2部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制GB17378.6海洋監(jiān)測規(guī)范第6部分：生物體分析GB17378.7海洋監(jiān)測規(guī)范第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測HY/T069—2005赤潮監(jiān)測技術(shù)規(guī)程海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)程國家海洋局2002原子熒光法測定海洋生物體中汞的技術(shù)規(guī)程國家海洋局2003原子熒光法測定海洋生物體中砷的技術(shù)規(guī)程國家海洋局20033監(jiān)測方案設(shè)計3.1監(jiān)測生物海洋生物質(zhì)量監(jiān)測以貝類為主，根據(jù)海區(qū)(灘涂)特征可增選魚、蝦和大型藻類作為監(jiān)測生物。3.2測站布設(shè)3.2.1布設(shè)原則監(jiān)測站位布設(shè)的主要原則為：——監(jiān)測站的布設(shè)應(yīng)覆蓋或代表監(jiān)測海域(灘涂)生物質(zhì)量，樣品采自潮間帶、潮下帶和外海海域；——依據(jù)監(jiān)測海域(灘涂)范圍，以最少數(shù)量測站，所獲取的數(shù)據(jù)能夠滿足監(jiān)測目的需要；——盡可能沿用歷史測站，盡量使監(jiān)測站位與沉積物污染調(diào)查站位相一致；——不同類型灘涂、增養(yǎng)殖海區(qū)，測站布設(shè)應(yīng)有所不同，采樣站位盡可能避開污染源；——應(yīng)考慮監(jiān)測海域(灘涂)的水動力狀況和功能，開闊海區(qū)，測站可適當(dāng)減少，半封閉或封閉海區(qū)，測站可適當(dāng)加密。3.2.2布站方法具體站位布設(shè)應(yīng)根據(jù)實際情況，以覆蓋和代表監(jiān)測海域(灘涂)生物質(zhì)量為原則，可采用扇型(河口近岸海域)或井字型、梅花型、網(wǎng)格型方法布設(shè)控制斷面和監(jiān)測站位。3.3監(jiān)測頻率和時間根據(jù)各地的具體情況，在生物成熟期(如貝類的成熟期一般為8月-10月)進行一次生物質(zhì)量監(jiān)測，不同年份的采樣時間應(yīng)保持不變。3.4監(jiān)測項目海洋生物質(zhì)量監(jiān)測推薦項目為：石油烴、總汞、鎘、鉛、銅、砷、六六六(666)、滴滴涕(DDTs)、多氯聯(lián)苯(PCBs)、糞大腸菌群、異養(yǎng)菌總數(shù)量、腹瀉性貝毒(DSP)、麻痹性貝毒(PSP)。24.1樣品采集4.1.1樣品類型4.1.1.1生物殘毒樣品生物殘毒樣品主要包括：——潮間帶測站定點采集的貝類樣品；——沿岸潮下帶和外海海域的貝類、魚、蝦、大型藻類樣品。4.1.1.2赤潮生物、細(xì)菌學(xué)指標(biāo)樣品赤潮生物、細(xì)菌學(xué)指標(biāo)樣品主要包括：——赤潮生物樣品(應(yīng)符合HY/T069—2005的相關(guān)規(guī)定);——異養(yǎng)菌樣品；——糞大腸菌群樣品。4.1.1.3貝毒樣品貝毒樣品可選用生物殘毒樣品中所采集的貝類樣品。4.1.2現(xiàn)場樣品采集4.1.2.1采樣的一般要求與原則現(xiàn)場采集樣品，一定要保持生物個體不受損傷。棲息在巖石或其他附著物上的生物個體，要用鑿子鏟取。棲息在沙底或泥底中的生物個體可用鏟子采取，或鐵鉤子扒取。在選取生物樣品時要去掉殼碎的或損傷的個體(指機械損傷),但在特殊情況下(如溢油或其他事故),對采集的生物樣品不能丟掉，保存起來，帶回實驗室分析其原因。要挑選完好的生物個體，每種樣品必須選擇大小、性別、年齡都相同(或相近)的個體，記錄其體長(貝類應(yīng)記錄殼長、殼高和殼寬)、性別、年齡等。現(xiàn)場無法確定生物種名時，需將該樣品(取2個～3個個體)放在廣口玻璃瓶中，用5%福爾馬林溶液或70%酒精溶液保存，待實驗室進一步鑒定。在養(yǎng)殖場、漁船、漁港采集或選取樣品時，其原則同上。在大尺度全海域同一監(jiān)測項目中，應(yīng)在相同(或相近)的采樣時間內(nèi)，盡可能地采集相同年齡、相似個體大小的同一種貝類，以提高監(jiān)測結(jié)果的可比性。采集貝類一般推薦如下8種：菲律賓蛤仔、文蛤、四角蛤蜊、紫貽貝、翡翠貽貝、毛蚶、縊蟶、僧帽牡蠣。其中，長江以北沿岸優(yōu)先采集順序為紫貽貝、菲律賓蛤仔、文蛤、四角蛤蜊、毛蚶；長江以南沿岸優(yōu)先采集順序為翡翠貽貝、僧帽牡蠣、縊蟶、毛蚶、菲律賓蛤仔、文蛤。優(yōu)先選擇采集貽貝類和蛤類，河口區(qū)優(yōu)先選擇采集文蛤。4.1.2.2貝類樣品的采集挑選采集體長大致相似的貝類個體約1.5kg左右(如牡蠣為40個左右、貽貝為60個左右)。如果殼上有附著物，應(yīng)用不銹鋼刀或比較硬的毛刷剝掉，彼此相連個體應(yīng)用不銹鋼小刀分開。用現(xiàn)場海水沖洗干凈后，放入雙層聚乙烯袋中冰凍保存(一10℃～—20℃),分別用于生物殘毒分析或貝毒檢測。4.1.2.3大型藻類樣品的采集采集大型藻類(次年以上的)樣品1.5kg左右，用現(xiàn)場海水沖洗干凈，放入雙層聚乙烯袋中冰凍保存(-10℃～-20℃)。4.1.2.4細(xì)菌學(xué)指標(biāo)樣品的采集檢測細(xì)菌學(xué)指標(biāo)(糞大腸菌群、異養(yǎng)細(xì)菌)的生物樣品，現(xiàn)場用鑿子鏟取棲息在巖石或其他附著物上的生物個體。棲息在沙底或泥底中的生物個體可用鏟子采取，或鐵鉤子扒取。在選取生物樣品時要去掉殼碎的或損傷的個體(指機械損傷),將無損傷、生物活力強的個體裝入預(yù)先做好標(biāo)記的一次性塑料袋中。然后將樣品放入冰瓶冷藏(0℃～4℃)保存不得超過24h,全程應(yīng)嚴(yán)格無菌操作。34.1.2.5蝦、魚類樣品的采集蝦、魚類等生物取樣量為1.5kg左右，為了保證樣品的代表性和分析用量，應(yīng)視生物個體大小確定生物的個體數(shù)，保證選取足夠數(shù)量(至少需要100g肌肉組織)的完好樣品用于分析測定。用現(xiàn)場海水沖洗干凈，冰凍保存(-10℃~-20℃)。4.1.3采樣工具與試劑4.1.3.1采樣工具采樣工具主要包括：——鐵锨(控取棲息在泥沙中的動物);——鐵把手(采集棲息在淺層泥沙中的貝類);——鑿子(采集棲息在巖石或巖石縫隙內(nèi)的生物，如牡蠣等);——解剖不銹鋼刀(各種類型鑷子及剪不銹鋼刀);——冰瓶(保存樣品);——組織搗碎機(樣品勻漿);——醫(yī)用酒精棉球；——一次性塑料袋；——一次性乳膠手套；主要試劑為：——酒精(70%):95%的酒精70mL,加25mL蒸餾水；——福爾馬林(5%):40%的甲醛水溶液5mL,加入95mL蒸餾水或海水；——碘液：2g碘化鉀加1g碘溶于200mL蒸餾水。4.1.4采樣現(xiàn)場描述與樣品登記編號4.1.4.1采樣現(xiàn)場(環(huán)境)描述野外采樣時，要做好觀察和記錄。采樣時，應(yīng)注意觀察生物個體的顏色、個體大小、性別、年齡、死亡數(shù)量、機械損傷或其他異常個體，記錄生物個體生活的環(huán)境等。必要時應(yīng)進行拍照或錄像。生物樣品的名稱一律用學(xué)名和拉丁名同時記錄。4.1.4.2樣品登記編號樣品采集后，按照附錄A表A.1的內(nèi)容填寫樣品采集登記表。同時還要根據(jù)附錄A表A.1中相應(yīng)的樣品編號，寫一紙簽或竹簽(見附錄B表B.1),放入瓶內(nèi)或袋內(nèi)，并在瓶外或袋外寫上相應(yīng)的樣品編號，以防差錯。記錄時用鉛筆，不能用墨水筆和圓珠筆。4.2樣品的保存與運輸4.2.1樣品的保存樣品運輸前，應(yīng)根據(jù)采樣記錄和樣品登記表清點樣品，填好裝箱單和送樣單，由專人負(fù)責(zé)，將樣品送回實驗室冷凍保存。生物殘毒和貝毒檢測樣品應(yīng)保存在一20℃以下的冰柜中。細(xì)菌學(xué)指標(biāo)樣品冷藏(4℃左右)運回實驗室后，應(yīng)立即進行無菌樣品制備和檢測。4.2.2樣品的運輸樣品采集后，若長途運輸，需把樣品放入樣品箱(或塑料桶)中，對無須封裝的樣品應(yīng)將現(xiàn)場清潔海水淋灑在樣品上，保持樣品潤濕狀(不得浸入水中);若樣品處理，須在采樣24h后進行，可將樣品放在聚乙烯袋中，壓出袋內(nèi)空氣，將袋口打結(jié)。將此袋和樣品標(biāo)簽一起放入另一聚乙烯袋(或潔凈的廣口玻璃44.3樣品制備4.3.1貝類樣品的制備將貝類樣品解凍后，用蒸餾水或清潔海水漂洗每一個個體，并使其自然風(fēng)干。用卡尺測定每一個貝類的體長(從殼前緣至后緣的距離),稱重量，并記錄。有足絲的貝類需將足絲拉出，用于分析石油烴、666、DDTs、PCBs、DSP、PSP的樣品，可用不銹鋼刀切開閉殼肌組織(不得丟失體液)將多個個體合并勻漿，放入廣口玻璃瓶中密封，冰凍保存。4.3.2蝦樣制備將樣品解凍后，用蒸餾水或清潔海水漂洗每一個個體并風(fēng)干。測定并記錄每一個體體長和重量，然的樣品，用不銹鋼刀沿腹部外甲邊緣切開，用鑷子或竹簽取下內(nèi)側(cè)的外甲并棄去，用另一把不銹鋼刀攪4.3.3魚樣制備取解凍并清洗好的個體樣品，測定魚的叉長(從頭至尾鰭的長度)并稱量。中、小型魚樣，需逐個測量并稱重。然后用不銹鋼刀切除胸鰭并切開背鰭附近自頭至尾部的魚皮，在魚鰓附近和尾部，橫過魚體各切一不銹鋼刀，在魚腹部，鰓和尾部兩側(cè)各切一不銹鋼刀(均切在魚體一側(cè)，但不得切得太深，以免切開內(nèi)臟，沾污肉片)。然后將魚皮和肉分開，謹(jǐn)防外表皮沾污肉片，用另一把不銹鋼刀將肌肉與脊椎分離，用鑷子或竹簽將肌肉取出。若一側(cè)肌肉不足，用同樣方法取出另一側(cè)肌肉。將足夠分析測定用的魚同樣方法取出另一側(cè)肌肉。將足夠分析測定用的魚樣合并勻漿后放入聚乙烯袋中封閉，冰凍保存。4.3.4大型藻類樣制備取大型藻類樣品清洗干凈后，除去根和末稍，切成段(或細(xì)條),然后在組織搗碎機中勻漿后，放入廣4.3.5無菌樣品制備用于生物體內(nèi)細(xì)菌學(xué)指標(biāo)檢測的無菌樣品制備，應(yīng)符合海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)程的相關(guān)規(guī)定。5質(zhì)量保證——制定一個科學(xué)的采樣計劃，選擇合理的采樣地點、采樣時間和采樣方法，確保采樣的代表性；——嚴(yán)格各類樣品采集、取樣、包裝、運輸和儲存的一切器具的選擇及按規(guī)定清洗，防止樣品被——過濾膜和相關(guān)設(shè)備必須保持清潔，用酸和其他洗滌劑清洗；——消過毒的瓶子必須保持在滅菌狀態(tài)直到樣品采集。消毒紙或鋁箔失效，或頂部封口破裂，則——樣品保存或運輸過程中要冰凍保存，不得放在水中；——樣品采集、運輸和交接等過程應(yīng)有相應(yīng)的記錄。55.2樣品測定的質(zhì)量保證海洋生物樣品測定中的質(zhì)量應(yīng)符合GB17378.2、GB17378.6、GB17378.7、HY/T069—2005、海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)程、原子熒光法測定海洋生物體中汞的技術(shù)規(guī)程和原子熒光法測定海洋生物體中砷的技術(shù)規(guī)程的相關(guān)規(guī)定。6樣品測定及其監(jiān)測結(jié)果海洋生物質(zhì)量監(jiān)測樣品測定方法應(yīng)符合附錄C表C.1的相關(guān)規(guī)定。海洋生物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果應(yīng)按附錄D表D.1填寫。7監(jiān)測報告編寫海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告編寫應(yīng)符合附錄E的規(guī)定。6(規(guī)范性附錄)海洋生物樣品采集登記海洋生物質(zhì)量監(jiān)測的生物樣品采集應(yīng)按表A.1填寫。表A.1海洋生物樣品采集登記表產(chǎn)地(站號)日期種名地名性別7(規(guī)范性附錄)海洋生物標(biāo)本標(biāo)簽用于海洋生物質(zhì)量監(jiān)測的生物樣品應(yīng)按表B.1填寫標(biāo)本標(biāo)簽。表B.1海洋生物標(biāo)本標(biāo)簽產(chǎn)地(站號):8海洋生物質(zhì)量監(jiān)測樣品的測定方法應(yīng)按表C.1的相關(guān)分析項目2總汞原子熒光法測定海洋生物體中汞的技術(shù)規(guī)程3鎘4鉛5銅6砷熒光法測定78滴滴涕9多氯聯(lián)苯9(規(guī)范性附錄)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果報表海洋生物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果應(yīng)按照表D.1填寫。表D.1海洋生物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果報表(鮮重)站號樣品總汞鎘鉛銅砷異養(yǎng)細(xì)菌注：666含量為四種異構(gòu)體含量的總和，DDTs含量為四種異構(gòu)體含量的總和，PCBs含量為各單體含量的總和。(規(guī)范性附錄)海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告格式與內(nèi)容E.1文本格式E.1.1文本規(guī)格海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告文本外形尺寸為A4(210mm×297mm)。E.1.2封面格式海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告封面格式如下。第一行書寫：×××海區(qū)或省市×××海域(一號宋體，加黑，居中);第二行書寫：海洋生物質(zhì)量監(jiān)測報告(一號宋體，加