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第第頁(yè)使用紫外可見(jiàn)光光度計(jì)進(jìn)行雜光散光測(cè)試光度計(jì)維修保養(yǎng)我們?cè)撊绾问褂米贤饪梢?jiàn)光光度計(jì)進(jìn)行雜光散光測(cè)試呢?下面跟我一起來(lái)了解一下吧。據(jù)了解,有的紫外可見(jiàn)光光度計(jì)只測(cè)試220nm處的雜散光,不測(cè)試340nm處的雜散光,這樣是不正確的,需測(cè)試220nm處雜散光是因?yàn)椋孩俑鶕?jù)儀器學(xué)理論中的電光源理論,氘燈在220nm處能量很小,即信號(hào)很小,容易顯現(xiàn)雜散光;②根據(jù)儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論,光電倍增管在220nm處的光譜響應(yīng)(靈敏度)低,容易顯現(xiàn)雜散光。③根據(jù)量子光學(xué)理論,波長(zhǎng)是能量的倒數(shù),波長(zhǎng)短能量大,容易產(chǎn)生雜散光,而220nm處屬于短波部分;而測(cè)試340nm處雜散光的原因是完全不同的,因?yàn)?40nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調(diào)換濾光片的地方,此時(shí)容易產(chǎn)生雜散光。所以,對(duì)于紫外可見(jiàn)光光度計(jì)來(lái)講,應(yīng)該測(cè)試220nm和340nm兩處的雜散光。紫外可見(jiàn)光光度計(jì)雜散光測(cè)試步驟:1、首先將參比液注入配對(duì)石英石吸收池,分別放置在參比池座和試樣池座內(nèi)。再測(cè)定波段掃描基線并使之平滑。2、將減光片插入試樣光路的濾光片槽內(nèi),其讀數(shù)即為減光片的衰減值K,然后將減光片插入?yún)⒈裙饴返臑V光片座內(nèi),3、將石英吸收池中的蒸餾水依次換成上述截止濾光液,插入試樣試樣池座中,在相應(yīng)的波段內(nèi)掃描、打印;在記錄紙的作標(biāo)上量取測(cè)定波長(zhǎng)處的透光度,乘以衰減值K,即得各測(cè)定波長(zhǎng)處的雜散光值。如何判別紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)優(yōu)劣
我們?nèi)绾蝸?lái)評(píng)價(jià)一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的優(yōu)劣呢?首先,我們要來(lái)考察它的外觀。然后,我們探討一下會(huì)對(duì)儀器的使用有很大影響的幾個(gè)重要指標(biāo):1、雜散光它指不應(yīng)該有光的地方有了光。它是光譜測(cè)量中誤差的主要來(lái)源。這個(gè)值當(dāng)然越小越好了。2、光度準(zhǔn)確度光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測(cè)量的光度讀數(shù)值與真值之差。它是用戶對(duì)儀器的直接要求,每個(gè)用戶都必須重視。3、噪聲噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。4、光譜帶寬指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。表征儀器的光譜分辨率。按照比耳定律,光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的,但是如果儀器的光源能量弱,光學(xué)傳感器的靈敏度低時(shí),光譜帶寬小了,也得不到理想的測(cè)量結(jié)果的。所以,選擇和使用儀器時(shí)一定注意。5、穩(wěn)定性穩(wěn)定性是使用者較為關(guān)注的指標(biāo)之一。儀器的宗旨就是穩(wěn)定可靠,不穩(wěn)定更談不上可靠了。6、噪聲噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。7、波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度和重復(fù)性儀器的每個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的,如果所示的波長(zhǎng)和實(shí)際波長(zhǎng)偏差萬(wàn)里,那么測(cè)出的值和真值的吻合度從何談起呢?可見(jiàn)這個(gè)指標(biāo)的重要性??傊?,這幾個(gè)指標(biāo)都是相互獨(dú)立又相互關(guān)聯(lián)的,每個(gè)指標(biāo)對(duì)儀器的使用都有很大影響。希望大家在選購(gòu)紫外、可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),多做比較,多做判斷,切實(shí)找到一個(gè)穩(wěn)定可靠的好幫手。我們選擇時(shí)需要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的需要,主要考慮光學(xué)構(gòu)造和光源、檢測(cè)方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等因素。1.光學(xué)構(gòu)造一般來(lái)說(shuō),紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。1單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過(guò)對(duì)照物,然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。可以最小化光漂移(lampdrift)和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來(lái)代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。2.樣品類型在大部分的樣品類型中,分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。用小試管裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來(lái)滿足各種改變需要。3.光源和檢測(cè)方法分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。有的儀器可以選擇多種光源:紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。4.樣品類型在大部分的樣品類型中,分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。用小試管裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來(lái)滿足各種改變需要。5.數(shù)據(jù)管理大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器
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