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文檔簡介

胚胎干細胞及其培養(yǎng)建系*****·***1完整版PPT課件干細胞

(stemcells,SC)23是一類具有多向分化潛能和自我復制能力的原始的未分化細胞,是形成哺乳類動物的各組織器官的原始細胞。2完整版PPT課件按分化潛能:全能干細胞多能干細胞單能干細胞干細胞的分類按發(fā)育狀態(tài):胚胎干細胞成體干細胞。→3完整版PPT課件胚胎干細胞

當受精卵分裂發(fā)育成囊胚時,內(nèi)層細胞團(InnerCellMass)的細胞即為胚胎干細胞。胚胎干細胞具有全能性,可以自我更新并具有分化為體內(nèi)所有組織的能力。4完整版PPT課件5完整版PPT課件胚胎干細胞的特點全能性無限擴增性遺傳穩(wěn)定性6完整版PPT課件7完整版PPT課件胚胎干細胞應(yīng)用前景1.是生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物的高效載體8完整版PPT課件胚胎干細胞應(yīng)用前景2.用于疾病治療9完整版PPT課件胚胎干細胞應(yīng)用前景胚胎干細胞用來克隆治療技術(shù)路線10完整版PPT課件胚胎干細胞培養(yǎng)建系方法11完整版PPT課件1.胚胎采集分離具有發(fā)育全能性的ES細胞,要求選擇合適階段的胚胎。采卵時一般取囊胚。12完整版PPT課件

2.ICM的獲取

從著床前的胚泡中分離內(nèi)細胞團,是從早期胚胎建立ES細胞系的先決條件

直接分離法免疫外科法延遲著床法機械切割13完整版PPT課件14完整版PPT課件3.內(nèi)胚團的離散分離ICM時可用吸管將其從滋養(yǎng)層細胞上轉(zhuǎn)移到胰蛋白酶微滴中,大約3~5分鐘ICM細胞彼此解離。15完整版PPT課件4.胚胎干細胞的鑒定

常用的檢測指標有堿性磷酸酶、OCT24、細胞特異性表面抗原(SSEA2l)

等。

測定胚胎干細胞的體內(nèi)分化能力是通過制備嵌合體來完成的。16完整版PPT課件

5.培養(yǎng)有飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系

胚胎干細胞是動物個體發(fā)生過程中具有全能性的原始細胞,維持ES細胞的不分化狀態(tài)由細胞內(nèi)一些結(jié)構(gòu)蛋白和多肽因子進行內(nèi)源性調(diào)控。體外培養(yǎng)的ES細胞,接種在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)時可以長時間保持ES細胞的原初特性。用作飼養(yǎng)層的細胞多數(shù)是具有貼附能力的細胞(如成纖維細胞、子宮內(nèi)皮細胞等)無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系飼養(yǎng)層細胞分泌的因子難以支持某些ES細胞的增殖。ES細胞也可在無飼養(yǎng)層細胞的環(huán)境中建立和維持,培養(yǎng)液中添加LIF因子或使用能分泌LIF的細胞制備條件培養(yǎng)液均可17完整版PPT課件

胚胎干細胞系不僅是研究細胞分化的

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