《寵物疫病與公共衛(wèi)生》實(shí)訓(xùn)29課件講解

原蟲診斷技術(shù)實(shí)訓(xùn)目標(biāo)學(xué)會(huì)血液原蟲壓滴檢查、涂片檢查及集蟲檢查技術(shù)；掌握球蟲卵囊檢查技術(shù)及弓形蟲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種檢查技術(shù)。進(jìn)一步認(rèn)識(shí)這些原蟲的形態(tài)特征。實(shí)訓(xùn)內(nèi)容1．血液原蟲檢查法；2．球蟲卵囊檢查法；3．弓形蟲檢查法。材料準(zhǔn)備

1．形態(tài)構(gòu)造圖：巴貝斯蟲、住白細(xì)胞原蟲、球蟲卵囊、弓形蟲形態(tài)構(gòu)造圖。2．器材：顯微鏡、載片、蓋片、離心機(jī)、離心管、移液管、平皿、采血針頭、燒杯、染色缸、污物缸、糞篩、玻棒、手術(shù)刀、剪刀、鑷子、剪毛剪、1ml注射器、酒精棉球、組織搗碎機(jī)、研缽等。3．藥品：生理鹽水、飽和鹽水、2%枸櫞酸鈉溶液、甲醇、姬姆薩染色液、瑞氏染色液、青霉素、鏈霉素等。血液壓滴原蟲檢查法將采的血液滴在潔凈的載玻片上，加等量的生理鹽水與混合，加上蓋玻片，立即放顯微鏡下用低倍鏡檢查，發(fā)現(xiàn)有運(yùn)動(dòng)的可疑蟲體時(shí)，可再換高倍鏡檢查。血液涂片染色檢查原蟲采血一滴，滴在載玻片的一端，按常規(guī)推制成血片，晾干。滴甲醇2～3滴于血膜上，使其固定，而后用姬姆薩染色，也可直接用瑞氏染色。染后用油鏡檢查。本法適用于各種血液原蟲。血液離心集蟲檢查原蟲在離心管中加2%的檸檬酸鈉生理鹽水3～4ml，再加血液6～7ml，混勻后，以500r/min離心5min，使其中大部分紅細(xì)胞沉降。將含有少量紅細(xì)胞、白細(xì)胞和蟲體的上層血漿，用吸管移入另一離心管中，補(bǔ)加一些生理鹽水，以2500r/min的速度離心10min，取其沉淀制成抹片，染色檢查。此法適用于檢查伊氏錐蟲和梨形蟲。其原理是錐蟲和感染有梨形蟲的紅細(xì)胞的比重較輕，在第1次沉淀時(shí)，正常紅細(xì)胞下沉，而錐蟲和感染有梨形蟲的紅細(xì)胞尚懸浮在血漿中。第2次離心沉淀時(shí)，則濃集于管底。球蟲卵囊檢查法一般情況下，采取新排出的糞便，按蠕蟲蟲卵的檢查方法，或直接涂片檢查，或采用飽和鹽水漂浮法檢查糞便中的卵囊。也可用腸粘膜刮取物涂片檢查，應(yīng)注意，卵囊較小，利用綿輪篩兜淘洗法檢查時(shí)，卵囊能通過篩孔，故應(yīng)留取濾下的液體，取沉渣檢查。當(dāng)需要鑒定球蟲的種類時(shí)，可將濃集后的卵囊，去除溶液中的鹽后加2.5%的重鉻酸鉀溶液，在25℃溫箱中培養(yǎng)，待其孢子形成后進(jìn)行觀察。弓形蟲檢查法除死后可在一些組織中找到包囊、滋養(yǎng)體外，生前可取腹水涂片，用瑞氏染色或姬姆薩氏染色后鏡檢，檢查滋養(yǎng)體的存在。動(dòng)物接種，方法是取急性死亡可疑動(dòng)物的肺、淋巴結(jié)、脾、肝或腦組織，以1:5的比例加入生理鹽水，搗碎制成乳劑，加入少量青、鏈霉素，以后吸取乳劑0.2ml接種于小白鼠腹腔，一般急性者4～5天發(fā)病，表現(xiàn)被毛粗亂，食欲消失，腹部膨大，有大量腹水，病程4～5天，最后死