實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理-實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施消毒與滅菌

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施消毒與滅菌任務(wù)描述知識(shí)平臺(tái)任務(wù)實(shí)施任務(wù)描述

了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施消毒滅菌的方法，消毒液的配制和使用，并實(shí)際在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)進(jìn)行消毒滅菌工作，填寫(xiě)相應(yīng)的記錄表。

知識(shí)平臺(tái)知識(shí)平臺(tái)一、消毒與滅菌二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法三、飼育器具消毒與滅菌四、各種區(qū)域的消毒與滅菌五、SPF級(jí)飼育室的消毒六、消毒工作中的個(gè)人防護(hù)1.飼育架

耐熱性較好的飼育架，可以用高壓蒸汽滅菌(121℃，20~30min)，高壓蒸汽滅菌前，先將飼育架完全清洗干凈，并擦干。三、飼育器具消毒與滅菌2.飼育籠

耐熱飼育籠采用高壓蒸汽滅菌。在滅菌前，需要先去除籠內(nèi)污物(墊料等)，將飼育籠在溫水中浸泡一晚，充分清除籠內(nèi)污跡，洗凈飼育籠。最后送入滅菌器中進(jìn)行滅菌（121℃，20~30min）。3.墊料一般情況下，墊料采用高壓蒸汽及干熱滅菌方法。（1）高壓蒸汽滅菌：墊料放入不銹鋼容器中，或者直接按每個(gè)飼育籠的需要量裝入籠子中一起滅菌，一般裝入2~3cm高。滅菌時(shí)間一般為40min(121℃)，干燥時(shí)間20min.（2）干燥滅菌用耐熱的不銹鋼容器，墊料放入八成左右，或直接按每個(gè)飼育籠的需要量裝入飼育籠中一起滅菌，一般裝入2~3cm高，然后放入到干熱滅菌器中，進(jìn)行180℃30min滅菌處理。4.飼料盒、飲水瓶（1）消毒在進(jìn)行消毒和滅菌之前，均應(yīng)清除飼料盒、飲水瓶中的飼料、飲水等，洗去附著的污物。用次氯酸鈉浸泡飼料盒、飲水瓶一個(gè)晚上，清洗干燥后放在規(guī)定的清潔場(chǎng)所。（2）滅菌

在溫水槽中將飼料盒、飲水瓶中殘留的飼料等污物浸泡一個(gè)晚上，以中性洗滌劑充分洗凈，放在大小適當(dāng)?shù)娜萜髦兴腿敫邏簻缇鳌?.飼料

將飼料裝入飼料箱放入高壓滅菌器中，箱與箱之間不要重疊，上下應(yīng)有一定的間隙。滅菌時(shí)間一般為121℃30~40min，干燥20~30min6.飲水

飲水一般采用高壓蒸汽滅菌。將耐熱性水瓶充分洗凈后，裝入80%經(jīng)過(guò)濾后的自來(lái)水，蓋上水瓶蓋，放入耐熱性容器中。7.實(shí)驗(yàn)器具實(shí)驗(yàn)用的器具有各種形狀、大小和材料等。一般根據(jù)其使用方法和目的進(jìn)行適宜的滅菌或消毒處理。操作時(shí)先清除實(shí)驗(yàn)器具上的污物，然后再進(jìn)行適當(dāng)?shù)臏缇蛳咎幚?，送入清潔區(qū)域保存。8.工作服可用洗衣機(jī)洗滌，干燥30分鐘后，用包裝袋包裝后放入滅菌器內(nèi)。滅菌時(shí)間一般為40min(121℃)，干燥30min，放在固定的場(chǎng)所保管。9.其他包括需要消毒滅菌的工作車、拖鞋、筆記用品、門把手等。（1）滅菌工作車一般用高壓蒸汽滅菌，條件121℃20min。拖鞋、筆記用品等一般用環(huán)氧乙烷滅菌。可將環(huán)氧乙烷滅菌器加熱至60℃，滅菌3小時(shí)，取出衣服放在規(guī)定的清潔區(qū)域保管。（2）消毒作業(yè)車、拖鞋及門把手用消毒液消毒，將作業(yè)車、拖鞋洗凈后揩干，用70%酒精，或50%異丙醇噴霧，門把手則用揩布蘸取藥劑后擦拭。1.驗(yàn)收、檢疫區(qū)域此區(qū)域因?yàn)榻?jīng)常性地搬入物品、動(dòng)物，如果帶入污染物，那么此區(qū)域極易被污染，因此必須每天進(jìn)行整理、整頓、消毒。2.SPF動(dòng)物的飼育區(qū)域3.無(wú)菌動(dòng)物、悉生動(dòng)物飼育區(qū)域五、SPF級(jí)飼育室的消毒

日常操作原則上每天對(duì)清潔物品貯藏室、浴室、緩沖間及走廊等進(jìn)行空氣消毒，定期操作則以周為單位，對(duì)屏障內(nèi)所有區(qū)域進(jìn)行消毒。1.消毒藥的選擇一般選廣譜消毒劑、鹵化物消毒劑(次氯酸鈉、碘伏等)、逆性皂液(界面活性劑)、過(guò)氧化物消毒劑(過(guò)氧酸)及季胺類(如新潔爾滅)消毒劑等并用。傳遞窗的消毒也可使用酒精、洗必泰、新潔爾滅等。2.日常消毒操作按照進(jìn)入屏障設(shè)施的要求穿上無(wú)菌服進(jìn)入動(dòng)物室。手指用以用消毒液浸泡或噴霧后擦干，戴上手套。地板上的污物、墊料、飼料殘?jiān)鍜吒蓛?。加料、給水作業(yè)結(jié)束后，籠架上的墊料、飼料殘?jiān)盟⒆踊蚩紥咔?。籠架擦拭消毒室內(nèi)排氣口的初效過(guò)濾器，每周用水清洗一次層流架上的初效過(guò)濾器同樣一周清洗一次。使用后的清掃用具，用上述消毒藥消毒后，盡量保持干。SPF飼育區(qū)域內(nèi)的緩沖間、走廊、更衣室打開(kāi)紫外線燈。使用后的專用滅菌衣，裝入帶蓋的容器內(nèi)收容，洗凈滅菌后待用。3.定期消毒操作（1）籠子、墊料、托盤、飼料盒、飲水瓶等，使用前用高壓滅菌器滅菌，籠子和墊料每周換1次以上，籠蓋、料盒1月?lián)Q一次以上，飲水瓶每周換2次以上，專用容器從傳遞窗、緩沖間搬出后洗凈、滅菌。（2）不能用高壓滅菌器滅菌的架子、飼育裝置，每周1次以上用200x10-6次氯酸鈉液或0.1%逆性皂液或含有效碘1000x10-6的碘伏清拭消毒。（3）SPF飼育區(qū)內(nèi)，盡量少用水，以保持干燥狀態(tài)。同時(shí)除去積水，以減少微生物繁殖。（4）傳遞窗、緩沖間內(nèi)部用70%酒精、或者用0.5%逆性皂液噴霧，或用0.5%的過(guò)氧乙酸。另外，打開(kāi)紫外線燈30min后方可打開(kāi)內(nèi)側(cè)門。（5）動(dòng)物更換籠子時(shí)，用消毒的小鑷子捉取動(dòng)物，一個(gè)籠子內(nèi)動(dòng)物更換后，小鑷子放在消毒液中浸泡3min以上再可使用。（6）動(dòng)物尸體應(yīng)放在塑料袋中，封住袋口，塑料袋四周用70%酒精或0.5%洗必泰酒精混合液噴霧消毒。

消毒因子大多對(duì)人是有害的，因此,在進(jìn)行消毒時(shí)工作人員一定要有自我保護(hù)的意識(shí)和采取自我保護(hù)的措施，以防止消毒事故的發(fā)生和因消毒操作方法不當(dāng)可能對(duì)人體造成的傷害。1.熱力滅菌：干熱滅菌時(shí)應(yīng)防止燃燒；壓力蒸汽滅菌應(yīng)防止發(fā)生爆炸事故及可能對(duì)操作人員造成的灼傷事故。2.紫外線、微波消毒：應(yīng)避免對(duì)人體的直接照射。3.氣體化學(xué)消毒、滅菌劑：應(yīng)防止有毒有害消毒氣體的泄漏，經(jīng)常檢測(cè)消毒環(huán)境中該類氣體的濃度,確保在國(guó)家規(guī)定的安全范圍之內(nèi)；對(duì)環(huán)氧乙烷氣體滅菌劑，還應(yīng)嚴(yán)防發(fā)生燃燒和爆炸事故。4.液體化學(xué)消毒、滅菌劑：應(yīng)防止過(guò)敏和可能對(duì)皮膚、粘膜的損傷。5.處理銳利器械和用具應(yīng)采取有效防護(hù)措施，以避免可能對(duì)人體的刺、割等傷害。任務(wù)實(shí)施

?分組練習(xí)，完成老師要求的考核2.各學(xué)習(xí)小組仔細(xì)閱讀消毒滅菌相關(guān)SOP了解消毒滅菌工作的要點(diǎn)，確定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育工作的主要負(fù)責(zé)人，制定工作計(jì)劃、分配工作任務(wù)。1.教師提出本次任務(wù)的學(xué)習(xí)內(nèi)容和目標(biāo)分組練習(xí)，完成老師要求的考核3.各學(xué)習(xí)小組進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施后，按照工作計(jì)劃和流程，完成高壓滅菌操作，并進(jìn)入動(dòng)物房，接收高壓滅菌鍋中的物品，對(duì)設(shè)施進(jìn)行滅菌消毒的工作。4.高壓滅菌操作（在有資質(zhì)人員指導(dǎo)下進(jìn)行，視情況選擇一種材料進(jìn)行滅菌操作）。1.消毒時(shí)，如何進(jìn)行自身防護(hù)？2.一名同學(xué)在一更和二更換衣后，進(jìn)入清潔區(qū)域。他匆匆完成換水、添料工作后，發(fā)現(xiàn)有一只死亡小鼠，就裝入垃圾袋中，然后帶著垃圾袋通過(guò)污染走廊離開(kāi)清潔區(qū)域，將垃圾袋扔到外部垃圾箱中。請(qǐng)問(wèn)，整個(gè)過(guò)程中他有哪些不符合要求的地方？如何改正？

思考與練習(xí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施消毒與滅菌任務(wù)描述知識(shí)平臺(tái)任務(wù)實(shí)施任務(wù)描述

了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施消毒滅菌的方法，消毒液的配制和使用，并實(shí)際在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)進(jìn)行消毒滅菌工作，填寫(xiě)相應(yīng)的記錄表。

知識(shí)平臺(tái)知識(shí)平臺(tái)一、消毒與滅菌二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法三、飼育器具消毒與滅菌四、各種區(qū)域的消毒與滅菌五、SPF級(jí)飼育室的消毒六、消毒工作中的個(gè)人防護(hù)

消毒是指殺滅或清除傳播媒介上病原微生物,使其達(dá)到無(wú)害化的處理。

滅菌是指殺滅或清除傳播媒介上一切微生物的處理。（1）低水平消毒法：只能殺滅細(xì)菌繁殖體和親脂病毒的化學(xué)消毒劑和通風(fēng)散氣、沖洗等機(jī)械除菌法。1.消毒、滅菌因子的基本分類（2）中水平消毒法：是可以殺滅和去除細(xì)菌芽孢以外的各種病原微生物的消毒方法。（3）高水平消毒法：可以殺滅一切病原微生物的消毒方法。（4）滅菌法：可殺滅外環(huán)境中除了一些高抗力的細(xì)菌芽孢以外的所有微生物的物理、化學(xué)方法。

2.選擇消毒、滅菌方法的原則

選擇消毒方法時(shí)需考慮，一是要保護(hù)消毒物品不受損壞，二是使消毒方法易于發(fā)揮作用。

應(yīng)遵循以下基本原則：（1）耐高溫、耐濕度的物品和器材，應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌；耐高溫的玻璃器材、油劑類和干粉類等可選用干熱滅菌。學(xué)生主體、教師引導(dǎo)課下教學(xué)

（2）不耐熱、不耐濕，以及貴重物品，可選擇環(huán)氧乙烷或低溫蒸汽甲醛氣體消毒、滅菌。

（3）器械的浸泡滅菌，應(yīng)選擇對(duì)金屬基本無(wú)腐蝕性的滅菌劑.（4）選擇表面消毒方法，應(yīng)考慮表面性質(zhì)，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距離照射，或液體消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法。

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施常用消毒滅菌方法

1.物理消毒法

（1）干熱消毒：包括焚燒、燒灼、干烤等幾種方法。焚燒適用于動(dòng)物尸體的處理，尤其是帶毒的動(dòng)物尸體，污染的垃圾、墊料等。（2）濕熱消毒：主要有以下幾種：①煮沸消毒：這種方法簡(jiǎn)單易行、經(jīng)濟(jì)實(shí)用且效果可靠。適用于金屬器械、玻璃制品、棉織品、飲水瓶、飲水及籠具的消毒。

②常壓蒸汽消毒：又稱為流通蒸汽消毒，是指在1atm（1.013×105Pa）下，用100℃的水蒸汽進(jìn)行消毒。適用于籠具、食物等不耐高熱的物品的消毒。

③高壓蒸汽滅菌：適用于大多數(shù)耐熱物品，包括：金屬器械、籠具、飼具、墊料、飲水瓶、飲水、飼料等物品的消毒。

（3）紫外線輻射消毒：適用于空氣、飲水及污染物體表面的消毒。

（4）電離輻射滅菌：是指用γ射線、X射線和離子輻射照射物品，殺死其中的微生物的冷滅菌方法。常用于對(duì)手術(shù)器械、儀器以及食物的消毒滅菌。

（5）過(guò)濾除菌：一般用于液體和氣體的消毒，而不用于對(duì)物品的滅菌處理。

①液體過(guò)濾除菌：用于不耐熱或不能用化學(xué)方法消毒的液體制劑、血清制品等。②空氣過(guò)濾除菌：屏障系統(tǒng)（屏障系統(tǒng)的空氣經(jīng)粗、中、高效過(guò)濾）、動(dòng)物運(yùn)輸盒等。

2.化學(xué)消毒法

常用化學(xué)消毒方法包括：藥物液體浸泡、噴灑消毒，蒸汽或氣體熏蒸消毒。常用的消毒藥品及方法介紹如下：常用的消毒藥品及方法介紹如下：（1）甲醛：常用于液體浸泡消毒和甲醛氣體熏蒸消毒。

①殺菌作用

②殺真菌作用

③滅活病毒

④注意事項(xiàng)：刺激性大，使用時(shí)注意防護(hù)；在9℃以下保存。

（2）戊二醛：常用濃度為2%，用0.3%碳酸氫鈉或碳酸鈉調(diào)節(jié)其pH值為7.5~8.5時(shí)，可達(dá)最強(qiáng)殺菌效果。常用于醫(yī)療器械的冷滅菌，內(nèi)窺鏡、生物制品的消毒滅菌，環(huán)境消毒以及水處理的殺菌滅藻。（3）環(huán)氧乙烷：多用于氣體消毒、常用于外科手術(shù)器械等的消毒滅菌；（4）過(guò)氧乙酸：稀釋至0.2%時(shí)才能用于皮膚粘膜消毒；0.5%溶液浸泡籠具、鼠盒、飲水瓶、工作衣、帽鞋等10~30分鐘；（5）漂白粉類：84消毒類是一種廣譜、高效、去污力強(qiáng)的新型消毒劑，能快速殺滅甲、乙型肝炎病毒、細(xì)菌芽孢等各類致病菌。。（6）二氧化氯：穩(wěn)定性二氧化氯是在二氧化氯水溶液中添加碳酸鈉、硼酸鈉等予以穩(wěn)定。通常用檸檬酸活化，在酸性條件下使用。原液用水稀釋20倍可用于籠具、地面消毒。

（7）乙醇：75%乙醇用于皮膚消毒；70~75%乙醇常用于物體表面的消毒，如工作臺(tái)面、推車表面等，時(shí)間應(yīng)在3min以上。

（8）苯酚：3%~5%的苯酚水溶液浸泡、噴灑或擦拭污染物品表面，作用時(shí)間30~60min。（9）煤酚皂溶液：1%~5%煤酚皂水溶液浸泡、噴灑或擦抹污染物表面，作用時(shí)間30~60min；1%~2%水溶液用于皮膚消毒，浸泡3~5min；對(duì)排泄物消毒用5%~10%的溶液攪拌均勻浸泡。

（10）洗必泰：0.5%洗必泰乙醇溶液用于外科手術(shù)前擦手及手術(shù)前皮膚消毒；0.02%~0.05%濃度的水溶液或醇溶液用于病房物體表面的噴灑、浸泡、擦拭消毒；0.5%的水溶液可用于傷口創(chuàng)面的沖洗消毒及各種外科創(chuàng)面的消毒處理。（11）新潔爾滅：0.02%消毒傷口和粘膜；對(duì)污染物品表面的消毒，可用0.1%~0.5%濃度的溶液噴灑、浸泡、