植物胚胎(胚乳)培養(yǎng)及離體授粉

6?影響花藥/小孢子培養(yǎng)的關(guān)鍵因素

基因型、小孢子發(fā)育時(shí)期不同Brassica

napus基因型的小孢子產(chǎn)胚率GenotypeEmbryoid/10

microsporeSeedling

(%)Topas10000-2000001-20Westar1000-100000.1-1Delta100-100000.01-1Bounty10-1000.001-0.01?

供體植株的生理狀態(tài)和環(huán)境條件(Physiological

status

of

donor

plant)光周期、光照強(qiáng)度、溫度等對(duì)以后的花粉離體培養(yǎng)有很大影響。一般田間比溫室，

幼齡比老齡植株易于培養(yǎng)。主莖易于側(cè)(次)分枝?

培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件單倍體植株的加倍方法

?自然加倍?人工加倍：化學(xué)藥劑處理(有絲分裂抑制劑）原生質(zhì)體定義指采用機(jī)械或酶解法去掉細(xì)胞壁的裸露細(xì)胞原生質(zhì)體純化方法Sedimentation(沉降法)Flotation(上浮法，用23%蔗糖)界面法6原生質(zhì)體培養(yǎng)原生質(zhì)體計(jì)數(shù):

原生質(zhì)體培養(yǎng)前必須調(diào)到一定密度,即確定每毫升培養(yǎng)基中

含多少原生質(zhì)體.

用CPW13M懸浮原生質(zhì)體,血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),計(jì)算稀釋倍數(shù)濃度：一般~10原生質(zhì)體培養(yǎng)方法?

液體淺層培養(yǎng)(Liquid

thin

layer

culture):

將純化后的原生質(zhì)體懸浮于液體培養(yǎng)

基中,

再取少許于培養(yǎng)皿底部形成很薄的一層，封口培養(yǎng)。?

固體培養(yǎng)(Solid

culture):

叫瓊脂糖平板法(Agarose

plate

culture)或包埋培養(yǎng)法

(Embedding

culture)。將原生質(zhì)體懸浮于液體培養(yǎng)基后，與凝固劑(主要是瓊脂或低熔

點(diǎn)瓊脂糖，LMT

agarose)按一定比例混合，在培養(yǎng)皿底部形成一薄層，凝固后封口培養(yǎng)?

固液雙層培養(yǎng)法(Solid

over

liquid

culture):

此法結(jié)合液體淺層培養(yǎng)和固體培養(yǎng)的

優(yōu)點(diǎn)，在培養(yǎng)皿底部先鋪一層固體培養(yǎng)基，待凝固后再在其上進(jìn)行液體淺層培養(yǎng)。

固體培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分可以被液體層中的原生質(zhì)體吸收利用，而原生質(zhì)體產(chǎn)生的

有毒物質(zhì)可以被固體培養(yǎng)基吸收。?

原生質(zhì)體培養(yǎng)好壞的標(biāo)準(zhǔn)之一：植板率(Plating

efficiency)，

即形成愈傷組織的

原生質(zhì)體數(shù)量占所培養(yǎng)原生質(zhì)體總數(shù)的百分比原生質(zhì)體再生?

細(xì)胞壁再生:

原生質(zhì)體培養(yǎng)后經(jīng)過(guò)一段時(shí)間會(huì)再生出細(xì)胞壁，原生質(zhì)體在培

養(yǎng)初期仍然為圓球形，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，逐漸變?yōu)闄E圓形，此時(shí)表明已

經(jīng)開(kāi)始再生細(xì)胞壁。不同原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁時(shí)間：從幾小時(shí)到幾天。?

細(xì)胞壁檢測(cè)方法：熒光增白劑（Calcofouor

White，CFW),一種二苯乙烯

類(lèi)化合物，非特異性熒光染料，能非特異性結(jié)合糖苷鍵連接多糖，如幾丁

質(zhì)、葡聚糖和纖維等，熒光顯微鏡下發(fā)出熒光。0h3h6h

12h18h

24h36h

36hCotton

protoplastsB、D、F、H、J、L

、N、P

CFW染色?

原生質(zhì)體增殖：第一次分裂通常發(fā)生在培養(yǎng)后2-5天?

植株再生:

具有再生能力的原生質(zhì)體就會(huì)不斷分裂，形成多細(xì)胞團(tuán)。當(dāng)細(xì)胞團(tuán)

進(jìn)一步發(fā)育成為肉眼可見(jiàn)的小愈傷組織(Mini

callus)，及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基

(Differentiation

medium)中培養(yǎng)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合(Protoplast

fusion):即細(xì)胞融合(Cell

fusion)，也叫體細(xì)胞雜交(Somatichybridization)，超性雜交(Parasexual

hybridization)或超性融合(Parasexual

fusion)。是指不同

種類(lèi)的原生質(zhì)體不經(jīng)過(guò)有性階段，在一定條件下融合創(chuàng)造雜種的過(guò)程。為了與有性雜

交區(qū)別開(kāi)來(lái)，原生質(zhì)體融合常常寫(xiě)作“a（+）b”，其中a和b是兩個(gè)融合親本，（+）

表示體細(xì)胞雜交。原生質(zhì)體融合的意義?

克服有性雜交不親和及生殖障礙原生質(zhì)體融合不涉及到雌雄性配子，從而可以克服遠(yuǎn)緣雜交的生殖障礙。上世紀(jì)八十年代，有學(xué)者試圖將番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合，以圖獲得地上長(zhǎng)番

茄地下結(jié)馬鈴薯的植株(即番茄薯或薯番茄)。Georg

Melchers教授等通過(guò)原生質(zhì)體

融合獲得此類(lèi)植株，雖然這種植株沒(méi)有太大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，但其設(shè)想具有深遠(yuǎn)的意義Pomato?

轉(zhuǎn)移有利的農(nóng)藝性狀，創(chuàng)造新的種質(zhì)材料作物栽培品種常常缺乏某些抗性性狀，在栽培中處于不利地位。野生種中具有很

多優(yōu)良的抗性，通過(guò)原生質(zhì)體融合可以將野生種的抗性轉(zhuǎn)移進(jìn)栽培種中。?

轉(zhuǎn)移胞質(zhì)基因，為研究體細(xì)胞遺傳提供途徑和材料現(xiàn)有研究表明，植物的細(xì)胞質(zhì)控制著很多優(yōu)良的性狀，如線(xiàn)粒體控制胞質(zhì)雄性不

育，葉綠體控制的抗除草劑特性。由于有性雜交的胞質(zhì)成分主要為母系遺傳，不

可能實(shí)現(xiàn)雜交親本的胞質(zhì)雜交。但原生質(zhì)體融合則可以達(dá)到此目的?

創(chuàng)造異附加系、代換系等遺傳材料?

縮短育種年限，提高育種效率原生質(zhì)體融合方法Protoplast

FusionSpontaneous

fusionIntraspecific

Intergeneric

ChemofusionNaNO3高pH-高鈣法

PEG介導(dǎo)Induced

fusionElectrofusionMechanical

fusion電融合(Electrofusion）電融合儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：一是高頻交流電場(chǎng)部分；一是高頻直流高壓脈沖部分。主要是雙向電泳法，其基本過(guò)程是：?

細(xì)胞膜的接觸：當(dāng)原生質(zhì)體置于電導(dǎo)率很低的溶液中時(shí)，電場(chǎng)通電后，電流即通過(guò)原

生質(zhì)體而不是通過(guò)溶液，其結(jié)果是原生質(zhì)體在電場(chǎng)作用下極化而產(chǎn)生偶極子，從而使

原生質(zhì)體緊密接觸排列成串；?

膜的擊穿：原生質(zhì)體成串排列后，立即給予高頻直流脈沖就可以使原生質(zhì)膜擊穿，從

而導(dǎo)致兩個(gè)緊密接觸的細(xì)胞融合在一起AC

DC

DC電融合三大優(yōu)點(diǎn)：不存在細(xì)胞毒害問(wèn)題；融合效率高；操作簡(jiǎn)便原生質(zhì)體融合方式?

對(duì)稱(chēng)融合(Symmetric

fusion):親本原生質(zhì)體在融合前未進(jìn)行處理（如輻射、碘

乙酰胺等）的一種融合方式。

由于它綜合雙親的全部性狀，在導(dǎo)入有利性狀的

同時(shí)，也不可避免地帶入不利性狀。?

非對(duì)稱(chēng)融合(Asymmetric

fusion):

:

融合前，對(duì)一方原生質(zhì)體進(jìn)行射線(xiàn)照射處

理，鈍化其細(xì)胞核，另一方原生質(zhì)體不處理或經(jīng)化學(xué)試劑（如碘乙酰胺、碘乙酸、

羅丹明6-G等）處理，前者通常稱(chēng)為供體（Donor），后者則稱(chēng)為受體

（Recipient），也稱(chēng)供-受體融合（Donor-recipient

fusion）。?

供體處理:

目的主要是造成染色體的斷裂和片段化(Fragmentation)，從而使供體

染色體進(jìn)入到受體后部分或全部丟失，達(dá)到轉(zhuǎn)移部分遺傳物質(zhì)或只轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)?

受體的處理

:

為了減少融合再生后代的篩選工作，研究者利用一些代謝抑制劑

（Metabolism

inhibitor）處理受體原生質(zhì)體以抑制其分裂。常用的抑制劑有碘

乙酸（Iodoacetic

acid，IA）、碘乙酰胺（Iodoacetamide，IOA）和羅丹明6-

G（Rhodamin

6-G，R-6-G）。融合產(chǎn)物?

對(duì)稱(chēng)雜種（Symmetric

hybrid）指雜種中具有融合雙親全部的核遺傳物質(zhì)。

?

非對(duì)稱(chēng)雜種（Symmetric

hybrid）指雙親或其中一方的核遺傳物質(zhì)出現(xiàn)了丟失。

?

胞質(zhì)雜種（Cybrid）是非對(duì)稱(chēng)雜種的一種，指融合一方的核物質(zhì)完全丟失，并且具有雙方的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)。?

異質(zhì)雜種（Alloplasmic

hybrid），指雜種的細(xì)胞核來(lái)源于一方，而細(xì)胞質(zhì)來(lái)

自于另一方。體細(xì)胞雜種的篩選和鑒定?

雜種細(xì)胞選擇?

互補(bǔ)篩選法：利用雙親細(xì)胞在生理或遺傳方面所產(chǎn)生的互補(bǔ)作用來(lái)篩選，如在

選擇壓力培養(yǎng)基上只有具有互補(bǔ)作用的體細(xì)胞才能生長(zhǎng)發(fā)育。?物理特性篩選法。常用的：可見(jiàn)標(biāo)記物篩選法，如顏色差異；熒光素篩選法，向

親本原生質(zhì)體導(dǎo)入兩種不同的熒光素等?

雜種植株選擇?

形態(tài)學(xué)鑒定：利用雜種植株和雙親在表型上的差異鑒定C201?

細(xì)胞學(xué)鑒定Somatic

hybridsK?

生物化學(xué)鑒定：如利用同工酶親本2親本1雜種Homoserine

dehydrogenase

activities

?

分子生物學(xué)鑒定體細(xì)胞雜種的重要應(yīng)用Fruits

from

allotetraploid

somatic

hybrids.

Left:

‘Valencia’

sweet

orange

+

‘Robinson’

9

x

‘Temple’;

Middle:

‘Nova’

+

‘Osceola’;

Right:

‘Rohde

Red

Valencia’

+

‘Dancy

’植物胚胎(胚乳)培養(yǎng)及離體授粉胚胎培養(yǎng)（Embryo

culture）:

指植物胚（種胚）及胚器官

（如子房、胚珠）在離體無(wú)菌培養(yǎng)條件下發(fā)育成幼苗的技術(shù)胚培養(yǎng)的意義?

克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性和雜種不育性(雜種胚的敗育

)，獲得種間或?qū)匍g雜種在很多種間和屬間雜交中，受精作用能正常完成，胚也能進(jìn)行早期的發(fā)育，但

由于胚乳發(fā)育不良，雜種胚最終將會(huì)夭折，因而不能形成有發(fā)芽能力的種子。Embryo

development

of

the

interspecific

hybrid

C.

martinezii

L.

(南瓜)×

C.

pepo

L

(西葫蘆)

through

embryo

rescue

technique

A)

Embryo

at

excision

time;

B)

embryo

at

7

(B),14

(C)

and

30

days-old

(D)?

打破種子休眠，促進(jìn)胚萌發(fā)及縮短育種周期植物休眠從幾天到幾年不等。某些園藝植物如落葉樹(shù)的育種和繁育工作因種子休

眠期太長(zhǎng)而受到影響。休眠的種子在合適的溫度、氧氣和濕度條件也不能萌發(fā)，

而應(yīng)用胚培養(yǎng)常?？梢钥朔@一類(lèi)種子發(fā)育上的障礙，促進(jìn)胚的生長(zhǎng)發(fā)育。通過(guò)

胚的離體培養(yǎng)，縮短休眠期。蘋(píng)果屬的一些品種，種子播種后在土壤中需幾個(gè)月才能萌發(fā)，離體培養(yǎng)的胚卻能

在48h萌發(fā)，4周內(nèi)形成移植幼苗，5個(gè)月的幼苗長(zhǎng)達(dá)1

m高。紅豆杉：自然條件下休眠期幾年(a)

Zygotic

embryos

excised

from

mature

seed

and

cultured

on

WPMB5

with

0.5%

AC

basal

salt

medium,

after

2

(b)

3

(c)

and

4

weeks

(d)

of

culture.

Radical

emergence

at

the

end

of

5

weeks

(e)?

快速繁育特殊(稀有)植物胚—種子—幼苗百山祖冷杉植物界的大熊貓：百山祖冷杉外，銀杉、華蓋木、伯樂(lè)樹(shù)、金花茶等園藝系陳利萍教授：胚—幼苗許多落葉果樹(shù)的種子是早熟的,種子往往不育。用胚胎培養(yǎng)可以將不能正常

萌發(fā)的種子培養(yǎng)出第二代植物。蘭花、天麻的種子成熟時(shí)，胚只有6~7個(gè)細(xì)胞，多數(shù)胚不能成活。如在種子

接近成熟時(shí)，把胚分離出來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)，就能生長(zhǎng)發(fā)育成正常植株。?

誘導(dǎo)胚性愈傷組織Wheat

immature

embryoMature

embryo?

獲得單倍體植株單倍體的產(chǎn)生方法很多，通過(guò)遠(yuǎn)緣雜交，結(jié)合胚培養(yǎng)技術(shù)是獲得單倍體的有

效方法之一。栽培大麥與球莖大麥進(jìn)行雜交，受精作用幾乎完全正常，但由

于二者的細(xì)胞分裂周期不同，合子胚在經(jīng)過(guò)幾次有絲分裂以后，球莖大麥的

染色體被淘汰，子細(xì)胞中只留下大麥的染色體，為大麥單倍體。?

種子活力測(cè)定對(duì)于休眠性強(qiáng)的種子？？？WT

hxk9TTC染色法都可染，發(fā)芽率100%？Seedling

emergence

and

germination

of

isolated

A.

crenata

(朱砂根)

embryosJournal

of

Botany

Volume

2012,

Article

ID

679765胚培養(yǎng)類(lèi)型?

成熟胚培養(yǎng)：子葉期后至發(fā)育完全的胚

?

幼胚培養(yǎng)：子葉期以前具胚結(jié)構(gòu)的胚胚培養(yǎng)操作過(guò)程取材和消毒胚的剝離接種(看護(hù))培養(yǎng)離體(幼)胚發(fā)育途徑?

胚胎發(fā)育途徑(embryonic

development)?

胚性發(fā)育途徑(embryonal

development)幼胚接種到培養(yǎng)基上以后,仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育,最后形成成熟胚

(有時(shí)甚至可能類(lèi)似種子),

然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株,這種途徑發(fā)

育的幼胚一般一個(gè)幼胚將來(lái)就是一個(gè)植株.?

早熟萌發(fā)途徑(early

mature

sprouting)未經(jīng)完成正常的胚胎發(fā)育過(guò)程而形成幼苗的現(xiàn)象，苗弱小。

?

產(chǎn)生愈傷途徑幼胚、成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化胚珠和子房培養(yǎng)Ovary

(授粉子房和未授粉子房）；Ovule（受精和未受精）胚珠培養(yǎng)的意義?

成熟胚很小時(shí)，胚培養(yǎng)難以成功，采用胚珠培養(yǎng)較易成功

。Maheshwari將

授粉5天的罌粟（Papaver

somnierum）胚珠進(jìn)行離體培養(yǎng)，得到種子。

罌粟授粉5天的胚珠僅為合子胚或只有2個(gè)細(xì)胞的原胚

。?

對(duì)未受精的胚珠進(jìn)行培養(yǎng)可誘發(fā)大孢子發(fā)育成單倍體植物

。?

在棉花種間雜交中，通過(guò)胚珠培養(yǎng)可以防止由于棉鈴脫落喪失雜種胚。?

研究棉花的纖維發(fā)育Cucumber

Gynogenesis纖維如何發(fā)育棉花胚珠和纖維的發(fā)育過(guò)程開(kāi)花當(dāng)天棉花纖維細(xì)胞開(kāi)始突起萌發(fā)，花后3天左右肉眼看見(jiàn)

伸長(zhǎng)纖維細(xì)胞，5天左右纖維細(xì)胞已經(jīng)伸長(zhǎng)并包裹胚珠，5~10

天是纖維的快速伸長(zhǎng)期，16天左右初生壁開(kāi)始沉積，纖維細(xì)

胞的纖維素含量開(kāi)始提高最終達(dá)到細(xì)胞質(zhì)量的90%左右。Trichome

on

Arabidopsis

leaf

Pavement

cell,

stomata

(in

blue),and

fiber

cells

initiating

from

the

epidermis

of

cottonseed

epidermis棉花的胚珠培養(yǎng)未受精胚珠受精胚珠培養(yǎng)2天培養(yǎng)6天培養(yǎng)15天

纖維細(xì)胞顯著伸長(zhǎng)胚乳培養(yǎng)胚乳培養(yǎng)(endosperm

culture)：離體條件下以胚乳為外植體培養(yǎng)獲得植株的技術(shù)原生質(zhì)體再生的主要過(guò)程?

細(xì)胞壁再生:

原生質(zhì)體培養(yǎng)后經(jīng)過(guò)一段時(shí)間會(huì)再生出細(xì)胞壁，原生質(zhì)體在培

養(yǎng)初期仍然為圓球形，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，逐漸變?yōu)闄E圓形，此時(shí)表明已

經(jīng)開(kāi)始再生細(xì)胞壁。不同原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁時(shí)間：從幾小時(shí)到幾天。?

原生質(zhì)體增殖：第一次分裂通常發(fā)生在培養(yǎng)后2-5天?

植株再生:

具有再生能力的原生質(zhì)體就會(huì)不斷分裂，形成多細(xì)胞團(tuán)。當(dāng)細(xì)胞團(tuán)

進(jìn)一步發(fā)育成為肉眼可見(jiàn)的小愈傷組織(Mini

callus)，及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基

(Differentiation

medium)中培養(yǎng)原生質(zhì)體融合方法原生質(zhì)體融合方式?

對(duì)稱(chēng)融合(Symmetric

fusion):親本原生質(zhì)體在融合前未進(jìn)行處理（如輻射、碘

乙酰胺等）的一種融合方式。

由于它綜合雙親的全部性狀，在導(dǎo)入有利性狀的

同時(shí)，也不可避免地帶入不利性狀。?

非對(duì)稱(chēng)融合(Asymmetric

fusion):

:

融合前，對(duì)一方原生質(zhì)體進(jìn)行射線(xiàn)照射處

理，鈍化其細(xì)胞核，另一方原生質(zhì)體不處理或經(jīng)化學(xué)試劑（如碘乙酰胺、碘乙酸、

羅丹明6-G等）處理，前者通常稱(chēng)為供體（Donor），后者則稱(chēng)為受體

（Recipient），也稱(chēng)供-受體融合（Donor-recipient

fusion）。離體胚培養(yǎng)類(lèi)型及其發(fā)育途徑?

成熟胚培養(yǎng)：子葉期后至發(fā)育完全的胚

?

幼胚培養(yǎng)：子葉期以前具胚結(jié)構(gòu)的胚發(fā)育途徑?

胚胎發(fā)育途徑(embryonic

development)

?

胚性發(fā)育途徑(embryonal

development)

?

早熟萌發(fā)途徑(early

mature

sprouting)

?

產(chǎn)生愈傷途徑胚乳培養(yǎng)的意義?

自然條件下，胚乳細(xì)胞以淀粉、蛋白質(zhì)和脂類(lèi)的形式貯存著大量的營(yíng)養(yǎng)

物質(zhì)，以供胚胎發(fā)育和種子萌發(fā)之需。胚乳是研究這些天然產(chǎn)物代謝過(guò)

程的一個(gè)理想系統(tǒng)。?獲得三倍體重要途徑(無(wú)籽果實(shí)、6倍體等應(yīng)用）?胚乳植株染色體的不穩(wěn)定性，為染色體工程研究提供有效途徑Triploid

plants

from

endosperm

callus

of

neem,

Azadirachta

indica

A.Juss

（印楝）植物離體授粉In

vivo植物離體授粉(In

vitro

pollination):

也叫立體受精(in

vitro

fertilization)

，指在人工控制條件下使離體的胚珠或子房完成授粉、受精形成果實(shí)或種子的過(guò)程Pollen

germination受精障礙?

花粉在柱頭上不能萌發(fā)

?

花粉管不能進(jìn)入胚珠

?

花粉在花柱中破裂離體授粉的意義?

克服雜交不親和性(遠(yuǎn)緣雜交不親和、自交不親和)甘藍(lán)X白菜

離體授粉A:

甘藍(lán)子房?jī)?nèi)白菜花粉粒萌發(fā)（24h）；授粉48h(B)，72h(C)，5d(D)

?

誘導(dǎo)孤雌生殖?

雙受精及胚胎早期發(fā)育機(jī)理研究第六章

植物體細(xì)胞無(wú)性系變異及應(yīng)用體細(xì)胞無(wú)性系變異(Somaclonal

variation):

泛指在植物細(xì)胞、組織或器官離體培養(yǎng)過(guò)程中，受到非生物因子誘導(dǎo)，進(jìn)而導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)

胞和再生植株發(fā)生遺傳變異(genetic

variation)或表觀(guān)遺傳變異

(epigenetic

variation).?

遺傳變異(genetic

variation):

基因重組、基因突變和染色體變異

?

表觀(guān)遺傳變異(epigenetic

variation)

：DNA甲基化、組蛋白修飾、染色體重塑、轉(zhuǎn)座子激活和基因沉默等體細(xì)胞無(wú)性系變異的性狀表現(xiàn)

?

農(nóng)藝性狀的變異Leaf

morphology

of

the

wildtype

(WT)

and

ten

somaclonalvariant

types

(SVT)

of

‘Red

Flash’

caladium

(花葉芋)Plant

Cell

Tiss

Organ

Cult

(2016)

126:269

–279?

(次生)代謝物成分及含量變異Oil

content

of

soybean

seed

produced

by

individual

R1

plants

grown

in

the

field

in

1993Theor

Appl

Genet

(2001)

102:1072

–1075?

染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的變異In

Vitro

Cell.Dev.Biol.

—Plant

(2015)

51:350

–359Autotetraploid

plant

regeneration

by

indirect

somatic

embryogenesis

from

leaf

mesophyll

protoplasts

of

diploid

Gentiana

decumbens

L.f?

DNA結(jié)構(gòu)的變異體細(xì)胞無(wú)性變異系得遺傳學(xué)原理

?

體細(xì)胞無(wú)性系的細(xì)胞學(xué)變異?

染色體數(shù)目變異Autotetraploid

plant

regeneration

by

indirect

somatic

embryogenesis

from

leaf

mesophyll

protoplasts

of

diploid

Gentiana

decumbens

L.f?

染色體結(jié)構(gòu)變異?

體細(xì)胞無(wú)性系的DNA水平變異

?

基因突變?

基因的擴(kuò)增和丟失再生芽和植株(T.

durum)

and

CMS

(T.

timopheevi)Theor

Appl

Genet

(1996)

93:355-360Lane

a:

T.

durum

cytoplasm,

lane

c:

T.

timopheevi

cytoplasm,

lane

b:regenerated

triticle

shoots

of

cross

number

745

(T.

durum

cytoplasm)Theor

Appl

Genet

(1996)

93:355-360?

表觀(guān)遺傳變化Schematic

illustration

of

changes

in

chromatin

structure

via

DNA

methylation,

histone

modi?cation,

and

small

RNA-directed

DNA

methylation

(RdDM)Journal

of

Experimental

Botany,

62

：

3713–

3725,

2011?

DNA甲基化變化Analysis

of

DNA

methylation

in

plant

in

vitro

cultures

for

assessment

of

somaclonal

variationHPCE,

high

performance

capillary

electrophoresis;

HPLC,

high

performance

liquidchromatography;

MS,

methylation-sensitive;

SssI-MAA,

SssI-methylase

accepting

assayJournal

of

Experimental

Botany,

62

：

3713–

3725,

2011?

組蛋白及小RNA的變化Modi?cations

in

histones

and

small

RNA

levels

detected

in

plant

cells/tissues

cultured

in

vitr

oJournal

of

Experimental

Botany,

62

：

3713

–3725,

2011?

轉(zhuǎn)座子激活Diagram

of

the

of

the

TCUP

sequence

DQ324364.1

drawn

to

scaleThe

DNA

sequence

of

the

predicted

hAT

transposase

ORF

is

represented

as

a

gray

box,

the

Znf-BED

domain

is

represent

by

a

blue

box,

and

the

hATC

domain

is

represent

with

a

red

boxFront

Plant

Sci.

2012,

3:6.?

轉(zhuǎn)座子激活Diagram

of

the

experimental

design

used

for

the

25-

μM

5-aza-2-deoxycytosine

treatment

experimentsTreat

UntreatRT-PCR

demonstrating

multiple

TCUP

transcripts

present

in

azadC

treated

callus

P,

Hi-II

A×B

seedling;

B,

BMS

callus.Front

Plant

Sci.

2012,

3:6.?

細(xì)胞器DNA的變化（葉綠體或線(xiàn)粒體）再生芽和植株(T.

durum)

and

CMS

(T.

timopheevi)Theor

Appl

Genet

(1996)

93:355-360Lane

a:

T.

durum

cytoplasm,

lane

c:

T.

timopheevi

cytoplasm,

lane

b:regenerated

triticle

shoots

of

cross

number

745

(T.

durum

cytoplasm)Theor

Appl

Genet

(1996)

93:355-360?

基因沉默(部分也表現(xiàn)為表觀(guān)遺傳)Cassava

mosaic

disease

(CMD)

and

cassava

brown

streak

disease

(CBSD)：

非洲木薯生產(chǎn)中最重要的兩種病毒；CMD的抗