主管檢驗(yàn)技師考試臨床血液學(xué)檢驗(yàn)講義第十二章自身免疫性溶血性貧血及其實(shí)驗(yàn)診斷

資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除第十二章自身免疫性溶血性貧血及其實(shí)驗(yàn)診斷一、自身免疫性溶血的檢驗(yàn)及其應(yīng)用二、自身免疫性溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷一、自身免疫性溶血的檢驗(yàn)及其應(yīng)用1.免疫性溶血性貧血的定義和分類(lèi)免疫性溶血性貧血是由抗體參與的溶血反應(yīng)所致的貧血。這類(lèi)免疫反應(yīng)是由于紅細(xì)胞表面抗原，或與外來(lái)的抗原（如藥物等）相結(jié)合，在相應(yīng)抗體（IgG或IgM）作用下，或激活補(bǔ)體的參與，導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集或破壞而發(fā)生溶血；或在脾或肝臟內(nèi)的單核-巨噬細(xì)胞的吞噬作用下被破壞。免疫性溶血性貧血的分類(lèi)見(jiàn)下表。免疫性溶血性貧血的分類(lèi)分類(lèi)抗體型別自身免疫性溶血性貧血通常為溫抗體，IgG為主溫反應(yīng)性抗體型以溫抗體IgG為主，少部分IgA、C3冷反應(yīng)性抗體型通常為IgG、補(bǔ)體冷凝集素綜合征幾乎均為IgM陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿癥一般為IgG藥物免疫性溶血免疫復(fù)合物型、IgG、IgM等同種免疫新生兒溶血癥ABO、Rh、MN型血型不合輸血ABO、Rh型）法和間接（DATGIATG）法。包括直接（抗人球蛋白試驗(yàn)2.）。分為檢測(cè)紅細(xì)胞表面有無(wú)不完全抗）原理：用于檢測(cè)自身免疫性溶血性貧血的自身抗體（1IgG（），以前者DAGT體的直接抗人球蛋白試驗(yàn)（IAGT）和檢測(cè)血清中有無(wú)不完全抗體的間接抗人球蛋白試驗(yàn)（最常用。分子結(jié)合，如紅細(xì)胞表面存抗和（或）IgG抗[直接試驗(yàn)應(yīng)用抗人球蛋白試劑與紅細(xì)胞表面的IgGC3d]在自身抗體，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除抗人球蛋白直接試驗(yàn)原理示意圖及結(jié)果觀察（玻片法）間接試驗(yàn)應(yīng)用Rh（D）陽(yáng)性O(shè)型正常人紅細(xì)胞與受檢血清混合孵育，如血清中存在不完全抗體，紅細(xì)胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出現(xiàn)凝集。間接試驗(yàn)原理示意圖及結(jié)果觀察（試管法）抗人球蛋白結(jié)果：健康人直接和間接抗人球蛋白試驗(yàn)均為陰性。（2）臨床意義：陽(yáng)性見(jiàn)于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿、藥物致免疫性溶血性貧血、輸血引起溶血性貧血和新生兒同種免疫性溶血性貧血。陰性不能排除免疫性溶血性貧血。3.冷凝集素試驗(yàn)（1）原理：冷凝集素為IgM類(lèi)完全抗體，在低溫時(shí)可使自身紅細(xì)胞、O型紅細(xì)胞或與受檢者血型相同的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。凝集反應(yīng)的高峰在0～4℃，當(dāng)溫度回升到37℃時(shí)凝集消失。參考值：正常人血清抗紅細(xì)胞抗原的IgM冷凝集素效價(jià)＜1:32（4℃）。（2）臨床意義：陽(yáng)性見(jiàn)于冷凝集素綜合征（＞1:1000），支原體肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、瘧疾、肝硬化、淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤者亦可增高，但不超過(guò)1:1000。4.冷熱溶血試驗(yàn)（1）原理：陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥患者血清中有一種特殊的冷反應(yīng)抗體（Donath-Landsteiner抗體），在20℃以下（常為0～4℃）時(shí)與紅細(xì)胞結(jié)合，同時(shí)吸附補(bǔ)體，但不溶血。當(dāng)溫度升至37℃時(shí)，補(bǔ)體激活，紅細(xì)胞膜破壞而發(fā)生急性血管內(nèi)溶血。結(jié)果：陰性。（2）臨床意義：陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥患者呈陽(yáng)性，D-L抗體效價(jià)可高于1:40。病毒感染可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除二、自身免疫性溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷1.溫抗體型自身免疫性溶血性貧血（WAIHA）；血紅蛋白降至20g/L×0.810/L，（1）血象：紅細(xì)胞和血紅蛋白：急性型迅速下降，紅細(xì)胞甚至可低至，表面凹凸不平，可見(jiàn)紅細(xì)胞自身凝集、碎片，偶見(jiàn)。周?chē)t細(xì)胞呈小球形多在40～80g/L慢性型Hb。白細(xì)胞常增高，急性型可紅細(xì)胞被吞噬現(xiàn)象，常見(jiàn)有核和嗜多色性紅細(xì)胞。網(wǎng)織紅細(xì)胞增多，可超過(guò)10%，慢性型可更高，兩型也都可減少。急性溶血期有早、中、晚幼粒細(xì)胞出現(xiàn)，甚至并發(fā)類(lèi)白/L50×10超過(guò)血病反應(yīng)。部分患者血小板減少。溫抗體型自免溶貧患者外周血中可見(jiàn)球形紅細(xì)胞溫抗體（主要）與紅細(xì)胞結(jié)合抗體Fc端構(gòu)型變化易被吞噬細(xì)胞所吞噬破壞或部分吞噬成為球形細(xì)胞最后在脾索內(nèi)被破壞。溫抗體型自免溶貧球形紅細(xì)胞形成機(jī)制示意圖（2）骨髓象：骨髓粒紅比例縮小或倒置，呈現(xiàn)幼紅細(xì)胞增生，偶見(jiàn)紅細(xì)胞系統(tǒng)輕度巨幼樣變。再障危象發(fā)生時(shí)，全血細(xì)胞減少，遷延數(shù)周。（3）抗人球蛋白試驗(yàn)：是本病重要的診斷方法，最好同時(shí)作直接和間接法。直接法的意義更大，具有半定量測(cè)定價(jià)值，可作為病情程度變化和隨訪的指標(biāo)。臨床上常分為三型：①多數(shù)是抗IgG及抗C3型，預(yù)后差，治療困難；②抗IgG型；③少數(shù)是抗C3型，預(yù)后好?？笽gA型偶見(jiàn)。間接試驗(yàn)用正常O型或Rb（D）或與被檢者（ABO）同型紅細(xì)胞檢測(cè)患者血清中游離的自身抗體或補(bǔ)體，發(fā)生凝集為陽(yáng)性。直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，并不能排除AIHA的診斷。遇可疑結(jié)果應(yīng)重復(fù)檢測(cè)。另外，紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)陽(yáng)性，自身溶血試驗(yàn)陽(yáng)性，且能被ATP糾正。2.冷凝集素綜合征（CAS）冷凝集素綜合征又名冷凝集素病，是另一種自身免疫性溶血性貧血。（1）血象：血片紅細(xì)胞大小不等、異形、嗜多色、紅細(xì)胞呈緡錢(qián)狀及自身凝結(jié)現(xiàn)象，制備血片特別困只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除難。網(wǎng)織紅細(xì)胞增高，有時(shí)也可下降。（2）骨髓象：骨髓增生活躍，幼紅細(xì)胞增生顯著。（3）冷凝集素試驗(yàn)：陽(yáng)性，抗體幾乎均為IgM，抗體效價(jià)甚至高至少1:1000～1:16000，但也有報(bào)告IgG或IgA增高，故廣譜抗人球蛋白直接反應(yīng)是陽(yáng)性?！婺?；冷凝集素綜合征患者試管中的血樣在4A.B.毛細(xì)吸管中的血樣在4℃凝集（下），置于37℃時(shí)，凝集消失（上）；C.血片中可見(jiàn)凝集成片的紅細(xì)胞。3.陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿（1）血象：中至重度貧血，血片中紅細(xì)胞大小不等，呈球形、異形、碎片、嗜堿性點(diǎn)彩和有核紅細(xì)胞。白細(xì)胞輕度增高，血小板正常。（2）骨髓象：骨髓增生活躍，主要為幼紅細(xì)胞系統(tǒng)增高，粒紅比例縮小或倒置。（3）確診試驗(yàn)：①抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性，屬低溫IgG型，有雙相溶血素（D-L抗體），具有抗-P血型特異性，抗C3陽(yáng)性；②冷熱溶血試驗(yàn)陽(yáng)性。不同類(lèi)型溶血性貧血試驗(yàn)選擇主要溶疑及的溶血性篩選/排除試驗(yàn)確診試驗(yàn)貧血疾病名稱血部位高滲冷溶血試驗(yàn)紅細(xì)胞形態(tài)檢查遺傳;遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥膜蛋白電泳分析膜脂滲透脆性試驗(yàn)性橢圓形紅細(xì)胞增多癥質(zhì)分析酸化甘油溶血試驗(yàn)血管外自身溶血試驗(yàn)?zāi)さ鞍谆蚍治鲞z傳性口形紅Coombs紅細(xì)胞腺苷三磷酸活性，家系調(diào)查細(xì)胞增多癥試驗(yàn)高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)活性測(cè)G6PD熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)G-6-PD葡萄糖6-磷酸紅細(xì)胞定；基因分析硝基四氮唑藍(lán)試驗(yàn)脫氫酶缺陷癥Heinz小體生成試驗(yàn)血管外紅細(xì)胞形態(tài)檢查PK活性定量測(cè)定熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)紅細(xì)胞形態(tài)檢PK丙酮酸激酶缺乏癥中間代謝產(chǎn)物測(cè)定Ret查；-5嘧啶嘧啶核苷酸比率嘧啶核苷酶缺乏癥′--′-5核苷酶只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除活性測(cè)定血管外血紅蛋珠蛋白生成障礙性貧血；紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)異丙醇沉淀試驗(yàn)熱變性試驗(yàn)Heinz小體生成試驗(yàn)紅細(xì)胞鐮變?cè)囼?yàn)血紅蛋白電泳珠蛋白肽鏈分析基因分析吸收光譜測(cè)定白病溫抗體型自身免疫性溶貧紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞形態(tài)檢查Coombs試驗(yàn)Coombs試驗(yàn)冷凝集素試驗(yàn)冷凝集素綜合征（半抗藥物致免疫性溶血性貧血原型、自身免疫型）紅細(xì)胞形態(tài)檢查Coombs試驗(yàn)IAGT加藥后血管外新生兒同種免疫性溶血癥；膽紅素Ret紅細(xì)胞形態(tài)檢查；代謝檢查；血型鑒定試驗(yàn)；Coombs孕婦產(chǎn)前免疫性抗體檢查遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)；紅細(xì)胞形態(tài)檢查；Ret進(jìn)一步的血型鑒定Coombs試驗(yàn)聚凝胺試驗(yàn)血管內(nèi)陣發(fā)性睡眠性Rous試驗(yàn)?zāi)螂[血試驗(yàn)蔗糖溶血試驗(yàn)試驗(yàn)Ham蛇毒溶血因子試驗(yàn)補(bǔ)體敏感性試驗(yàn)血紅蛋白尿癥蠶豆病高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)G-6-PD熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)硝基四氮唑藍(lán)試驗(yàn)Heinz小體生成試驗(yàn)活性測(cè)紅細(xì)胞G-6-PD定；基因分析血管內(nèi)陣發(fā)性冷性試驗(yàn)；RousCoombs試驗(yàn)試驗(yàn)Coombs冷熱溶血試驗(yàn)IAGT及加藥后的IAGT血紅蛋白尿癥藥物致免疫性溶血性貧血（奎尼丁型）急發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)Coombs試驗(yàn)血型鑒定及不同方法的交叉配血試驗(yàn)微血管病性溶血性貧血紅細(xì)胞形態(tài)檢查；Ret；血小板計(jì)數(shù)；血漿游離血紅蛋白測(cè)定等止血與血栓實(shí)驗(yàn)室檢查及其他相關(guān)檢查習(xí)題紅細(xì)胞膜異常導(dǎo)致的貧血是A.丙酮酸激酶缺乏癥-6-葡萄糖B.磷酸脫氫酶缺乏癥C.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥D.珠蛋白生成障礙性貧血E.血紅蛋白病只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除『正確答案』C『答案解析』丙酮酸激酶缺乏癥和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥屬于酶缺陷異常導(dǎo)致的貧血。珠蛋白生成障礙性貧血和血紅蛋白病屬于血紅蛋白異常導(dǎo)致的貧血。關(guān)于尿含鐵血黃素試驗(yàn)，下列敘述哪項(xiàng)不正確A.陰性結(jié)果可排除血管內(nèi)溶血存在B.亦稱Rous試驗(yàn)C.陽(yáng)性對(duì)慢性血管內(nèi)溶血的診斷價(jià)值最大D.用普魯士藍(lán)反應(yīng)顯示含鐵血黃素E.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿常為陽(yáng)性『正確答案』A『答案解析』尿含鐵血黃素試驗(yàn)慢性血管內(nèi)溶血時(shí)陽(yáng)性，陰性結(jié)果不可以排除血管內(nèi)溶血存在。多種溶血的特殊檢查，下列哪一組是錯(cuò)誤的A.Coombs試驗(yàn)-自身免疫性溶血性貧血B.Ham試驗(yàn)-PNHC.蠶豆病-機(jī)體對(duì)蠶豆的變態(tài)反應(yīng)D.外周血中出現(xiàn)大量靶形紅細(xì)胞-珠蛋白生成障礙性貧血E.紅細(xì)胞滲透脆性增高-遺傳性球形細(xì)胞增多癥『正確答案』C『答案解析』蠶豆病是因?yàn)槿狈-6-PD導(dǎo)致的。有關(guān)血管內(nèi)溶血的敘述，下列錯(cuò)誤的是A.急性發(fā)作B.血紅蛋白血癥和血紅蛋白尿C.肝脾常大D.多為獲得者E.肝脾不大『正確答案』C『答案解析』血管內(nèi)溶血肝脾腫大少見(jiàn)。與血管外溶血不符合的是A.常為慢性經(jīng)過(guò)B.脾不大C.常為先天性D.破壞的紅細(xì)胞被單核-巨噬系統(tǒng)吞噬E.紅細(xì)胞形態(tài)改變多見(jiàn)『正確答案』B『答案解析』血管外溶血肝脾腫大常見(jiàn)。下列哪項(xiàng)不符合溶血性貧血的診斷A.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高B.膽紅素明顯升高C.尿膽原≥1:40只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除D.Hb尿陰性E.Rous試驗(yàn)陽(yáng)性『正確答案』D『答案解析』血管內(nèi)溶血時(shí)血紅蛋白尿常見(jiàn)，血管外溶血時(shí)血紅蛋白尿無(wú)或較輕。下列不屬于先天性溶血性貧血的疾病是A.遺傳性紅細(xì)胞增多癥B.丙酮酸激酶缺陷癥C.鐮狀細(xì)胞貧血D.不穩(wěn)定血紅蛋白病E.陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥『正確答案』E『答案解析』陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥屬于獲得性溶血性貧血。關(guān)于冷凝集素試驗(yàn)，下列哪項(xiàng)是正確的A.冷凝集綜合征患者陽(yáng)性，效價(jià)在1:1000以上B.37℃凝集反應(yīng)最強(qiáng)C.0～4℃凝集現(xiàn)象消失D.抗體IgGE.為不完全抗體『正確答案』A『答案解析』冷凝集素為IgM類(lèi)完全抗體，在低溫時(shí)可使自身紅細(xì)胞、O型紅細(xì)胞或與受檢者血型相同的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。凝集反應(yīng)的高峰在0～4℃，當(dāng)溫度回升到37℃時(shí)凝集消失。珠蛋白生成障礙性貧血的主要診斷依據(jù)是A.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高B.血紅蛋白尿C.外周血出現(xiàn)有核紅細(xì)胞D.血紅蛋白電泳異常E.骨髓中幼稚紅細(xì)胞明顯增高『正確答案』D『答案解析』血紅蛋白電泳：HbA增多，見(jiàn)于β珠蛋白合成障礙性貧血，為雜合子的重要實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)。HbE病時(shí)也在HbA區(qū)帶位置處增加，但含量很大（在10%以上）。HbA輕度增加亦可見(jiàn)于肝病、腫瘤和某些血液病。下列哪些可導(dǎo)致變性珠蛋白小體增高A.化學(xué)物質(zhì)中毒B.HbHC.G-6-PD缺陷D.還原型谷胱甘肽缺乏癥E.以上都是『正確答案』E『答案解析』變性珠蛋白小體試驗(yàn)：G-6-PD缺乏癥常高于45%，故可作為G-6-PD缺乏的篩檢試驗(yàn)。但還原型谷胱甘肽缺乏癥也增高；不穩(wěn)定血紅蛋白病含小體的細(xì)胞百分率為75%～84%，HbH病和化學(xué)物只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除質(zhì)中毒時(shí)也增高。下列屬于獲得性溶血性貧血疾病的是A.遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥B.珠蛋白生成障礙性貧血C.葡萄糖磷酸異構(gòu)酶缺陷征D.冷凝集素綜合征E.遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥『正確答案』D『答案解析』冷凝集素綜合征是由免疫因素引起的獲得性溶血性貧血?？谷饲虻鞍自囼?yàn)直接法下列哪項(xiàng)是正確的A.檢查紅細(xì)胞表面不完全抗體B.加抗人球蛋白血清發(fā)生凝集C.直接試驗(yàn)陽(yáng)性并有溶血者，其間接試驗(yàn)可能是陰性D.直接試驗(yàn)陽(yáng)性不一定發(fā)生溶血E.以上都是『正確答案』E『答案解析』用于檢測(cè)自身免疫性溶血性貧血的自身抗體（IgG）。分為檢測(cè)紅細(xì)胞表面有無(wú)不完全抗體的直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAGT）和檢測(cè)血清中有無(wú)不完全抗體的間接抗人球蛋白試驗(yàn)（IAGT），以前者最常用。直接試驗(yàn)應(yīng)用抗人球蛋白試劑[抗IgG和（或）抗C]與紅細(xì)胞表面的IgG分子結(jié)合，如紅細(xì)胞表面存在自身抗體，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。間接試驗(yàn)應(yīng)用Rh（D）陽(yáng)性O(shè)型正常人紅細(xì)胞與受檢血清混合孵育，如血清中存在不完全抗體，紅細(xì)胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出現(xiàn)凝集。某男，18歲，反復(fù)鞏膜黃染4年。體檢：鞏膜輕度黃染，肝肋下2cm，脾肋下7.2cm，檢驗(yàn)結(jié)果：血紅蛋白：75g/L，白細(xì)胞、血小板正常，Ret：9%；總膽紅素：34μmol/L，間接膽紅素28μmol/L，HBsAg：（＋），Coombs試驗(yàn)：陰性，紅細(xì)胞滲透脆性增加，最有可能的診斷是A.先天性非溶血性黃疸B.慢性肝病性貧血C.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥D.珠蛋白生成障礙性貧血E.自身免疫性溶血性貧血『正確答案』C『答案解析』由題干可知該患者肝脾腫大，由此可推斷該疾病為血管外溶血；Coombs試驗(yàn)陰性可排除自身免疫性溶血性貧血；紅細(xì)胞滲透脆性增加可判斷出該疾病為遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。患者，女，24歲，貧血貌，皮膚鞏膜黃染；化驗(yàn)檢查：網(wǎng)織紅細(xì)胞12%，直接Coombs陽(yáng)性，最有可能的診斷為