(高清版)GB 18280.2-2015 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 輻射 第2部分：建立滅菌劑量

醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第2部分：建立滅菌劑量2015-12-31發(fā)布中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布GB18280.2—2015/ISO11137-2:2006 1 Ⅱ 2規(guī)范性引用文件 3縮略語、術(shù)語和定義 4劑量設(shè)定、劑量證實和滅菌劑量審核中產(chǎn)品族的定義和保持 45建立和驗證滅菌劑量中產(chǎn)品的選擇和試驗 66劑量建立的方法 87方法1:利用生物負載信息設(shè)定劑量 88方法2:從增量劑量試驗中得到的陽性分數(shù)的信息確定外推因子的劑量設(shè)定方法 9VDmx方法——25kGy或15kGy作為滅菌劑量的證實 10滅菌劑量審核 11實例 參考文獻 IGB18280的本部分的全部技術(shù)內(nèi)容為強制性。GB18280《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射》分為以下部分：制要求；——GB/T18280.3本部分為GB18280本部分按照GB/T醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)控醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第2部分：建立滅菌劑量；醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第3部分：劑量測量指南。的第2部分。1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分部分代替GB18280—2000《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌確認和常規(guī)控制要求輻射滅菌》,與GB18280—2000相比，本部分由GB18280—2000的附錄B發(fā)展而來，主要技術(shù)內(nèi)容變化如下：——增加了產(chǎn)品族的定義；——細化了劑量建立的方法，更詳細地介紹了方法1和方法2的應(yīng)用； 本部分使用翻譯法等同采用ISO11137-2:2006《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第2部分：建立滅菌與本部分規(guī)范性引用的國際文件有一致性對應(yīng)關(guān)系的我國文件如下：——GB/T19973.1—2005醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌微生物學(xué)方法第1部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估 —GB/T19973.2—2005醫(yī)療器械的滅菌微生物學(xué)方法第2部分：確認滅菌過程的無菌試驗本部分由國家食品藥品監(jiān)督管理總局提出。本部分由全國消毒技術(shù)與設(shè)備標準化技術(shù)委員會(SAC/TC200)歸口。本部分起草單位：北京市射線應(yīng)用研究中心、深圳市金鵬源輻照技術(shù)有限公司、國家食品藥品監(jiān)督管理局廣州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心。本部分所代替標準的歷次版本發(fā)布情況為： ⅡGB18280的本部分描述了根據(jù)GB18280.1—2015的8.2給出的兩種途徑中的任意一種建立滅菌劑量的方法。這些方法是：a)獲得產(chǎn)品特有劑量的設(shè)定方法；b)對預(yù)先選定的25kGy或15kGy做劑量證實。Tallentire,DwyerandLey,1971[18];TallentireandKhan,1978[19])。之后，標準草案形成的劑量設(shè)定方法基礎(chǔ)經(jīng)過AAMI推薦的γ輻射滅菌實踐(AAMI1984,1991[4][6])細化后得到發(fā)展(Davisetal.,1981[8];Davis,StrawdermanandWhitby,1984[])。方法1和方法2及相關(guān)的劑量審核程序中使用的數(shù)據(jù)來源于自然狀態(tài)下存在于產(chǎn)品上的微生物群體。方法基于微生物群體失活的概率模型。由于生物負載由不同微生物種組成，概率模型設(shè)定了每一種微生物的單獨D值。在模型中，當(dāng)用給定的劑量輻射后，一件產(chǎn)品中有一個殘存微生物的概率是由輻照前產(chǎn)品中微生物初始的數(shù)量和D。值決定的。方法包括用低于滅菌劑量輻射產(chǎn)品后，對產(chǎn)品做無菌試驗。試驗的結(jié)果用于預(yù)測達到預(yù)定的無菌保證水平所需要的劑量。在實施設(shè)定劑量試驗中，方法1和方法2也可以用于證實25kGy能夠達到10-?的無菌保證水平。證實25kGy的方法，即：VDmx的方法是由KowalskiandTallentire(1999)[4]發(fā)展的。之后，對基本原理做了評估，包括應(yīng)用計算機演示，為這個方法奠定了很好的基礎(chǔ)(Kowalski,AoshuangandTallentire,2000[13]),現(xiàn)場試驗證明了VDmx方法用于各種方法生產(chǎn)和組裝出來的產(chǎn)品的滅菌都是有效的(Kowalskietal.,2002[16])。使用VDmx方法證實25kGy作為滅菌劑量的標準程序曾經(jīng)發(fā)表在AAMI的技術(shù)報告“醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌輻射證實25kGy作為滅菌劑量VDmx方法”(AAMITIR27:2001)[5],這個文件闡述了VDmx方法的主要原理。VDmax基于劑量設(shè)定方法1,因此具有較高的安全性。VDmx類似于劑量設(shè)定方法1,包括了用低于滅菌劑量的劑量輻射產(chǎn)品后，對產(chǎn)品作無菌檢查。試驗的結(jié)果用于證實25kGy能夠達到10-°無菌保證水平。為了表示VDm方法預(yù)證實的劑量，將以kGy為單位的劑量值寫在VD的右上角。證實25kGy,同樣，證實15kGy表示為VDmx1?。VDmx1?試驗程序的使用限于平均生物負載≤1.5的產(chǎn)品，其他與VDmx2相同。檢測的結(jié)果用于證實15kGy能夠使產(chǎn)品達到10-?的無菌保證水平。本部分也描述了依據(jù)GB18280.1—2015的第12章實施的劑量審核的方法。建立滅菌劑量之后，滅菌劑量審核是例行的常規(guī)程序，以保證滅菌劑量持續(xù)能夠達到需要的無菌保證水平。1醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第2部分：建立滅菌劑量1范圍GB18280的本部分規(guī)定了用于滿足無菌特殊要求的最小劑量的設(shè)定方法和證實25kGy或15kGy作為能達到10-6無菌保證水平(SAL)的滅菌劑量的方法。本部分還規(guī)定了劑量審核的方法，以便證明滅菌劑量持續(xù)有效。本部分定義了用于劑量建立和劑量審核的產(chǎn)品族。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB18280.1—2015醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌輻射第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)控制要求(ISO11137-1:2006,IDT)ISO11737-1醫(yī)療器械的滅菌微生物學(xué)方法第1部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估計(Sterilizationofmedicaldevices—Microbiologicalmethods—Part1:Determinationofapopulationofmicroorganismsonproducts)ISO11737-2醫(yī)療器械的滅菌微生物學(xué)方法第2部分：確認滅菌過程的無菌試驗(Sterilizationofmedicaldevices—Microbiologicalmethods—Part2:Testsofsterilityperformedinthevalidationofasterilizationprocess)3縮略語、術(shù)語和定義GB18280.1—2015界定的及以下縮略語、術(shù)語和定義適用于本文件。3.1縮略語A調(diào)整中值ffp向下到FFP的劑量。在方法2的驗證劑量試驗中，從100個產(chǎn)品單元的無菌試驗中獲得的陽性數(shù)。從給定的生產(chǎn)批中抽取產(chǎn)品單元，做增量劑量試驗，從試驗得到的劑量。對供試產(chǎn)品達到10-2SAL的最初估計劑量。2供試產(chǎn)品試驗達到10-2SAL最終估計劑量，這個劑量用于計算滅菌劑量。方法2的驗證劑量試驗中得到的劑量。DS經(jīng)過DD*輻射后，產(chǎn)品中存在的微生物的估計Di?值。D值DvalueD?值Diovalue在規(guī)定的條件下，殺滅90%的數(shù)量的微生物所需要的劑量或時間。ffp用增量劑量系列輻射從給定的產(chǎn)品批中抽出的產(chǎn)品單元，經(jīng)過輻射后20個產(chǎn)品單元中至少有一個無菌試驗為陰性的最低劑量。首次陽性分數(shù)劑量FirstFractionPositivedose使20個無菌試驗中19個為陽性的劑量，通過從3ffp的中值減去A計算得到。FNP對于給定的生物負載的最大驗證劑量，使用15kGy可以達到10-SAL。VDma25對于給定的生物負載的最大驗證劑量，使用25kGy可以達到10-“SAL。3.2術(shù)語和定義期望在特征和質(zhì)量上一致，并在某一確定的制造周期中生產(chǎn)出的規(guī)定量的產(chǎn)品。3一件產(chǎn)品和/或無菌屏障系統(tǒng)上和/或其中活微生物的總數(shù)。試驗結(jié)果的混濁被解釋為產(chǎn)品或產(chǎn)品份額有微生物生長，而微生物生長是由于外來微生物的污染所致或混濁是由于產(chǎn)品或產(chǎn)品份額和試驗用培養(yǎng)基互相影響的結(jié)果。以無菌試驗的陽性數(shù)作分子，以試驗數(shù)作分母的商。增量劑量incrementaldose一系列用于輻射數(shù)個產(chǎn)品或其份額的劑量，在劑量設(shè)定方法中，用于獲得或證實滅菌劑量。無菌陰性試驗negativetestofsterility在無菌試驗中，產(chǎn)品或產(chǎn)品份額經(jīng)培養(yǎng)后不能檢查到微生物的生長。無菌屏障系統(tǒng)和保護性包裝的結(jié)合。無菌陽性試驗positivetestofsterility在無菌試驗中，產(chǎn)品或產(chǎn)品份額經(jīng)培養(yǎng)后能檢查到微生物的生長。樣品份額sampleitemportion;SIP對被檢測的單元醫(yī)療保健產(chǎn)品所規(guī)定的份額。無菌屏障系統(tǒng)sterilebarriersystem為了產(chǎn)品在使用時處于無菌狀態(tài)而使用的防止微生物進入產(chǎn)品的最小包裝。無菌保證水平sterilityassurancelevel;SAL滅菌后單元產(chǎn)品上存在一個活微生物的概率。證實已建立的滅菌劑量的適合性的活動。驗證劑量verificationdose在建立滅菌劑量中，能夠達到預(yù)定SAL≥10-2的滅菌劑量。44劑量設(shè)定、劑量證實和滅菌劑量審核中產(chǎn)品族的定義和保持4.1總則建立滅菌劑量和實施滅菌劑量審核是過程定義(見GB18280.1—2015第8章)和過程有效性保持的一部分活動(見GB18280.1—2015第12章)。為了這些活動，將產(chǎn)品劃分產(chǎn)品族，劃分產(chǎn)品族主要根據(jù)產(chǎn)品中或產(chǎn)品內(nèi)存在的微生物數(shù)量和類型(生物負載)。微生物的類型反映其對輻射的抗力。劃分產(chǎn)品族時并不考慮產(chǎn)品的密度和產(chǎn)品在包裝系統(tǒng)中的裝載模式，因為這些因素并不影響生物負載。在建立滅菌劑量和滅菌劑量審核中使用產(chǎn)品族，在生產(chǎn)過程中，發(fā)現(xiàn)影響輻射有效性的意外變化的能力降低的風(fēng)險很重要。而且，使用單一產(chǎn)品代表產(chǎn)品族可能不能發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品族中其他成員發(fā)生的變化。應(yīng)評估對產(chǎn)品族中其他成員的變化的發(fā)現(xiàn)能力降低的風(fēng)險，并在滅菌過程開始前，應(yīng)制定并實施維持產(chǎn)品族的計劃。注：見YY/T0316與風(fēng)險管理相關(guān)的指南。4.2產(chǎn)品族的劃分4.2.1劃分產(chǎn)品族的標準應(yīng)文件化。根據(jù)這些標準評審產(chǎn)品并考慮潛在的產(chǎn)品族成員間的類似性。應(yīng)考慮產(chǎn)品的變化中可能影響生物負載的變化，包括但不限于以下因素：a)原料的性質(zhì)和來源，如果原料來源不止一個地方，還包括其造成的影響；b)產(chǎn)品的構(gòu)成；c)產(chǎn)品的設(shè)計和尺寸；d)生產(chǎn)過程；e)生產(chǎn)設(shè)備；f)生產(chǎn)環(huán)境；g)生產(chǎn)地址。記錄評審和考慮的結(jié)果(見GB18280.1—2015中4.1.2)。4.2.2只有在已證明產(chǎn)品相關(guān)的變化(見4.2.1)類似和受控時，該產(chǎn)品才能歸于一個產(chǎn)品族中。4.2.3只有在產(chǎn)品生物負載的數(shù)量和種類相似時，才能歸于一個產(chǎn)品族。4.2.4產(chǎn)品族中包含在一個地方以上生產(chǎn)的產(chǎn)品時，應(yīng)證明這種劃分是合理的并記錄(見GB18280.1—2015中的4.1.2),應(yīng)該考慮其對生物負載的作用：a)不同地點之間的地理和(或)氣候的差異；b)在生產(chǎn)過程或環(huán)境控制中的任何差異；c)原料和輔助材料的來源(例如：水)。4.3在驗證劑量試驗和滅菌劑量審核中對產(chǎn)品族中代表產(chǎn)品的設(shè)計4.3.1產(chǎn)品族的代表產(chǎn)品產(chǎn)品上生物負載的數(shù)量和微生物類型是選擇產(chǎn)品族代表產(chǎn)品的依據(jù)。產(chǎn)品族可以由以下產(chǎn)品代表：a)主產(chǎn)品(見4.3.2);或b)等同產(chǎn)品(見4.3.3);或c)模擬產(chǎn)品(見4.3.4)。依照確定三種可能的代表產(chǎn)品中的任何一種作為代表產(chǎn)品的評審應(yīng)是正式的、文件化的。在評審中，應(yīng)考慮以下問題：5a)生物負載中微生物的數(shù)量；b)微生物存在的環(huán)境；c)產(chǎn)品的尺寸；d)產(chǎn)品的組件數(shù)量；e)產(chǎn)品的復(fù)雜程度；f)生產(chǎn)過程中的自動化程度；g)生產(chǎn)環(huán)境。如果評估表明產(chǎn)品族的某個產(chǎn)品的生物挑戰(zhàn)大于產(chǎn)品族的其他產(chǎn)品，這個產(chǎn)品可以被認定為主產(chǎn)品。有些情況，有數(shù)個產(chǎn)品可以被認定為主產(chǎn)品，在這種情況下，依據(jù)4.3.3,這些產(chǎn)品中的任何一個都可以被定作主產(chǎn)品，代表產(chǎn)品族。如果評估(見)表明一個產(chǎn)品族的產(chǎn)品需要同樣的滅菌劑量，產(chǎn)品族的產(chǎn)品可以被認為是等同產(chǎn)品。選擇代表產(chǎn)品族等同產(chǎn)品的代表即可以是：a)隨機的；也可以是b)根據(jù)計劃表選擇產(chǎn)品族中的不同產(chǎn)品。選擇等同產(chǎn)品代表產(chǎn)品族時應(yīng)考慮產(chǎn)品的生產(chǎn)量和可行性。在滅菌過程中，當(dāng)模擬產(chǎn)品較產(chǎn)品族的產(chǎn)品有等同或較大的生物挑戰(zhàn)，這個模擬產(chǎn)品可以作為這個產(chǎn)品族的代表。模擬產(chǎn)品的包裝方式和包裝使用的材料應(yīng)與實際產(chǎn)品相同。注：模擬產(chǎn)品并不用于臨床，僅用于建立和保持滅菌劑量。模擬產(chǎn)品可以是：a)與實際產(chǎn)品有相似的材料和尺寸，經(jīng)過相似加工過程，例如：經(jīng)過完整生產(chǎn)過程的一件植入物b)產(chǎn)品族中產(chǎn)品組件的組合，在使用中不是典型的，例如：含有復(fù)合濾器、夾子、活塞的一套軟管，這些組件在其他的產(chǎn)品族的產(chǎn)品中也有。4.4產(chǎn)品族的保持評審應(yīng)在規(guī)定的頻度內(nèi)進行，以確定產(chǎn)品族和代表產(chǎn)品族的產(chǎn)品持續(xù)有效。產(chǎn)品和/或過程的評審可能影響到產(chǎn)品族的產(chǎn)品，評審的職責(zé)應(yīng)分派給有能力的人。這樣的評審至少每年做一次。評審的結(jié)果應(yīng)根據(jù)GB18280.1—2015中4.1.2進行記錄。4.4.2產(chǎn)品和/或生產(chǎn)過程的修改對產(chǎn)品的修改，例如：原料(性質(zhì)和來源)、產(chǎn)品設(shè)計或組分(包括尺寸)和/或生產(chǎn)過程的修改(例如：設(shè)備、環(huán)境和場所),都應(yīng)進行正式的、文件化的變更控制系統(tǒng)評審。這種修改可能改變產(chǎn)品族劃分的依據(jù)或選擇產(chǎn)品族代表產(chǎn)品的依據(jù)。重大的變化需要重新劃分新的產(chǎn)品族和規(guī)定不同的代表產(chǎn)品。應(yīng)保存產(chǎn)品族的記錄(見GB18280.1—2015中4.1.2)。64.5建立滅菌劑量和滅菌劑量審核失敗對產(chǎn)品族的影響一個產(chǎn)品族在建立滅菌劑量或滅菌劑量審核失敗時，應(yīng)考慮所有的產(chǎn)品族產(chǎn)品受到的影響，后續(xù)措施應(yīng)針對產(chǎn)品族中所有的產(chǎn)品實施。5建立和驗證滅菌劑量中產(chǎn)品的選擇和試驗5.1產(chǎn)品性質(zhì)5.1.1用于滅菌的產(chǎn)品應(yīng)由以下組成：a)在其包裝系統(tǒng)中的一個獨立的醫(yī)療保健產(chǎn)品；b)包裝系統(tǒng)中的一套組件，通過安裝組成醫(yī)療保健產(chǎn)品，但需要與必要的附件聯(lián)合使用；c)在一個包裝系統(tǒng)中的數(shù)件同樣的醫(yī)療保健產(chǎn)品；d)一個器械包包含多種相關(guān)聯(lián)的醫(yī)療保健產(chǎn)品。根據(jù)表1抽取完成劑量設(shè)定和證實所需要的產(chǎn)品單元。表1建立和驗證滅菌劑量所需一件產(chǎn)品單元的特性產(chǎn)品類型生物負載評價、驗證和/或增量劑量試驗所需一件產(chǎn)品原理在其包裝系統(tǒng)中的一個獨立的醫(yī)療保健產(chǎn)品單個醫(yī)療保健產(chǎn)品獨立用于臨床實踐的每一件醫(yī)療保健產(chǎn)品一個包裝系統(tǒng)中的一套醫(yī)療保健產(chǎn)品組件所有組件結(jié)合在一起的產(chǎn)品所有組件作為一個產(chǎn)品用于臨床實踐在其包裝系統(tǒng)中的數(shù)個醫(yī)療保健產(chǎn)品包裝系統(tǒng)中的單一醫(yī)療保健產(chǎn)品每一件醫(yī)療保健產(chǎn)品都獨立用于臨床實踐，在其包裝系統(tǒng)中的單個醫(yī)療保健產(chǎn)品的SAL都滿足選定的SAL,加上包裝系統(tǒng)，SAL可能更高一些包含多種相關(guān)聯(lián)的醫(yī)療保健產(chǎn)品的一個器械包“組成器械包的一種類型的醫(yī)療保健產(chǎn)品獨立用于臨床實踐的一件醫(yī)療保健產(chǎn)品注1:5.1.1b)所述產(chǎn)品特征見5.2中SIP的使用指南。注2:5.1.1d)所述產(chǎn)品特征見第4章中產(chǎn)品族的使用指南。在滅菌劑量設(shè)定中，選擇醫(yī)療保健產(chǎn)品的最高滅菌劑量為滅菌劑量。5.1.2如果產(chǎn)品需要部分滅菌，滅菌劑量僅根據(jù)這部分建立。示例：如果產(chǎn)品有標簽聲明僅流體通道無菌，滅菌劑量僅根據(jù)流體通道生物負載檢測試驗和無菌試驗結(jié)果確定。5.2樣品份額(SIP)5.2.1對于平均生物負載大于或等于1.0的產(chǎn)品，可行時，根據(jù)表1,需檢測一件完整的產(chǎn)品(SIP等于1.0),如果使用完整的產(chǎn)品不可行時，可選用部分產(chǎn)品作為替代，選擇的比例盡可能的大，以便進行實驗室操作，尺寸要在實驗室能夠處理的范圍內(nèi)。5.2.2對于平均生物負載等于或小于0.9的產(chǎn)品，根據(jù)表1,應(yīng)檢測一件完整的產(chǎn)品(SIP等于1.0)。5.2.3如果生物負載均勻分布在產(chǎn)品上和/或其中，SIP可以從產(chǎn)品的任何一部分選擇。如果生物負載不均勻分布，隨機選擇組成SIP的部分，這部分成比例地代表了制成產(chǎn)品的每一種材料。如果生物負載分布是已知的，SIP可以選擇對滅菌過程生物負載挑戰(zhàn)最苛刻的部分。SIP可以根據(jù)長度、質(zhì)量、體積和表面積計算(見表2中的例子)。7表2SIP計算的例子產(chǎn)品SIP計算的基礎(chǔ)產(chǎn)品長度管子(直徑一致的)質(zhì)量粉末工作服植入物(可吸收)體積流體表面積植入物(不可吸收)管子(直徑不一致的)5.2.4SIP的制備和包裝應(yīng)在生物負載變化最小的條件下實施環(huán)境控制，只要可能，包裝材料應(yīng)等同最終產(chǎn)品。5.2.5選用SIP的充分性應(yīng)得到證明。SIP的生物負載應(yīng)用以下試驗證明：對20件未輻照的SIP樣品做無菌試驗，結(jié)果最少應(yīng)有17件陽性(如：85%陽性)。如果達不到這個標準，須擴大SIP以滿足這個標準。如果樣品選用一個完整的產(chǎn)品(SIP等于1.0),不需要符合20件樣品的無菌試驗中必須有17件陽性的標準。5.3取樣方式5.3.1用于建立和審核滅菌劑量的產(chǎn)品須代表常規(guī)加工過程和條件。通常用于確定生物負載或無菌試驗的每一件產(chǎn)品都應(yīng)有獨立的包裝系統(tǒng)。5.3.2選擇樣品和生物負載檢測所耗費的時間應(yīng)反映從生產(chǎn)的最后步驟到產(chǎn)品滅菌之間的時間間隔。樣品可以取自生產(chǎn)過程中淘汰的產(chǎn)品，這些產(chǎn)品與合格產(chǎn)品經(jīng)歷了相同的加工過程和條件。5.4微生物學(xué)實驗5.4.1生物負載確定和無菌試驗分別依照ISO11737-1和ISO11737-2。當(dāng)使用單一培養(yǎng)基做無菌試驗時，推薦使用以下條件：胰蛋白大豆肉湯，培養(yǎng)溫度(30士2)℃,培養(yǎng)周期14天。如有理由懷疑這個培養(yǎng)基和溫度并不能支持現(xiàn)有微生物的生長時，可以使用其他適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。見Herringetal,1974[12];Favero,1971[10];NHB5340.1A,1968[]等。只要可行，產(chǎn)品應(yīng)以其原來的形式和包裝系統(tǒng)接受輻照。然而，為了減少無菌試驗中的假陽性，樣品在輻照前可以拆分和再包裝。任何使生物負載有較大變化或影響輻射的處理都是不能被接受的(例如：改變微生物存在的化學(xué)環(huán)境，典型的是：氧分壓)。樣品的再包裝的材料要能經(jīng)受得起輻射劑量和后續(xù)的處理，以減少可能的污染。5.4.2用于生物負載確定的樣品要經(jīng)過包裝過程。注：通常，生物負載確定是在產(chǎn)品脫離包裝系統(tǒng)后實施的，因此，忽略了來自包裝系統(tǒng)的污染。5.5輻照5.5.1輻照用于建立和審核滅菌劑量的樣品要在一個根據(jù)GB18280.1—2015經(jīng)過安裝鑒定、運行鑒定和性能鑒定的輻照裝置上進行。對于驗證劑量或增量劑量的試驗，制作適宜的劑量分布以確定產(chǎn)品獲得的最大劑量和最小劑量。5.5.2劑量測量和所使用輻射源應(yīng)符合GB18280.1—2015的要求。注：見GB/T18280.3中輻射滅菌劑量方面的指南。86劑量建立的方法6.1如按照GB18280.1—2015中8.2.2a)建立滅菌劑量(產(chǎn)品特有的滅菌劑量),使用以下方法中的一種：a)用于多批和單一生產(chǎn)批的方法1(見第7章);b)方法2A(見8.2);c)方法2B(見8.3);d)與以上a)、b)或c)有相同保證水平的、且能滿足指定的滅菌要求的方法。6.2如果根據(jù)GB18280.1—2015中8.2.2b)建立滅菌劑量，可以使用以下方法中的一個證實：a)產(chǎn)品的平均生物負載在0.1～1000之間(包含):1)VDmax25方法(見9.2或9.3);2)方法1(見第7章),初始滅菌劑量≤25kGy且SAL為10-?;3)方法2(見第8章),初始滅菌劑量≤25kGy且SAL為10-?;或4)與以上1)、2)或3)有相同保證水平的、能夠達到最大的10-“的無菌保證水平的方法。b)產(chǎn)品的平均生物負載在0.1～1.5(包含)之間使用：1)VDmax15方法(見9.4或9.5);2)方法1,初始滅菌劑量≤15kGy且SAL達到10-?;3)方法2,初始滅菌劑量≤15kGy且SAL達到10-?;或4)采用等同1)、2)或3)得到的最大的10-?的無菌保證水平的方法。c)平均生物負載<0.1的產(chǎn)品用：1)VDmx25方法(見9.2或9.3);2)VDmx1?方法(見9.4或9.5);3)方法2(見第8章),初始滅菌劑量≤15kGy且達到SAL10-?;或4)與以上1)、2)或3)有相同保證水平的、能夠達到最大的10-6的無菌保證水平的方法(見7方法1:利用生物負載信息設(shè)定劑量7.1原理這種建立滅菌劑量的方法基于通過試驗驗證生物負載的輻射抗力低于或等于微生物種群具有的標準抗力分布(SDR,見表3)的抗力。表3方法1中使用的標準抗力分布概率%制定SDR是一個合理的選擇。SDR以D?的形式規(guī)定微生物的抗力及其在所有微生物中出現(xiàn)的概率值，通過計算得出，隨著具有SDR的生物負載水平的增加，分別要達到SAL10-2、10-3、10-?、10-5和10-6所需要的劑量。根據(jù)給定的平均生物負載計算出的劑量值見表5和表6。9在實踐中，要對平均生物負載做確定。這個平均生物負載要達到SAL10-2所需要的劑量可以從表5或表6中讀到。這個劑量被設(shè)定為驗證劑量，是能夠?qū)⒕哂蠸DR的微生物的數(shù)量減少到SAL10-2的劑量。將100件產(chǎn)品用選定的驗證劑量輻照，逐個對每一件做無菌試驗，如試驗結(jié)果是100件產(chǎn)品中的陽性數(shù)不多于兩個，再次使用表5或表6,在此平均生物負載下找到達到所需的無菌保證水平的滅菌允許兩個陽性發(fā)生的原理是基于以下假設(shè)：平均一個陽性左右的數(shù)量發(fā)生的概率服從泊松分布。按照這個分布，0、1、2個陽性發(fā)生的概率為0.92。見表4。表4SAL為10-2,100件樣品陽性發(fā)生的可能概率陽性數(shù)量012345678概率%0.050.0060.0007注：GB18280—2000中的表1給出方法1的驗證劑量和滅菌劑量，隨著平均生物負載的增加劑量有規(guī)律地增加，劑量按照0.1kGy遞增，生物負載值的增加沒有規(guī)律，既有整數(shù)也有小數(shù)(例如：140、112.6、121.9、131.9等)。為了改進這個表，以便更加好用和解釋，本部分的表5中的平均生物負載值表示為有規(guī)律增加的整數(shù)。生物負載的增量值選為驗證劑量增加0.1kGy導(dǎo)致的生物負載增加值。驗證劑量保留一位小數(shù)。表6中生物負載的增加也是有規(guī)律的。7.2平均生物負載不小于1.0,多生產(chǎn)批產(chǎn)品使用方法1的程序方法1有以下6步。注：實例見11.1。7.2.2步驟1:選擇SAL和取樣記錄預(yù)期使用的產(chǎn)品的SAL。根據(jù)5.1、5.2和5.3,從3個獨立的生產(chǎn)批中的每一批產(chǎn)品中至少選擇10件產(chǎn)品單元。7.2.3步驟2:確定平均生物負載決定在生物負載確定中是否使用一個校正因子。注：根據(jù)ISO11737-1,從對生物負載技術(shù)的驗證中獲得一個校正因子，應(yīng)用這個校正因子確定生物負載的方法。使用方法1確定劑量可以不使用這個校正因子，不使用這個校正因子，生物負載可能被低估。應(yīng)用校正因子失敗可能導(dǎo)致驗證劑量失敗的風(fēng)險增加。確定選定的每一件產(chǎn)品的生物負載并計算：a)三批中的每一批產(chǎn)品的平均生物負載(批平均);b)所有選定產(chǎn)品的平均生物負載(總平均生物負載)。注：生物負載通常根據(jù)單個產(chǎn)品確定，但當(dāng)生物負載低時(例如<1.0),可以聯(lián)合10件產(chǎn)品確定批的平均生物負載。這個方法并不適用于SIP,與其聯(lián)合使用樣品，不如選擇更大的SIP。用總平均生物負載與三批平均生物負載比較，確定是否有一批產(chǎn)品生物負載的平均數(shù)大于總平均數(shù)的兩倍或更多。7.2.4步驟3:獲得驗證劑量根據(jù)以下數(shù)據(jù)中的一個，從表5中獲得SAL10-2的劑量：a)如果一批或多批的平均值≥2×總平均生物負載，取最高批平均生物負載；b)如果批平均值<2×總平均生物負載，取總平均生物負載。確定驗證劑量。如果打算在無菌試驗中使用SIP,在確定驗證劑量時應(yīng)使用SIP平均生物負載。如果表5中沒有給出要查的平均生物負載，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值。7.2.5步驟4:完成驗證劑量實驗從一批產(chǎn)品中選擇100件產(chǎn)品單元(步驟4),這批是生物負載確定(步驟2)產(chǎn)品中的一批或是在常規(guī)生產(chǎn)條件下生產(chǎn)出的產(chǎn)品批。選擇生產(chǎn)批時需要考慮產(chǎn)品支持微生物生長的能力。用驗證劑量輻射產(chǎn)品，檢測實施的驗證劑量，如果產(chǎn)品接受的最大劑量超過驗證劑量的10%以上，使用方法1建立滅菌劑量，驗證劑量試驗應(yīng)重做。如果產(chǎn)品接受的最大和最小劑量的算術(shù)平均值小于驗證劑量的90%,驗證劑量試驗可重復(fù)。如果最大和最小劑量的算術(shù)平均值低于驗證劑量的90%,且無菌試驗的結(jié)果是可接受的，驗證劑量試驗不必重復(fù)。根據(jù)ISO11737-2(見5.4.1),逐個對每一件輻照產(chǎn)品做無菌試驗并記錄陽性數(shù)。7.2.6步驟5:結(jié)果的解釋100件產(chǎn)品單元的無菌試驗得到的陽性數(shù)不多于2件，驗證被接受。如果無菌試驗中陽性數(shù)多于2件，驗證不被接受。如果生物負載試驗的結(jié)果被歸因于實施了不正確的生物負載檢測，在計算生物負載時使用了不適用的校正因子、實施了不正確地?zé)o菌試驗或不正確地傳遞了驗證劑量，在實施了糾正措施后，驗證劑量試驗可以重復(fù)。如果造成這個結(jié)果的原因并不能被糾正措施消除，這個劑量設(shè)定方法無效，換個建立滅菌劑量的方法(見第6章)。7.2.7步驟6:建立滅菌劑量如果使用的是完整的產(chǎn)品且驗證試驗被接受，從表5中用最近的大于或等于計算的平均生物負載和預(yù)先規(guī)定的SAL查到產(chǎn)品的滅菌劑量。如果SIP小于1.0且驗證試驗被接受，用SIP生物負載除以SIP值，得到整個單元產(chǎn)品的生物負載，以便依據(jù)預(yù)先規(guī)定的SAL獲得產(chǎn)品的滅菌劑量。表5已知標準抗力分布的微生物負載≥1.0達到給定無菌保證水平(SAL)所需輻射劑量(kGy)平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)20.624.3270022.826.520.724.4280022.826.520.824.5290022.926.620.924.622.926.621.024.723.026.821.124.823.126.921.224.923.226.921.324.923.327.021.325.0400023.427.121.425.1420023.527.221.525.2440023.527.321.525.2460020.023.627.321.625.3480020.023.727.421.725.320.123.727.521.725.420.223.827.621.825.520.323.927.721.825.520.424.027.821.925.6620020.424.127.821.925.6650020.524.227.922.025.7680020.624.228.022.025.720.724.320.724.420.824.4800020.824.528.322.225.9850020.924.628.422.225.9900021.024.728.5200022.326.0950021.124.828.5210022.428.6220022.426.121.324.928.7230022.526.221.325.028.8240022.626.321.425.128.9250022.626.421.525.228.9260022.726.421.625.329.1平均生物負載無菌保證水平(SAL)平均生物負載無菌保證水平(SAL)21.725.428.621.825.529.321.325.028.821.925.629.421.525.228.922.025.729.521.625.329.621.725.429.721.825.529.32000022.326.029.821.925.629.42100022.426.129.922.025.729.52200022.426.129.922.125.829.62300022.529.72400022.626.320000022.326.029.82500022.626.422000022.426.129.92600022.726.424000022.626.32700022.826.526000022.726.42800022.826.528000022.826.52900022.926.630000022.926.63000022.926.632000023.026.83200023.026.834000023.126.93400023.126.938000023.327.03600023.226.940000023.427.13800023.327.042000023.527.24000023.427.144000023.527.34200023.527.246000020.023.627.34400023.527.348000020.023.727.44600020.023.627.350000020.123.727.54800020.023.727.454000020.223.927.65000020.123.727.558000020.324.027.75400020.223.927.662000020.424.127.85800020.324.027.766000020.524.227.96200020.424.127.870000020.624.328.06600020.524.227.975000020.724.428.27000020.624.328.080000020.824.528.37500020.724.428.285000020.924.628.48000020.824.528.390000021.024.728.58500020.924.628.495000021.124.828.59000021.024.728.521.224.928.69500021.124.828.5注1:在表5中出現(xiàn)的高生物負載水平并不暗示其就是正常。注2:表中的值用在劑量設(shè)定方法1的步驟3、4、6中。7.3平均生物負載≥1.0,單一生產(chǎn)批產(chǎn)品使用方法1的程序這種方法是方法1在單一生產(chǎn)批產(chǎn)品上的應(yīng)用。這種方法通過試驗驗證生物負載的輻射抗力小于或等于微生物種群的SDR,在此基礎(chǔ)上建立滅菌劑量。方法1的這種應(yīng)用有如下六步。注：實例見11.1。7.3.3步驟1:選擇SAL并獲得產(chǎn)品的樣品記錄規(guī)定用于產(chǎn)品的SAL。根據(jù)5.1、5.2和5.3,從單一批中至少選擇10件產(chǎn)品單元。7.3.4步驟2:確定平均生物負載決定在確定生物負載中是否使用校正因子。注：GB18280.1—2015中描述的確定生物負載的方法是應(yīng)用了從生物負載活菌計數(shù)技術(shù)的驗證中產(chǎn)生的校正因子，使用方法1建立劑量可以不使用這個校正因子，不使用這校正因子可能導(dǎo)致生物負載低估。使用生物負載校正因子失敗將增加驗證試驗失敗的風(fēng)險。確定所選擇的每一件產(chǎn)品的生物負載，計算所選擇所有產(chǎn)品的平均生物負載(總平均生物負載)。注：生物負載一般是單個產(chǎn)品確定的，但當(dāng)生物負載較低(例如<10)時，可以聯(lián)合10件樣品測定批的平均生物負載。7.3.5步驟3:獲得驗證劑量從表5中，用平均生物負載查到10-2的SAL的劑量。制定這個劑量為驗證劑量。如果在無菌試驗中使用了SIP,用SIP平均生物負載確定驗證劑量。如果表5中沒有給出要查的平均生物負載，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值。7.3.6步驟4:完成驗證劑量試驗從單一生產(chǎn)批中選擇100件產(chǎn)品單元。用驗證劑量輻射產(chǎn)品，測定劑量。如果產(chǎn)品獲得的最高劑量超過了驗證劑量的10%,且使用方法1建立滅菌劑量，驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果產(chǎn)品接受的最大和最小劑量的算術(shù)平均值小于驗證劑量的90%,驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果劑量中值低于驗證劑量的90%且無菌試驗的結(jié)果是可接受的(見),驗證試驗不必重復(fù)。根據(jù)ISO11737-2(見5.4.1)單獨對每一件產(chǎn)品做無菌試驗，記錄陽性試驗數(shù)。7.3.7步驟5:結(jié)果的解釋如果100件產(chǎn)品單元的無菌試驗中陽性數(shù)不多于2件，接受驗證。如果無菌試驗中陽性數(shù)多于2件，驗證不被接受。如果生物負載試驗的結(jié)果被歸因于實施了不正確的生物負載確定，在計算生物負載時使用了不適用的校正因子、實施了不正確的無菌試驗或不正確地傳遞了驗證劑量，在實施了糾正措施后，驗證劑量試驗可以重復(fù)。如果造成這個結(jié)果的原因并不能被糾正措施消除，這個劑量設(shè)定方法無效，換個建立滅菌劑量的方法(見第6章)。7.3.8步驟6:建立滅菌劑量如果使用的是完整的產(chǎn)品且驗證被接受，從表5中所列出的平均生物負載中尋找與計算出來的平均生物負載最接近的大于或等于的值，用這個值和預(yù)期的SAL查到產(chǎn)品的滅菌劑量。如果SIP小于1.0且驗證被接受，用SIP生物負載除以SIP以得到完整單元產(chǎn)品的生物負載。從表5中所列出的平均生物負載中尋找與計算出來的平均生物負載最接近的大于或等于的值，用這個值和預(yù)期的SAL查到產(chǎn)品的滅菌劑量。7.4平均生物負載在0.1～0.9之內(nèi)的多個或單一生產(chǎn)批的產(chǎn)品使用方法1的程序產(chǎn)品的生物負載在0.1～0.9(包括)之內(nèi)的產(chǎn)品，使用方法1建立滅菌劑量的程序：多生產(chǎn)批見7.2,單一生產(chǎn)批見7.3,除非：a)根據(jù)表1在試驗中使用完整的產(chǎn)品；b)在確定生物負載中使用校正因子；c)從表6獲得SAL10-2的劑量(驗證劑量)和所選擇的滅菌劑量。注1:實例見11.1。注2:表6中的值用在劑量設(shè)定方法1中的步驟3、4和6。表6達到所需的SAL具有標準生物負載的平均生物負載為0.1～0.9所需要的輻射劑量(kGy)平均生物負載無菌保證水平平均生物負載無菌保證水平注：如平均生物負載在0.9～1.0之間，輸入表5中平均生物負載為1.0的數(shù)據(jù)。8方法2:從增量劑量試驗中得到的陽性分數(shù)的信息確定外推因子的劑量設(shè)定方法8.1原理方法2基于存在于產(chǎn)品中的微生物的輻射抗力信息。這個方法是用經(jīng)過一系列增量劑量輻射的產(chǎn)品樣本的無菌試驗結(jié)果估計劑量，用這個劑量輻射的100件產(chǎn)品中預(yù)計有1件可能不是無菌(即：無菌保證水平為10-2)。經(jīng)過這個劑量輻射后殘存的微生物比初始污染有更加均勻的D值。為了確定滅菌劑量，從劑量增量試驗估計出一個D??值，用這個估計值外推出低于10-2SAL的劑量值。計算的滅菌劑量的有效性通常取決于對SAL10-2外推的有效性。在對采用計算機模擬產(chǎn)品上微生物滅活的試驗草案的擴展研究中，通過試驗建立的微生物群體的抗力分布證實了外推的有效性。上述原理的細致說明以及計算機模擬的結(jié)果都在Davis,Strawderman和Whitby,1984[]中。用于生物負載一貫很低的產(chǎn)品。使用方法2B的條件在中有規(guī)定。在方法2中建立滅菌劑量不依靠生物負載確定結(jié)果。生物負載確定作為常規(guī)生產(chǎn)監(jiān)測的必要手段(見GB18280.1—2015的7.3和12.1)。與方法2A和2B不同，計算A、DSAL和滅菌劑量更注重于確保使用的公式適當(dāng)。劑量計算數(shù)據(jù)可以保留小數(shù)點后一位，滅菌劑量可以四舍五入到一位小數(shù)(使用標準修約程序)。注1:在之后的程序和舉例中，當(dāng)關(guān)系到單一產(chǎn)品批的結(jié)果時，標記是一個較低的情況，當(dāng)關(guān)系到三批產(chǎn)品的結(jié)果注2:方法2B需要使用完整的產(chǎn)品(SIP=1.0),而方法2A既可以用于完整的產(chǎn)品也可以用于有樣品份額使用2A方法有以下五個步驟。注：實例見11.2.2和11.2.3。8.2.2步驟1:選擇SAL和取得樣品記錄預(yù)使用產(chǎn)品的SAL。根據(jù)5.1、5.2和5.3,從3個獨立的生產(chǎn)批中每一批至少選擇280件產(chǎn)品單元。當(dāng)SIP<1時，需要額外的產(chǎn)品驗證SIP的充分性，見5.5。8.2.3步驟2:實施增量劑量試驗.1對3批產(chǎn)品的每一批，用一個劑量系列中的每一個劑量輻照20個產(chǎn)品單元，一個劑量系列至少有9個劑量，從2kGy開始，以2kGy的標稱劑量增加。確定每一個增量劑量。增量劑量中的最高劑量用于確定首次陽性分數(shù)劑量(ffp)和d*。這些劑量可以大于標稱增量劑量+1.0kGy或+10%,選較大的值。如果增量劑量中的任何一個劑量的最高劑量和最低劑量的算術(shù)平均值小于最低值，用這個劑量重新輻照另外20件產(chǎn)品單元。.2對于輻射過的產(chǎn)品單元，依照ISO11737-2(見5.4.1)對每一個產(chǎn)品單元做無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。.3從該試驗結(jié)果中獲得下列數(shù)據(jù)：a)A和首次陽性分數(shù)劑量(FFP)(見);b)D*(見);c)CD*批(見)。從3個批次每批增量劑量系列確定20個樣品中至少1個陰性的最低劑量。指定這個劑量為某批產(chǎn)品的ffp并找出3個ffp的中值。如果2批或者3批產(chǎn)品有同樣的ffp,選擇陽性數(shù)較高或最高的批的劑量為中值ffp。.2用中值ffp的無菌試驗陽性數(shù)，查表7,記錄A值。表7在中值ffp時不同無菌試驗陽性數(shù)對應(yīng)的A值(方法2A)中值ffp的無菌試驗陽性數(shù)AkGy中值ffp的無菌試驗陽性數(shù)AkGy0.0090.790.1380.870.2270.950.3160.3850.4540.5230.5820.6512.000.7202.00……(1)式中的n是無菌試驗陰性數(shù)(SeeDavisetal.,1981)。.3用式(2)計算FFP:.1對于3批產(chǎn)品中的每一批，用以下任意方法確定d*:a)找出所有無菌試驗均陰性的兩個連續(xù)劑量中較低的劑量，在隨后的增量劑量試驗系列中陽性不得多于1;b)找出20個樣品出現(xiàn)一個陽性的最低劑量，緊隨前后的是所有樣品均陰性的增量劑量。.2如果三批中的任何一批都不能滿足.1a)或b)的標準，劑量遞增試驗不成功。在這種情況下，在對試驗方法做了檢查并實施了糾正的前提下，可以重復(fù)劑量增量試驗。a)若最高批d*超過中間批d*<5b)若最高批d"超過中間批d*≥5kGy,則中間批d*就成為D*;或kGy,則最高批d*就成為D*。找出d*=D*的批次并將其標定為CD*批。如果一個以上的批d*等于D*,則隨機選定這些批中的任何一批為CD*批。保留在方法2A的步驟3中使用的CD*批樣品。從3批樣品中留下的樣品的保存條件應(yīng)能防止微生物的生長。第4批產(chǎn)品可以作為CD*批。8.2.4步驟3:完成驗證劑量試驗批的100件產(chǎn)品單元。測定實施劑量并將測定的最大劑量標定為DD*。DD*可在D*的基礎(chǔ)上有+1.0kGy或+10%的變化，取其中較大值。如果產(chǎn)品得到的最大劑量和最GB18280.2—2015/ISO11137-2:2低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%,則該驗證劑量試驗可用CD*批的另外100個產(chǎn)品單元重做。如果產(chǎn)品得到的最大劑量和最低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%,且無菌試驗的結(jié)果被接受，不必重做驗證劑量試驗。根據(jù)ISO11737-2(見5.4.1)對產(chǎn)品單元獨立實施無菌試驗并記錄陽性試驗數(shù)。定義陽性數(shù)8.2.5步驟4:結(jié)果的考慮從本試驗得到首次無陽性的劑量(FNP):a)如果CD*≤2,FNP=DD*;d)如果CD*>15,應(yīng)分析情況，采取糾正措施，重新確定D*。8.2.6步驟5:建立滅菌劑量依據(jù)FFP和FNP的不同，使用式(3)或式(4),由FFP和FNP值測定DS。當(dāng)(FNP-FFP)<10kGy,使用式(3):DS=2+0.2(FNP-FFP)…(3)注：在使用式(3)時，如果(FNP-FFP)<0,設(shè)定(FNP-FFP)=0當(dāng)(FNP-FFP)≥10kGy,用式(4):用式(5)建立D**:D*=DD*+(lgCD*)(DS)………(5)注：如果CD*=0,設(shè)定lgCD*=0。用式(6)計算滅菌劑量：滅菌劑量=D*+(-lgSAL-lgSIP-2)(DS)…………(6)式中：D*——對樣品提供10-2SAL的最終估計劑量；SAL——產(chǎn)品預(yù)先選定的無菌保證水平；SIP——用于測定D*和DS使用的樣品單元；DS——殺滅90%經(jīng)過DD*輻照后存活下來的微生物的估計劑量。劑量計算數(shù)據(jù)應(yīng)報告到小數(shù)點后一位。注：當(dāng)產(chǎn)品份額使用在設(shè)定劑量時，式(6)中的lgSIP提供了一個校正因子。8.3.1總則在使用方法2B時，應(yīng)滿足以下3點要求：a)使用整個產(chǎn)品為產(chǎn)品單元(SIP=1.0);b)用任何增量劑量輻照后，觀察到的無菌試驗的陽性數(shù)不得超過14個；c)FNP不超過5.5kGy。在使用方法2B時，應(yīng)依照以下5步。注：實例見11.2.4。8.3.2步驟1:選擇SAL并獲得產(chǎn)品樣本記錄預(yù)使用產(chǎn)品的SAL。依據(jù)5.1、5.2和5.3,從3個獨立的生產(chǎn)批的每一批中至少選擇260件產(chǎn)品單元。8.3.3步驟2:完成增量劑量實驗.1對3批產(chǎn)品的每一批，用一個劑量系列中的每一個劑量輻照20個產(chǎn)品單元，一個劑量系列至少有8個劑量，從1kGy開始，以1kGy的標稱劑量增加。測定每一個增量劑量，每一個標稱增量劑量的最大值隨后用于識別ffp和d*,這些劑量可以在標稱增量劑量的±0.5kGy或±10%變化，取較大值。如果最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于給定劑量的最低限，使用這個增量劑量輻照另外20個產(chǎn)品.2按照ISO11737-2(見5.4.1)對輻照過的產(chǎn)品單元逐個進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。.3從該試驗結(jié)果中獲得下列數(shù)據(jù)：a)A和FFP(見);c)CD*批(見)。從3批中的每一批的增量劑量系列確定20個樣品中至少1個是陰性的最低劑量。指定這個劑量為某批產(chǎn)品的ffp,并從3個ffp中找出中值。如果2批或3批有同樣的ffp,選擇陽性數(shù)較高或最高的批的劑量作為中值ffp。.2根據(jù)經(jīng)過中值ffp輻射后無菌試驗的陽性數(shù)從表8查出A。表8在中值ffp時不同無菌試驗陽性數(shù)對應(yīng)的A值(方法2B)中值ffp的無菌試驗陽性數(shù)AkGy中值ffp的無菌試驗陽性數(shù)AkGy0.2260.520.2650.580.2940.640.3230.720.3620.8290.40180.44070.48注：計算A見式(7):……(7)式中的n是無菌試驗陰性數(shù)(SeeDavisetal.,19818)。.1對3批中的每一批用以下方法中的任意一種方法確定d*:a)找出所有無菌試驗均陰性的兩個連續(xù)劑量中較低的劑量，在隨后的增量劑量試驗系列中陽性不得多于1;b)找出20個樣品出現(xiàn)一個陽性的最低劑量，緊隨前后的是所有樣品均陰性的增量劑量。.2如果3批產(chǎn)品的每一批都不能滿足,1a)或b)的要求，增量劑量試驗失敗，在這種情況下，在對試驗方法做了檢查并實施了糾正的前提下，可以重復(fù)劑量增量試驗。a)若最高批d*超過中間批d*<5b)若最高批d*超過中間批d*≥5kGy,則中間批d*就成為D*;或kGy,則最高批d*就成為D*。找出D“等于d“的批次并將其標定為CD*批。如果一個以上的批d”等于D*,則隨機選定這些批中的任何一批為CD*批。保留在方法2B的步驟3中使用的CD*批樣品。從3批樣品中留下的樣品的保存條件應(yīng)能防止微生物的生長。第4批產(chǎn)品可以作為CD*批。8.3.4步驟3:完成驗證劑量試驗“批的100件產(chǎn)品單元。測定實施劑量并將測定的最大劑量標定為DD*。DD*可在D*的基礎(chǔ)上有+1.0kGy或+10%的變化，取其中較大值。如果產(chǎn)品得到的最大劑量和最低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%,則該驗證劑量試驗可用CD*批的另外100個產(chǎn)品單元重做。如果產(chǎn)品得到的最大劑量和最低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%,且無菌試驗的結(jié)果是可接受的，驗證劑量試驗不必重復(fù)。根據(jù)ISO11737-2(見5.4.1)對產(chǎn)品單元獨立實施無菌試驗并記錄陽性試驗數(shù)。定義陽性數(shù)為CD*。8.3.5步驟4:結(jié)果的考慮從本試驗得到首次無陽性的劑量(FNP):a)如果CD*≤2,FNP=DD*;b)如果2<CD*<10,FNP=DD*+2.0kGy;c)如果9<CD*<16,FNP=DD*+4.0d)如果CD*>15,應(yīng)分析情況，采取糾正措施，重新確定D*。8.3.6步驟5:建立滅菌劑量依據(jù)FFP和FNP的不同，使用式(8),由FFP注：如果CD*=0,設(shè)定[1g(CD*)]=0。用式(9)計算滅菌劑量：式中：D*——達到SAL10-2的最終估計劑量；SAL——預(yù)先選定的無菌保證水平；DS——殺滅90%經(jīng)過DD*輻射后存活下來的微生物的估計劑量。9VDmax方法——25kGy或15kGy作為滅菌劑量的證實9.1原理從操作上看，證實選定的滅菌劑量的方法類似于劑量設(shè)定方法1(見第7章),需要測定生物負載和完成驗證劑量試驗。在實施證實中，滅菌前存在于產(chǎn)品中的生物負載的輻射抗力低于微生物群體的最大輻射抗力是取得SAL10-6滅菌劑量的前提。以SAL10-1的劑量作為驗證劑量輻照10件產(chǎn)品。劑量(最大驗證劑既體現(xiàn)了生物負載水平的特點又體現(xiàn)了與之相連的最大抗力特點。在建立特別生物負載水平的最大抗力中，需計算SDR各個成分的抗力的變化(見表3)。高抗力的SDR的成分對達到的成分是定義最大抗力的依據(jù)，這是證實試驗的基礎(chǔ)。因此，同方法1一樣，使用SDR的保守水平，見Kowalsik和Tallentire1999[4];Kowalsik\Aoshuang和Tallentire,2000[13];Kowalsik和Tallentire,2003[15]。在實踐中，生物負載的確定是平均生物負載的結(jié)果。與這個生物負載相關(guān)的VDmx劑量可以從表中讀出。驗證劑量試驗依據(jù)這個劑量實施。10件產(chǎn)品單元或份額暴露于驗證劑量，立即對每件樣品逐個地實施無菌試驗，如果10個無菌試驗中不超過一個陽性，預(yù)選擇的滅菌劑量就被證實了。本部分給出的VDmx方法是用于選擇滅菌劑量25kGy和15kGy的。25kGy的方法可用于平均生物負載小于或等于1000(見9.2或9.3)的產(chǎn)品。15kGy的方法僅用于平均生物負載≤1.5(見9.4或9.5和表10)的產(chǎn)品。15kGy的VDmax方法提供了方法1之外的另一種用于低生物負載產(chǎn)品建立滅菌劑量的方法。為了區(qū)別這兩種方法，將驗證劑量值與VDmx聯(lián)用，在VDmx的上角寫上劑量25或15,注：查看表9中的VDmax25中各種平均生物負載變化水平，可看到生物負載水平與VDmx值之間的變化關(guān)系，隨著生物負載增加到80,VDmax值如預(yù)測逐漸增加。然而，在生物負載到達80時，VDmx25值最高，對于再增加的生物負載，相應(yīng)的VDmx下降。在VDmx1?中(見表10),也可見生物負載增加而Dx值下降。這是由于VDmx方法與方法1有同樣的保守度的必然結(jié)果。9.2多生產(chǎn)批使用VDmx25的程序這個方法僅用于平均生物負載≤1000的產(chǎn)品。使用VDmx25,產(chǎn)品的平均生物負載≤0.9并使用完整產(chǎn)品，依照表9,平均生物負載大于0.9時可以使用SIP。實施VDmx25有以下5步。注：實例見11.3。9.2.2步驟1:獲得產(chǎn)品樣品依據(jù)5.1、5.2和5.3,從3個獨立的生產(chǎn)批的每一批至少選擇10件產(chǎn)品單元。9.2.3步驟2:確定平均生物負載在測定生物負載中使用校正因子(見ISO11737-1)。測定所選擇產(chǎn)品單元中的每一件的生物負載并計算：a)3批產(chǎn)品中的每一批產(chǎn)品的平均生物負載(批平均);b)選擇的所有產(chǎn)品單元中的每一件的平均生物負載(總平均生物負載)。注：生物負載一般通過確定單個產(chǎn)品單元得到，但當(dāng)生物負載低(例如：<10)時，將10件產(chǎn)品單元合在一起確定生物負載是可接受的。這個指導(dǎo)方法不用于有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品上，有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品應(yīng)選擇大一些的產(chǎn)品份額。比較3個批平均與總平均生物負載，確定是否有任何一個批平均大于總平均生物負載的兩倍或多倍。9.2.4步驟3:獲得VDmax2用下述條件之一從表9中獲得一個VDmx25:a)如果一個或多個批平均≥2×總平均生物負載，取最高批平均；b)如果每一批的批平均<2×總平均生物負載，取總平均值。當(dāng)SIP=1.0,如果表9中沒有要查的平均生物負載，使用表中平均生物負載值最近的且大于計算的生物負載的值當(dāng)SIP<1.0,用SIP平均生物負載除以SIP得到完整產(chǎn)品的生物負載。如果表9中沒有給出計算的平均生物負載，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值，查找SIP=1.0VDmax25值和相關(guān)的減少因子。注：平均生物負載≤0.9(見)的產(chǎn)品不允許使用SIP<1.0。表9平均生物負載≤1000的VDmx25和SIP劑量減少因子平均生物負載SIP劑量減少因子平均生物負載SIP劑量減少因子平均生物負載SIP=1.0VDmax25kGySIP劑量減少因子kGy平均生物負載SIP=1.0VDmax25kGySIP劑量減少因子kGy2.762.722.692.672.642.602.562.522.492.462.432.402.374002.344252.324502.304752.282.242.122.962.092.912.072.862.052.832.042.792.02注：如果VDmx2=0.0kGy,產(chǎn)品未輻照?！贿m用；平均生物負載≤0.9,全部產(chǎn)品(SIP=1.0)被使用，因此SIP劑量減少因子未給出。使用式(10)計算SIPVDmx25(見Kowalski和Tallentire2003[15]):SIPVDmax25=(SIP=1.0VDmx2?)+(SIP劑量減少因子×lgSIP)9.2.5步驟4:完成驗證劑量實驗從單一生產(chǎn)批中選擇10件產(chǎn)品。實施步驟4需要的10件可以從生物負載檢測的3批中選一批，也可以選能夠代表常規(guī)生產(chǎn)水平的第4批產(chǎn)品。選擇產(chǎn)品批應(yīng)考慮產(chǎn)品支持微生物生長的能力。用從表9中得到的驗證劑量或用式(10)計算出的VDmx25值，哪個適合就用哪個，輻照10件產(chǎn)品單元，確定劑量。產(chǎn)品單元獲得的最高劑量不能超過VDmx25值的10%。如果最大和最小劑量的算術(shù)平均值<VDmx25值的90%,驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果最大和最小劑量的算術(shù)平均值<VDmx2值的90%,無菌試驗的結(jié)果可以接受，驗證試驗不必重復(fù)。注：如果VDmax25=0.0kGy,不輻照產(chǎn)品單元。根據(jù)ISO11737-2(見5.4.1)對產(chǎn)品單元(見)逐個做無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。9.2.6步驟5:結(jié)果的解釋如果10件產(chǎn)品的無菌試驗中陽性數(shù)不超過1件，就證實了25kGy可以作為滅菌劑量。如果10件產(chǎn)品的無菌試驗中有2件陽性，完成證實驗證劑量試驗(見9.2.7)。如果無菌試驗中陽性數(shù)大于2,則驗證不被接受。如果這個結(jié)果是由于實施了不正確的生物負載確定、不正確的無菌試驗或不正確的傳遞驗證劑量，實施了糾正措施后，驗證劑量試驗可以重復(fù)。如果造成這個結(jié)果的原因并不能被糾正措施消除，這個劑量證實方法無效，選擇25kGy證實方法以外的方法建立滅菌劑量(見第6章)。9.2.7證實驗證劑量試驗實施證實驗證劑量試驗(見)有以下3步(、和)。步驟1:獲得產(chǎn)品樣品從單一批產(chǎn)品中至少取10件產(chǎn)品。這10件產(chǎn)品可以選自步驟2(見9.2.3)生物負載檢測批中的一批，也可以選自步驟4的第4批(見9.2.5),或任何一批能夠代表常規(guī)生產(chǎn)條件的產(chǎn)品批。選擇產(chǎn)品應(yīng)考慮產(chǎn)品支持微生物生長的能力。步驟2:完成驗證劑量試驗.1如9.2.4確定用VDmx25輻照10件產(chǎn)品的劑量，如果產(chǎn)品的最高劑量超過VDmx25的10%,驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果產(chǎn)品獲得的最高和最低劑量的算術(shù)平均值<VDmx25的90%,證實驗證劑量試驗可重復(fù)。如果最高和最低劑量的算術(shù)平均值<VDmx25的90%,且無菌試驗的結(jié)果是可接受的(見),驗證試驗不必重復(fù)。.2按照ISO11737-2(見5.4.1)對輻照過的產(chǎn)品單元逐個進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽步驟3:結(jié)果的解釋.1如果10件產(chǎn)品單元無菌試驗中沒有陽性，原驗證劑量試驗和證實驗證劑量試驗的無菌試驗陽性總數(shù)為2件，證實被接受，因此：證實了25kGy可以作為滅菌劑量。.2如果無菌試驗中有任何陽性出現(xiàn)，不接受驗證。如果這個結(jié)果是由于實施了不正確的生物負載確定、實施了不正確的無菌試驗或不正確地傳遞了驗證劑量，實施了糾正措施后，證實驗證劑量試驗可以被重復(fù)。如果造成這個結(jié)果的原因并不能被糾正措施消除，這個劑量證實方法無效，選擇25kGy證實方法以外的方法建立滅菌劑量(見第6章)。這個方法是VDmx25方法的一種應(yīng)用，且僅用于預(yù)用25kGy作為滅菌劑量的單一生產(chǎn)批。這個方法僅用于平均生物負載≤1000的產(chǎn)品。在應(yīng)用VDmx25中，當(dāng)產(chǎn)品的生物負載≤0.9時，應(yīng)按照表9使用完整的產(chǎn)品，當(dāng)產(chǎn)品的生物負載>0.9時，可使用SIP。在使用VDmx25方法的這種應(yīng)用時，有以下5步。9.3.3步驟1:獲得產(chǎn)品樣品根據(jù)5.1、5.2和5.3,從一批產(chǎn)品中至少選擇10件產(chǎn)品單元。9.3.4步驟2:確定平均生物負載在生物負載確定中使用校正因子(見ISO11737-1)。確定每一件選定的產(chǎn)品單元的生物負載并計算平均生物負載。注：生物負載一般通過確定單個產(chǎn)品單元得到，但當(dāng)生物負載低(例如：<10)時，將10件產(chǎn)品單元合在一起確定生物負載是可接受的。這個指導(dǎo)方法不用于有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品上，有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品應(yīng)選擇大一些的產(chǎn)品份額。從表9獲得驗證劑量(VDmx25)。a)當(dāng)SIP=1.0時，如果表9中沒有給出要查的平均生物負載，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值。b)當(dāng)SIP<1.0時，用SIP平均生物負載除以SIP得到完整產(chǎn)品(SIP=1.0)的平均生物負載，如果表9中沒有給出要查的平均生物負載，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值查找SIP=1.0VDmx25值和相關(guān)的減少因子。注：平均生物負載≤0.9(見)的產(chǎn)品不能使用SIP<1.0。用式(10)計算SIPVDmx25(見9.2.4)。9.3.6步驟4:完成驗證劑量試驗從單一批產(chǎn)品中選擇10件產(chǎn)品。用從表9中獲得的VDmx或用式(10)導(dǎo)出的VDmx,用兩者中適合的一個，輻射10件產(chǎn)品單元或份額，確定劑量。如果產(chǎn)品單元獲得的最大劑量超過驗證劑量的10%,而且滅菌劑量是用VDmx25建立的，驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果產(chǎn)品獲得的最大和最小劑量的算術(shù)平均值小于的90%,驗證劑量試驗需要重復(fù)。如果平均劑量<VDmx25的90%,且無菌試驗的結(jié)果是可接受的，驗證試驗不必重復(fù)。注：如果VDmx25=0.0kGy,不輻照產(chǎn)品單元。按照ISO11737-2(見5.4.1)對輻照過的產(chǎn)品單元(見)逐個進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。9.3.7步驟5:結(jié)果的解釋如果10件產(chǎn)品單元的無菌試驗中陽性數(shù)不超過1個，接受驗證，也就證實了25kGy可以作為滅菌劑量。如果10件產(chǎn)品單元的無菌試驗中有2件陽性，完成證實驗證劑量試驗(見9.2.7)。如果無菌試驗中的陽性數(shù)多于2件，則驗證不被接受。如果這個結(jié)果是由于實施了不正確的生物負載確定，不正確的無菌試驗或不正確的驗證劑量的傳遞，實施了糾正措施后可以重復(fù)驗證劑量試驗。如果引起這個結(jié)果的原因不能被糾正措施消除，證實25kGy作為滅菌劑量的方法無效，選擇25kGy證實方法以外的方法建立滅菌劑量(見第6章)。這種方法僅用于平均生物負載≤1.5的產(chǎn)品。根據(jù)表10,在應(yīng)用VDmax1?方法中使用完整的產(chǎn)品(SIP=1.0)。應(yīng)用VDmxl?方法有以下5步。注：實例見11.3。9.4.2步驟1:獲得產(chǎn)品樣品根據(jù)5.1、5.2和5.3,從3個獨立的生產(chǎn)批中的每一批至少選擇10件產(chǎn)品單元。9.4.3步驟2:確定平均生物負載在確定平均生物負載中使用校正因子(見ISO11737-1)。確定選定的每一件產(chǎn)品單元的生物負載并計算：a)3批產(chǎn)品中每一批產(chǎn)品的每一件產(chǎn)品單元上的平均生物負載(批平均);b)所有選定產(chǎn)品單元的每一件產(chǎn)品單元的平均生物負載(總平均生物負載)。注：生物負載一般通過確定單個產(chǎn)品單元得到，但當(dāng)生物負載低(例如：<10)時，將10件產(chǎn)品單元合在一起確定生物負載是可接受的。這個指導(dǎo)方法不用于有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品上，有產(chǎn)品份額的產(chǎn)品應(yīng)選擇大一些的產(chǎn)品份額。比較3批的平均生物負載與總平均生物負載，確定是否有一批的平均生物負載大于總平均生物負載的兩倍或更多。使用以下一個數(shù)據(jù)從表10中獲得VDmx15:a)如果一個或多個批的平均值≥2×總平均生物負載，取最大的批平均值；b)如果每一批的批平均<2×總平均生物負載，取總平均生物負載。如果平均生物負載不在表10中，使用表中最近的且大于計算的平均生物負載的值。表10平均生物負載≤1.5的VDmx15值平均生物負載SIP=1.0平均生物負載SIP=1.0注：如果VDmx1?=0.0kGy,未輻射產(chǎn)品單元。9.4.5步驟4:完成驗證劑量試驗從一個生產(chǎn)批選擇10件產(chǎn)品單元。實施步驟4需要的10件產(chǎn)品單元可以從生物負載檢測的3批中選一批，也可以選自第4批能夠代表常規(guī)生產(chǎn)條件的產(chǎn)品批。選擇供試產(chǎn)品批應(yīng)考慮產(chǎn)品支持微生物生長的能力。用從表10獲得的VDmxl?輻射10件產(chǎn)品單元，確定劑量。如果產(chǎn)品獲得的最大劑量超過驗證劑量的+0.1kGy或+10%,兩者選擇較大的，而且使用VDmx1?建立滅菌劑量，驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果產(chǎn)品獲得的最大和最小劑量的算術(shù)平均值小于VDmx1?的90%,驗證劑量試驗可以重復(fù)。如果平均值小于VDmx15的90%,已實施了無菌試驗，結(jié)果被接受，驗證劑量試驗不必重復(fù)。注：如果VDmx1?=0.0kGy,未輻射產(chǎn)品單元。按照ISO11737-2(見5.4.1)對輻照后的產(chǎn)品單元(見)逐個進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。9.4.6步驟5:結(jié)果的解釋如果10件產(chǎn)品單元的無菌試驗中陽性數(shù)不多于1個，接受驗證試驗，也就證實了15kGy可以作為滅菌劑量。如果10件產(chǎn)品單元的無菌試驗中有2個陽性，實施證實驗證劑量試驗(見9.4.7)。如果無菌試驗的陽性數(shù)多于2個，驗證不被接受。如果結(jié)果是由于實施了不正確的生物負載確定、不正確的無菌試驗或不正確地傳遞了驗證劑量，實施糾正措施后，重復(fù)驗證劑量試驗。如果引起這個結(jié)果的原因不能被糾正措施消除，證實15kGy作為滅菌劑量的方法無效，選擇15kGy證實方法以外的方法建立滅菌劑量(見第6章)。如果屬于上述任何情況，驗證劑量試驗可以重復(fù)。9.4.7證實驗證劑量試驗實施證實驗證劑量試驗(見)有以下3步(、和)。步驟1:獲得產(chǎn)品樣品從一批產(chǎn)品中至少選10件產(chǎn)品單元，用于證實驗證劑量試驗的這10件產(chǎn)品單元可以選自步驟2生物負載測定批中的一批，也可以選自步驟4(見9.4.5)的第4批，還可以選代表常規(guī)生產(chǎn)條件的產(chǎn)品批的產(chǎn)品。選擇產(chǎn)品應(yīng)考慮產(chǎn)品支持微生物生長的能力。步驟2:完成證實驗證劑量試驗.1用根據(jù)9.4.4確定的VDmx15輻射10件產(chǎn)品單元，確定劑量。如果產(chǎn)品單元獲得的最大劑量大于驗證劑量的10%,用VDmx15建立滅菌劑量，驗證劑量試驗應(yīng)重復(fù)。如果產(chǎn)品單元獲得的最大和最小劑量的算術(shù)平均值小于VDmx15的90%,驗證劑量試驗可以重復(fù)。如果平均劑量小于VDmxl的90%,且無菌試驗的結(jié)果是可接受的，驗證劑量試驗不必重復(fù)。.2按照ISO11737-2(見5.4.1),對輻射后的產(chǎn)品單元逐