動物細胞培養(yǎng)+高二下生物人教版（2019）選擇性必修3

動物細胞培養(yǎng)

治療大面積燒傷時，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植。但對這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且會產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。如何解決？通過動物細胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚從社會中來目錄01動物細胞工程02動物細胞培養(yǎng)03動物細胞融合04動物核移植05（基礎(chǔ)）一、動物細胞培養(yǎng)1.概念：指從動物體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。2.原理：細胞增殖3.培養(yǎng)條件：營養(yǎng)條件環(huán)境條件無菌、無毒的環(huán)境、適宜的溫度、pH和滲透壓、適宜的氣體環(huán)境糖類、氨基酸、無機鹽、維生素···任務(wù)1：請結(jié)合體內(nèi)細胞生活的內(nèi)環(huán)境，說說體外培養(yǎng)動物細胞需要滿足哪些條件將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴格配制而成的培養(yǎng)基。①狀態(tài)：一般用液體培養(yǎng)基，也稱培養(yǎng)液②成分：合成培養(yǎng)基＋血清人們對細胞所需的營養(yǎng)條件尚未研究清楚原因糖類、氨基酸、無機鹽、維生素···營養(yǎng)條件①無菌、無毒的環(huán)境a、對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌b、在無菌環(huán)境下進行操作c、定期更換培養(yǎng)液環(huán)境條件②適宜的溫度、pH和滲透壓a、培養(yǎng)溫度：36.5+0.5℃b、多數(shù)動物細胞生存的適宜pH：7.2~7.4c、細胞必須生存在等滲環(huán)境中：培養(yǎng)液中的無機鹽可維持滲透壓，如Na+③適宜的氣體環(huán)境a、氣體組成：O2+CO2細胞代謝必需維持培養(yǎng)液pHb、培養(yǎng)裝置：培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶

置于CO2培養(yǎng)箱

95%空氣和5%CO24.培養(yǎng)過程：取動物組織細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)分瓶任務(wù)2：初步構(gòu)建動物細胞培養(yǎng)流程圖任務(wù)3：請結(jié)合培養(yǎng)流程，閱讀課本P44-45，思考回答以下問題①取什么樣的組織進行培養(yǎng)？為什么？②為什么動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞呢？用什么方法？③常用胰蛋白酶分散細胞，這說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶可以嗎？④胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎，為什么？⑤體外培養(yǎng)動物細胞分為兩類，分為哪兩類？⑥什么是細胞貼壁？⑦什么是接觸抑制？⑧為什么要進行分瓶培養(yǎng)？⑨進行傳代培養(yǎng)時，如何處理？取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)②為什么動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞呢？

用什么方法？①取什么樣的組織進行培養(yǎng)？為什么？這些細胞分化程度低，分裂能力強，容易培養(yǎng)。成塊組織中，細胞與細胞靠在一起，彼此限制了生長和繁殖。①機械的方法；②胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理。一般取動物胚胎或幼齡動物的組織、器官培養(yǎng)取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)③常用胰蛋白酶分散細胞，這說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶可以嗎？多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。蛋白質(zhì)④胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎，為什么？細胞膜的成分中含有蛋白質(zhì)，而胰蛋白酶能夠水解蛋白質(zhì)，所以胰蛋白酶會把細胞消化掉。取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)⑤體外培養(yǎng)動物細胞分為兩類第1類：懸浮生長細胞細胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖⑥什么是細胞貼壁懸液中大多數(shù)分散的細胞很快就貼附在瓶壁上生長增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞貼壁。第2類：貼壁生長細胞細胞需貼附于某些基質(zhì)（如培養(yǎng)瓶壁）表面才能增殖（主要類型）當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)⑦什么是接觸抑制？這種現(xiàn)象稱為接觸抑制形成一層細胞可形成多層細胞⑧為什么要進行分瓶培養(yǎng)？取動物組織→制成細胞懸液→原代培養(yǎng)

→分瓶

→傳代培養(yǎng)⑨進行傳代培養(yǎng)時，如何處理？懸浮培養(yǎng)細胞貼壁細胞細胞密度過大、有害代謝物積累、營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等出現(xiàn)接觸抑制細胞分裂受阻分瓶培養(yǎng)

懸浮培養(yǎng)細胞

貼壁細胞

胰蛋白酶處理

制成細胞懸液分瓶培養(yǎng)離心法收集取動物組織用機械法和用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理分散成單個細胞加培養(yǎng)液細胞懸液在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶內(nèi)原代培養(yǎng)貼壁細胞細胞分裂受阻傳代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)細胞密度過大、有害代謝物積累、營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等出現(xiàn)接觸抑制懸浮培養(yǎng)細胞懸浮培養(yǎng)細胞

貼壁細胞

胰蛋白酶處理制成細胞懸液

分瓶培養(yǎng)離心法收集學習任務(wù)3：完善動物細胞培養(yǎng)流程圖3、分布：1、概念：4、分類：電鏡下的胚胎干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中包括胚胎干細胞和成體干細胞等干細胞是一類具有分裂和分化能力的細胞。2、特點：體積較小，細胞核大，核仁明顯二、干細胞的培養(yǎng)和應(yīng)用在一定條件下，可以分化成其他類型的細胞。3、分布：1、概念：4、分類：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中胚胎干細胞

和

成體干細胞等干細胞是一類具有分裂和分化能力的細胞。2、特點：體積較小，細胞核大，核仁明顯二、干細胞的培養(yǎng)和應(yīng)用在一定條件下，可以分化成其他類型的細胞。具有發(fā)育的全能性，但涉及倫理問題移植取成纖維細胞等iPS細胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化分化胰島細胞神經(jīng)元血細胞腸上皮細胞心肌細胞病人iPS細胞用于治療人類疾病示意圖肝細胞5、誘導多能干細胞（