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第三章第三節(jié)DNA復制第1頁2月2日,杭州西湖區(qū)西澳路某企業(yè)附近發(fā)生一起殺人分尸案。經(jīng)現(xiàn)場勘察,發(fā)覺了2塊非常細小尸塊,另外并未留下任何痕跡。這2塊尸塊到底是不是同一人,被害人是男性還是女性?技術人員從尸塊中提取出一些DNA片段,送到刑偵支隊利用PCR技術取得了大量DNA系列。進行性別判定和同一認定。結(jié)果發(fā)覺這2塊尸塊屬于同一體,均是女性尸塊。這一判定為兇案告破開啟了大門。8天后,兇犯楊某被抓獲歸案。從案例可知PCR技術起到了什么作用?
第2頁一、對DNA復制方式演繹推理提出問題:_______________提出假設:_______________演繹推理:驗證推理:得出結(jié)論:_______________第3頁1:假如是半保留復制,親代DNA分子復制后得到第1代和第2代組成是怎么樣?用圖解表示出來。2:怎樣識別DNA中哪一條是母鏈,哪一條是子鏈?3:用哪種同位素進行標識,為何?4:假如原DNA是15N,原料是14N,那么請推演復制后第1代與第2代中N情況怎樣?第4頁5:復制后,子一代每個DNA全為15N/14N-DNA;第2代中有二分之一是15N/14N-DNA,另二分之一為14N/14N-DNA。但我們是看不出DNA分子,產(chǎn)生DNA分子通常是混雜在一起。有什么技術或方法能夠證實上述結(jié)論是正確?6:假如對每一代DNA進行離心分離,試驗結(jié)果會是怎樣呢?第5頁DNA半保留復制試驗證據(jù)自學思索以下問題,然后與小組同學交流
1、大腸桿菌首先放在什么培養(yǎng)基中培養(yǎng)?然后轉(zhuǎn)移到什么培養(yǎng)基中培養(yǎng)?2、假如是半保留復制,離心后應該出現(xiàn)幾條帶?3、三條帶離心后在試管中分布怎樣?第6頁重帶中帶輕帶中帶第7頁中帶(中間)15N/14N-DNA重帶(下部)15N/15N-DNA輕帶(上部)14N/14N-DNA15N/14N-DNA中帶(中間)
親代DNA
第一代DNA
第二代DNA結(jié)論:DNA分子是以半保留方式復制。第8頁二、DNA分子復制過程初探【材料二】步驟1:1956年美國生物化學家康貝格在試管中,將大腸桿菌中提取出DNA聚合酶加人到含有4種豐富脫氧核苷酸人工合成體系中。結(jié)果:在試管中4種脫氧核苷酸不能合成DNA分子。步驟2:康貝格在上述試管中加人了少許DNA分子和ATP,培養(yǎng)在適宜溫度條件下,一段時間后,測定其中DNA含量。結(jié)果:試管中DNA含量增加。問題:試驗中加入DNA聚合酶、4種脫氧核苷酸,少許DNA以及ATP分別起什么作用?依據(jù)試驗可知,復制需要哪些必需條件?第9頁問題7:生化分析得知,間期細胞中脫氧核昔酸含量開始時很低,很快急劇增加,以后又逐步降低到初始水平。伴隨脫氧核苷酸含量動態(tài)改變,DNA聚合酶活性顯著增高。這說明什么問題?問題8:將變形蟲放在有標識過脫氧核苷酸培養(yǎng)液中,一段時間后,在細胞核中首先發(fā)覺有標識DNA分子。這說明什么問題?第10頁時間場所模板模板去向原料能量酶產(chǎn)物特點閱讀教材p54頁“DNA分子復制過程”,填寫以下表格:第11頁三、DNA分子復制第12頁解旋酶催化解旋:模板(在DNA聚合酶催化下,利用游離脫氧核苷酸進行堿基配對)復制:以母鏈為模板進行堿基配對母鏈(舊鏈)子鏈(新鏈)復制后DNA:同時進行組成復制過程第13頁拓展題1、女性子宮肌瘤細胞中最長DNA分子達36mm,復制速度約為4um/min,但復制過程僅需40min左右即完成。試分析其可能原因。2、研究表明,D
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