2024屆高考生物考前沖刺刷題首選卷第1部分專題訓(xùn)練專題8生物技術(shù)與工程(二)_第1頁
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第1部分專題訓(xùn)練專題8生物技術(shù)與工程(二)一、單項(xiàng)選擇題(每題給出的四個(gè)選項(xiàng)中,只有一個(gè)選項(xiàng)是符合題目要求的)1.(2023·湖北部分重點(diǎn)中學(xué)第一次聯(lián)考)與啤酒、葡萄酒并稱世界三大古酒的黃酒是中國特產(chǎn),即墨老酒是黃酒中的珍品,按照“黍米必齊,曲蘗必時(shí),水泉必香,陶器必良,湛熾必潔,火劑必得”的古代造酒六法(古遺六法)釀制而成。下列關(guān)于我國傳統(tǒng)黃酒發(fā)酵的敘述,錯(cuò)誤的是()A.“黍米”中所含物質(zhì)只能為微生物提供碳源和氮源B.“曲蘗”指釀造老酒的酵母菌,其在釀造黃酒過程中進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸C.“湛熾必潔”是為消除雜菌對(duì)釀酒過程的影響D.“火劑必得”的目的是控制適宜的溫度,保證酵母菌發(fā)酵所需答案A解析“黍米”中含有蛋白質(zhì)、糖類等,其所含物質(zhì)不僅能為微生物提供碳源和氮源,還能為微生物提供無機(jī)鹽等,A錯(cuò)誤;“曲蘗”指釀造老酒的酵母菌,酵母菌是兼性厭氧微生物,在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖,而后進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精,B正確;在釀酒過程中需要避免雜菌污染,“湛熾必潔”的目的是消除雜菌對(duì)釀酒過程的影響,C正確;“火劑必得”是為了控制適宜的溫度,保證酵母菌發(fā)酵所需,D正確。2.(2023·棗莊模擬)自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立進(jìn)行固氮的細(xì)菌??蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究,部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。已知步驟④獲得的三個(gè)平板的菌落數(shù)分別為90、95、100,對(duì)照組平板為0。相關(guān)敘述正確的是()A.步驟②振蕩20min的目的是擴(kuò)大菌種數(shù)量,屬于選擇培養(yǎng)B.步驟④使用接種環(huán)劃線接種,使用前需要灼燒滅菌C.1g土壤中平均自生固氮菌數(shù)約為9.5×106個(gè)D.所用培養(yǎng)基應(yīng)加入碳源、氮源、無機(jī)鹽、水和瓊脂答案C解析由圖觀察可知,步驟②振蕩20min的目的是讓樣品中的微生物充分釋放到無菌水中,A錯(cuò)誤;由圖觀察可知,步驟④獲得的菌落分散在平板上,利用的是涂布平板法,使用的接種工具是涂布器,使用前需要灼燒滅菌,B錯(cuò)誤;1g土壤中平均自生固氮菌數(shù)約為(90+95+100)÷3÷0.1×104=9.5×106個(gè),C正確;由題干信息可知,該實(shí)驗(yàn)的目的是分離土壤中自生固氮菌和固氮能力的測(cè)定,自生固氮菌能夠利用空氣中的氮作為氮源,故培養(yǎng)基中不需要加入氮源,D錯(cuò)誤。3.(2023·遼寧省協(xié)作校高三第二次模擬略改)通過植物細(xì)胞工程技術(shù),可利用甲(高產(chǎn)不耐鹽),乙(低產(chǎn)耐鹽)兩種二倍體植物培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株,實(shí)驗(yàn)流程如圖所示,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.經(jīng)①處理后,可采用質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)檢測(cè)制備的原生質(zhì)體的活性情況B.②~③過程中,雜種細(xì)胞內(nèi)高爾基體和線粒體活動(dòng)明顯增強(qiáng)C.由④到目的植株需進(jìn)一步篩選的原因是④中含有低產(chǎn)耐鹽品種D.目的植株相對(duì)于甲、乙而言發(fā)生了染色體數(shù)目變異但植株仍可育答案A4.(2023·海南,7)某團(tuán)隊(duì)通過多代細(xì)胞培養(yǎng),將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)過一系列處理,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育答案A解析傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞增殖到貼滿瓶壁時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制,A錯(cuò)誤;據(jù)題干“將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞”可知,該過程中發(fā)生了染色體數(shù)目變異,B正確;XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞過程中,細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能發(fā)生了變化,即發(fā)生了細(xì)胞分化,C正確;若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可以通過去除胚胎干細(xì)胞的Y染色體等一系列處理獲得有功能的卵母細(xì)胞,用于繁殖后代,D正確。5.(2023·湖北省十一校高三第二次聯(lián)考)利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術(shù),改變了小鼠生殖細(xì)胞的“基因組印記”,使其“變性”。我國科研人員將一個(gè)第二極體注入修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞后(類似受精作用),最終創(chuàng)造出“孤雌生殖”的小鼠。實(shí)驗(yàn)過程如下圖所示。下列敘述正確的是()A.體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí),為防止污染需將培養(yǎng)皿密閉培養(yǎng)在二氧化碳培養(yǎng)箱中B.胚胎移植前,需對(duì)供體和受體進(jìn)行免疫檢查,避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.甲基化會(huì)關(guān)閉基因的活性,對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化后該基因可正常表達(dá)D.“孤雌小鼠”的誕生過程沒有精子參與,其基因型與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同答案C解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,為防止雜菌污染,需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作,A錯(cuò)誤;胚胎移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥,B錯(cuò)誤;DNA分子甲基化會(huì)影響基因的表達(dá),從而關(guān)閉基因的活性,而對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化后該基因可正常表達(dá),C正確;“孤雌小鼠”是由次級(jí)卵母細(xì)胞發(fā)育而來,如果提供卵細(xì)胞的雌鼠基因型是AaBb,經(jīng)過減數(shù)分裂形成的次級(jí)卵母細(xì)胞基因型可以是AABB,產(chǎn)生的卵細(xì)胞的基因型是AB,若第二極體的基因型也是AB,則獲得的“孤雌小鼠”的基因型是AABB,所以二者基因型可能不同,D錯(cuò)誤。6.(2023·蘇州模擬)熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中某種DNA含量。其原理是在PCR體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針,當(dāng)耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處,會(huì)水解探針,使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一次,就有一個(gè)熒光分子生成。下列有關(guān)敘述正確的是()A.加入的引物是單鏈DNA,引物1、2的堿基序列相同B.耐高溫的DNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸C.達(dá)到設(shè)定熒光強(qiáng)度所經(jīng)過的循環(huán)次數(shù)與其起始模板量關(guān)系不大D.該項(xiàng)技術(shù)可用于檢測(cè)某種細(xì)胞中不同基因的轉(zhuǎn)錄水平答案D解析加入的引物是單鏈DNA,但由于引物1、2的結(jié)合位點(diǎn)不同,故引物1、2的堿基序列不同,A錯(cuò)誤;由圖分析可知,耐高溫的DNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸,B錯(cuò)誤;由熒光定量PCR技術(shù)原理分析可知,達(dá)到設(shè)定熒光強(qiáng)度所經(jīng)過的循環(huán)次數(shù)與其起始模板量呈正相關(guān),C錯(cuò)誤;cDNA是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成的,故若以cDNA為模板,該項(xiàng)技術(shù)便可用于檢測(cè)某種細(xì)胞中不同基因的轉(zhuǎn)錄水平,D正確。二、不定項(xiàng)選擇題(每題給出的四個(gè)選項(xiàng)中,有的只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求,有的有多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)7.(2023·湖北武漢聯(lián)考改編)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長,氨基酸營養(yǎng)缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變而無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長,如圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖,數(shù)字代表培養(yǎng)基,A、B、C表示操作步驟。下列有關(guān)說法正確的是()A.①②④為完全培養(yǎng)基,③為基本培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高該突變菌株的濃度C.B操作不可直接用涂布器蘸取菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后,可從④中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)答案ABCD解析對(duì)比分析③和④,兩個(gè)培養(yǎng)基上接種的細(xì)菌相同,而④中菌落數(shù)比③中多,說明④為完全培養(yǎng)基,而③為基本培養(yǎng)基;①②中突變株和野生型大腸桿菌都能生長,則①②為完全培養(yǎng)基,A正確;B操作需用移液槍將菌液滴加到②表面,再用涂布器將菌液均勻地涂布在②表面,C正確;在③中不能生長而在④中能生長的菌落為突變株形成的,因此可從④中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng),D正確。8.(2023·丹東模擬改編)如圖是培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的相關(guān)圖示,圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的切割位點(diǎn)。下列相關(guān)敘述中正確的是()A.若通過PCR技術(shù)擴(kuò)增該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙B.圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ剪切,斷裂氫鍵C.檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否表達(dá)出蛋白質(zhì),采用抗原—抗體雜交技術(shù)D.質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)答案AC解析根據(jù)乙圖引物引導(dǎo)子鏈延伸的方向可知,若通過PCR技術(shù)擴(kuò)增該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙,A正確;根據(jù)質(zhì)粒上限制酶識(shí)別序列的分布位點(diǎn)可知,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),不能選用限制酶BamHⅠ,否則會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞,因此應(yīng)該選擇BclⅠ和HindⅢ這兩種限制酶,限制酶破壞的是磷酸二酯鍵,B錯(cuò)誤;檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否表達(dá)出蛋白質(zhì),應(yīng)采用抗原—抗體雜交技術(shù),C正確;質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞,但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá),D錯(cuò)誤。三、非選擇題9.(2023·湖南,21)某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?;卮鹣铝袉栴}:(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌,培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水和____________。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H,其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測(cè)該抗菌肽對(duì)________________________的抑制效果較好,若要確定其有抑菌效果的最低濃度,需在________μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。測(cè)試菌抗菌肽濃度(μg·mL-1)55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌-----++枯草芽孢桿菌-----++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注:“+”表示長菌,“-”表示未長菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達(dá)質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中,傳代多次后,生產(chǎn)條件未變,但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是__________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(4)研究人員通過肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官,可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體,如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及____________________________(答出兩點(diǎn))等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)?________(填“是”或“否”)。(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)是一種耐藥菌,嚴(yán)重危害人類健康??蒲腥藛T擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型,來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實(shí)驗(yàn)材料中必備的是________。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體②MRSA感染的肺類裝配體③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽④生理鹽水⑤青霉素(抗金黃色葡萄球菌的藥物)⑥萬古霉素(抗MRSA的藥物)答案(1)淀粉、無機(jī)鹽(2)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌1.73~3.45(3)淀粉酶M基因發(fā)生突變或含有M基因的表達(dá)載體丟失(4)適宜的氣體和無菌、無毒的環(huán)境否(5)②③④⑥解析(1)培養(yǎng)基的成分一般包含水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分,篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌所需要的選擇培養(yǎng)基中,除含水、無機(jī)鹽外,還應(yīng)含有淀粉,而不能含有有機(jī)氮。(2)從表中數(shù)據(jù)可以看出,抗菌肽濃度為3.45~55.20μg·mL-1時(shí),金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均無法存活,禾谷鐮孢菌和假絲酵母在抗菌肽濃度為55.20μg·mL-1時(shí)無法存活,而在抗菌肽濃度低于27.6μg·mL-1(含)時(shí)可存活,故抗菌肽對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌抑制效果較好??咕臐舛葹?.73μg·mL-1時(shí),金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均能存活,而在3.45μg·mL-1時(shí)均不能存活,所以若要確定抗菌肽有抑菌效果的最低濃度,應(yīng)在1.73~3.45μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。(3)淀粉酶M基因發(fā)生突變或含有M基因的表達(dá)載體丟失時(shí),菌株不能再產(chǎn)生淀粉酶M。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)除需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓和pH條件外,還需要適宜的氣體環(huán)境(95%空氣和5%CO2)以滿足代謝需求和維持培養(yǎng)液pH,以及無菌、無毒的環(huán)境防止其他微生物的污染和細(xì)胞代謝物的危害。肺類裝配體形成過程涉及兩種或多種細(xì)胞的共培養(yǎng),但并未運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(5)若要探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力,需至少取三組MRSA感染的肺類裝配體進(jìn)行培養(yǎng),第一組加入解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽,第二組加入萬古霉素(作為有抗菌效果的對(duì)照),第三組加入等量生理鹽水(作為無抗菌效果的對(duì)照),觀察并比較三組肺類裝配體的生長情況,若第一組肺類裝配體生長情況明顯好于第三組,且與第二組類似或好于第二組,說明該抗菌肽對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。10.(2023·張家口模擬)SRY基因是哺乳動(dòng)物Y染色體上具有決定雄性性別作用的基因片段。某人的性染色體組成為XX,但表現(xiàn)為男性體征,調(diào)查發(fā)現(xiàn)其1條X染色體上帶有Y染色體的DNA片段?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)在確定該DNA片段中是否含有SRY基因時(shí),先從被測(cè)試者細(xì)胞中提取該DNA片段,然后和引物(根據(jù)____________設(shè)計(jì)的一段堿基序列)混合,進(jìn)行PCR擴(kuò)增;在PCR的延伸階段,需加熱至72℃左右,主要依據(jù)________________________________和________________因素考慮。最后,用________________________________作為探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)陽性反應(yīng),則________(填“含有”或“不含有”)SRY基因。(2)為驗(yàn)證該DNA片段能否決定雄性性別,將含該DNA片段的基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠體內(nèi)。一種操作方法是將目的基因?qū)胄墼?,而不是雌原核,過程如圖所示,從兩者形態(tài)差異上分析,主要原因是________________________________________________。(3)為篩選出性染色體組成為XX的小鼠胚胎,可對(duì)________時(shí)期胚胎的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒別。將符合條件的早期胚胎移入代孕母鼠子宮中,胚胎移植時(shí)代孕母鼠的選擇條件是______________________________________(寫出2項(xiàng)即可),代孕母鼠對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生________________________,這為胚胎在代孕母鼠子宮內(nèi)的存活提供了可能。在獲得的子代小鼠中出現(xiàn)________(性別)小鼠,證明該DNA片段含SRY基因。答案(1)SRY基因保證耐高溫的DNA聚合酶所需溫度條件防止DNA變性標(biāo)記的含SAY基因的DNA片段含有(2)雄原核較大,更容易容納外源DNA(3)囊胚同種、具有健康體質(zhì)和正常繁殖能力免疫排斥雄性解析(1)引物是根據(jù)目的基因的一段序列設(shè)計(jì)的,在本檢測(cè)中目的基因是SRY基因,因此引物是根據(jù)SRY基因的一段序列設(shè)計(jì)的。在PCR的延伸階段,需加熱至72℃左右,主要依據(jù)保證耐高溫的DNA聚合酶所需溫度條件和防止DNA變性因素考慮。用標(biāo)記的含SRY基因的DNA片段作為探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)陽性反應(yīng),則含有SRY基因。(2)雄原核較大,更容易容納外源DNA,故可將外源基因?qū)氲叫墼酥小?3)當(dāng)DNA片段導(dǎo)入受體細(xì)胞后,可控制小鼠的性別,使小鼠表現(xiàn)為雄性,但應(yīng)排除原細(xì)胞中Y染色體的影響,可對(duì)囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞的性染色體進(jìn)行鑒別并選取性染色體為XX的小鼠胚胎,選擇接受胚胎的代孕母鼠時(shí),應(yīng)選擇同種、具有健康體質(zhì)和正常繁殖能力個(gè)體,將符合條件的胚胎導(dǎo)入代孕母鼠子宮后,外來胚胎不被免疫排斥,這為胚胎在代孕母鼠子宮內(nèi)的存活提供了可能。在獲得的子代小鼠中出現(xiàn)雄性小鼠,證明該DNA片段含SRY基因。11.(2023·河南九師聯(lián)盟)油菜是一種常見的油料作物。維生素E有延緩衰老的作用,是一種脂溶性維生素。尿黑酸植基轉(zhuǎn)移酶(HPT)是擬南芥中天然維生素E合成途徑中的關(guān)鍵酶。為獲得高產(chǎn)維生素E的油菜種子,科研工作者將編碼HPT的基因HPT1轉(zhuǎn)入油菜細(xì)胞并獲得轉(zhuǎn)基因油菜,流程如圖。請(qǐng)回答相關(guān)問題:(1)為獲得目的基因,科研工作者用擬南芥基因組DNA為模板,用基因HPT1兩端的已知序列設(shè)計(jì)________進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增的原理是________________。(2)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胗筒思?xì)胞,其中用到的質(zhì)粒是________;該質(zhì)粒含有一段特殊的DNA片段,稱為________;該方法中農(nóng)桿菌的作用是________________________________________________________________。(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)選用的酶是___________________________________________________。該操作與常用的同一種酶切割相比,優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________________________________________________。(4)含有目的基因的農(nóng)桿菌可根據(jù)標(biāo)記基因進(jìn)行篩選。若農(nóng)桿菌在含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上都可以生長繁殖,農(nóng)桿菌中是否已含有目的基因?________(填“是”或“否”)。為什么?_______________________________________________________。(5)將已經(jīng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌進(jìn)行如下操作,篩選出符合要求的農(nóng)桿菌。先把轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌接種到A培養(yǎng)基中培養(yǎng),長出菌落后,用無菌牙簽挑取A上的單個(gè)菌落,分別接種到B(含氨芐青霉素)和C(含四環(huán)素和氨芐青霉素)兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位于B或C上的哪些菌落中?請(qǐng)?jiān)趫D中相應(yīng)的位置上圈出來。答案(1)引物DNA半保留復(fù)制(2)Ti質(zhì)粒T-DNA感染油菜細(xì)胞,把目的基因插入到油菜細(xì)胞的染色體DNA上(3)HindⅢ和SalⅠ兩種限制酶和DNA連接酶防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和反向連接,以提高目的基因正向連接的重組質(zhì)粒的合成效率(4)否含有目的基因的重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因被破壞(5)如圖所示解析(2)農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上有T-DNA,目的基因插入到T-DNA上,農(nóng)桿菌感染油菜細(xì)胞后,才能把T-DNA上的目的基因插入到油菜細(xì)胞的染色體DNA上。(3)根據(jù)題圖可知,選用HindⅢ和SalⅠ兩種限制酶可以不破壞目的基因,同時(shí)質(zhì)粒上有相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn);目的基因要插入到切割后的質(zhì)粒的T-DNA上,還需要DNA連接酶的連接。兩種限制酶切割的黏性末端不同,可防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和反向連接,可以提高目的基因正向連接的重組質(zhì)粒的合成效率。(4)由于含有目的基因的重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因被破壞,則含有目的基因的農(nóng)桿菌只能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。(5)根據(jù)上述分析,含有目的基因的農(nóng)桿菌只能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基B上生長,對(duì)比C可得出答案。12.(2023·福州市普通高中畢業(yè)班4月質(zhì)量檢測(cè)改編)基因組中大片段DNA的定向整合擁有廣闊的應(yīng)用前景。目前細(xì)菌中的定向整合系統(tǒng)存在諸多不足,如效率偏低,缺乏有效的篩選標(biāo)記物,可整合的片段大小有限(3~4kb)等。研究者嘗試構(gòu)建CRISPRRNA-guided定向整合系統(tǒng)以改善上述缺陷。(1)Cas蛋白是一種RNA引導(dǎo)的內(nèi)切酶,能催化雙鏈DNA在特定位點(diǎn)斷裂。crRNA是一種短鏈RNA,它一端可與Cas蛋白結(jié)合,另一端通過______________原則與目標(biāo)DNA序列結(jié)合。(2)轉(zhuǎn)座子(Tn)是一段特殊的DNA片段。轉(zhuǎn)座酶A和轉(zhuǎn)座酶B相互結(jié)合后可將Tn從原有的DNA鏈上切下,并將其整合到其他DNA片段上。為了使轉(zhuǎn)座子定向整合到特定的位置,研究者構(gòu)建了圖1所示的CRISPRRNA-guided定向整合系統(tǒng),導(dǎo)入大腸桿菌,并統(tǒng)計(jì)定向整合的效率,結(jié)果如圖2。①構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)將翻譯終止序列設(shè)置在Cas基因和轉(zhuǎn)座酶A基因之后而不是設(shè)置在兩者之間,目的是____________________________________________________________。②

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