散點圖臨床應用

專家審核系統(tǒng)瑞印課堂-走進成都市第一人民醫(yī)院臨床應用專員-王菁菁CAL8000BC6600/BC6900序言患者的困惑序言一份代價幾十萬的報告單序言小測試：這份報告正常嗎？序言一個報警信息改變了整份報告結(jié)果的性質(zhì)序言

高端血球產(chǎn)品容易被忽略的序言目前高端血球儀應用的困境分類準確，精準報警異常形態(tài)，精準提示假性結(jié)果，識別修正血液檢測報告參數(shù)+研究參數(shù)白細胞系(13項白細胞數(shù)目WBC嗜堿性粒細胞數(shù)目Bas#嗜堿性粒細胞百分比Bas%中性粒細胞數(shù)目Neu#中性粒細胞百分比Neu%嗜酸性粒細胞數(shù)目Eos#嗜酸性粒細胞百分比Eos%淋巴細胞數(shù)目Lym#淋巴細胞百分比Lym%單核細胞數(shù)目Mon#單核細胞百分比Mon%未成熟粒細胞數(shù)目IMG#未成熟粒細胞百分比IMG%紅細胞系(10項)紅細胞數(shù)目RBC血紅蛋白濃度HGB平均紅細胞體積MCV平均紅細胞血紅蛋白含量MCH平均紅細胞血紅蛋白濃度MCHC紅細胞分布寬度變異系數(shù)RDW-CV紅細胞分布寬度標準差RDW-SD紅細胞壓積HCT有核紅細胞數(shù)目NRBC#有核紅細胞百分比NRBC%血小板系(6項)血小板數(shù)目PLT平均血小板體積MPV血小板分布寬度PDW血小板壓積PCT大血小板比率P-LCR大血小板數(shù)目P-LCC網(wǎng)織紅系(7項)網(wǎng)織紅細胞百分比RET%網(wǎng)織紅細胞數(shù)RET#未成熟網(wǎng)織紅細胞比例IRF低熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率LFR中熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率MFR高熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率HFR未成熟血小板比例IPF研究參數(shù)(18項)高熒光強度細胞數(shù)目HFC#高熒光強度細胞百分比HFC%RET通道白細胞數(shù)目WBC-RDIFF通道白細胞數(shù)目WBC-DBASO通道白細胞數(shù)目WBC-BNRBC通道白細胞數(shù)目WBC-N光學紅細胞數(shù)目RBC-O光學血小板數(shù)目PLT-O鞘流阻抗通道血小板數(shù)目PLT-I血小板分布寬度標準差PDW-SD感染紅細胞數(shù)目InR#感染紅細胞千分比InR%小紅細胞百分比Micro%小紅細胞數(shù)目Micro#大紅細胞百分比Macro%大紅細胞數(shù)目Macro#平均網(wǎng)織紅細胞體積MRV網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量RHE10白細胞篇01光學算法DIFF通道Diff通道－檢測流程血樣20ulM-68LD溶血劑1.0mlM-68FD染色液20ulDIFF反應池（1:51）散射＋熒光DIFF結(jié)果12淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸性粒細胞紅細胞增加細胞通透性LD溶血劑熒光染色FD染色液熒光強度差異淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸性粒細胞紅細胞體積差異淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸性粒細胞紅細胞復雜度差異細胞處理技術(shù)-DIFF通道S-Scatter散射光（前向、側(cè)向散射光檢測細胞大小、復雜程度）F-Fluorescence熒光（側(cè)向熒光檢測細胞內(nèi)核酸物質(zhì)含量）

Cube

立方體（由散射和熒光信號組成的多維分析技術(shù)）FLSSFStvtvtvFSCSSCFLSSCDIFF通道-激光散射結(jié)合熒光染色多維分析技術(shù)（SFCube）DIFF通道檢測原理—SFCubeSFCube激光散射結(jié)合熒光染色多維分析技術(shù)S-Scatter散射（前向和側(cè)向散射光檢測細胞大小和復雜程度）F-Fluorescence

熒光（側(cè)向熒光檢測細胞內(nèi)被染色的核酸物質(zhì)含量）Cube立方體（由散射和熒光信號組成的多維分析技術(shù)）15淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜堿性粒細胞紅細胞嗜酸性粒細胞單核細胞淋巴細胞紅細胞中性粒細胞嗜堿性粒細胞嗜酸性粒細胞細胞皺縮特殊的嗜堿性粒細胞溶血劑（表面活性劑+甘氨酸緩沖液）將血液中的紅細胞溶解；溶血劑將嗜堿性粒細胞以外的白細胞形成裸核白細胞；細胞處理技術(shù)-BASO通道LB溶血劑通過光散射技術(shù)，收集前向、側(cè)向散射信號，實現(xiàn)嗜堿性粒細胞的區(qū)分。

FSGHOSTBASOtherWBC

SSCellVolumeComplexity第一波進入檢測器，輸出WBC-NNRBC通道第二波進入檢測器，輸出WBC-BBASO通道最后進入檢測器，輸出WBC-RRET通道第三波進入檢測器，輸出WBC-DDIFF通道當WBC-B<1.5時，儀器自動在DIFF檢測時延長3倍的進樣時間，增加了3倍分析粒子總數(shù)。細胞流式技術(shù)-WBC低值樣本的多倍計數(shù)法NRBCBASODIFFRETSStvtvSSFLFL高值WBC/PLT/RBC標本稀釋，單位時間內(nèi)推慢了粒子進樣速度，降低50%濃度。人工指定閾值或下達命令；目前限于血球流水線產(chǎn)品；細胞流式技術(shù)-

WBC高值樣本的流量控制法

Step3：異常細胞的報警標記含義&結(jié)果顯示,因為其他通道的結(jié)果值被修正過E結(jié)果被直接編輯e由于其他參數(shù)結(jié)果被編輯而導致本參數(shù)的值重新計算@結(jié)果超出線性范圍R可疑報警（包含吸樣異常），對數(shù)值產(chǎn)生懷疑H超過參考值范圍上限L低于參考值范圍下限****數(shù)據(jù)異常（包括儀器異常，樣本異常等）++++超出顯示范圍(1)分葉中性粒細胞(2)淋巴細胞(3)單核細胞(4)嗜酸性粒細胞(5)桿狀核細胞(6)幼稚粒細胞(7)異淋/原始細胞(8)感染紅細胞(9)血影細胞(10)嗜堿性粒細胞(11)有核紅細胞(12)血小板聚集可疑類報警SFCube22原始細胞？幼稚粒細胞？一般是指原始粒和原始單核；原始細胞的大小不規(guī)則，熒光強弱差異較大，在散點圖中一般分界不清。幼稚粒細胞在中性粒細胞的上方患者，女，23歲，婦科門診，近兩次月經(jīng)量過多幼稚細胞檢測及報警患者，女，23歲，于半月前發(fā)現(xiàn)雙下肢散在瘀斑，伴牙齦出血，有頭暈、乏力，近兩次月經(jīng)量偏多，后診斷為急性早幼粒細胞白血病。提示：儀器DIFF散點圖的未成熟粒細胞敏感區(qū)域大量散點，BASO散點圖出現(xiàn)異常，說明可能存在大量幼稚粒細胞。幼稚細胞檢測及報警異常淋巴/原始？異型淋巴細胞？一般指幼稚和原始淋巴細胞，形態(tài)大小不規(guī)則，熒光強度差異較大，一般在散點圖中與其它細胞分界不清。異型淋巴細胞和漿細胞一般形態(tài)大小比較規(guī)則，熒光強度相差不大；在散點圖中，與其他細胞分界比較清楚。異型淋巴細胞報警提示—異型淋巴細胞增多BC-6800檢測結(jié)果結(jié)果說明儀器結(jié)果顯示W(wǎng)BC值正常，儀器給出了“異型淋巴細胞？”、“異常淋巴細胞/原始細胞？”等Message報警儀器給出“碎片？”，“小細胞性紅細胞”、“血小板直方圖異常”等Message報警，表示PLT-I可能有干擾，結(jié)出“&”符號，PLT最后報告為PLT-O的結(jié)果27異型淋巴細胞報警提示—異型淋巴細胞增多BC-6800檢測圖形圖形分析儀器DIFF散點圖上高熒光細胞區(qū)散點明顯稠密（箭頭所指），與異型淋巴細胞偏高的現(xiàn)象一致28異型淋巴細胞報警提示—異型淋巴細胞增多BC-6800研究參數(shù)及三維圖圖形分析:在研究參數(shù)界面可見高熒光細胞數(shù)量和百分比較高，提示可能異型淋巴細胞含量偏高;DIFF三維散點圖上高熒光細胞區(qū)散點明顯稠密（箭頭所指），與異型淋巴細胞偏高的現(xiàn)象一致。29患者，男，35歲，呼吸內(nèi)科門診患者，2017年3月21號抽取抗凝靜脈血進行血常規(guī)測試

。臨床信息人工鏡檢信息白細胞分類(n=200)中性桿狀核0%中性分葉核38%淋巴細胞45%異型淋巴細胞11%單核細胞4%嗜酸粒細胞1%嗜堿粒細胞1%血涂片鏡檢分析鏡下可見較多異型淋巴細胞；紅細胞大小均一，以小紅細胞為主

鏡下觀察白細胞、紅細胞、血小板形態(tài)均正常圖中：1、2、3異型淋巴細胞4中性分葉核粒細胞5紅細胞6血小板異型淋巴細胞報警提示—異型淋巴細胞增多13245630BC-6800檢測結(jié)果異型淋巴細胞報警提示—漿細胞增多結(jié)果說明儀器結(jié)果顯示W(wǎng)BC值正常，儀器給出了“異型淋巴細胞？”、“異常淋巴細胞/原始細胞？”等Message報警31異型淋巴細胞報警提示—漿細胞增多BC-6800檢測圖形圖形分析儀器DIFF散點圖上高熒光細胞區(qū)散點明顯稠密（箭頭所指），與漿細胞偏高的現(xiàn)象一致32異型淋巴細胞報警提示—漿細胞增多BC-6800研究參數(shù)結(jié)果分析研究參數(shù)界面可見高熒光細胞數(shù)量和百分比較高，提示可能異常細胞含量偏高33患者，女，43歲，血液內(nèi)科門診患者，2017年5月8日號抽取抗凝靜脈血進行血常規(guī)測試

。臨床信息人工鏡檢信息白細胞分類(n=200)中性桿狀核5%中性分葉核22.5%淋巴細胞51.5%單核細胞0%嗜酸粒細胞0.5%嗜堿粒細胞0%漿細胞20.5%血涂片鏡檢分析鏡下可見漿細胞明顯增多，同時可見紅細胞的緡錢狀聚集

鏡下觀察白細胞、紅細胞、血小板形態(tài)均正常圖中：1、2漿細胞3紅細胞4血小板異型淋巴細胞報警提示—漿細胞增多124334有核紅細胞？感染紅細胞？時間:2011-07-25---2011-08-20地點:印度孟買DR.BhideLab共收集：合格樣本497例，其中含瘧原蟲的樣本約248例檢測樣本497例瘧原蟲樣本248例滋養(yǎng)體期75例裂殖體期169例配子體期4例間日虐184例惡性瘧64例BC-6800對裂殖體的檢測具有較高的特異性（99.6%）及敏感性（88.2%），對滋養(yǎng)體檢測略差。BC-6800對間日虐檢測結(jié)果優(yōu)于對惡性瘧檢測結(jié)果。臨床檢驗雜志2012年3月第1卷第1期錢程《一個離群點引發(fā)的思考----邁瑞血細胞分析儀瘧原蟲感染檢測研究進展》DIFF通道：SF-Cube異常細胞識別—瘧疾瘧原蟲感染檢測與報警患者，男，37歲，血液內(nèi)科門診患者，2011年8月4日抽取抗凝靜脈血進行血常規(guī)測試，后確認為瘧原蟲感染瘧原蟲感染檢測與報警提示：儀器DIFF散點圖出現(xiàn)明顯異常，Neu和Eos之間散點明顯增多。脂質(zhì)顆粒？白細胞散點圖異常？含大量脂質(zhì)顆粒的部分樣本，在BASO圖和DIFF三維散點圖中會出現(xiàn)特殊的S曲線。DIFF通道細胞亞群之間邊界不清邊界顆粒達到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則；BASO通道細胞亞群之間邊界不清邊界顆粒達到一定數(shù)量觸發(fā)；邊界異常：對應的粒子團相關(guān)參數(shù)打“R”標記；邊界嚴重重疊：對應的粒子團相關(guān)參數(shù)屏蔽結(jié)果；DIFF通道：粒子群分離度數(shù)字增強技術(shù)識別—脂質(zhì)嗜堿性粒細胞增多嗜酸性粒細胞增多未成熟粒細胞增多異常淋巴/原始？感染紅細胞血小板聚集有核紅細胞網(wǎng)織紅細胞增多異型淋巴單核細胞增多中性粒細胞增多脂質(zhì)干擾紅細胞篇

02細胞種類細胞體積存在位置細胞核DNA/RNA有核紅細胞較大骨髓有有網(wǎng)織紅細胞中等骨髓和外周血無有成熟紅細胞較小外周血無無RBC/PLT通道-雙鞘流阻抗技術(shù)前鞘后鞘PLTRBC紅細胞直方圖正常RBC直方圖RBC直方圖異常雙峰紅細胞RBC聚集/減少缺鐵性貧血治療過程RBC直方圖變化紅細胞凝集

2018.1.16

檢驗科老師遇到這樣一例標本，患者女，3歲，咳嗽伴咳痰，流清涕，體溫37.4℃，急性呼吸道感染，急查血常規(guī)。血常規(guī)檢測結(jié)果如下：結(jié)果分析：結(jié)果可見RBC和HCT顯著降低，MCH和MCHC異常增高，MCHC高達629g/L，RBC與HGB比例明顯異常，RDW-CV和RDW-SD結(jié)果為***，RBC報警：紅細胞凝集？紅細胞凝集根據(jù)國際血液學復檢專家組確定的復檢規(guī)則[1]：第13條——平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）≥380g/L紅細胞凝集

冷凝集素又稱冷型自身抗體，多為IgM抗體，大部分正常人群中都存在冷凝集素，但其效價多小于１:16，高效價的冷凝集素能凝集自身或“Ｏ”型人的紅細胞，是紅細胞自身免疫性抗體。RBC意外凝集的發(fā)生與凝集程度同冷凝集素的水平及環(huán)境溫度呈正比，多數(shù)冷凝集素在４℃活性最強，出現(xiàn)顆粒樣凝集，因此又稱抗Ⅰ冷型血凝集素。冷凝集素效價輕度增高目前已發(fā)現(xiàn)許多疾病會引起冷凝集素升高，如支原體肺炎[2]、急性感染性疾病（扁桃體炎、猩紅熱），寄生蟲?。ǒ懠?、絲蟲?。斡不?，妊娠，病毒感染（HIV，水痘），輸血時均會引起冷凝集素升高[3]，高效價冷凝集素主要見于原發(fā)性冷凝集素綜合征。在臨床檢驗中冷凝集素不僅會引起血細胞分析儀結(jié)果異常[4]，也可引起血型正反定型鑒定結(jié)果不一致[5]。其中血細胞分析儀的異常結(jié)果多出現(xiàn)RBC明顯降低，紅細胞中各計算項目如平均紅細胞血紅蛋白含量、平均血紅蛋白濃度等結(jié)果異常，但是WBC、PLT及HGB結(jié)果變化不大。常見針對冷凝集素引起的血細胞分析儀檢測結(jié)果異常，大多采用37℃水浴10min后重測可以獲得修正結(jié)果，但高效價的冷凝集素標本，可采用血漿置換法或生理鹽水置換血漿法，據(jù)此得出的結(jié)果與真實值吻合，可用于臨床實際工作。[6][1]BarnesPW,McfaddenSL,MachinSJ,etal.Theinternationalconsensusgroupforhematologyreview:suggestedcriteriaforactionfollowingautomatedCBCandWBCdifferentialanalysis[J].LabHematol,2005,11(2):83.[2]

金曉東,孫龍,陳然峰.肺炎支原體肺炎導致紅細胞嚴重冷凝集的臨床診治探討[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2015(20):3591-3592.[3]

曾德鴻.冷凝集素臨床研究進展[J].廣西醫(yī)學,1998(6):1077-1080.[4]

樂家新,馬駿龍,徐菡,等.紅細胞冷凝集對不同類型血細胞分析儀檢測結(jié)果的影響探討[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備,2009,30(2):69-71.[5]

張晨光,龐桂芝,趙慶偉,等.高效價冷凝集素致交叉配血困難分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學,2007,34(5):958-960.[6]

唐友云,桂滿元.冷凝集素對血常規(guī)的影響及不同處理方法的分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2014(17):2401-2403.紅細胞凝集水浴前檢測結(jié)果水浴后檢測結(jié)果MR冷凝集報警邏輯高白細胞說明：1）WBC值超高，未給分類結(jié)果，多項參數(shù)報警異常；2）RBC值為2.99，HGB值為94，儀器能對RBC和MCV進行修正。RET通道-激光散射結(jié)合熒光染色多維分析技術(shù)（SFCube）DR（三羥甲基氨基甲烷緩沖液）在血細胞檢測過程中對紅細胞進行球形化處理；FR（熒光染料+甘醇）對網(wǎng)織紅細胞核酸物質(zhì)進行快速染色；紅細胞網(wǎng)織紅細胞血小板紅細胞網(wǎng)織紅細胞血小板紅細胞網(wǎng)織紅細胞血小板細胞球形化熒光染色熒光強度激光照射細胞激光照射細胞球形化前激光照射細胞激光照射細胞球形化后DR稀釋液FR稀釋液RBC-O*LFRMFRHFRWBC-R*MFRHFRIRF未成熟網(wǎng)織紅細胞比例PLT-O*依據(jù)RET散射光信息計算得到RHE*MRV*全自動網(wǎng)織紅細胞檢測51LFRMFRHFRIRF網(wǎng)織紅細胞增多BC-6800檢測結(jié)果結(jié)果說明儀器檢測RBC、HGB、HCT結(jié)果偏低，RET%檢測結(jié)果明顯偏高，同時儀器給出了“網(wǎng)織紅細胞增加”、“網(wǎng)織紅散點圖異?！?、“碎片”等Message提示53網(wǎng)織紅細胞增多BC-6800檢測圖形圖形分析儀器RET散點圖上，RET敏感區(qū)散點明顯稠密，同時RBC直方圖及PLT直方圖均出現(xiàn)異常（懷疑為紅細胞碎片干擾）54NRBC通道-激光散射結(jié)合熒光染色多維分析技術(shù)（SFCube）LN（檸檬酸緩沖液）在血細胞檢測過程中溶解紅細胞；FN（熒光染料+甘醇）對有核紅細胞核酸物質(zhì)進行染色；白細胞紅細胞有核紅細胞紅細胞有核紅細胞白細胞白細胞有核紅細胞紅細胞細胞通透性熒光染色熒光強度LN溶血劑FN染色液有核紅細胞的檢測可用于自動糾正白細胞的計數(shù)和分類結(jié)果NRBC%WBC-N*

NRBC%有核紅細胞百分比NRBC#有核紅細胞數(shù)目白細胞分類修正血小板篇

03血小板檢測-病理性血小板是由骨髓造血組織中巨核細胞產(chǎn)生，具有維持血管內(nèi)皮完整性以及粘附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮等功能。血小板計數(shù)：血小板計數(shù)為（20-50）×109/L，可有輕度出血或手術(shù)后出血；低于20×109/L，可有較嚴重的出血，低于5×109/L時，可導致嚴重出血；血小板超過400×109/L為血小板增多。病理血小板減少和增多的原因及臨床意義見下表：血小板計數(shù)原因臨床意義減少生成障礙急性白血病、再障、骨髓腫瘤、放射性損傷、巨幼細胞性貧血等破壞過多特發(fā)性血小板減少性紫癜、脾抗、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等消耗過多DIC、血栓性血小板減少性紫癜等分布異常脾大、血液被稀釋等先天性新生兒血小板減少癥、巨大血小板綜合征等增多原發(fā)性慢粒、原發(fā)性血小板增多癥、真紅細胞增多癥等反應性急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等其他外科手術(shù)后、脾切除等原因假性減低采集標本不順利手指采血：采血速度慢、出血不暢、擠壓采血部位等都會造成血小板假性減少；靜脈彩血：因多次穿刺而引起水腫及皮下出血，組織凝血因子混入血標本中產(chǎn)生小凝塊造成血小板假性減少。大血小板血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞等分開，致使許多大血小板被當成紅細胞而未計入血小板計數(shù)池，造成血小板假性減少。EDTA依賴性減少EDTA能夠誘導血小板活化，使血小板表面隱藏的抗原暴露，與血漿中的抗體結(jié)合，活化的血小板能夠釋放花生四烯酸/膠原等活性物質(zhì)，使血小板聚集造成血小板假性減少。血小板衛(wèi)星現(xiàn)象因EDTA抗凝中血小板黏附于分葉核粒細胞表面，形成“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”，此巨大血小板未通過血小板計數(shù)而引起血小板假性減少。血小板冷凝集原發(fā)性巨球蛋白血癥患者的冷球蛋白使血液中的非晶體物質(zhì)聚集發(fā)生冷凝集而引起血小板假性減少。原因假性增高裂紅細胞增多溶血性疾?。貉褐谐霈F(xiàn)較多的紅細胞碎片，因這些碎片會被劃分到血小板區(qū)域從而干擾血小板計數(shù)造成血小板假性增多。小紅細胞增多

患者的紅細胞體積<70fl的小紅細胞多見時，部分極小紅細胞會計入血小板數(shù)，引起血小板假性增高。血小板檢測-假性血小板直方圖（PLT-I）儀器報警：“血小板聚集