TSPPHN 001-2024 擴散前沿區(qū)柑橘黃龍病可持續(xù)防控技術(shù)規(guī)程

ICS01.040.65CCSB15/19湖南省植物保護學(xué)會團體標(biāo)準(zhǔn)T/SPPHN001-2024擴散前沿區(qū)柑橘黃龍病可持續(xù)防控技術(shù)規(guī)程CodeofSustainablePreventionandControlofCitrusHuanglongbingintheDiffusionFrontierZone2024-06-05發(fā)布 2024-06-05實施湖南省植物保護學(xué)會 發(fā)布T/SPPHN001-2024T/SPPHN001-2024II前 言本文件是根據(jù)GB/T1.1-20201本文件由湖南省植物保護學(xué)會提出。本文件由湖南省植物保護學(xué)會歸口。本文件起草單位為湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)、贛南師范大學(xué)。本文件主要起草人：王運生、戴良英、易龍、戴素明、李大志、宋娜、李娜、周俊、胡威、鮑敏麗。T/SPPHN001-2024T/SPPHN001-2024PAGEPAGE1擴散前沿區(qū)柑橘黃龍病可持續(xù)防控技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了擴散前沿區(qū)柑橘黃龍病可持續(xù)防控的術(shù)語和定義、檢疫、預(yù)防、診斷、防控等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于擴散沿區(qū)柑橘黃龍病可持續(xù)防控。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB5040柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程GB4285 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)GB/T8321 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則GB15569 農(nóng)業(yè)植物調(diào)運檢疫規(guī)程GB/Z26580 柑橘生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范GB/T28062 PCR檢測方法GB/T29393 柑桔黃龍病菌的檢疫檢測與鑒定GB/T35333 柑橘黃龍病監(jiān)測規(guī)范NY/T973 柑橘無病毒苗木繁育規(guī)程NY/T974 柑橘苗木脫毒技術(shù)規(guī)范NY/T975 柑橘栽培技術(shù)規(guī)程NY/T2920 柑橘黃龍病防控技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義GB/T35333和界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。柑橘黃龍?。–itrusHuanglongbing）柑橘黃龍病是一類由韌皮部寄生的革蘭氏陰性菌韌皮部桿菌引起的柑橘類系統(tǒng)性植物病害，是一種病原體觸發(fā)的免疫疾病。柑橘黃龍病的傳播方式主要有柑橘木虱傳播和嫁接傳播，造成柑橘葉片黃化、果實品質(zhì)下降、產(chǎn)量降低、樹勢衰退甚至死亡。CitrusHuanglongbingDiffusionFrontZones1頭。擴散前沿區(qū)柑橘黃龍病防控策略NY/T2920防控措施病害監(jiān)測定期對果園進行巡查監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)疑似病株，及時抽取送檢，確診為病株后，以病株為中心，周圍25-8片葉子，B。園區(qū)生態(tài)隔離460目及以上的防蟲網(wǎng)圍住。新果園要全面清除園內(nèi)及周NY/T975規(guī)定。種植無病蟲種苗GB5040-2003，GB15569-2009NY/T973-20063年以下小苗在苗圃進行集中管理，果園定殖3年以上大苗。栽培管理NY/T975的規(guī)定執(zhí)行。清除病株挖除病樹之前1-3天，對病樹及附近植株施用防治木虱觸殺性藥劑，將病樹連根挖除，對于不能10失管果園防控木虱防治農(nóng)業(yè)防治5kg~10140g~50g。梢期管理，采取分批抹梢、統(tǒng)一打頂?shù)姆椒?，以達(dá)到統(tǒng)一放梢的目的。通過合理的肥水管理和栽培管理，統(tǒng)一放春梢，通過抹梢、以梢控梢、殺梢等手段控制夏秋梢。物理防治在樹冠外圍中上部懸掛粘蟲黃板，每畝20片~30片。化學(xué)防治防治原則施藥方法及時期采用飛防或噴霧器噴霧法，重點施藥新梢部位。新梢2cm~3cm噴第一次藥，10d~15d后噴第二次藥，藥劑選擇見附件C。農(nóng)藥使用按照GB4285和GB/T8321的規(guī)定執(zhí)行。檔案管理與保存D。附錄A柑橘黃龍病癥狀葉片黃化均勻黃化葉片：葉片呈現(xiàn)均勻的淺黃綠色。斑駁型黃化葉片：葉片呈現(xiàn)黃、綠相間的不均勻斑塊狀。果實癥狀與缺素癥狀的區(qū)別B）和分析。 枝條均勻黃化 斑駁黃化紅鼻子果 柑橘黃龍病后期癥狀附錄B柑橘黃龍病分子檢測DNA用CTAB法提取總DNA，主要步驟如下：100mg1.5mL離心管中，加入500μL2%CTAB(65°C預(yù)熱）；（2）65°C水浴30min，期間每7分鐘顛倒混勻；2min500μL氯仿異戊醇（24：1）5min；-20°C10min，10000rpm4°C20min;340μL冷凝的異丙醇，輕輕混勻，-20°C30min;500μL75%乙醇洗兩次，倒掉乙醇晾干;50μL無菌水，65°C3minDNAPCR檢測。PCRPCR檢測引物序列，上游引物：GGAGAGGTGAGTGGAATTCCGA，下游引物：ACCCAACATCTAGGTAAAAACC。擴增片斷大?。杭s500bp。PCR擴增反應(yīng)體系試劑（μL）上游引物（10μmol/L）0.5下游引物（10μmol/L）0.5Mix10模板DNA2加ddH2O至20PCR擴增反應(yīng)參數(shù)電泳及成像電泳將PCR擴增產(chǎn)物10μL與3μL上樣緩沖液(5×)和2μLSYBRGreenI(1×)1.5%D2000標(biāo)準(zhǔn)分子量DNA120V電壓電泳約30mn。成像及分析將電泳后的瓊脂糖凝膠放置于凝膠成像系統(tǒng)內(nèi)，打開紫外燈，在凝膠成像系統(tǒng)控制軟件上觀察PCR擴增條帶。結(jié)果判定1圖1柑橘黃龍病PCR檢測電泳圖，圖中顯示樣本2、3為陽性，樣本1為陰性檢測后樣品的處理基因組DNA提取液放置于-20℃冰箱中保存，以備復(fù)檢；用于檢測的樣品和用具，樣品應(yīng)保存于-80℃冰箱或集中銷毀，用具應(yīng)進行滅菌處理。附錄C柑橘木虱防治藥劑序號防治藥劑使用方法使用次數(shù)安全間隔期（天）1100克/升聯(lián)苯菊酯1667倍~3333倍噴霧37255%氯氰·毒死蜱1000倍~1500倍噴霧37325克/升聯(lián)苯菊酯800倍~1200倍噴霧374100克/升吡丙醚1000倍~1500倍噴霧37517%氟吡呋喃酮3000倍~4000倍噴霧37626%聯(lián)苯·螺蟲酯5000倍~6000倍噴霧37730%螺蟲·吡丙醚3000倍~5000倍噴霧37840%啶蟲·毒死蜱2667倍~3200倍噴霧37915%阿維·螺蟲酯2500倍~3500倍噴霧371028%阿維·螺蟲酯5000倍~7000倍噴霧371125%吡丙·噻嗪酮1500倍~2500倍噴霧371220%阿維·螺蟲酯3500倍~4500倍噴霧371330%螺蟲·噻蟲嗪4000倍~5000倍噴霧371435%螺蟲·噻嗪酮2000倍~3000倍噴霧37152.50%高效氟氯氰菊酯1500倍~2500倍噴霧37164.50%聯(lián)苯菊酯1500倍~2500倍噴霧371722%螺蟲·噻蟲啉3000倍~5000倍噴霧371880億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa4211000倍~2000倍噴霧37195%香芹酚800倍~1200倍噴霧372030%噻蟲嗪4000倍~6000倍噴霧372151.50%高氯·毒死蜱1000倍~2000倍噴霧3722522.5克/升氯氰·毒死蜱1000倍~1500倍噴霧372334%啶蟲·毒死蜱1500倍~2500倍噴霧372440%螺蟲·毒死蜱2000倍~3000倍噴霧372510%虱螨脲3000倍~5000倍噴霧372620%螺蟲·噻蟲嗪4000倍~6000倍噴霧372730%吡丙·噻嗪酮2000倍~3000倍噴霧372820%聯(lián)苯·噻蟲啉3000倍~4000倍噴霧372925%喹硫磷1500倍~2000倍噴霧373070%螺蟲乙酯8000倍~12000倍噴霧373110.50%高氯·啶蟲脒2000倍~3000倍噴霧373230%螺蟲·噻蟲嗪3000倍~4000倍噴霧373322.40%螺蟲乙酯4000倍~5000倍噴霧37