2023核酸產(chǎn)業(yè)白皮書(shū)

核酸產(chǎn)業(yè)白皮書(shū)第一章核酸藥物前景廣闊，進(jìn)入黃金發(fā)展階段 6第二章核酸藥物的商業(yè)化一覽 8一、國(guó)內(nèi)外商業(yè)化現(xiàn)狀 81.核酸藥物市場(chǎng)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀 82.兩款上市mRNA新冠疫苗的商業(yè)化經(jīng)驗(yàn) 3.國(guó)內(nèi)mRNA新冠疫苗的商業(yè)化之路 17二、核酸，融資寒冬的一股暖流 201.國(guó)內(nèi)mRNA市場(chǎng)再度迎來(lái)熱潮 202.國(guó)內(nèi)核酸藥融資爆發(fā) 213.海外核酸藥向更遠(yuǎn)處探索 25第三章技術(shù)特點(diǎn)及應(yīng)用現(xiàn)狀 27一、mRNA技術(shù)的成藥 27二、mRNA療法的臨床優(yōu)勢(shì) 30三、小核酸藥物優(yōu)勢(shì) 32四、小核酸上游工藝 33五、mRNA技術(shù)已布局三大領(lǐng)域 351.預(yù)防性疫苗 362.治療性疫苗 373.治療性藥物 38六、mRNA療法的開(kāi)發(fā)挑戰(zhàn)與解決策略 401.穩(wěn)定性和遞送效率 402.mRNA的免疫原性 44七、小核酸藥物研發(fā)挑戰(zhàn)與關(guān)鍵技術(shù) 47第四章未來(lái)技術(shù)核心：序列設(shè)計(jì)和遞送系統(tǒng)的布局和進(jìn)展 48一、序列設(shè)計(jì) 481.序列設(shè)計(jì)的作用 482.國(guó)內(nèi)外的序列設(shè)計(jì)布局 483.國(guó)內(nèi)外的序列設(shè)計(jì)進(jìn)展 514.mRNA序列技術(shù)的未來(lái)發(fā)展 54二、核酸藥物下一個(gè)十年的關(guān)鍵所在：解決肝外靶向遞送 551.遞送系統(tǒng)是核酸藥物的破局攻略 552.國(guó)內(nèi)mRNA企業(yè)遞送系統(tǒng)開(kāi)發(fā) 563.國(guó)內(nèi)外的遞送系統(tǒng)布局 644.國(guó)內(nèi)外的遞送技術(shù)進(jìn)展 685.小核酸藥物遞送系統(tǒng) 73第五章核酸技術(shù)應(yīng)用百景圖 74一、mRNA適應(yīng)癥拓展 741.全球大量布局mRNA療法 742.拓展大量不同適應(yīng)癥 763.按遞送器官分類(lèi) 78二、mRNA聯(lián)合療法 801.iPSC 802.外泌體 813.CAR-T 824.CAR-M 845.工程化 85三、技術(shù)新潮流 851.mRNA藥物打印機(jī) 852.寡核苷酸 862.自擴(kuò)增RNA 863.microRNA（miRNA） 874.可編程表觀遺傳藥物 885.凍干粉mRNA疫苗 896.助心臟細(xì)胞再生 90第六章后疫情時(shí)代，核酸領(lǐng)域國(guó)內(nèi)外龍頭企業(yè)的布局 90一、國(guó)外三大巨頭mRNA企業(yè) 901.Moderna 902.BioNTech 943.CureVac 96二、國(guó)內(nèi)mRNA新冠疫苗龍頭企業(yè) 971.艾博生物 982.斯微生物 1003.麗凡達(dá)生物 101三、寡核苷酸優(yōu)勢(shì)及龍頭企業(yè) 1031.DyneTherapeutics 1032.TallcTherapeutics 1043.DenaliTherapeutics 105四、小核酸三巨頭 1061.Alynlam 1062.Ionis 1063.SareptaTherapeutic 106第七章核酸療法的臨床思考 107一、SARS-CoV-2mRNA疫苗申報(bào)臨床藥學(xué)研究一般原則及評(píng)價(jià)思考 1071.SARS-CoV-2mRNA疫苗研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)控制相關(guān)思考 1072.目標(biāo)抗原選擇及DNA模板設(shè)計(jì) 1093.mRNA疫苗遞送系統(tǒng)開(kāi)發(fā) 1094.生產(chǎn)工藝及質(zhì)量研究 1105.佐劑 1106.生物活性檢測(cè) 1117.研發(fā)期間的工藝變更 111三、mRNA療法的臨床應(yīng)用及進(jìn)展 1121.臨床應(yīng)用方向 112第八章國(guó)內(nèi)現(xiàn)狀 128一、行業(yè)現(xiàn)狀 1281.國(guó)外mRNA的商業(yè)化方面 1282.國(guó)外mRNA的專(zhuān)利方面 1293.國(guó)內(nèi)mRNA的企業(yè)管線進(jìn)展 1304.miRNA臨床現(xiàn)狀 132二、國(guó)內(nèi)mRNA研發(fā)公司一覽 134三、國(guó)內(nèi)小核酸研發(fā)公司一覽 139四、國(guó)內(nèi)合作現(xiàn)狀 1401.不同領(lǐng)域?qū)RNA技術(shù)/平臺(tái)的選擇 1402.BigPharma尋找新的增長(zhǎng)點(diǎn) 1423.新冠mRNA候選疫苗賽道的合作模式 143第九章上下游的相關(guān)企業(yè) 147一、mRNA上游企業(yè)與其縱橫合作 1471.原材料類(lèi) 1482.生產(chǎn)設(shè)備類(lèi) 152二、mRNA的CDMO企業(yè) 1531.mRNACDMO：藥物研發(fā)與生產(chǎn)的重要助力 1532.mRNA三巨頭與CDMO合作情況 1543.國(guó)內(nèi)主要布局mRNA的CDMO現(xiàn)狀 155三、冷鏈運(yùn)輸與凍融技術(shù)發(fā)展 165第十章mRNA疫苗的工藝 170一、工藝流程 170二、mRNA下游工藝之純化 1721.mRNA純化的重要性 1722.下游工藝的一般純化流程及作用 1733.mRNA純化方法詳解 174三、mRNA下游工藝之包封 1791.包封的意義 1792.包封的做法及步驟 1793.LNP-mRNA包封率檢測(cè) 1814.LNP-mRNA的挑戰(zhàn) 182四、mRNA體外合成優(yōu)化策略 1841.模板線性化 1862.體外轉(zhuǎn)錄 1873.轉(zhuǎn)錄后修飾 1884.模板降解 189五、USP指南草案:解讀mRNA疫苗質(zhì)量分析方法 1901.原料藥質(zhì)量評(píng)估 1912.RNA鑒定 1923.RNA定量 1924.RNA的完整性 1935.RNA的純度 194六、mRNA的體外穩(wěn)定性分析方法 1951.導(dǎo)致mRNA疫苗體外不穩(wěn)定的因素 1952.mRNA體外穩(wěn)定性的分析方法 195第十一章核酸領(lǐng)域的政策法規(guī) 199一、國(guó)外的mRNA政策法規(guī) 1991.USP《mRNA疫苗質(zhì)量分析流程》草案 2002.WHO文件 203二、國(guó)內(nèi)的mRNA政策法規(guī) 2051.國(guó)家“十四五”醫(yī)藥工業(yè)發(fā)展規(guī)劃 2052.《體外基因修飾系統(tǒng)藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》 2063.《新型冠狀病毒預(yù)防用疫苗研發(fā)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》 207三、mRNA企業(yè)該如何應(yīng)用政策法規(guī) 208第一章核酸藥物前景廣闊，進(jìn)入黃金發(fā)展階段與其他小分子、生物大分子藥相比，核酸藥物的研發(fā)不僅生產(chǎn)過(guò)程更加省時(shí)、便捷，更有在原理上標(biāo)本兼治、更長(zhǎng)效的顯著優(yōu)勢(shì)。再加上隨著諾貝爾獎(jiǎng)的落歸，核酸藥物受到了越來(lái)越多的投資人青睞，成為了各大制藥公司積極布局的重要賽道。核酸藥物的研發(fā)歷經(jīng)40多年的發(fā)展，從“無(wú)人問(wèn)津”到“門(mén)庭若市”，其基本原理與機(jī)制的完善總體可大致分成3個(gè)階段：第一階段1956年，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)雙鏈RNA在RNA沉默中扮演了重要的角色，由此拉開(kāi)了基于RNA研發(fā)藥物的序幕；第二階段1978年和1998年，ASO和RNA干擾機(jī)制相繼被發(fā)現(xiàn)，多種小核酸藥物逐漸進(jìn)入人們的視線；第三階段為2020年后新冠大流行期間，兩款mRNA疫苗的上市正式宣告mRNA技術(shù)進(jìn)入商業(yè)化時(shí)代，新冠mRNA疫苗得到廣泛應(yīng)用，也讓越來(lái)越多的投資者關(guān)注到核酸藥物的潛力。核酸藥物有望成為繼小分子藥、抗體藥物后第三大藥物類(lèi)型，mRNA技術(shù)進(jìn)入快速發(fā)展的黃金年代?！『怂崴幬锏陌l(fā)展歷程（來(lái)源：BiotechnolAdv）核酸藥物包括小核酸藥物及mRNA藥物，小核酸藥物是指具有疾病治療功能的DNA或RNA片段，能夠直接作用于致病靶基因或致病靶mRNA，在基因水平上發(fā)揮治療疾病的作用。小核酸藥物主要包括反義核酸（ASO）、小干擾RNA（siRNA）、微小RNA（miRNA）、小激活RNA（saRNA）、適配體（aptamer）等。mRNA藥物主要是利用化學(xué)修飾后的信使RNA分子進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，利用細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的自有核苷酸進(jìn)行轉(zhuǎn)錄表達(dá)，生成機(jī)體所需要的蛋白質(zhì)。中國(guó)目前不僅是全球最大的核苷酸生產(chǎn)市場(chǎng)，在技術(shù)上也逐漸突破國(guó)際壁壘，雖然大多數(shù)企業(yè)仍處于發(fā)展早期，但在環(huán)狀RNA與腫瘤RNAi療法等部分新興領(lǐng)域走在了世界前列。回顧發(fā)展史，不難發(fā)現(xiàn)核酸藥物目前仍處于不斷涌現(xiàn)前沿技術(shù)的發(fā)展過(guò)程之中，打好修飾與遞送技術(shù)方面的優(yōu)化和革新的重要根基，才能更快更好的推動(dòng)核酸藥物企業(yè)的發(fā)展。在此基礎(chǔ)上，研究核酸藥物的聯(lián)合用藥與個(gè)性化治療或?qū)⒊蔀獒槍?duì)藥物治療效果的突破口，適應(yīng)癥拓展尤其是大適應(yīng)癥的開(kāi)拓，將成為持續(xù)擴(kuò)大行業(yè)市場(chǎng)的最強(qiáng)引擎。國(guó)外mRNA的產(chǎn)業(yè)化也是近10幾年的事，除國(guó)際頭部公司外，國(guó)內(nèi)外大多數(shù)mRNA療法的研究都處于快速發(fā)展追趕階段。mRNA新冠疫苗的開(kāi)發(fā)和成功應(yīng)用，為mRNA療法的研究積累了更多經(jīng)驗(yàn)和信心。人類(lèi)對(duì)目前mRNA藥物的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和遞送系統(tǒng)都在不斷優(yōu)化，加之潛在受眾龐大，該領(lǐng)域必定會(huì)有更進(jìn)一步的發(fā)展。基于目前腫瘤免疫治療的現(xiàn)狀以及mRNA藥物的局限性，未來(lái)的研究應(yīng)可能主要集中在研發(fā)mRNA疫苗的最佳保存載體、優(yōu)化免疫佐劑、實(shí)施聯(lián)合給藥方案、簡(jiǎn)化給藥方法和提高轉(zhuǎn)化效率以增強(qiáng)靶向性，從而提高其抗腫瘤作用。當(dāng)下mRNA疫苗風(fēng)頭正勁，特斯拉CEO埃隆·馬斯克(ElonMusk)曾在采訪中表示：醫(yī)學(xué)的未來(lái)是mRNA，基本上你可以用mRNA治愈一切，它就像一個(gè)計(jì)算機(jī)程序，你可以對(duì)它進(jìn)行編程以執(zhí)行所需的任何操作，你實(shí)際上可以變成一只蝴蝶。第二章核酸藥物的商業(yè)化一覽一、國(guó)內(nèi)外商業(yè)化現(xiàn)狀1.核酸藥物市場(chǎng)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀1.1mRNA疫苗全球市場(chǎng)規(guī)模圖源：Frost&SullivanmRNA疫苗為通用的平臺(tái)型技術(shù)，提供了靈活的、快速的、大規(guī)模的、具有成本效益的生產(chǎn)流程，面對(duì)新冠大流行威脅時(shí)，優(yōu)勢(shì)明顯。與此同時(shí)，根據(jù)III期臨床結(jié)果，mRNA新冠疫苗表現(xiàn)出了優(yōu)于其他新冠疫苗的保護(hù)效力和對(duì)免疫系統(tǒng)的激活能力。2020年是mRNA疫苗突破性的一年，由Pfizer/BioNTech、Moderna分別研發(fā)的兩款mRNA新冠疫苗獲緊急使用授權(quán)。2021年，兩款mRNA新冠疫苗全球銷(xiāo)售收入高達(dá)587億美元，均遠(yuǎn)超其他新冠疫苗的銷(xiāo)售額。短期來(lái)看，mRNA產(chǎn)品未來(lái)市場(chǎng)主要貢獻(xiàn)者仍然將是新冠疫苗。除新冠外，在預(yù)防性疫苗領(lǐng)域，主要市場(chǎng)機(jī)會(huì)在于未被滿足的免疫需求，如針對(duì)Zika、HIV、EBV、RSV等病毒進(jìn)行開(kāi)發(fā)。在腫瘤治療領(lǐng)域，mRNA設(shè)計(jì)生產(chǎn)快速，在個(gè)性化腫瘤疫苗方面存在一定的優(yōu)勢(shì)，BioNTech和Moderna均有相應(yīng)管線進(jìn)入臨床階段，但在腫瘤疫苗的應(yīng)用目前仍處于概念驗(yàn)證階段；在蛋白替代療法領(lǐng)域，目前仍有關(guān)鍵技術(shù)瓶頸，未來(lái)需要跨越靶向性差和表達(dá)不穩(wěn)定兩大障礙。1.2寡核苷酸市場(chǎng)增長(zhǎng)迅速近日，國(guó)際市場(chǎng)研究機(jī)構(gòu)ResearchAndMarkets發(fā)布了一份“寡核苷酸合成”市場(chǎng)報(bào)告。報(bào)告顯示：在新冠疫情后業(yè)務(wù)格局發(fā)生變化的情況下，全球寡核苷酸合成市場(chǎng)在2022年達(dá)到61億美元，預(yù)計(jì)到2030年將達(dá)到199億美元的規(guī)模，并在2022-2030年期間以15.9%的復(fù)合年增長(zhǎng)率增長(zhǎng)?！?022年全球寡核苷酸市場(chǎng)及2030年預(yù)測(cè)此外，2022年美國(guó)的寡核苷酸合成市場(chǎng)約為17億美元。中國(guó)是世界第二大經(jīng)濟(jì)體，到2030年預(yù)計(jì)市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到49億美元，復(fù)合年增長(zhǎng)率為21.5%。其他值得關(guān)注的國(guó)家包括日本和加拿大，預(yù)計(jì)在2022年至2030年期間分別增長(zhǎng)11.6%和13.6%。由此可見(jiàn)寡核苷酸藥物在未來(lái)具有巨大潛力，GSK近年來(lái)也正在抓緊布局中，與相關(guān)企業(yè)達(dá)成戰(zhàn)略性合作。1.3全球小核酸藥物市場(chǎng)規(guī)模最早上市的3款小核酸藥物目前已退市，隨著2016年2款A(yù)SO藥物的上市，打破了多年藥物市場(chǎng)的沉寂。小核酸藥物全球市場(chǎng)規(guī)模從2016年0.1億美元已增長(zhǎng)至2021年32.5億美元，年復(fù)合增長(zhǎng)率高達(dá)217.8%。未來(lái)隨著臨床階段小核酸藥物的不斷上市，尤其是針對(duì)患者群體較大的適應(yīng)癥藥物，如乙型肝炎的潛在治愈性藥物，將進(jìn)一步驅(qū)動(dòng)市場(chǎng)快速發(fā)展。圖源：Frost&Sullivan目前已上市小核酸藥物均為ASO和siRNA藥物，ASO藥物上市早，商業(yè)化發(fā)展更為成熟，在整體小核酸藥物中的份額較高，達(dá)到近80%。從適應(yīng)癥來(lái)看，脊髓性肌萎縮是目前商業(yè)化最為成功的適應(yīng)癥，2021年該適應(yīng)癥僅有一款藥物，卻貢獻(xiàn)了近20億美元的銷(xiāo)售。其他適應(yīng)癥包括有杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等，總體來(lái)看，目前上市產(chǎn)品主要在罕見(jiàn)病適應(yīng)癥領(lǐng)域，商業(yè)化成功的同時(shí)也踐行了解決臨床需求和痛點(diǎn)的初衷，但也從側(cè)面揭露出目前小核酸藥物市場(chǎng)缺乏病人群體較大的適應(yīng)癥的現(xiàn)狀。值得注意的是，憑借小核酸獨(dú)特的作用機(jī)制，其在眾多適應(yīng)癥擁有更大的開(kāi)發(fā)潛力和臨床價(jià)值，臨床在研管線中不乏針對(duì)癌癥、糖尿病、乙肝等大病種的臨床試驗(yàn)，將極大地彌補(bǔ)商業(yè)化重磅品種乏力的現(xiàn)狀，支持小核酸藥物市場(chǎng)未來(lái)的發(fā)展。1.4全球已上市小核酸藥物目前，全球共有16款小核酸藥物獲批上市（早期3款藥物已退市包括10款A(yù)SO藥物、5款siRNA藥物和1款核酸適配體。小核酸藥物經(jīng)多年發(fā)展，重磅產(chǎn)品已出現(xiàn)，其中渤健與Ionis開(kāi)發(fā)的Nusinersen是全球首個(gè)用于治療脊髓性肌萎縮癥的藥物，2021年全球銷(xiāo)售額達(dá)19.51億美元，是目前銷(xiāo)售額最高的小核酸藥物；諾華與Alnylam開(kāi)發(fā)的Inclisiran是一款長(zhǎng)效降脂藥，一年僅需注射兩次，開(kāi)啟了小核酸藥物應(yīng)用于常見(jiàn)慢性病的新篇章。▲目前上市的15款小核酸藥物（醫(yī)麥客整理）2.兩款上市mRNA新冠疫苗的商業(yè)化經(jīng)驗(yàn)據(jù)金融時(shí)報(bào)報(bào)道，在歐盟簽訂的新冠疫苗合約中，輝瑞將其疫苗售價(jià)提高了逾25%，此前的15.5歐元提升至為19.5歐元；Moderna將其疫苗售價(jià)提高了逾10%，由此前的19.1歐元提升至21.5歐元。此后雙方售價(jià)再做調(diào)整，除在美售價(jià)Moderna略低于輝瑞，美國(guó)以外其他大部分市場(chǎng)Moderna定價(jià)均較高。根據(jù)輝瑞與美國(guó)政府達(dá)成的供應(yīng)協(xié)議，疫苗價(jià)格約為每劑19.5美元，面向歐盟國(guó)價(jià)格每劑23.15美元。而Moderna與美國(guó)協(xié)議價(jià)每劑15美元，對(duì)美國(guó)以外的市場(chǎng)，尤其是劑量數(shù)較小的訂單，單劑疫苗定價(jià)高達(dá)30美元。顯然，更低的價(jià)格使得輝瑞的疫苗贏得更多接種訂單，覆蓋更大的人群，從而獲得更好的商業(yè)表現(xiàn)。另外，輝瑞疫苗采取分級(jí)定價(jià)方式，其疫苗出售給中等收入國(guó)家的價(jià)格為發(fā)達(dá)國(guó)家的一半，出售給低收入國(guó)家的價(jià)格近乎為成本價(jià)。BioNTech也表示，非歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家的價(jià)格會(huì)另行定價(jià)。但在今年海外的定價(jià)其實(shí)是呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，Modena今年3月份，對(duì)非盟的供應(yīng)單價(jià)已經(jīng)降到了7.5美金。從長(zhǎng)遠(yuǎn)上來(lái)看，在海外的單價(jià)應(yīng)該會(huì)是下降的趨勢(shì)，例如covax(全球新冠疫苗獲取機(jī)制)的工業(yè)價(jià)格一直以來(lái)就是5-8美金的區(qū)間。2.2銷(xiāo)售方式▲美國(guó)官方采購(gòu)輝瑞、莫德納新冠疫苗的記錄和金額(數(shù)據(jù)來(lái)源：)目前在美國(guó)，醫(yī)保和政府支付接種疫苗的費(fèi)用。根據(jù)美國(guó)醫(yī)療保險(xiǎn)和補(bǔ)助服務(wù)中心(CentersforMedicareandMedicaidServices)的說(shuō)法，無(wú)論是否有醫(yī)療保險(xiǎn)，新冠疫苗對(duì)所有美國(guó)人都是免費(fèi)的。政府機(jī)構(gòu)還表示，他們計(jì)劃確保居民可以報(bào)銷(xiāo)任何FDA批準(zhǔn)的新冠治療費(fèi)用。但最近拜登政府開(kāi)始讓聯(lián)邦政府不再為Covid-19疫苗、檢測(cè)和治療付費(fèi)。白宮新冠疫情應(yīng)對(duì)協(xié)調(diào)員AshishJha表示，隨著美國(guó)準(zhǔn)備從疫情的急性階段過(guò)渡，拜登政府最早將于今年秋天停止購(gòu)買(mǎi)新冠疫苗、療法和檢測(cè)試劑。Jha表示，這些產(chǎn)品將轉(zhuǎn)向美國(guó)常規(guī)醫(yī)療系統(tǒng)。因此，那些需要疫苗或抗病毒治療的人將從他們的醫(yī)生或醫(yī)院獲得。在美國(guó)之外的其它國(guó)家與地區(qū)，兩家公司都分別做出了一些公益舉措：>今年3月，Moderna在一份聲明中稱，對(duì)92個(gè)易受疫情影響的低收入和中等收入國(guó)家之外的其他國(guó)家，公司愿意以商業(yè)合作的方式將其COVID-19疫苗技術(shù)許可給這些國(guó)家的制造商，這意味著此類(lèi)合作是有償?shù)模葱枋杖∫欢ǖ奶卦S權(quán)使用費(fèi)。>2021年6月10日，輝瑞和BioNTech宣布以成本價(jià)向美國(guó)政府提供5億劑新冠mRNA疫苗用于對(duì)外捐贈(zèng)。捐贈(zèng)對(duì)象包括COVAX中“預(yù)先市場(chǎng)采購(gòu)協(xié)議”(AdvanceMarketCommitment,AMC)認(rèn)定的92個(gè)中低收入國(guó)家或地區(qū)及55個(gè)非盟國(guó)家。2.3產(chǎn)業(yè)鏈-冷鏈運(yùn)輸使用mRNA技術(shù)，從裝瓶到為患者接種前一刻，都必須在-70℃的低溫條件下保存。相比普通疫苗所要求的2℃~8℃的存儲(chǔ)要求，新冠疫苗對(duì)溫度更為敏感。目前，國(guó)際上用量最大的兩款mRNA疫苗，從裝瓶到為患者接種前一刻，都必須在極其嚴(yán)苛的超低溫環(huán)境下進(jìn)行儲(chǔ)存和運(yùn)輸。輝瑞/BioNTech的Comirnaty需要在-80℃到-60℃的極低溫度保存，室溫解凍后僅能穩(wěn)定2小時(shí)；而Moderna的Spikevax穩(wěn)定性稍好，但仍然需要在-20℃的環(huán)境下進(jìn)行保存。嚴(yán)苛的保存條件，限制了疫苗的運(yùn)輸半徑，使得疫苗的生產(chǎn)、運(yùn)輸、儲(chǔ)存成本大幅增加，無(wú)形中推高了疫苗本身的價(jià)格。同時(shí)在基礎(chǔ)設(shè)施相對(duì)落后的中等收入國(guó)家甚至是經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)，mRNA疫苗不管是在價(jià)格上還是運(yùn)輸、儲(chǔ)存條件上，很難實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的應(yīng)用。2.4產(chǎn)業(yè)鏈-產(chǎn)能擴(kuò)張因?yàn)槿蛞呙缧枨蠡鶖?shù)大，加上疫情持續(xù)反撲，導(dǎo)致mRNA新冠疫苗的生產(chǎn)供應(yīng)鏈遭遇了原料、生產(chǎn)組件、周邊物料(包括包裝mRNA原料的一次性生物反應(yīng)器、罐裝疫苗的中硼硅玻璃瓶)和生產(chǎn)人員的短缺。脂質(zhì)納米顆粒(LNP)是制造mRNA疫苗的重要原材料，為繞開(kāi)LNP專(zhuān)利，Moderna研發(fā)了名為L(zhǎng)ipidSM-102的自有專(zhuān)利陽(yáng)離子脂質(zhì)(盡管該專(zhuān)利與ArbutusBiopharma公司還存在爭(zhēng)議)。在歐洲，輝瑞-BioNTech直接找德國(guó)一家名為Knauer公司代工。在美國(guó)，拜登政府直接動(dòng)用《國(guó)防生產(chǎn)法》(DefenseProductionAct，DPA)，讓輝瑞快速采購(gòu)到過(guò)濾乙醇的設(shè)備。而Moderna由于使用了自研的陽(yáng)離子脂質(zhì)，導(dǎo)致需要特別的設(shè)備，只能從零開(kāi)始制造，這也是拖延其量產(chǎn)進(jìn)度的環(huán)節(jié)之一。同時(shí)，為了規(guī)避某些貿(mào)易保護(hù)主義政策(比如美國(guó)疫情期間很少將原料出口境外)，輝瑞-BioNTech、Moderna紛紛在美國(guó)和歐洲建立了獨(dú)立供應(yīng)鏈和產(chǎn)線。產(chǎn)業(yè)鏈信息顯示，輝瑞在mRNA疫苗全產(chǎn)業(yè)鏈都有生產(chǎn)線，具有穩(wěn)定的產(chǎn)業(yè)把控能力，加上BioNTech收購(gòu)另一個(gè)跨國(guó)巨頭諾華的制藥廠，可以保證其產(chǎn)業(yè)鏈不會(huì)因一家公司意外而斷裂。而Moderna只涉足原料藥生產(chǎn)，其余環(huán)節(jié)或者采購(gòu)，或者外包給以龍沙(Lonza)、康泰倫特(Catalent)、賽默飛世爾(ThermoFisherScientific)為代表的全球三大CDMO企業(yè)。3.國(guó)內(nèi)mRNA新冠疫苗的商業(yè)化之路目前國(guó)內(nèi)最有希望率先獲批上市的有復(fù)星醫(yī)藥和BioNTech合作的mRNA新冠疫苗復(fù)必泰(BNT162b2)與軍事醫(yī)學(xué)研究院、艾博生物和沃森生物共同研發(fā)的ARCoV。>從定價(jià)來(lái)看，復(fù)必泰國(guó)際市場(chǎng)售價(jià)在12-20美元之間，也完全符合醫(yī)保局此前對(duì)于滅活疫苗的采購(gòu)價(jià)。具體定價(jià)方式上，復(fù)星醫(yī)藥或?qū)⒉捎脟?guó)家采購(gòu)+自費(fèi)市場(chǎng)相結(jié)合的模式，鑒于公司在自費(fèi)市場(chǎng)具有強(qiáng)大定價(jià)能力，綜合考量中國(guó)6月-18歲兒童數(shù)量達(dá)2億多，針對(duì)糖尿病、高血壓患者等特殊人群及高端人士、外籍人士的需求較大等因素，若疫苗成功上市，有望為復(fù)星醫(yī)藥帶來(lái)數(shù)十億利潤(rùn)彈性。>另外，此前沃森生物發(fā)布會(huì)上稱，預(yù)期海外定價(jià)17-20美金/劑，國(guó)內(nèi)定價(jià)小于14美金/劑。2.2銷(xiāo)售方式在今年4月2日，國(guó)家醫(yī)保局表示，新冠病毒疫苗費(fèi)用1200余億元由醫(yī)?；鸷拓?cái)政共同分擔(dān)。目前，我國(guó)已經(jīng)接種32億劑次疫苗，疫苗支出費(fèi)用在醫(yī)?；鹂沙惺芊秶鷥?nèi)。正是因?yàn)橐呙缃臃N資金等各方面保障到位，在世界人口大國(guó)中，我國(guó)的接種速度最快，覆蓋面最廣。下一步，國(guó)家醫(yī)保局將結(jié)合疫情防控需要，繼續(xù)做好相應(yīng)的費(fèi)用保障工作，服務(wù)疫情防控大局。同時(shí)，復(fù)星醫(yī)藥此前宣布，其控股子公司復(fù)星實(shí)業(yè)分別與臺(tái)積電、鴻海和永齡基金會(huì)以及裕利醫(yī)藥正式簽訂《銷(xiāo)售協(xié)議》，復(fù)星實(shí)業(yè)將向臺(tái)積電、鴻海、永齡基金會(huì)委托的裕利醫(yī)藥銷(xiāo)售共計(jì)1000萬(wàn)劑mRNA新冠疫苗，該等疫苗將被買(mǎi)方捐贈(zèng)予臺(tái)灣地區(qū)疾病管制機(jī)構(gòu)用于當(dāng)?shù)亟臃N。2.3產(chǎn)業(yè)鏈-冷鏈運(yùn)輸>ARCoV是我國(guó)首個(gè)、全球第四個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的mRNA技術(shù)COVID-19疫苗項(xiàng)目，并開(kāi)展了國(guó)際多中心臨床試驗(yàn)，目前正在進(jìn)行海外三期臨床試驗(yàn)。目前，ARCoV具有明確優(yōu)越性的是冷鏈友好：ARCoV只需在常規(guī)的疫苗冷鏈溫度(2～8度)下運(yùn)輸和儲(chǔ)存，而美國(guó)的兩款mRNA疫苗都需要零下20度或更低的冷凍溫度。常規(guī)冷鏈疫苗的全球適應(yīng)性更強(qiáng)，儲(chǔ)運(yùn)成本也更低。據(jù)了解，ARCoV實(shí)現(xiàn)冷鏈優(yōu)越性的主要原因是：艾博生物的專(zhuān)利脂質(zhì)體對(duì)mRNA的保護(hù)更佳；此外ARCoV里的mRNA編碼RBD蛋白、S蛋白，前者比后者更短，更穩(wěn)定些。>今年2月，瑞科生物公布了其子公司瑞科吉生物的凍干劑型mRNA新冠肺炎疫苗的臨床前數(shù)據(jù)。值得一提的是，該疫苗應(yīng)用了瑞科吉生物自主開(kāi)發(fā)的mRNA凍干技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了4℃和25℃條件下的制劑穩(wěn)定性，使得該疫苗可在常規(guī)冷鏈條件下貯存與運(yùn)輸，使得全球更大范圍使用mRNA新冠疫苗成為可能。瑞科吉生物的凍干劑型mRNA新冠肺炎疫苗通過(guò)采用自主研發(fā)的mRNA凍干技術(shù)，突破了mRNA疫苗儲(chǔ)存與運(yùn)輸方面的技術(shù)難題。經(jīng)驗(yàn)證，該工藝適用于不同的mRNA序列，凍干前后的基礎(chǔ)物化性質(zhì)和生物活性與新制備的溶液劑型無(wú)任何區(qū)別?？梢云诖?，該疫苗將進(jìn)一步推動(dòng)mRNA疫苗在全球范圍內(nèi)的普及和應(yīng)用。2.4產(chǎn)業(yè)鏈-產(chǎn)能擴(kuò)張此前拜登宣布使用《國(guó)防生產(chǎn)法》提高對(duì)輝瑞疫苗的原材料供應(yīng)后，有關(guān)疫苗生產(chǎn)原料短缺的擔(dān)憂開(kāi)始不斷加深。美國(guó)拜登政府禁止出口某些關(guān)鍵物品，包括袋子和過(guò)濾器，這可能導(dǎo)致嚴(yán)重的生產(chǎn)瓶頸。他提出，如果要在全球范圍內(nèi)進(jìn)行產(chǎn)能建設(shè)，那么這些關(guān)鍵原材料的共享將成為主要限制因素。輝瑞去年也一度因原材料短缺而下調(diào)產(chǎn)量目標(biāo)。疫苗生產(chǎn)商所需的安瓶、玻璃、塑料和瓶塞也存在短缺問(wèn)題。因此2021年以來(lái)，國(guó)內(nèi)企業(yè)抓住國(guó)內(nèi)外疫苗公司產(chǎn)能擴(kuò)張的機(jī)會(huì)，積極進(jìn)行和改進(jìn)產(chǎn)能建設(shè)。>疫苗廠商康希諾生物位于上海臨港新建的mRNA疫苗產(chǎn)業(yè)化基地將于今年年底建成，首期規(guī)劃產(chǎn)能1億制劑，后續(xù)還會(huì)擴(kuò)產(chǎn)增至2億劑原液。今年4月，康希諾生物公告稱，該公司開(kāi)發(fā)的新冠mRNA疫苗已獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥物臨床試驗(yàn)批件。目前這款mRNA疫苗已進(jìn)入國(guó)內(nèi)二期臨床。>同時(shí)，根據(jù)相關(guān)負(fù)責(zé)人透露，ARCoV從三季度開(kāi)始全年將有1.2億支產(chǎn)能供給，對(duì)外出口多人份產(chǎn)能可達(dá)到數(shù)億劑。沃森生物未來(lái)會(huì)繼續(xù)跟英博合作擴(kuò)大產(chǎn)能，產(chǎn)能不是大問(wèn)題。二、核酸，融資寒冬的一股暖流.1.國(guó)內(nèi)mRNA市場(chǎng)再度迎來(lái)熱潮2021年市場(chǎng)敲了一記警鐘，mRNA領(lǐng)域在當(dāng)時(shí)有所降溫，而如今，核酸賽道依舊炙手可熱，今年33家核酸藥公司獲得40億融資，熱度領(lǐng)跑全球。眼下，后入局者依舊頗多，不少企業(yè)仍揣著門(mén)票等著進(jìn)入mRNA疫苗行業(yè)——2022年，在去年從加拿大公司引進(jìn)mRNA疫苗和平臺(tái)技術(shù)后，云頂新耀和華潤(rùn)醫(yī)藥準(zhǔn)備著手成立一家mRNA疫苗公司；石藥和康希諾憑借mRNA新冠疫苗獲批臨床，正式加入mRNA療法競(jìng)賽；安科生物宣布進(jìn)軍新冠mRNA疫苗；荷塘生華也與翌圣生物正式達(dá)成戰(zhàn)略合作，一起打造mRNA藥物研發(fā)、生產(chǎn)新生態(tài)……BioNTech剛發(fā)布了CAR-T+mRNA疫苗治療實(shí)體瘤的臨床數(shù)據(jù)。輝瑞和賽諾菲則都同步押注了mRNA流感疫苗。該領(lǐng)域被視為mRNA疫苗的下一個(gè)高地。艾博生物創(chuàng)始人英博也曾表示，mRNA疫苗未來(lái)主要的發(fā)展方向會(huì)集中在腫瘤和傳染病疫苗、罕見(jiàn)病等。眼下，艾博生物與沃森生物還將合作開(kāi)發(fā)帶狀皰疹mRNA疫苗。斯微生物的mRNA個(gè)性化腫瘤疫苗則在今年2月中旬進(jìn)入海外臨床階段。2022年6月29日，國(guó)家工信部宣布全國(guó)行程碼“摘星”，新措施的出臺(tái)，不意味著中國(guó)將要走西方國(guó)家新冠防控所謂的“躺平”路線。取消“星號(hào)”標(biāo)記，對(duì)于促進(jìn)人員流動(dòng)、活躍經(jīng)濟(jì)發(fā)展，將起到積極推動(dòng)作用。另外疫苗接種將繼續(xù)普及,探親簽證又重新開(kāi)始批準(zhǔn)等，這無(wú)疑對(duì)mRNA疫苗的市場(chǎng)帶來(lái)光明的預(yù)期。同時(shí)，沃森生物/艾博生物的ArCoV有望成為中國(guó)首個(gè)獲批的mRNA疫苗。如果獲批，ARCoV可能被列入我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)新冠肺炎疫苗接種計(jì)劃，也可用作加強(qiáng)針免疫人群。因此，伴隨著我國(guó)管控力度的逐漸放開(kāi)，以及mRNA疫苗的最終到來(lái)，預(yù)計(jì)mRNA疫苗市場(chǎng)將會(huì)迎來(lái)新的一波熱度。4月23日，據(jù)第三方研究機(jī)構(gòu)ReportsandData的最新報(bào)告，2022年全球反義(Antisense)和核糖核酸干擾(RNAi)治療市場(chǎng)規(guī)模為12.6億美元，預(yù)計(jì)到2032年將達(dá)到21.3億美元，預(yù)計(jì)收入復(fù)合年增長(zhǎng)率(CAGR)為6%。目前越來(lái)越多地使用這些療法來(lái)治療遺傳疾病、傳染病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，推動(dòng)了收入的增長(zhǎng)。2.國(guó)內(nèi)核酸藥融資爆發(fā)近兩年來(lái)，醫(yī)藥資本市場(chǎng)處于一種相對(duì)低迷的狀態(tài)，生物醫(yī)藥行業(yè)關(guān)于“寒冬”的討論從未間斷過(guò)。在投融資市場(chǎng)上，創(chuàng)新藥企融資難度加大，投資者出手更加謹(jǐn)慎，再加上上市新規(guī)的改變，使得國(guó)內(nèi)創(chuàng)新藥企業(yè)融資進(jìn)入了一個(gè)相對(duì)冰點(diǎn)。而就是在這種寒冬之下，核酸藥成為了醫(yī)藥投融資市場(chǎng)當(dāng)中不可多得的一抹亮色。據(jù)公開(kāi)資料統(tǒng)計(jì)，即便是寒冬，核酸藥領(lǐng)域融資熱度不減，早期融資顯示大幅回暖跡象。尤其是在國(guó)內(nèi)，即便是內(nèi)外部環(huán)境存在的多種利空因素，但核酸藥領(lǐng)域的融資仍然呈現(xiàn)出火熱的狀態(tài)，從今年1月到11月更是有31家公司獲得了融資，多家企業(yè)的融資超過(guò)了1億元，總?cè)谫Y金額近40億。據(jù)統(tǒng)計(jì)，國(guó)內(nèi)核酸藥融資大多為A輪及之前，核酸領(lǐng)域融資熱度首次超越美國(guó)，獲得融資的企業(yè)數(shù)量和融資事件均超過(guò)美國(guó)。圖源：星耀研究院從細(xì)分賽道來(lái)看，mRNA技術(shù)和小核酸藥物為國(guó)內(nèi)融資最火熱的領(lǐng)域，尤其是小核酸領(lǐng)域獲得了諸多投資機(jī)構(gòu)的青睞。mRNA技術(shù)融資火熱一方面在于技術(shù)優(yōu)勢(shì)，另一方面在于藥企本身的優(yōu)勢(shì)。從技術(shù)角度來(lái)看，mRNA的優(yōu)勢(shì)主要在于研發(fā)速度快、安全、高效、應(yīng)用范圍廣，藥企一旦掌握病原體的基因序列，就可以很快研制出mRNA疫苗。且除了對(duì)抗傳染病，mRNA技術(shù)還可以應(yīng)用于腫瘤、蛋白替換療法、罕見(jiàn)病、慢性病等多個(gè)疾病領(lǐng)域治療。并且今年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)花落mRNA疫苗領(lǐng)域，進(jìn)一步增加了mRNA技術(shù)的熱度。馬斯克也為mRNA技術(shù)站臺(tái)，許多業(yè)內(nèi)人士更是聲稱“醫(yī)學(xué)的未來(lái)是mRNA。”因此，mRNA技術(shù)獲得融資也在情理之中。不過(guò)回到國(guó)內(nèi)，國(guó)內(nèi)mRNA行業(yè)因?yàn)槠鸩綍r(shí)間較晚，除了面臨技術(shù)壁壘之外，整個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈與國(guó)外相比仍不夠完善。盡管玩家很多，但mRNA疫苗競(jìng)賽國(guó)內(nèi)最終現(xiàn)在跑出來(lái)的也僅此一家，許多藥企即便是在之前憑借mRNA技術(shù)的熱度獲得了融資，在以后如果不能盡快跑出來(lái)一款產(chǎn)品，或者連續(xù)出現(xiàn)決策失誤也會(huì)被市場(chǎng)拋棄。隨著mRNA研發(fā)的逐漸推進(jìn)，當(dāng)下投資者對(duì)于國(guó)內(nèi)mRNA產(chǎn)業(yè)的認(rèn)知也更加清晰，能夠獲得融資的mRNA公司往往是存在能夠跑出產(chǎn)品的預(yù)期或者有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)在。小核酸融資火熱一方面在于技術(shù)的優(yōu)勢(shì)和巨大的市場(chǎng)，另一方面在于藥企的積累和獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。經(jīng)過(guò)四十多年的發(fā)展，小核酸藥物已經(jīng)突破了新技術(shù)成藥瓶頸，逐步成熟并且進(jìn)入多個(gè)疾病領(lǐng)域，小核酸藥物開(kāi)始加速上市，也使該類(lèi)藥物技術(shù)隱現(xiàn)出崛起之勢(shì)。并且中國(guó)慢性病市場(chǎng)巨大，而小核酸藥物在治療許多慢性病方面具備獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。以已經(jīng)進(jìn)入國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的諾華的降脂小核酸藥物英克司蘭鈉注射液（Inclisran）為例，諾華定價(jià)每針價(jià)格為9988元，一針可以管半年，每年2萬(wàn)元，而國(guó)內(nèi)已上市的單抗每年治療費(fèi)用超過(guò)4萬(wàn)元，且需要多次注射。這也意味著諾華的產(chǎn)品不僅定價(jià)低，在臨床給藥方面存在優(yōu)勢(shì)，讓國(guó)內(nèi)新上市降脂單抗優(yōu)勢(shì)蕩然無(wú)存。在這種情況下，國(guó)內(nèi)在小核酸領(lǐng)域有著深厚技術(shù)積累和洞察、高效研發(fā)效率的藥企，獲得投資者青睞也在情理之中。從融資金額來(lái)看，嘉晨西海、靖因藥業(yè)、威斯津生物、舶望制藥等公司融資金額較為靠前，根據(jù)公開(kāi)資料，這些公司的共同點(diǎn)在于技術(shù)積累相對(duì)較為深厚、執(zhí)行力強(qiáng)，并且已建立了多個(gè)具有FIC和BIC潛力的差異化的產(chǎn)品管線，且已經(jīng)通過(guò)臨床試驗(yàn)得到了早期驗(yàn)證。3.海外核酸藥向更遠(yuǎn)處探索除了國(guó)內(nèi)之外，國(guó)外RNA技術(shù)的融資熱度也相對(duì)較高。早在兩年前，馬斯克為mRNA技術(shù)站臺(tái)，他認(rèn)為：“mRNA技術(shù)就像一個(gè)電腦程序，你可以對(duì)其進(jìn)行編程以執(zhí)行所需的任何操作。你甚至都可以變成蝴蝶?！辈⑶遥衲耆蚍秶鷥?nèi)融資金額最高的幾家公司都擁有RNA技術(shù)底座，專(zhuān)注于研發(fā)RNA藥物和遞送技術(shù)的ReNAgadeTherapeutics更是獲得超3億美元A輪融資。該公司建立了一個(gè)全面的RNA系統(tǒng)，包括全面的遞送技術(shù)套件和基因編輯工具。目前大部分的RNA藥物都是肝靶向，盡管當(dāng)下已有靶向不同器官的研究，但如何將臨床前研究成果轉(zhuǎn)化到臨床中仍是一大挑戰(zhàn)。ReNAgade致力于將這些系統(tǒng)化的平臺(tái)與其豐富的基因插入、編碼和編輯工具相結(jié)合，解決目前RNA療法的主要局限性，進(jìn)而打開(kāi)更加廣闊的市場(chǎng)。另外，海外融資金額較高的企業(yè)還有ElevateBio、OrbitalTherapeutics。今年5月，ElevateBio公司宣布完成4.01億美元D輪融資，用于技術(shù)平臺(tái)搭建。ElevateBio的基因編輯技術(shù)、iPSC平臺(tái)和RNA技術(shù)業(yè)內(nèi)領(lǐng)先，并且搭建了一種集技術(shù)、制造和生產(chǎn)能力的商業(yè)模式。今年4月，OrbitalTherapeutics宣布成功完成2.7億美元的A輪融資，用于RNA工具和下一代RNA藥物的研發(fā)。該公司目標(biāo)在于下一代RNA療法，其擁有一支科學(xué)和管理經(jīng)驗(yàn)豐富的團(tuán)隊(duì)，首席執(zhí)行官GiuseppeCiaramella擁有超20年藥物研發(fā)和管理經(jīng)驗(yàn)，他曾在輝瑞、勃林格殷格翰以及阿斯利康等企業(yè)任職，并在Moderna傳染病部門(mén)擔(dān)任CSO。2021年4月15日，生物制藥公司BrooklynImmunoTherapeutics宣布，斥資100萬(wàn)美元獲得FactorBioscience和Novellus的mRNA基因編輯和細(xì)胞療法技術(shù)的使用授權(quán)許可。目前，該公司通過(guò)與FactorBioscience和Novellus的選擇權(quán)協(xié)議，探索利用先進(jìn)的基因編輯和細(xì)胞治療技術(shù)推進(jìn)疾病療法。這將使得Brooklyn能夠利用廣泛專(zhuān)利尋求發(fā)展，使用mRNA來(lái)開(kāi)發(fā)基因編輯的化合物，這種化合物對(duì)多種實(shí)體瘤、鐮狀細(xì)胞性貧血，以及其他一些遺傳性疾病的治療將更為有效。已授權(quán)該平臺(tái)的包括mRNA細(xì)胞重編程、基于mRNA的基因編輯、專(zhuān)有的基因編輯蛋白以及專(zhuān)有的ToRNAdo脂質(zhì)遞送系統(tǒng)，該系統(tǒng)可將mRNA有效傳遞在體內(nèi)和體外的皮膚、腦、眼和肺組織。2021年9月，mRNA巨頭Moderna宣布了一項(xiàng)新的合作，為Crigler-Najjar綜合征1型(CN-1)開(kāi)發(fā)一種新的mRNA療法(mRNA-3351)。這是一種極罕見(jiàn)的疾病，據(jù)估計(jì)，世界上只有大約70-100例CN-1已知病例。合作的目標(biāo)是為患者免費(fèi)提供一種用于治療CN-1的mRNA療法。根據(jù)協(xié)議條款，Moderna將向非營(yíng)利性生命改變藥物研究所(ILCM)授權(quán)mRNA-3351，無(wú)需預(yù)付費(fèi)用，也無(wú)需支付任何下游費(fèi)用。ILCM將負(fù)責(zé)mRNA-3351的臨床開(kāi)發(fā)。ILCM計(jì)劃在2022年啟動(dòng)mRNA-3351的臨床研究。mRNA-3351是編碼人類(lèi)UGT1A1，旨在恢復(fù)導(dǎo)致Crigler-Najjar綜合征1型的缺(mRNA-1944)、丙酸血癥(mRNA-3927)和甲基丙酸血癥(mRNA-3704)的抗體相同的專(zhuān)有LNP配方。mRNA-3351已被美國(guó)FDA授予罕見(jiàn)兒科疾病稱號(hào)。Crigler-Najjar綜合征1型(CN-1)是一種極罕見(jiàn)的遺傳性疾病，由UGT1A1基因突變引起，在此類(lèi)突變中，肝臟生成的物質(zhì)膽紅素?zé)o法被分解。當(dāng)通常將膽紅素轉(zhuǎn)化為可輕松從體內(nèi)清除的形式的蛋白質(zhì)無(wú)法正常工作時(shí)，就會(huì)發(fā)生該綜合征。沒(méi)有這種酶，膽紅素就會(huì)在體內(nèi)積聚，導(dǎo)致黃疸，并對(duì)大腦、肌肉和神經(jīng)造成損害。這些癥狀在出生后不久就會(huì)變得明顯，可能會(huì)危及生命。2022年1月，Moderna與Carisma宣布建立合作關(guān)系，將Carisama的工程巨噬細(xì)胞技術(shù)與Moderna的mRNA和LNP技術(shù)相結(jié)合，以開(kāi)發(fā)體內(nèi)嵌合抗原受體巨噬細(xì)胞(CAR-M)療法。根據(jù)協(xié)議條款，Carisma將獲得4500萬(wàn)美元的預(yù)付現(xiàn)金和Moderna以3500萬(wàn)美元可轉(zhuǎn)換票據(jù)的形式進(jìn)行的投資，并有資格獲得開(kāi)發(fā)、監(jiān)管和商業(yè)里程碑付款，以及根據(jù)協(xié)議商業(yè)化的任何產(chǎn)品的凈銷(xiāo)售額的特許權(quán)使用費(fèi)。Carisma總裁兼首席執(zhí)行官StevenKelly表示：“Moderna在mRNA和LNP技術(shù)方面的深厚專(zhuān)業(yè)知識(shí)為工程巨噬細(xì)胞開(kāi)辟了一個(gè)潛在的改變游戲規(guī)則的機(jī)會(huì)。結(jié)合Carisma在工程巨噬細(xì)胞生物學(xué)方面的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和Moderna開(kāi)創(chuàng)性的體內(nèi)mRNA遞送技術(shù)，直接向單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)遞送可以實(shí)現(xiàn)一種現(xiàn)成的治療方法，通過(guò)使用患者自身的細(xì)胞來(lái)提供真正的個(gè)性化治療?！钡谌录夹g(shù)特點(diǎn)及應(yīng)用現(xiàn)狀一、mRNA技術(shù)的成藥理論上，mRNA擁有能夠合成“任意一種蛋白質(zhì)”的潛力，將mRNA制成疫苗或者藥物，相當(dāng)于送出一張可以在人體內(nèi)生成藥物工廠的“施工圖紙”，根據(jù)這張圖紙，mRNA可以在細(xì)胞內(nèi)翻譯表達(dá)而無(wú)需進(jìn)入細(xì)胞核，因此相比于DNA藥物，mRNA藥物并沒(méi)有整合人體DNA的風(fēng)險(xiǎn)，也可作用于傳統(tǒng)蛋白藥物(如抗體等)無(wú)法觸及的胞內(nèi)靶點(diǎn)。▲mRNA藥物的作用機(jī)理(圖片來(lái)源：NatureDrugReview)如圖所示，mRNA藥物在體內(nèi)發(fā)揮作用大體可分成6個(gè)步驟：①注射的mRNA藥物被抗原呈遞細(xì)胞內(nèi)吞；②mRNA進(jìn)入胞質(zhì)后，由核糖體翻譯成蛋白質(zhì)，翻譯的抗原蛋白可以通過(guò)幾種方式刺激免疫系統(tǒng)；③細(xì)胞內(nèi)抗原被蛋白酶體復(fù)合物分解成較小的片段，片段通過(guò)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅰ類(lèi)分子在細(xì)胞表面展示給細(xì)胞毒性T細(xì)胞；④活化的細(xì)胞毒性T細(xì)胞通過(guò)分泌溶細(xì)胞分子，如穿孔素、顆粒酶等殺死感染細(xì)胞；⑤此外，分泌的抗原可被細(xì)胞攝取，在內(nèi)體內(nèi)部降解，并通過(guò)MHCII類(lèi)蛋白在細(xì)胞表面呈遞給輔助性T細(xì)胞；⑥輔助性T細(xì)胞通過(guò)刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，并通過(guò)炎性細(xì)胞因子激活吞噬細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞，有利于循環(huán)病原體的清除。mRNA發(fā)現(xiàn)之處，不穩(wěn)定性和免疫原性等問(wèn)題阻礙了其應(yīng)用。直到近幾年，通過(guò)在mRNA序列中引入經(jīng)過(guò)修飾的核苷，并開(kāi)發(fā)出RNA遞送系統(tǒng)，這些關(guān)鍵問(wèn)題基本得到解決。許多證據(jù)表明，mRNA不僅能介導(dǎo)更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率和更長(zhǎng)的蛋白表達(dá)時(shí)間，而且和DNA相比具有更大優(yōu)勢(shì)。>首先，mRNA無(wú)需進(jìn)入細(xì)胞核即可發(fā)揮功能：到達(dá)細(xì)胞質(zhì)中mRNA即啟動(dòng)蛋白質(zhì)翻譯，因此效率更高。另外mRNA免疫源性低，不易觸發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)，半衰期短、代謝產(chǎn)物純天然，沒(méi)有持續(xù)累積毒性的風(fēng)險(xiǎn)。>其次，與DNA和病毒載體相比，mRNA不會(huì)插入基因組：mRNA只是瞬時(shí)表達(dá)編碼蛋白，由于其低插入風(fēng)險(xiǎn)，為藥物研發(fā)人員提供了絕佳的安全選擇，很多難成藥的蛋白或胞內(nèi)蛋白均可由mRNA編碼表達(dá)。>最后，mRNA很容易通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄過(guò)程合成：這個(gè)過(guò)程相對(duì)廉價(jià)，并且可以快速應(yīng)用于各種療法。因此從制藥行業(yè)的角度來(lái)看，mRNA是一種非常有潛力的候選藥物，可以滿足基因治療、癌癥治療以及開(kāi)發(fā)疫苗等的需求?！鴐RNA藥物研發(fā)及生產(chǎn)流程圖(圖片來(lái)源：中國(guó)食品藥品網(wǎng))如圖所示：從mRNA藥物的研發(fā)來(lái)看，mRNA生產(chǎn)有三個(gè)關(guān)鍵方面：靶點(diǎn)設(shè)計(jì)、化學(xué)修飾及序列優(yōu)化。>靶點(diǎn)設(shè)計(jì)：無(wú)論在哪一個(gè)疾病領(lǐng)域，要想真正成藥，第一步必須完成對(duì)于該疾病的mRNA靶點(diǎn)設(shè)計(jì)。不同于傳統(tǒng)藥物靶點(diǎn)的概念，蛋白、病毒的某些結(jié)構(gòu)、基因片段等都有可能成為mRNA的靶點(diǎn)。具體來(lái)看，在腫瘤領(lǐng)域，mRNA靶點(diǎn)可以是腫瘤抗原、抗體，也可以是腫瘤免疫相關(guān)的細(xì)胞因子和免疫佐劑；在傳染病領(lǐng)域，mRNA靶點(diǎn)可以是一些具有免疫原性的病毒抗原，或者是病原體的蛋白；也可以是抗病毒的中和抗體。而在遺傳性疾病中，mRNA靶點(diǎn)則可以是基因發(fā)生突變的位點(diǎn)。>化學(xué)修飾：這些修飾可以調(diào)控基因的表達(dá)，并由此決定細(xì)胞的狀態(tài)，影響細(xì)胞的分化和發(fā)育。>序列優(yōu)化：mRNA序列優(yōu)化的目標(biāo)是提高穩(wěn)定性和效率。不過(guò)這種設(shè)計(jì)理念并不是每一次都能針對(duì)性地找到實(shí)踐解決方案，原因在于序列設(shè)計(jì)對(duì)算法的要求極高。目前，需要借助專(zhuān)業(yè)軟件及人工智能算法對(duì)二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)優(yōu)化，以提高mRNA序列的結(jié)構(gòu)緊密性、轉(zhuǎn)錄穩(wěn)定性及翻譯效率，最終提升疫苗誘導(dǎo)的免疫原性。從目前正在開(kāi)發(fā)的基于mRNA技術(shù)的疫苗和藥物，可根據(jù)其潛在作用機(jī)制分為三大應(yīng)用方向：預(yù)防性疫苗、治療性疫苗和治療性藥物，涉及到的疾病領(lǐng)域主要是腫瘤學(xué)、自身免疫和呼吸系統(tǒng)等。目前勢(shì)頭最猛的是預(yù)防性疫苗，但治療性疫苗和治療性藥物目前也布局了許多不同的適應(yīng)癥，同樣具有巨大的潛力和前景。二、mRNA療法的臨床優(yōu)勢(shì)mRNA療法兼具抗原呈遞與自佐劑的作用當(dāng)體外轉(zhuǎn)錄的mRNA遞送到人體后，兼具著抗原呈遞和自佐劑兩方面的作用。首先，胞質(zhì)內(nèi)少量mRNA就可以實(shí)現(xiàn)抗原呈遞到CTL細(xì)胞，而蛋白質(zhì)只能依賴效率較低的交聯(lián)提呈途徑；機(jī)體通過(guò)mRNA翻譯可持續(xù)地獲得抗原，在抗體廣度和親和力方面顯著優(yōu)于蛋白質(zhì)相關(guān)疫苗，帶來(lái)更持久的保護(hù)。此外，mRNA相較蛋白質(zhì)可遞呈抗原種類(lèi)更豐富，mRNA能編碼全長(zhǎng)蛋白質(zhì)，因此可避免病人MHC半抗原限制。同時(shí)，通過(guò)串聯(lián)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可以將多種抗原表型組裝在一條mRNA鏈中。其次就是自佐劑的作用，內(nèi)體中的mRNA會(huì)被多種模式識(shí)別受體(PRR)識(shí)別，促進(jìn)I型干擾素(IFN-I)和其他促炎細(xì)胞因子(如IL-6和TNF-α)的產(chǎn)生。相比于各類(lèi)傳統(tǒng)藥物，mRNA成藥更加靈活小分子化藥通過(guò)與靶點(diǎn)蛋白結(jié)合發(fā)揮治療作用，但可成藥的靶點(diǎn)蛋白數(shù)量有限，靶向性差因此無(wú)法從機(jī)制上治療疾病。在小分子藥物之后，以抗體藥物為主的生物藥逐漸出現(xiàn)，與小分子化藥相比，抗體藥物可作用的靶點(diǎn)蛋白種類(lèi)更多，且可通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)提升其親和性降低毒性等。但是抗體類(lèi)藥物擁有分子結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜、生產(chǎn)成本更高、通常需通過(guò)注射給藥等劣勢(shì)，并且抗體藥物通常只能與細(xì)胞膜表面或細(xì)胞外的蛋白質(zhì)發(fā)揮作用，使得其應(yīng)用受到一定限制。小分子和抗體藥物的發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化過(guò)程中，對(duì)活性、PKPD等性質(zhì)的優(yōu)化均需要對(duì)結(jié)構(gòu)做改動(dòng)，需要花費(fèi)大量的工作。相比之下，核酸類(lèi)藥物擁有明顯的優(yōu)勢(shì)。核酸類(lèi)藥物可基于堿基互補(bǔ)原理對(duì)表達(dá)相關(guān)蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行調(diào)節(jié)，如ASO、siRNA、miRNA、saRNA等，而非與靶點(diǎn)蛋白質(zhì)進(jìn)行結(jié)合，且通過(guò)合適的遞送系統(tǒng)可使其進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，而且對(duì)胞內(nèi)外和細(xì)胞膜蛋白均可發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。同時(shí)，多數(shù)核酸類(lèi)藥物的作用基礎(chǔ)是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，只需知道靶基因的堿基序列，核酸藥物的序列設(shè)計(jì)就十分容易，化學(xué)修飾和遞送系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與序列的設(shè)計(jì)也是相對(duì)獨(dú)立的，因此可直接快速翻譯成蛋白質(zhì)，半衰期短、代謝產(chǎn)物天然，沒(méi)有持續(xù)和積累性，研發(fā)周期快。三、小核酸藥物優(yōu)勢(shì)小核酸藥物的出現(xiàn)，使得主動(dòng)設(shè)計(jì)藥物序列用于靶向沉默疾病基因成為可能，與傳統(tǒng)藥物相比，具有多重優(yōu)勢(shì)。?候選靶點(diǎn)豐富，適應(yīng)癥分布廣泛理論上，任何由特定基因過(guò)表達(dá)引起的疾病都可以通過(guò)小核酸藥物進(jìn)行治療，這為小核酸藥物的研發(fā)提供了豐富的候選靶點(diǎn)，包括很多傳統(tǒng)藥物無(wú)法成藥的靶點(diǎn)。?藥物設(shè)計(jì)簡(jiǎn)便，研發(fā)周期短小核酸藥物是基因組學(xué)和功能基因組學(xué)發(fā)展至今的最大獲益領(lǐng)域。小核酸藥物的設(shè)計(jì)可以實(shí)現(xiàn)直接針對(duì)疾病基因（mRNA）序列的數(shù)字化設(shè)計(jì)，從而擺脫了傳統(tǒng)藥物的大規(guī)模篩選周期，使藥物設(shè)計(jì)得以主動(dòng)進(jìn)行，研發(fā)成功率相對(duì)較高。?靶向特異性強(qiáng)小核酸藥物從轉(zhuǎn)錄后水平實(shí)現(xiàn)基因的表達(dá)調(diào)控，能夠特異性地作用于致病基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，從疾病的上游調(diào)控致病基因的表達(dá)，并且可以達(dá)到單堿基水平上的序列特異性，具有“有的放矢”及“治標(biāo)治本”的特點(diǎn)。此外，核酸藥物遞送系統(tǒng)不斷革新，可以有效地將核酸藥物遞送至靶器官，真正實(shí)現(xiàn)靶向給藥。?藥物作用長(zhǎng)效小核酸藥物的作用對(duì)象為mRNA，以siRNA藥物為例，當(dāng)靶標(biāo)mRNA被降解后，RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體可以循環(huán)工作，參與下一輪靶標(biāo)mRNA的降解。因此，小核酸藥物得以實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞內(nèi)較長(zhǎng)時(shí)間的作用。此外，核酸藥物的化學(xué)修飾技術(shù)不斷革新，包括磷酸骨架修飾、糖基修飾和堿基修飾等，可提高核酸藥物的穩(wěn)定性和半衰期，使藥物作用更長(zhǎng)效，大大提高患者治療的依從性。四、小核酸上游工藝小核酸藥物，即寡核苷酸藥物，是由十幾個(gè)到幾十個(gè)核苷酸串聯(lián)組成的短鏈核酸，目前大部分寡核苷酸藥物都是采取固相亞磷酸酰胺化學(xué)法進(jìn)行合成，其中，核心物料核苷亞磷酸酰胺單體（核苷單體）的制備是固相合成工藝的關(guān)鍵技術(shù)，具有較高的技術(shù)壁壘。自然狀態(tài)下的小核酸結(jié)構(gòu)容易被體內(nèi)核酸酶降解，為保證核酸藥物的成藥性，提高其抗酶解的能力等，需要對(duì)核苷進(jìn)行多位點(diǎn)的化學(xué)修飾，此類(lèi)修飾主要包括：堿基修飾、2’羥基核糖修飾、磷酸骨架修飾、核糖五元環(huán)骨架修飾等。從FDA批準(zhǔn)的寡核苷酸療法的修飾策略中我們可以看出，2’氟修飾、PS骨架修飾、2’O-Me修飾在1960年代就被報(bào)道！經(jīng)過(guò)數(shù)十年的積累，化學(xué)修飾已經(jīng)進(jìn)行了3次迭代。圖1寡核苷酸療法修飾策略[1]第一代化學(xué)修飾技術(shù)—磷酸骨架修飾核酸酶切割核酸鏈?zhǔn)亲饔糜谶B接核苷酸的磷酸骨架中的磷酸二酯鍵，其中磷原子是核酸酶攻擊的中心，因此，改造骨架磷原子的結(jié)構(gòu)可以影響核酸鏈的穩(wěn)定性。使用較多的骨架修飾為硫代磷酸，即用一個(gè)硫原子取代磷酸二酯鍵的非橋氧原子（P-S替代P-O），從而可以減少寡核苷酸的親水性，增加了對(duì)核酸酶降解的抵抗力，提高了小核酸藥物穩(wěn)定性和半衰期。硫代磷酸酯修飾（PS）算是第一代的ASO修飾方法！圖2硫代磷酸酯修飾[1]第二代化學(xué)修飾技術(shù)—核糖修飾第二代的化學(xué)修飾主要集中在核糖結(jié)構(gòu)中，主要是對(duì)核糖結(jié)構(gòu)部分的羥基進(jìn)行化學(xué)修飾，因?yàn)?’位的修飾能夠改變糖環(huán)本身的折疊，影響整個(gè)核酸分子的最穩(wěn)定構(gòu)象，從而影響其結(jié)合能力，改變分子的活性，另外引入2’位修飾基團(tuán)，其作為核酸酶底物的契合度會(huì)降低，可以增強(qiáng)對(duì)核酸酶的抗性。由于RNA和DNA的結(jié)構(gòu)僅差一個(gè)2’位的羥基，因此該羥基微小的改變就足以引起顯著效應(yīng)，也決定著RNA糖基部分的構(gòu)像，最終影響與靶RNA的親和力。2’-O-甲基（2’-OMe）、2’-O-甲氧基乙基（2’-MOE）以及2’-氟（2’-F）是最常用的2’位取代基，它們相比未經(jīng)修飾的2’-OH有更好的核酸酶抗性，提高了藥物在血漿中的穩(wěn)定性、增加了在組織中的半衰期，能夠延長(zhǎng)藥效時(shí)間。圖32'修飾基團(tuán)[1]第三代化學(xué)修飾技術(shù)—核糖五元環(huán)修飾第三代修飾主要是對(duì)核糖結(jié)構(gòu)部分的母環(huán)進(jìn)行更多的化學(xué)修飾，改善成藥性。包括LNA（鎖核酸，lockednucleicacid）、ENA（ethylene-bridgednucleicacids)、PNA（肽核酸，peptidenucleicacid）、PMO（嗎啉代寡核苷酸，phosphoroamidatemorpholinooligomer）等。LNA是經(jīng)典的核苷酸橋接修飾技術(shù)，其通過(guò)核苷酸第2和第4個(gè)碳原子之間的橋連而將其構(gòu)象固定，增強(qiáng)了藥物對(duì)核酸酶的抗性以及對(duì)靶mRNA的親和力；PMO是五元核糖雜環(huán)被六元嗎啉環(huán)取代，而PNA是一種核酸模擬物，利用假肽聚合物主鏈替代DNA/RNA的PO骨架，PNA和PMO改造可以增強(qiáng)核酸藥物對(duì)核酸酶的抵抗、提高親和力和特異性等。圖4第三代糖環(huán)修飾[2]目前，已有數(shù)十種核酸藥物（包括mRNA藥物）推向市場(chǎng)，這些藥物在化學(xué)上進(jìn)行了修飾，包括小核酸藥物化學(xué)修飾主要包含2’-F、2’-O-Me、PS、2’-O-MOE以及PMO骨架等，mRNA藥物也進(jìn)行了化學(xué)修飾，利用N1-Me-假尿苷替代UTP。化學(xué)修飾使小核酸分子提高化學(xué)穩(wěn)定性和有效性，改善藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)和生物體內(nèi)分布，增加細(xì)胞特異性，降低免疫反應(yīng)，減少脫靶效應(yīng)，使mRNA藥物顯著提高翻譯效率，延長(zhǎng)半衰期，同時(shí)降低免疫原性！五、mRNA技術(shù)已布局三大領(lǐng)域1.預(yù)防性疫苗開(kāi)發(fā)針對(duì)傳染性病原體的預(yù)防性或治療性疫苗是控制和預(yù)防流行病的最有效手段。然而，傳統(tǒng)疫苗方法在很大程度上未能生產(chǎn)針對(duì)引起慢性或反復(fù)感染的具有挑戰(zhàn)性的病毒的有效疫苗，例如HIV-1、單純皰疹病毒和呼吸道合胞病毒(RSV)。此外，像2014-2016年埃博拉和寨卡病毒爆發(fā)所表明的那樣，基于傳統(tǒng)疫苗的商業(yè)疫苗開(kāi)發(fā)和批準(zhǔn)的緩慢速度不足以應(yīng)對(duì)迅速出現(xiàn)的急性病毒性疾病。因此，開(kāi)發(fā)更有效、更快速、更通用的疫苗平臺(tái)至關(guān)重要。mRNA疫苗可以分為兩種主要類(lèi)型：非復(fù)制mRNA疫苗和自擴(kuò)增mRNA疫苗。其中非復(fù)制mRNA疫苗還可以根據(jù)遞送載體分為兩類(lèi)：體外轉(zhuǎn)染樹(shù)突狀細(xì)胞類(lèi)型和體內(nèi)直接注射類(lèi)型。>直接注射非復(fù)制性mRNA疫苗直接注射、非復(fù)制性mRNA疫苗是一種有吸引力的疫苗形式，因?yàn)楹?jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)，特別是在資源有限的環(huán)境中。目前已有兩款mRNA疫苗獲得FDA批準(zhǔn)上市，分別來(lái)自Moderna和BioNTech，均用于預(yù)防新冠病毒(SARS-CoV-2)感染。>自擴(kuò)增mRNA疫苗自擴(kuò)增mRNA疫苗在mRNA序列中加入了可復(fù)制序列，在進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)能夠利用宿主細(xì)胞進(jìn)行自我復(fù)制，從而在極低注射劑量的情況下，實(shí)現(xiàn)抗原的高表達(dá)，達(dá)到產(chǎn)生較強(qiáng)免疫反應(yīng)的能力。>樹(shù)突狀細(xì)胞mRNA疫苗這種mRNA疫苗是在體外將mRNA轉(zhuǎn)染到樹(shù)突狀細(xì)胞，目前主要限于HIV-1治療性疫苗。因預(yù)防性疫苗目前具有大量的研發(fā)管線、更高的成功概率以及mRNA相對(duì)于其他疫苗技術(shù)的優(yōu)勢(shì)，預(yù)防性疫苗在未來(lái)15年將依舊是mRNA領(lǐng)域的主導(dǎo)，目前的mRNA行業(yè)研發(fā)活動(dòng)也主要集中在預(yù)防性疫苗上。短期內(nèi)，大部分預(yù)防性疫苗收入仍將來(lái)自新冠肺炎產(chǎn)品，而中長(zhǎng)期來(lái)看，其他針對(duì)呼吸道合胞病毒和流感等疾病的疫苗可能會(huì)覆蓋更廣泛的人群，但價(jià)格上漲空間有限。盡管許多適應(yīng)癥已有上市的產(chǎn)品占據(jù)，并且疫苗的競(jìng)爭(zhēng)可能會(huì)很激烈，但mRNA在研發(fā)速度方面比其他技術(shù)具有明顯優(yōu)勢(shì)，至少在新冠肺炎的保護(hù)率方面具有優(yōu)勢(shì)。因此，預(yù)計(jì)預(yù)防性mRNA疫苗將比其他技術(shù)類(lèi)型疫苗贏得更大市場(chǎng)份額。鑒于mRNA預(yù)防性疫苗的顯著優(yōu)勢(shì)和市場(chǎng)潛力，NatureReviewsDrugDiscovery預(yù)計(jì)1，mRNA預(yù)防性疫苗在2035年市場(chǎng)規(guī)模達(dá)到120-150億美元。>新冠疫苗：2021年570億美金左右(輝瑞/BioNTech/復(fù)星400億美金+Moderna170億美金，由于加強(qiáng)針接種和降價(jià)趨勢(shì)，預(yù)計(jì)2035年新冠疫苗貢獻(xiàn)50億美金左右。>其他疫苗：預(yù)計(jì)2024-25年開(kāi)始進(jìn)入市場(chǎng)銷(xiāo)售，隨著市場(chǎng)的開(kāi)拓和放量，假設(shè)平均每個(gè)在研管線的銷(xiāo)售峰值為8億美金，預(yù)計(jì)2035年銷(xiāo)售額達(dá)到70-100億美2.治療性疫苗癌癥疫苗和其他免疫療法代表了治療惡性腫瘤的有希望的新策略。癌癥疫苗是利用腫瘤抗原誘導(dǎo)機(jī)體自身的免疫反應(yīng)對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行特異性殺傷。由于機(jī)體的免疫反應(yīng)具有系統(tǒng)性和全身性的特點(diǎn)，這種療法不僅可以對(duì)術(shù)后殘留的腫瘤病灶進(jìn)行特異性殺傷，也能有效作用于遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的細(xì)胞，相比于其他治療方法作用范圍更特異且廣泛。其中癌癥疫苗可分為樹(shù)突狀細(xì)胞mRNA癌癥疫苗、直接注射的mRNA癌癥疫苗。1)樹(shù)突狀細(xì)胞mRNA癌癥疫苗自1996年首次報(bào)道了用電穿孔轉(zhuǎn)染mRNA的樹(shù)突狀細(xì)胞可以引發(fā)針對(duì)腫瘤抗原的有效免疫反應(yīng)后，許多研究和臨床試驗(yàn)證實(shí)了這種方法的可行性和有效性。2)直接注射的mRNA癌癥疫苗一些臨床前研究表明，將mRNA癌癥與輔助療法(如傳統(tǒng)化療、放療和免疫檢查點(diǎn)抑制劑)相結(jié)合，增加了mRNA癌癥疫苗接種的有益結(jié)果?？偟膩?lái)說(shuō)，mRNA癌癥疫苗已被證明對(duì)人類(lèi)具有免疫原性，進(jìn)一步改進(jìn)疫苗接種方法可能需要獲得更大的臨床益處。因此治療性疫苗很可能是mRNA產(chǎn)品的一個(gè)利基空間，由于患者群體的規(guī)模以及在針對(duì)多種腫瘤相關(guān)抗原的療法中可能占主導(dǎo)地位，因此具有巨大的市場(chǎng)潛力。目前，大多數(shù)mRNA治療性疫苗是多抗原疫苗，行業(yè)也越來(lái)越關(guān)注與免疫腫瘤藥物(如PD1/PDL1阻滯劑)的聯(lián)合策略，用于疾病負(fù)擔(dān)較低且免疫系統(tǒng)仍然有效患者的早期治療。因此，單一個(gè)性化癌癥疫苗的市場(chǎng)規(guī)模可能很大。在獲得領(lǐng)域領(lǐng)導(dǎo)者的概念驗(yàn)證數(shù)據(jù)后，用于各種癌癥類(lèi)型的mRNA個(gè)性化癌癥疫苗研發(fā)管線將出現(xiàn)爆炸式增長(zhǎng)。上文提到的NatureReviewsDrugDiscovery，對(duì)mRNA治療疫苗預(yù)計(jì)：2035年市場(chǎng)規(guī)模達(dá)到70-100億美金，假設(shè)個(gè)性化腫瘤疫苗的銷(xiāo)售峰值為50億美金，單一腫瘤疫苗的銷(xiāo)售峰值為13億美金。同時(shí)根據(jù)美國(guó)ASCO的數(shù)據(jù)顯示，癌癥患者在初始階段平均年治療費(fèi)用為4.18萬(wàn)美元，合計(jì)市場(chǎng)規(guī)模超過(guò)100億美元。3.治療性藥物mRNA藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的主要技術(shù)門(mén)檻在于穩(wěn)定性和遞送，如果相關(guān)難點(diǎn)能夠得以解決，再加上mRNA能夠合成任意一種蛋白質(zhì)的潛力，除用于預(yù)防傳染病外，其也可作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充或替代療法治療其他疾??；另外，由于癌癥基因測(cè)序和抗原表位發(fā)現(xiàn)等技術(shù)的發(fā)展，mRNA也可針對(duì)腫瘤患者進(jìn)行個(gè)性化治療。因此，mRNA藥物在傳染病預(yù)防、癌癥和包括罕見(jiàn)病在內(nèi)的多種疾病治療領(lǐng)域均有巨大的應(yīng)用潛力。在罕見(jiàn)病治療領(lǐng)域，目前較為有進(jìn)展的mRNA藥物包括Moderna治療甲基丙二酸血癥(MMA)的mRNA-3704和TranslateBio治療囊性纖維化(CF)的MRT-5005，已進(jìn)入2期臨床階段。對(duì)于蛋白質(zhì)替代療法，在某些情況下，與標(biāo)準(zhǔn)重組蛋白策略相比，mRNA平臺(tái)可能具有遞送優(yōu)勢(shì)，但面臨的技術(shù)挑戰(zhàn)近期還沒(méi)有明確的解決方案，包括缺乏器官選擇性、頻繁遞送的潛在需求和高免疫原性。最初，由于治療藥物利用免疫系統(tǒng)，例如，編碼雙特異性抗體的mRNA與T細(xì)胞上的CD3和腫瘤細(xì)胞上的靶抗原結(jié)合，這可能會(huì)限制mRNA療法來(lái)解決腫瘤學(xué)適應(yīng)癥的子集。對(duì)于遺傳疾病和罕見(jiàn)疾病，mRNA療法可能需要與基因療法競(jìng)爭(zhēng)。后者已在遺傳疾病方面處于更晚期的臨床試驗(yàn)階段，可以為患者提供更持續(xù)的治療性蛋白供應(yīng)。在闡明RNAi的自然基因沉默機(jī)制后二十多年，基于siRNA的療法終于打入了醫(yī)藥市場(chǎng)。目前已有五款藥物獲批上市，許多藥物也處于藥物開(kāi)發(fā)的后期階段，siRNA藥物正在成為一種標(biāo)準(zhǔn)的藥物治療方式。由于特異性和顯著的基因沉默功能，RNA干擾（RNAi）有望成為治療各種感染性、血液腫瘤、心血管和神經(jīng)退行性疾病的必要方法。2023年3月，首個(gè)治療AMD的RNAi療法完成首例患者給藥，這也是自2015年以來(lái)首款進(jìn)入臨床階段的眼科RNAi療法。siRNA分子在敲除疾病相關(guān)基因中通常是特異性和有效的。然而，它們的特點(diǎn)是低細(xì)胞攝取、易受核酸酶介導(dǎo)的降解。因此，siRNA需要一個(gè)載體來(lái)保護(hù)它們并有效地傳遞到靶細(xì)胞中。此外，對(duì)于siRNA藥物進(jìn)入機(jī)體后，局部藥物分布模式、靶向器官內(nèi)藥物量與給藥劑量對(duì)應(yīng)關(guān)系、局部對(duì)靶向基因沉默的效果的檢測(cè)，可以更好的幫助我們了解藥物效果與安全性，確定給藥周期。大多數(shù)晚期候選藥物適用于罕見(jiàn)病或孤兒病，其患者迫切需要新穎有效的療法。此外，有些藥物有可能滿足更廣泛人群的需求。鑒于上述情況，治療性藥物占比因此較低，每個(gè)治療領(lǐng)域的mRNA治療性藥物成功概率也會(huì)低于平均水平。因此根據(jù)上文NatureReviewsDrugDiscovery，預(yù)計(jì)mRNA治療藥物：2035年市場(chǎng)規(guī)模達(dá)到40-50億美金，假設(shè)腫瘤、呼吸系統(tǒng)、罕見(jiàn)病等管線的銷(xiāo)售峰值分別為11億美金、18億美金、5億美金。在蛋marketsandmarkets的數(shù)據(jù)，預(yù)計(jì)2025年全球免疫冶療藥物市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到2746億美元，CAGR為11%，假設(shè)mRNA的蛋白替代治療領(lǐng)域?qū)τ诿庖咧委熕幬锏奶娲蕿?%，則該領(lǐng)城市場(chǎng)規(guī)模為55億美元。六、mRNA療法的開(kāi)發(fā)挑戰(zhàn)與解決策略mRNA技術(shù)潛在應(yīng)用范疇，圖片來(lái)源：Nature1.穩(wěn)定性和遞送效率保存條件較苛刻（穩(wěn)定性）研發(fā)人員一直在探索關(guān)于mRNA疫苗遞送系統(tǒng)和保護(hù)制劑的研發(fā)。RNA本身是一種不穩(wěn)定的分子，核糖上存在的羥基使得環(huán)境中的生物核酸酶能輕易將其裂解。冷凍狀態(tài)下RNA穩(wěn)定性顯著增高，但儲(chǔ)存和運(yùn)輸成本大。應(yīng)用脂質(zhì)納米顆粒等載體類(lèi)保護(hù)劑最多也只能將其保存3個(gè)月；魚(yú)精蛋白也可使mRNA免受酶類(lèi)降解，但可能會(huì)增加其翻譯難度，影響作用效果。開(kāi)發(fā)更穩(wěn)定的遞送系統(tǒng)也會(huì)保證一定的穩(wěn)定性，從而保證高效穩(wěn)定的遞送效率。單用抗腫瘤作用較低（有效性）mRNA疫苗的有效性主要由遞送效率、翻譯效率以及免疫原性等因素決定，由于穩(wěn)定性較差、腫瘤特異性抗原免疫耐受性強(qiáng)和腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性等原因，癌癥mRNA藥物本身的抗腫瘤作用難以有質(zhì)的提高，這也導(dǎo)致其臨床研究發(fā)展緩慢，難以迅速推廣。另外，晚期腫瘤的免疫微環(huán)境往往具有高度免疫抑制作用，可能也是單用mRNA疫苗效果不佳的原因之一。開(kāi)發(fā)效率更高且引起免疫原性低的遞送系統(tǒng)顯得尤為重要。聯(lián)合抗體藥物一定程度上也可以抑制免疫炎癥，因此后續(xù)開(kāi)發(fā)mRNA藥物的聯(lián)合用藥對(duì)mRNA藥物的使用也非常重要。mRNA的穩(wěn)定性和遞送效率一直是限制因素，細(xì)胞外存在大量RNase可以將大部分進(jìn)入體內(nèi)的mRNA降解，只有小部分mRNA可以逃脫RNase進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。因此，mRNA要想成藥，需要有一定的遞送系統(tǒng)包被。進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的mRNA翻譯效率也是另一個(gè)制約其成藥性的問(wèn)題。mRNA代謝路徑與其進(jìn)入細(xì)胞的方式有關(guān)，傳統(tǒng)胞飲或者脂嗜的內(nèi)吞路徑與內(nèi)吞體代謝相關(guān)，因此如何提升內(nèi)吞體逃逸效率是傳統(tǒng)mRNA提送一大難題。提高mRNA穩(wěn)定性及翻譯效率是mRNA走向臨床應(yīng)用必須要跨越的障礙。目前，提高mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率，主要通過(guò)mRNA結(jié)構(gòu)化學(xué)優(yōu)化以及遞送系統(tǒng)的優(yōu)化。由于mRNA藥物半衰期有限，無(wú)法長(zhǎng)期表達(dá)等缺點(diǎn)，外源核酸藥物要想進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮作用，應(yīng)考慮如何存留足夠時(shí)間以準(zhǔn)確靶向到病變部位，同時(shí)避免損傷正常細(xì)胞，歸根結(jié)底是研發(fā)出高效安全的藥物遞送系統(tǒng)，首先需要避免被快速清除并延長(zhǎng)半衰期。解決方法>較好的解決方法為通過(guò)PEG化降低腎臟清除速率，或者制成納米粒結(jié)構(gòu)(通常在10–200nm)，可使其高于腎臟清除的分子量界限。此外核苷酸的化學(xué)修飾可降低核酸藥物對(duì)核酸酶的敏感性，制成納米粒結(jié)構(gòu)可以避免核酸藥物在遞送過(guò)程中與核酸酶直接接觸。對(duì)遞送系統(tǒng)的修飾可以增強(qiáng)核酸藥物在靶組織的攝取效率，比如納米粒結(jié)構(gòu)可使得提高核酸藥物在肝臟，脾臟或腫瘤等組織中的滲透性，提高與靶細(xì)胞結(jié)合和細(xì)胞攝取效率。盡管化學(xué)修飾可以改善核酸藥物的穩(wěn)定性和免疫原性，核酸藥物需進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)才可以發(fā)揮作用，由于核酸藥物分子量較大且通常帶負(fù)電荷，因此被細(xì)胞攝取的效率和內(nèi)吞體逃逸的效率比較低，因此需借助遞送系統(tǒng)的力量。脂質(zhì)類(lèi)是目前核酸藥物中研究應(yīng)用最多的遞送系統(tǒng)之一，且已經(jīng)有使用脂質(zhì)納米顆粒遞送系統(tǒng)的核酸藥物獲批，根據(jù)其性質(zhì)和結(jié)構(gòu)的不同其可以分為脂質(zhì)體、脂質(zhì)納米顆粒(LNP，lipidnanoparticle)等，目前研究中用的較多的包括含有可離子化脂質(zhì)的LNP。>為了優(yōu)化mRNA的效率，科學(xué)家們探索了對(duì)mRNA結(jié)構(gòu)的各種化學(xué)修飾，包括修改5'-帽，多聚腺苷酸(A)尾部，5'-和3'-UTR以及編碼區(qū)域。mRNA帽由7-甲基鳥(niǎo)嘌呤(m7G)組成，是在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中通過(guò)5'，5'-三磷酸酯橋連接到初次轉(zhuǎn)錄后的RNA核苷酸中。它不僅通過(guò)與翻譯起始因子4E(EIF4E)結(jié)合參與翻譯過(guò)程，也與DCP1/DCP2結(jié)合調(diào)節(jié)mRNA的降解。報(bào)道最多的帽蓋類(lèi)似物是核糖內(nèi)修飾的抗反向帽蓋類(lèi)似物(ARCA)m7G的部分。ARCA加帽的mRNA可防止在mRNA合成過(guò)程中錯(cuò)誤地結(jié)合帽，因此表現(xiàn)出卓越的翻譯效率。2021年，JacekJemielity等合成了一類(lèi)新的帽類(lèi)似物，稱為2S類(lèi)似物，其結(jié)合了二硫代二磷酸修飾，ARCA和延伸的多磷酸鹽鏈。他們發(fā)現(xiàn)這種2S類(lèi)似物提高了其在人未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞中的翻譯水平，并優(yōu)于之前發(fā)表的用于臨床試驗(yàn)的磷酸鹽修飾的帽類(lèi)似物。最近，Moderna公司的研究人員觀察到mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)可以通過(guò)改變mRNA翻譯的半衰期來(lái)調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)，并且修飾的核苷酸可以穩(wěn)定mRNA空間結(jié)構(gòu)以實(shí)現(xiàn)蛋白的高表達(dá)水平。計(jì)算機(jī)輔助也被用于設(shè)計(jì)產(chǎn)生或多或少所需蛋白質(zhì)的mRNA序列。迄今為止，該技術(shù)已成功用于基于mRNA的療法，例如非病毒蛋白的表達(dá)和傳染病疫苗的開(kāi)發(fā)。總的來(lái)說(shuō)，5'-帽，3'-多聚(A)尾巴，5'-和3’-UTR和編碼區(qū)域都可以作為修飾靶標(biāo)。為了獲得最好的mRNA的治療效率，有必要針對(duì)特定應(yīng)用做出優(yōu)化組合。不過(guò)因?yàn)橄馦oderna、BioNTech這些mRNA龍頭企業(yè)已經(jīng)申請(qǐng)了各項(xiàng)mRNA技術(shù)專(zhuān)利，形成了超高的技術(shù)壁壘，其他企業(yè)要想在技術(shù)上有所突破會(huì)比較困難。2.mRNA的免疫原性缺乏長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)論（安全性）雖然癌癥mRNA藥物在諸多短期試驗(yàn)中所表現(xiàn)出的有效性及安全性較高，但缺乏長(zhǎng)期研究結(jié)果所提供的證據(jù)，成為常規(guī)治療手段的道路還很漫長(zhǎng)。并且有報(bào)道稱，某些mRNA疫苗可能與導(dǎo)致一些罕見(jiàn)且致命的血栓形成事件有關(guān)，因此不能忽視對(duì)用藥安全的觀測(cè)。一方面，癌癥mRNA藥物的最佳給藥途徑也沒(méi)有最終共識(shí)，不同的給藥途徑會(huì)決定mRNA的分布并影響藥物的效能。皮內(nèi)/皮下注射、鼻內(nèi)給藥、瘤內(nèi)注射和肌肉注射等都可作為mRNA藥物的給藥途徑。新型冠狀病毒mRNA疫苗一般都是肌肉注射，但在治療性癌癥mRNA疫苗中最多見(jiàn)的給藥途徑為靜脈注射，不同注射方法各有利弊。因此這些問(wèn)題同樣需要長(zhǎng)期的臨床觀察，以達(dá)成指南性的用藥經(jīng)驗(yàn)。另一方面，mRNA藥物成分復(fù)雜、生產(chǎn)及制劑工藝難度高，所以對(duì)安全性有較高的要求。安全性風(fēng)險(xiǎn)主要來(lái)自于mRNA和遞送系統(tǒng)兩個(gè)方面，也要關(guān)注與載體相關(guān)的毒性問(wèn)題，如：陽(yáng)性聚合物材料自身的毒性或安全性、制劑及貯存期間產(chǎn)生的降解產(chǎn)物以及各類(lèi)雜質(zhì)累積的安全性風(fēng)險(xiǎn)等。IVTmRNA的一個(gè)重要問(wèn)題是其免疫原性，因?yàn)橥庠葱訰NA將被視為病毒感染的信號(hào)。非免疫細(xì)胞識(shí)別RNA通過(guò)視黃酸誘導(dǎo)基因I(RIG-I)受體，然后觸發(fā)先天免疫反應(yīng)。免疫細(xì)胞可以被IVTmRNA激活并誘導(dǎo)通過(guò)Toll樣受體引起的炎癥。富含U的RNA序列是已知的Toll樣受體的有效激活劑。因此，可以通過(guò)降低U的含量來(lái)解決免疫原性問(wèn)題。解決方法迄今為止，可以選擇幾種核苷酸化學(xué)修飾策略以降低免疫原性而不影響其翻譯特性。例如，將天然腺苷替換為N1-甲基腺苷(m1A)或N6-甲基腺苷(m6A)。替換天然胞嘧啶核苷為5-甲基胞嘧啶核苷(m5C)；并將天然尿苷替換為5-甲基尿苷(m5U)，2-硫尿苷(s2U)，5-甲氧基尿苷(5moU)，假尿苷(ψ)或N1-甲基偽杜鵑堿(m1ψ)。其中，m5C和ψ備受關(guān)注，因?yàn)闊o(wú)論是體內(nèi)還是體外都表明，它們降低mRNA的免疫原性同時(shí)也提高了翻譯效率。同時(shí)研究者發(fā)現(xiàn)增加聚(A)尾巴的長(zhǎng)度并減少U含量或?qū)⑵潆[藏在序列中會(huì)產(chǎn)生低的免疫原性。除了修飾核苷酸并添加多聚(A)尾巴以外，優(yōu)化富含GC的密碼子并使U含量最小化是另一種消除RNA免疫原性的有效方法。CureVac和AcuitasTherapeutics開(kāi)發(fā)了一種無(wú)需對(duì)mRNA進(jìn)行任何化學(xué)修飾的序列工程方法。他們通過(guò)給每一個(gè)氨基酸選擇富含GC密碼子設(shè)計(jì)了EPO的mRNA序列，并使用LNP對(duì)豬全身給藥。結(jié)果表明EPO蛋白的表達(dá)導(dǎo)致積極的生理反應(yīng)而沒(méi)有可檢測(cè)的免疫原性。但是，應(yīng)注意GC含量不是越多越好，因?yàn)檫^(guò)量的GC含量不利于蛋白質(zhì)表達(dá)。體外轉(zhuǎn)錄后，生產(chǎn)mRNA需要一系列純化過(guò)程包括濃縮，沉淀，萃取和色譜法。精密的工藝技術(shù)，例如陰離子交換色譜法，大小排阻色譜柱，高效液相色譜(HPLC)和親和力色譜法去除雙鏈RNA和轉(zhuǎn)錄本的片段。這些純化程序?qū)ο庖咴允潜仨毜?。?jù)報(bào)道經(jīng)HPLC純化后具有ψ修飾的mRNA沒(méi)有了免疫原性并且蛋白質(zhì)翻譯效率顯著提高。在一個(gè)代表性的例子中，Pardi等將編碼廣泛中和HIV-1抗體VRC01的輕鏈和重鏈mRNA進(jìn)行m1ψ修飾和HPLC純化，并將其包裹在LNPs里。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，全身給藥后，mRNA-LNPs很快在小鼠中轉(zhuǎn)為功能性抗體。單次注射mRNA-LNP完全保護(hù)小鼠免受HIV-1感染。七、小核酸藥物研發(fā)挑戰(zhàn)與關(guān)鍵技術(shù)小核酸藥物面臨如何高效進(jìn)入靶細(xì)胞、釋放到細(xì)胞質(zhì)、并高效長(zhǎng)效發(fā)揮作用等問(wèn)題。小核酸藥物研發(fā)過(guò)程中的不同問(wèn)題需要相應(yīng)的技術(shù)加以解決。按照小核酸藥物研發(fā)流程的順序，核心技術(shù)分為設(shè)計(jì)、化學(xué)修飾、遞送、合成及制劑技術(shù)。最關(guān)鍵的核心技術(shù)是核酸藥物遞送技術(shù)。藥物遞送在保護(hù)RNA結(jié)構(gòu)、增強(qiáng)靶向能力、降低給藥劑量和降低毒副作用等方面起重要作用。第四章未來(lái)技術(shù)核心：序列設(shè)計(jì)和遞送系統(tǒng)的布局和進(jìn)展一、序列設(shè)計(jì)1.序列設(shè)計(jì)的作用為了實(shí)現(xiàn)mRNA安全穩(wěn)定地表達(dá)和高效遞送至靶細(xì)胞，mRNA的序列結(jié)構(gòu)優(yōu)化、修飾以及遞送系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)選擇極為重要。理論上任何可翻譯成蛋白的抗原/靶標(biāo)序列均可成為mRNA的候選序列，因此mRNA序列選擇上十分靈活，通過(guò)序列優(yōu)化和修飾，配合恰當(dāng)?shù)倪f送系統(tǒng)后能顯著降低藥物劑量、給藥頻率和不良反應(yīng)發(fā)生率。2.國(guó)內(nèi)外的序列設(shè)計(jì)布局ModernaModerna自主研發(fā)了1-甲基假尿嘧啶修飾方法，并獲得美國(guó)專(zhuān)利授權(quán)US9428535B2，該專(zhuān)利家族在眾多國(guó)家廣泛布局。中國(guó)同族CN103974724B要求保護(hù)一種編碼目標(biāo)多肽的分離的mRNA，其中包含：(1)n個(gè)數(shù)量的連接的核苷的序列，(2)包含至少一個(gè)Kozak序列的5‘UTR(非編碼區(qū))，(3)3’UTR，(4)至少一個(gè)5‘帽結(jié)構(gòu)。CureVac所述分離的mRNA由核苷酸1-甲基假尿苷、腺苷、鳥(niǎo)苷和胞苷組成，其中所述分離的mRNA提供的蛋白與細(xì)胞因子的比率P:C對(duì)于TNF-α為大于100，對(duì)于IFN-α為大于100；并且其中所述P:C比率大于相應(yīng)的包含假尿苷ψ而非1-甲基假尿苷的mRNA的P:C比率?！鳰oderna涉及mRNA修飾的部分核心專(zhuān)利布局圖（圖源官網(wǎng)）BioNTechBioNTech通過(guò)降低mRNA分子中尿苷酸的含量來(lái)實(shí)現(xiàn)降低mRNA免疫原性的效果，例如專(zhuān)利WO2017036889A1，已經(jīng)進(jìn)入了美國(guó)、歐盟和日本等主要國(guó)家或地區(qū)，這是BioNTech公司在mRNA尿苷修飾領(lǐng)域重要的專(zhuān)利布局策略?！w外轉(zhuǎn)錄mRNA的結(jié)構(gòu)和常用的修飾手段（DOI：10.3390/pharmaceutics12020102）公司有4種RNA技術(shù)平臺(tái)：RNActive、RNArt、RNAntibody、RNAdjuvant。CureVac的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)人類(lèi)的密碼子的第三位很少是A